5 ?I. 5g，加蒸馏水至 1000ml，pH 值调为 7. 0 ?7. 2。121 °C 灭菌 20min制得；
[0039] (3)分离筛选降解含酚的嗜盐菌：
[0040] 配制LB苯酚培养基。蛋白胨5?15g，酵母膏1?10g，NaC15?15g，苯酚0. 1? 〇· 2g，蒸馏水1000ml，pH值调为7. 0?7. 2。121°C灭菌20min制得。
[0041] 在LB苯酚培养基平板中加入牛津杯，在牛津杯中加入嗜盐菌菌液，用不加菌液的 牛津杯做对照，37°C，培养24?36h，选取与对照相比透明圈大5mm以上的菌液为降解苯酚 的嗜盐菌；
[0042] (4)在降解含酚的嗜盐菌中加入稳定剂和保护剂。稳定剂采用甘油、乙醇、乙二醇 中的一种或多种，加入量为降解苯酚的嗜盐菌重量的〇. 5?5% ;保护剂采用沸石粉、硅藻 土、粉末活性炭中的一种或多种，加入量为降解苯酚的嗜盐菌重量的1?10%。
[0043] 实施例2
[0044] 本发明实施例提供一种降解含酚废水的嗜盐菌菌剂及其制备方法。该嗜盐菌菌剂 是用于高浓度含酚废水。
[0045] 本发明实施例的具体制备方法如下：
[0046] (1)样品米集制成囷悬液：
[0047] 选取工业园区内化工厂排放的高含盐废水的活性污泥作为样品，废水的含盐量为 10%。
[0048] 采集200ml的水样放入烧杯，用滤纸过滤，然后盛放到离心管当中，以12000r/min 速度离心30min，倒出上清液，将全部上清液通过细菌滤器过滤，然后取下过滤膜，将其放入 含有无菌水样的烧杯中，使滤纸充分浸泡。用灭好菌的移液管取出Iml该溶液放入无菌的 试管中，向该试管中加入9ml无菌水，充分震荡后，让其充分混合，制成菌悬液；
[0049] (2)分离筛选嗜盐菌：
[0050] 取菌悬液在嗜盐菌分离筛选培养基制成的平板上划线，分离筛选嗜盐菌。嗜盐菌 分离筛选培养基的组成有牛肉膏5g，蛋白胨9g，NaC18g，Na 2S045g，KCl 0. 8g，NaHCO3O. 9g， KBrO. 5g，H3BO3O. 14g，NaF 0· 009g，MgCl2IOg, CaCl2O. 8g，加蒸馏水至 1000ml，pH 值调为 7. 0 ?L 2,121°C 灭菌 20min 制得；
[0051] (3)分离筛选降解含酚的嗜盐菌：
[0052] 配制LB苯酚培养基。蛋白胨10g，酵母膏5g，NaCl 10g，苯酚0· 2g，蒸馈水1000ml, pH值调为7· 0?7· 2,121°C灭菌20min制得；
[0053] 在LB苯酚培养基平板中加入牛津杯，在牛津杯中加入嗜盐菌菌液，用不加菌液的 牛津杯做为对照，37°C，培养24h，选取与对照相比透明圈大5mm以上的菌液为降解苯酚的 嗜盐菌；
[0054] (4)在降解含酚的嗜盐菌中加入稳定剂和保护齐IJ。稳定剂采用甘油、乙醇、乙二醇 中的一种或多种，加入量为降解苯酚的嗜盐菌重量的〇. 5?5% ;保护剂采用沸石粉、硅藻 土、粉末活性炭中的一种或多种，加入量为降解苯酚的嗜盐菌重量的1?10%。
[0055] 实施例3
[0056] 本发明实施例提供一种降解含酚废水的嗜盐菌菌剂及其制备方法。该嗜盐菌菌剂 是用于高浓度含酚废水。
[0057] 本发明实施例的具体制备方法如下：
[0058] (1)样品的采集制成菌悬液
[0059] 选取工业园区内化工厂排放的高含盐废水的活性污泥作为样品，废水的含盐量为 15%。
[0060] 采集200ml的水样放入烧杯，用滤纸过滤，然后盛放到离心管当中，以12000r/min 速度离心30min，倒出上清液，将全部上清液通过细菌滤器过滤，然后取下过滤膜，将其放入 含有无菌水样的烧杯中，使滤纸充分浸泡。用灭好菌的移液管取出Iml该溶液放入无菌的 试管中，向该试管中加入9ml无菌水，充分震荡后，让其充分混合，制成菌悬液。
[0061] (2)分离筛选嗜盐菌：
[0062] 取菌悬液在嗜盐菌分离筛选培养基制成的平板上划线，分离筛选嗜盐菌。嗜盐菌 分离筛选培养基的组成有牛肉膏5g，蛋白胨5g，NaC16g，Na 2S047g，KCl 0. 8g，NaHCO3O. 5g， KBrO. 5g，H3BO3O. 13g，NaF O.Olg，MgCl2IOg, CaCl2Ig,加蒸馏水至 1000ml，pH 值调为 7.0 ? 7.2。121°C灭菌 20min 制得。
[0063] (3)降解含酚的嗜盐菌的分离筛选
[0064] 配制LB苯酚培养基。蛋白胨8g，酵母膏7g，NaCl 13g，苯酚0· 2g，蒸馈水1000ml, pH值调为7.0?7.2。121°C灭菌20min制得。
