m100AA相为水（0? 1%TFA)，B相为甲醇（0? 1%TFA);淋洗梯度为： 0-3min:5%B相；3-3.Imin:5%~25%B相；3.l-9min:25%B相；9-9.Imin:25%~34%B相；9.l-20min:34%~100%B相；20-25min:100%B相；25-25.Imin:100%~5%B相； 25.l_30min:5%B相。流速ImL?min:〇 [0081 ] 实施例3三羰基锝-99m标记的配合物的制备
[0082] 分别称取硼氢化钠5. 5mg、酒石酸钾钠20mg、碳酸钠4mg置于青霉素小瓶中，盖上 胶塞后铝盖密封，用抽气针抽取空气，向其中通入CO气体10-20min。将从医用99Mo-99mTc发 生器中淋洗获得的高锝酸钠Na[99mTcO4]淋洗液2mL(约2mCi^mL^，加入反应瓶中，摇匀溶 解后在75°C金属浴加热条件下反应30min，即得到三羰基锝-99m中间体。加入Imol?L1 盐酸，调节pH值为7。
[0083] 将、2mgDAP-3-DG溶于0?5mL0?5mo1 ?L1pH7. 0磷酸缓冲液中，加入三羰基 锝-99m中间体溶液中。在95°C加热条件下反应15min。即得到99mTc(CO) 3-DAP-3-DG。
[0084] 通过薄层层析及HPLC鉴定，其放射化学纯度均大于99%。HPLC中保留时 间为 10. 17min。HPLC条件为：高效液相色谱仪HITACHI(D-2000);KromaislC18 柱 250X4. 6mm，5ym1〇〇A;A相为水（0? 1%TFA)，B相为甲醇（0? 1%TFA);淋洗梯度为： 0-3min:5%B相；3-3.Imin:5%~25%B相；3.l-9min:25%B相；9-9.Imin:25%~34% B相；9.l-20min:34%~100%B相；20-25min:100%B相；25-25.Imin:100%~5%B相； 25.l_30min:5%B相。流速ImL?min:〇
[0085] 实施例4三羰基锝-99m标记的配合物的制备
[0086] 分别称取硼氢化钠5. 5mg、酒石酸钾钠20mg、碳酸钠4mg置于青霉素小瓶中，盖上 胶塞后铝盖密封，用抽气针抽取空气，向其中通入CO气体10-20min。将从医用99Mo-99mTc发 生器中淋洗获得的高锝酸钠Na[99mTcO4]淋洗液2mL(约2mCi^mL^，加入反应瓶中，摇匀溶 解后在75°C金属浴加热条件下反应30min，即得到三羰基锝-99m中间体。加入Imol?L1 盐酸，调节pH值为7。
[0087] 将20mgDAP-5-DG溶于0? 5mL0? 5mol?L-IpH7. 0磷酸缓冲液中，加入三羰基 锝-99m中间体溶液中。在95°C加热条件下反应15min。即得到99mTc(CO) 3-DAP-5-DG。
[0088] 通过薄层层析及HPLC鉴定，其放射化学纯度均大于99%。HPLC中保留时 间为 10. 45min。HPLC条件为：高效液相色谱仪HITACHI(D-2000);KromaislC18 柱 250X4. 6mm，5ymIQOA;A相为水（〇? 1%TFA)，B相为甲醇（0? 1%TFA);淋洗梯度为： 0-3min:5%B相；3-3.Imin:5%~25%B相；3.l-9min:25%B相；9-9.Imin:25%~34% B相；9.l-20min:34%~100%B相；20-25min:100%B相；25-25.Imin:100%~5%B相； 25.l_30min:5%B相。流速ImL?min:〇
[0089] 应用例1
[0090] 以实施例3中所得99mTc(CO) 3-DAP-3-DG为例，生物实验过程如下：
[0091] 取15只荷S180肿瘤的昆明小白鼠，于尾静脉注射0.ImL99mTc(C0)3-DAP-3-DG(约 0.1851^)。于注射后30、120和2401^11后断头处死。取出心、肝、肺、肾、肌肉、骨、肿瘤、血 等组织，称量并在Y计数器中测其放射性计数。其在荷瘤小鼠中的生物分布结果见表1。
[0092] 表I.99mTc(CO) 3-DAP-3-DG在小鼠体内生物分布数据（％ID/g土sd，n= 5)
[0093]
[0094] 表1的结果显示，99mTc(C0)3-DAP-3-DG在注射后能够在肿瘤区域浓集，注射后 30min，在肿瘤部位的摄取为1.01%ID/g，其在非靶器官的摄取较低，肿瘤/肌肉比值可达 2. 05,主要通过肾脏快速代谢排出体外。
[0095] 在注射后4h，肿瘤/肌肉比值为2. 31，而同等条件下临床使用的18F-FDG在荷S180 肿瘤小鼠注射4h后，肿瘤/肌肉比值仅为0. 51。
