一种柯里拉京的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及柯里拉京，尤其是涉及从大戟科植物纤梗叶下珠中提取制备柯里拉京 的方法。
【背景技术】
[0002] 柯里拉京（β-1-〇-galloyl_3, 6_ (R)-hexahydroxy diphenoyl-D-glucose)，又名 鞣云实精，鞣料云实素，分子式C27H22018,分子量634. 453, CAS登录号为23094-69-1，分子 结构式如下：
[0003]
[0004] 柯里拉京为可水解鞣质的一种，极性大，易溶于甲醇、乙醇、丙酮和DMS0。资料表 明，柯里拉京具有抗氧化、抗HIV、保肝、抑制老年痴呆和动脉粥样硬化等活性，尤其是具有 良好的抗肿瘤活性，对肝癌、卵巢癌、胆管癌等有显著的抑制效果，且毒性很低，极具开发成 为抗肿瘤新药的前景（中国专利201010225722. 9)。
[0005] 柯里拉京在多种植物中均含有，尤以大戟科叶下珠和蜜柑草含量较高。现有 的制备方法均以这两种植物为原料，用水或乙醇溶液回流提取，及CO 2超临界萃取，然后 通过柱层析、膜过滤、逆流色谱及重结晶等方法分离纯化（中国专利201010535378. 3， 201110187905. 0,201110210060. 2)。上述方法中叶下珠和蜜柑草不易大量采集，且均需特 殊设备，放大生产成本较高。
[0006] 纤梗叶下珠 （Phyllanthus tenellus Roxb)，又名五蕊油柑，为大戟科叶下珠属植 物，原产马斯克林群岛，我国最早2006年在广东发现，生长旺盛，株高可达lm。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的在于提供一种柯里拉京的制备方法。
[0008] 本发明包括以下步骤：
[0009] 1)提取与富集：将纤梗叶下珠粉末加入乙醇溶液浸提，将所得浸提液浓缩至无醇 味，再加入甲醇溶液溶解分散，用石油醚萃取脱脂脱色；
[0010] 2)柱色谱分离：甲醇溶液浓缩后加水溶解过滤，滤液经大孔吸附树脂，水洗脱去 杂后用乙醇溶液洗脱；收集含柯里拉京的洗脱液，浓缩后经RP-18反相硅胶柱，以甲醇-水 体系洗脱；合并含柯里拉京的洗脱组分，浓缩后再经LH-20凝胶，甲醇-丙酮体系洗脱，浓缩 干燥富含柯里拉京的组分即得柯里拉京。
[0011] 在步骤1)中，所述乙醇溶液的质量百分浓度可为50%~90%;乙醇溶液的用量按 质量比可为纤梗叶下珠粉末的6~10倍；所述浸提可浸提3次，浸提的温度可为45°C，每 次浸提的时间可6~IOh ;所述甲醇溶液的质量百分浓度可为50%~90% ;所述萃取可萃 取2~3次。
[0012] 在步骤2)中，所述大孔吸附树脂可选自HP-20大孔吸附树脂、DlOl大孔吸附树脂、 AB-8大孔吸附树脂、DM130大孔吸附树脂等中的至少一种；所述乙醇溶液的质量百分浓度 可为20%~40%;所述以甲醇-水体系洗脱的甲醇质量百分浓度可为15%~50%;所述甲 醇-丙酮体系洗脱的甲醇与丙酮的体积比可为1 : (〇~5)，丙酮不为0。
[0013] 本发明具有如下的突出特点和技术效果：
[0014] 1)本发明所用原料纤梗叶下珠生长旺盛，植株高大，资源丰富，柯里拉京含量高。
[0015] 2)本制备工艺所用仪器设备简单，工艺操作简便，生产规模容易放大。
【具体实施方式】
[0016] 实施例1
[0017] 纤梗叶下珠全草粉碎，称取1kg，加入10倍70%乙醇浸提2次，每次8h。合并浸提 液，减压浓缩得到乙醇粗提物。粗提物用500mL 90%甲醇溶解悬浮，石油醚萃取3次。剩余 甲醇溶液减压浓缩干后水溶解上样于DM-130型大孔树脂柱，水洗脱除杂后用30%乙醇洗 脱，收集乙醇洗脱液，浓缩干后上样于RP-18反相硅胶柱，30%甲醇溶液洗脱。收集含阿克 替苷的组分，浓缩后上样于LH-20凝胶，甲醇洗脱，收集目标成分，浓缩干燥即得柯里拉京。
[0018] 柱色谱分离过程以TLC检测，GF254硅胶板为载体，氯仿：甲醇：甲酸（3 : I : 1) 作展开剂，紫外线、碘、三氯化铁、硫酸乙醇等显色。
[0019] 实施例2
