01' ),190. 7 (C-3) ,196.3 (C-I)
[0190]HR-ESI-MS:m/z483. 2383 [M+H]+，505. 2204 [M+Na]+.
[0191] 实施例7
[0192] 化合物7的合成方法，包括以下步骤：
[0193] (1)3, 5-二羟基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮的合成
[0194] 取lg2, 4, 6-三羟基苯乙酮和0. 68g氢氧化钾加到IOml水中，冰水浴搅拌溶解，取 I. 37ml溴代异戊烯烧，加到水溶液中；60分钟后，用稀盐酸调节PH到3,然后用乙酸乙酯萃 取，将其有机相洗涤、干燥，最后用石油醚/乙酸乙酯混合溶剂体积比10 :1，硅胶柱层析得 到〇. 8g黄色油状物3, 5-二羟基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮，产率为 44% ;该过程发生如下反应：
[0196] 产物的结构表征数据为=1H NMR(DMS0-d6, 300MHz) SL641 (12H, s, 4XCH3)，2 ? 566 (5H，m，-CH2CH = ,-CH3CO) ,2.660 (2H，m，-CH2CH = ),4.894 (2H，t，J = 7. 5Hz,= CHCH2)，5. 661 (1H, s, H-4)?ESI-MS :m/z303. I [M-H]+.
[0197] (2) 3-羟基-5-甲氧甲氧基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮的合 成
[0198] 取I. 22g3, 5-二羟基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮加入到无水 丙酮中，搅拌溶解后，取4. 09g碳酸钾，搅拌15分钟后，再取760 iU氯甲基甲醚滴加入丙酮 溶液中，搅拌5小时后，过滤，将其滤液干燥，最后用石油醚/乙酸乙酯混合溶剂体积比20 : 1，硅胶柱层析得到I.〇7g黄色油状物3-羟基-5-甲氧甲氧基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯 基环己-2, 4-二烯酮，产率为77%;该过程发生如下反应：
[0200] 产物的结构表征数据为：? NMR(O)Cl3, 300MHz) S I. 485 (6H, s, 2 XCH3)，I. 501 (6H，s，2 X CH3), 2. 408 (2H，m，-CH2CH = ),2.634 (2H，m，-CH2CH = ),3.393 (3H，s，-OCH3), 4.715(2H，t，J = 7. 5Hz, = CHCH2) ,5.071 (2H，s，-OCH2O) ,5.679 (lH，s，H-4).ESI-MS:m/ z349. 1[M+H]+, 371. 1[M+Na]+.
[0201] (3) 2-[I-羟基-3- (4-溴苯基）-亚-2-丙烯基]-5-甲氧甲氧基-6, 6-二异戊烯 基环己-4-烯-1，3-二酮的合成
[0202] 取I. 4g3_羟基-5-甲氧甲氧基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮与 I. 09g对溴苯甲醛混合，加入乙醇水溶液溶解，再加入0. 4g氢氧化钾，常温反应3天后，用稀 盐酸调节PH到3,然后用乙酸乙酯萃取，将其有机相洗涤、干燥，最后用甲醇/水混合溶剂体 积比7 :3, YMC Rp-C18柱层析得到I. 57g黄色油状物2-[1_羟基-3-(4-溴苯基）-亚-2-丙 烯基]-5-甲氧甲氧基-6, 6-二异戊烯基环己-4-烯-1，3-二酮，产率为76%;该过程发生 如下反应：
[0204]产物的结构表征数据为：? NMR(DMS0-d6, 400MHz) S L 501 (12H, s, 4XCH3) ,2. 457 (2H, m,-CH2CH = ),2. 623 (2H, m,-CH2CH = ),3. 409 (3H, s, CH3OCH2O),4. 784 (2 H, t, J = 7. 6Hz, = CHCH2),5. 276 (2H, s, -OCH2O),5. 821 (1H, s, H-4) ,7.619 (2H, d, J =8. 4Hz,H-3",H-5"), 7. 655 (1H, d, J = 8. 4Hz, H-2", H-6"), 7. 812 (1H, d, J = 16Hz,H-2，），8.209(lH，d，J=16Hz，H-3，）?
[0205]13C NMR (DMS0-d6, 100MHz) S 17. 6 (-CH3)，25. 4 (-CH3)，37. I (-CH2CH =)，56. 7 (CH3OC H2O)，57. 6 (C-6)，95. I (-OCH2O-)，100. 9 (C-4)，107. 6 (C-2)，117. 9 (-CH = C)，123. 7 (C-2') ，124. 2(C-4" )130. 2(C-2"，C-6" ),132. 0(C-3"，C-5" ),133. 9(C-1" ),134. 2(-C = CH) ,142.5(03' ),175. 0(C-5)，185. 8(01' ),190. 8 (C-3) ,195.7 (C-I)?