[0096] 荷S180肿瘤的昆明小白鼠，于尾静脉注射0?ImL99mTc(CO) 3-DAP-3-DG(约 7. 4MBq)。采用异氟烷麻醉后，于注射后30、60和120min后采用SPECT扫描仪进行采集。荷 瘤小鼠SPECT成像结果与生物分布一致，在注射后30min在肿瘤区域即有明显的放射性浓 集。其在体内的清除较快，主要通过肾脏代谢进入膀胱，并最终排出体外。
[0097] 应用例2
[0098] 将99mTc(C0)3-DAP-n-DG分别放置于生理盐水、0.0 Olmol/L的半胱氨酸、 0.0 Olmol/L的组氨酸、2%胎牛血清溶液中，37°C下温浴24小时后放化纯度无变化，说明 99mTc(CO) 3-DAP-n-DG具有较好的稳定性。
[0099] 上述应用例说明，本发明的三羰基锝-99m核心标记的2, 3-二氨基丙酸偶联氨基 葡萄糖配合物（99mTc(CO)3-DAP-Ii-DG)具有高的放射化学纯度（大于99% )，优异的体外稳 定性，在肿瘤中有较好的摄取，且在体内的清除速度较快，能减少不必要的放射性损伤。与 临床使用的 18F-FDG相比有较好的肿瘤/肌肉靶与非靶比值，可以作为新型的肿瘤SPECT显 像剂。
[0100] 除非特别限定，本发明所用术语均为本领域技术人员通常理解的含义。
[0101] 本发明所描述的实施方式仅出于示例性目的，并非用以限制本发明的保护范围， 本领域技术人员可在本发明的范围内作出各种其他替换、改变和改进，因而，本发明不限于 上述实施方式，而仅由权利要求限定。
【主权项】
1. 一种氨基葡萄糖衍生配体化合物，其具有如通式（A)所示结构，其中，-(CH2)。-为直链或包含支链的结构，n表示2~8的整数。2. 根据权利要求1所述的氨基葡萄糖衍生配体化合物，其中，-(CH2)。-为直链结构，n 表示2~5的整数。3. 权利要求1或2所述氨基葡萄糖衍生配体化合物的制备方法，包括W下步骤： (1) W2-目亏基-2-氯基乙酸叔下醋（I)为起始原料还原为2-氨基-2-氯基乙酸叔下 醋（II); (2) 将步骤（1)所得的2-氨基-2-氯基乙酸叔下醋（II)的氨基进行基团保护得到中 间体化合物（III)，并与面代簇酸醋R' 00C(CH2)J反应得到中间体化合物（IV-n); 做将步骤似所得的中间体化合物（IV-n)中的氯基还原为氨基得到并进行基团保 护得到中间体化合物（V-n); (4) 将步骤（3)所得的中间体化合物（V-n)的醋基水解得到中间体化合物（VI-n); (5) 将步骤（4)所得的中间体化合物（VI-n)与四乙酷氧基氨基葡萄糖反应得到中间 体化合物（W-n); (6) 将步骤（5)所得的中间体化合物（W-n)进行基团脱保护、水解即得到所述氨基葡 萄糖衍生配体化合物（A); 合成路线如下：4. 根据权利要求3所述的制备方法，其中，所述面代簇酸醋R'00C(CH2)J中，X表示F、 C1或化，R'表示C1~CIO的直链或支链烷基，优选C1~巧的直链或支链烷基。5. -种S幾基得-99m标记的配合物，其具有如通式度）所示结构，其中，-(CH2)。-为直链或包含支链的结构，n表示2~8的整数，M表示99mTc。6. 根据权利要求5所述的配合物，其中，-(CH2)。-为直链结构，n表示2~5的整数。7. 权利要求5或6所述S幾基得-99m标记的配合物的制备方法，包括W下步骤： (1)制备S幾基得-99m中间体水合离子fac-["mTc(CO)3(H2〇)3]+; 似将所得的化(3-[9叫(：(0))3化2〇)3]+与权利要求1或2所述氨基葡萄糖衍生配体化 合物反应制得所述配合物。8. 根据权利要求7的制备方法，其中，所述步骤（2)中，fac-[99mTc(CO)3(H2〇)3]+与权 利要求1或2所述氨基葡萄糖衍生配体化合物在中性条件下加热至70~100°C反应5~ 30min制得所述配合物。9. 根据权利要求8的制备方法，其中，所述中性条件为抑值为7的憐酸缓冲液。10. 权利要求5或6所述的配合物用于制备肿瘤S阳CT显像剂的用途。
【专利摘要】本发明提供了一种氨基葡萄糖衍生配体化合物及其制备方法。本发明还提供了一种三羰基锝-99m标记的配合物，其具有如通式(B)所示结构，本发明还提供了三羰基锝-99m标记配合物的制备方法以及用途。本发明的氨基葡萄糖衍生配体化合物以2,3-二氨基丙酸偶联氨基葡萄糖，原料易得、制备方法简便。本发明的三羰基锝-99m标记配合物由所述氨基葡萄糖衍生配体化合物与放射性三羰基锝-99m形成，化学稳定性强、制备简单、化学纯度高、生物性能好，可以用于制备新型的肿瘤SPECT显像剂。
【IPC分类】A61K103/10, C07H5/06, C07F13/00, A61K51/04, C07H1/00
【公开号】CN105001274
【申请号】CN201510463556
【发明人】杨文江, 刘宇, 张延华, 魏乐, 薛井泉, 汪建军
【申请人】中国科学院高能物理研究所
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2015年7月31日