技术特征：
技术总结
本发明公开了一种构建靶向ARID5A的KI‑T2A‑Luciferase细胞系的方法，该方法利用CRISPR/Cas9系统在基因组上ARID5A基因的3’端产生双链切口(DSBs)，在Cas9‑sgRNA组分中加入一个供体载体(Donor DNA)，该供体载体(Donor DNA)上带有靶向位点两端的同源序列，DSBs的修复会以供体载体(Donor DNA)为模板进行，进而将报告基因插入到ARID5A的3’端，获得单一稳定的HEK293‑ARID5A‑T2A‑luciferase‑KI细胞系。结果表明，该HEK293‑ARID5A‑T2A‑Luciferase细胞系内的Luciferase表达水平可以准确灵敏地反映该细胞系内ARID5A分子表达水平，有助于ARID5A基因功能研究及筛选影响ARID5A表达的上游转录因子或小分子化学药物，为与ARID5A相关的自身免疫过程及炎症反应调节的进一步研究提供了新的解决方案。
技术研发人员：夏海滨;黎维康
受保护的技术使用者：陕西师范大学
技术研发日：2018.09.11
技术公布日：2019.02.12