[0206] ESI-MS:m/z537. I [M+Na]+.
[0207] (4)2-(4-溴肉桂酰基）-3, 5-二羟基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮的合成
[0208]取0.5182-[1-羟基-3-(4-溴苯基）-亚-2-丙烯基]-5-甲氧甲氧基-6,6-二异 戊烯基环己-4-烯-1，3-二酮加入IOml四氢呋喃溶解后，加入IOml的IM HC1，加热反应 10小时，待反应物冷却至室温后，将其倒入水中，然后用乙酸乙酯萃取，将其有机相洗涤、干 燥，最后用甲醇/水混合溶剂体积比6 :4, YMC Rp-C18柱层析得到0. 25g黄色油状物2- (4-溴 肉桂酰基）-3, 5-二羟基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮，产率为54%;该过程发生如 下反应：
[0210]产物的结构表征数据为=1H NMR(DMS0-d6, 400MHz) S I. 503(12H, s, 4XCH3) ,2. 457 (2H, m,-CH2CH = ),2. 566 (2H, m,-CH2CH = ),4. 786 (2H, t, J = 7. 6Hz, = CH CH2), 5. 604 (1H, s, H-4), 7. 598 (2H, d, J = 8. 4Hz, H-3" ,H-5" ),1.640 (1H, d, J = 8.4Hz，H-2" ,H-6" ),7. 739 (lH，d, J= 15.6Hz, H-2，），8. 213 (lH，d, J= 15.6Hz, H-3，）?
[0211] 13C NMR (DMS0-d6, 100MHz) S 17. 7 (-CH3)，25. 6 (-CH3)，37. 0 (-CH2CH = )，57. 6 (C-6)， 99.8(C-4)，107.2(C-2)，118.2(-CH = C)，123.9(C-2, )，124.4(C-4" )130.2(02"，C-6" )，132. I (C-3"，C-5" ),133. 9(C-1" ),134. 0(-C = CH), 134. I (-C = CH), 141. 6(C-3，），I 80. 2. 0 (C-5)，185. 4 (C-l' )，190. 6 (C-3)，196. 4 (C-I)?
[0212] HR-ESI-MS:m/z471. 1172[M+H]+, 493. 0996[M+Na]+.
[0213] 2、一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物的药理活性实验
[0214] 通过药理学试验发现上述化合物具有明显的抑制NO释放筛选的抗炎作用实验例 1
[0215] -类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物对抑制NO释放筛选的抗炎作用
[0216] 以小鼠腹腔巨噬细胞建立了脂多糖（LPS)诱导的NO释放筛选模型，通过测定 NO 2-标准曲线计算NO释放量来筛选受试药的抗炎作用。实验分为空白对照组（只加入细 胞液），LPS组，给药组（LPS+终浓度为10 5mol/L的受试药），阳性对照药组（LPS+终浓度 为10 6mol/L的地塞米松）。取各组上清液100 ill与等量Griess试剂（含有2. 5 %磷酸的 1%磺胺溶液与〇. 1%萘乙二胺溶液临用时1 :1混合）与微量振荡器上混匀，而后置于室温 下静置10分钟。570nm滤光片酶标仪测定读数，根据NO2标准曲线计算NO含量来筛选受 试药的抗炎作用。
[0217] 结果见表1，一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物有明显的抗炎作用，在 浓度为1X10 5mol/L时，NO生成抑制率为89. 4~99. 3%。
[0218] 表1 一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物对LPS诱导的NO释放的抗炎 作用
【主权项】
1. 一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物，其特征在于，具有通式（I)所示的 结构：U) 其中，R为苯环上1，2，3，4个任意的取代基， 所述一个取代基的位置为：所述二个取代基的位置为：其中R选自：氢，羟基，巯基，甲氧基，氨基，硝基，卤素，氰基，甲磺酸基，甲酸基。2. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，R选自：氢，羟基，甲氧基，氯，溴。3. 根据权利要求1-2任一所述的化合物，其特征在于，所述的化合物选自如下化合物：4.权利要求1-3任一所述化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:(1) 3, 5-二羟基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮的合成 取2, 4, 6-三羟基苯乙酮加到碱水溶液中，冰水浴搅拌溶解，取1. 5-2. 