[0020] 纤梗叶下珠全草粉碎，称取2kg，加入8倍60 %乙醇浸提2次，每次10h。合并浸提 液过滤浓缩至稠膏状，加70%甲醇溶液IL充分分散溶解，石油醚萃取3次。甲醇液浓缩除 去甲醇后加水分散溶解，上样于HP-20型大孔树脂柱，水洗脱除杂后用40%乙醇洗脱。收集 乙醇洗脱液，浓缩干后上样于RP-18反相硅胶柱，20%甲醇溶液洗脱。收集含柯里拉京的组 分，浓缩后上样于LH-20凝胶，甲醇：丙酮=1 : 3洗脱，收集目标成分，浓缩干燥即得阿克 替苷。
[0021] 柱色谱分离过程以TLC检测，GF254硅胶板为载体，氯仿：甲醇：甲酸（3 : I : 1) 作展开剂，碘、硫酸乙醇显色。
【主权项】
1. 一种柯里拉京的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 提取与富集：将纤梗叶下珠粉末加入乙醇溶液浸提，将所得浸提液浓缩至无醇味， 再加入甲醇溶液溶解分散，用石油醚萃取脱脂脱色； 2) 柱色谱分离：甲醇溶液浓缩后加水溶解过滤，滤液经大孔吸附树脂，水洗脱去杂后 用乙醇溶液洗脱；收集含柯里拉京的洗脱液，浓缩后经RP-18反相硅胶柱，以甲醇-水体系 洗脱；合并含柯里拉京的洗脱组分，浓缩后再经LH-20凝胶，甲醇-丙酮体系洗脱，浓缩干燥 富含柯里拉京的组分即得柯里拉京。2. 如权利要求1所述一种柯里拉京的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述乙醇溶 液的质量百分浓度为50 %~90%。3. 如权利要求1所述一种柯里拉京的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述乙醇溶 液的用量按质量比为纤梗叶下珠粉末的6~10倍。4. 如权利要求1所述一种柯里拉京的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述浸提是 浸提3次，浸提的温度为45°C，每次浸提的时间为6~10h。5. 如权利要求1所述一种柯里拉京的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述甲醇溶 液的质量百分浓度为50 %~90%。6. 如权利要求1所述一种柯里拉京的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述萃取是 萃取2~3次。7. 如权利要求1所述一种柯里拉京的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述大孔吸 附树脂选自HP-20大孔吸附树脂、DlOl大孔吸附树脂、AB-8大孔吸附树脂、DM130大孔吸附 树脂中的至少一种。8. 如权利要求1所述一种柯里拉京的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述乙醇溶 液的质量百分浓度为20 %~40%。9. 如权利要求1所述一种柯里拉京的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述以甲 醇-水体系洗脱的甲醇质量百分浓度为15 %~50 %。10. 如权利要求1所述一种柯里拉京的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述甲 醇-丙酮体系洗脱的甲醇与丙酮的体积比为1 : (〇~5)，丙酮不为0。
【专利摘要】一种柯里拉京的制备方法，涉及柯里拉京。1)提取与富集：将纤梗叶下珠粉末加入乙醇溶液浸提，将所得浸提液浓缩至无醇味，再加入甲醇溶液溶解分散，用石油醚萃取脱脂脱色；2)柱色谱分离：甲醇溶液浓缩后加水溶解过滤，滤液经大孔吸附树脂，水洗脱去杂后用乙醇溶液洗脱；收集含柯里拉京的洗脱液，浓缩后经RP-18反相硅胶柱，以甲醇-水体系洗脱；合并含柯里拉京的洗脱组分，浓缩后再经LH-20凝胶，甲醇-丙酮体系洗脱，浓缩干燥富含柯里拉京的组分即得柯里拉京。所用原料纤梗叶下珠生长旺盛，植株高大，资源丰富，柯里拉京含量高。设备简单，工艺操作简便，生产规模容易放大。
【IPC分类】C07H1/08, C07H13/08
【公开号】CN105061522
【申请号】CN201510500624
【发明人】刘韶松, 童庆宣, 明艳林, 林靖怡, 郑志忠, 陈良华
【申请人】厦门华侨亚热带植物引种园
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年8月14日