[0065] 在LB苯酚培养基平板中加入牛津杯，在牛津杯中加入嗜盐菌菌液，用不加菌液的 牛津杯做为对照，37°C，培养24h。选取与对照相比透明圈大5mm以上的菌液为降解苯酚的 嗜盐菌。
[0066] (4)在降解含酚的嗜盐菌中加入稳定剂和保护齐IJ。稳定剂采用甘油、乙醇、乙二醇 中的一种或多种，加入量为降解苯酚的嗜盐菌重量的〇. 5?5%。保护剂采用沸石粉、硅藻 土、粉末活性炭中的一种或多种，加入量为降解苯酚的嗜盐菌重量的1?10%。
[0067] 将上述各实施例制得的降解含酚废水的嗜盐菌菌剂，应用到工程项目上，对进水 苯酚和出水苯酚进行测定，具体如下：
[0068] 用各实施例制得的降解含酚废水的嗜盐菌菌剂投入各生活污水厂的好氧池中，控 制温度在20?38°C，pH值6. 0?9. 0，溶解氧在3?6mg/L，污泥沉降比SV3tl为15 %?30 %， 停留时间3?6h，进水COD指标为400?650mg/L，出水COD指标为60?100mg/L，进水苯 酚含量100?200mg/L，污泥回流比控制在1 :1?1 :4。
[0069]
【主权项】
1. 一种降解含酚的嗜盐菌菌剂的制备方法，其特征在于，包括： (1) 制作菌悬液： 选取工业园区内化工厂排放的含盐量为3%?15%的高含盐废水的活性污泥制成菌 悬液； (2) 分离筛选嗜盐菌： 取所述菌悬液在嗜盐菌分离筛选培养基制成的平板上划线分离筛选嗜盐菌得到嗜盐 菌菌液； (3) 分离筛选降解含酚的嗜盐菌： 将蛋白胨5?15g，酵母膏1?10g，NaC15?15g，苯酚0· 1?0· 2g，蒸馈水IOOOml混 合后，将pH值调为7. 0?7. 2,于121°C灭菌20分钟配制成LB苯酚培养基； 在所述LB苯酚培养基平板中加入牛津杯，在牛津杯中加入步骤2得到的所述嗜盐菌菌 液，用不加菌液的牛津杯做为对照，37°C，培养24?36h，选取与对照相比透明圈大5mm以上 的菌液为降解苯酚的嗜盐菌，在所述降解含酚的嗜盐菌中加入稳定剂和保护剂即完成降解 含酚的嗜盐菌菌剂的制备。
2. 根据权利要求1所述的一种降解含酚的嗜盐菌菌剂的制备方法，其特征在于，所述 稳定剂采用甘油、乙醇、乙二醇中的一种或多种，加入量为所述降解含酚的嗜盐菌重量的 0. 5?5% ;所述保护剂采用沸石粉、硅藻土、粉末活性炭中的一种或多种，加入量为所述降 解含酚的嗜盐菌重量的1?10%。
3. 根据权利要求1或2所述的一种降解含酚的嗜盐菌菌剂的制备方法，其特征在于，所 述制作菌悬液步骤中，将高含盐废水的活性污泥制成菌悬液的方式如下： 采集200ml的废水水样放入烧杯，用滤纸过滤，然后盛放到离心管中，以12000r/min速 度离心30min，倒出上清液，将全部上清液通过细菌滤器过滤，然后取下过滤膜，将过滤膜放 入含有无菌水样的烧杯中，使滤纸充分浸泡得到溶液；用灭菌的移液管取出Iml的所述溶 液放入无菌的试管中，向该试管中加入9ml无菌水，充分震荡后，让其充分混合，即制成菌 悬液。
4. 根据权利要求1或2所述的一种降解含酚的嗜盐菌菌剂的制备方法，其特征在于，所 述分离筛选嗜盐菌步骤中，所用的嗜盐菌分离筛选培养基为：由牛肉膏2?5g，蛋白胨5? 15g，NaC15 ?15g，Na2SO4 3 ?lOg，KCl 0· 5 ?I. 5g，NaHCO3 0· 1 ?lg，KBr 0· 1 ?I. 5g， H3BO3 0· 01 ?0· 15g，NaF 0· 001 ?0· 015g，MgCl2 1 ?15g 和 CaCl2 0· 5 ?I. 5g，加蒸馏水 至1000ml，pH值调为7. 0?7. 2后，经121°C灭菌20分钟制得的培养基。
【专利摘要】本发明公开了一种降解含酚废水的嗜盐菌菌剂的制备方法，属嗜盐菌菌剂制备领域。该方法包括：选取工业园区内化工厂排放的含盐量为3％～15％的高含盐废水的活性污泥制成菌悬液；取所述菌悬液在嗜盐菌分离筛选培养基制成的平板上划线分离筛选嗜盐菌得到嗜盐菌菌液；分离筛选得到降解含酚的嗜盐菌。制得的嗜盐菌菌剂，用于降解含酚类物质，可用于处理含酚类物质含量过高的废水，取得良好的处理效果。将该菌群应用于含盐量较高且含酚量也较高的废水处理，能够专性地解决特种废水的问题，且经济有效，具有重要的意义和广阔的应用前景。
【IPC分类】C02F101-34, C02F3-34, C12N1-20
【公开号】CN104560798
【申请号】CN201410812036
【发明人】张景志, 屈佳玉, 刘金泉, 姜安平, 王凯
【申请人】桑德集团有限公司, 北京桑德环境工程有限公司
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月23日