2倍2, 4, 6-三羟 基苯乙酮摩尔量的溴代异戊烯烷，加到水溶液中，60分钟后，用稀盐酸调节PH到3,然后用 乙酸乙酯萃取，将其有机相洗涤、干燥，最后用石油醚/乙酸乙酯混合溶剂，硅胶柱层析得 到黄色油状物3, 5-二羟基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮； (2) 3-羟基-5-甲氧甲氧基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮的合成 取3, 5-二羟基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮加入到无水丙酮中，搅 拌溶解后，取6-8倍3, 5-二羟基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮摩尔量的 碳酸钾，搅拌15分钟后，再取2-3倍3, 5-二羟基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二 烯酮摩尔量的氯甲基甲醚滴加入丙酮溶液中，搅拌4-6小时后，过滤，将其滤液干燥，最后 用石油醚/乙酸乙酯混合溶剂，硅胶柱层析得到黄色油状物3-羟基-5-甲氧甲氧基-2-乙 酰基-6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮； (3) 甲氧甲氧基保护的一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物的合成 按照摩尔比1 :1~1 :2,将3-羟基-5-甲氧甲氧基-2-乙酰基-6, 6-二异戊烯基环 己-2, 4-二烯酮与取代苯甲醛混合，加入乙醇水溶液溶解，再加入1-2. 5倍3-羟基-5-甲 氧甲氧基-2-乙酰基_6, 6-二异戊烯基环己-2, 4-二烯酮摩尔量的碱性催化剂，常温反应3 天后，用稀盐酸调节PH到3,然后用乙酸乙酯萃取，将其有机相洗涤、干燥，最后用甲醇/水 混合溶剂，YMCRp-Cls柱层析得到甲氧甲氧基保护的一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类 化合物； (4) 一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物的合成 取甲氧甲氧基保护的一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物加入四氢呋喃溶 解后，加入稀盐酸，加热反应10小时，待反应物冷却至室温后，将其倒入水中，然后用乙酸 乙酯萃取，将其有机相洗涤、干燥，最后用甲醇/水混合溶剂，YMCRp-Cls柱层析得到一类A 环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物； 其中R的定义和权利要求1-3中任一项相同。5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤（1)所述的碱选自氢氧化钠或 氢氧化钾；步骤（1)所述的石油醚/乙酸乙酯混合溶剂中，石油醚与乙酸乙酯的体积比为 10 :1〇6. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤（2)所述的石油醚/乙酸乙酯 混合溶剂中，石油醚与乙酸乙酯的体积比为20 :1。7. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤（3)所述的乙醇水溶液的体积 比为3 :2 ;碱性催化剂选自氢氧化钠或氢氧化钾；步骤（3)所述的甲醇/水混合溶剂中，甲 醇与水的体积比为7 :3。8. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：步骤（4)所述的稀盐酸浓度是 l-2mol/L，与四氢呋喃的体积比为1 :1 ;步骤（4)所述的加热温度为30-50°C;步骤（4)所 述的甲醇/水混合溶剂中，甲醇与水的体积比为6 :4。9. 一种药物组合物，其特征在于：含有有效剂量权利要求1-3中任一所述的化合物和 药学上可接受的载体。10. 根据权利要求9的药物组合物，其特征在于，所述组合物的剂型选自片剂、胶囊剂、 丸剂、颗粒剂、口服液和混悬剂。11. 权利要求1-3任一所述的化合物在制备治疗和/或预防炎症的产品中应用。12. 根据权利要求11的应用，其特征在于，所述的炎症选自脉管炎，骨关节炎，神经炎 症。13. 根据权利要求11的应用，其特征在于，所述的产品选自药品、保健品。
【专利摘要】本发明公开了一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物及其制备方法与抗炎活性应用。本发明的化合物具有通式(Ⅰ)所示的结构，其制备方法包括以下步骤：(1)合成3,5-二羟基-2-乙酰基-6,6-二异戊烯基环己-2,4-二烯酮，(2)合成3-羟基-5-甲氧甲氧基-2-乙酰基-6,6-二异戊烯基环己-2,4-二烯酮，(3)合成甲氧甲氧基保护的一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物，(4)合成一类A环具有异戊烯基的醌式查尔酮类化合物。本发明的化合物制备方法简单并且具有明显的抗炎作用。
【IPC分类】A61P9/00, C07C49/747, A61P19/04, A61K31/122, A61P25/00, A61P29/00, C07C45/61, A61P9/10, C07C49/753, A23L1/29, A61P19/02
【公开号】CN105085219
【申请号】CN201410220017
【发明人】张培成, 侯琦, 陈钟, 林明宝, 杨桠楠, 袁绍鹏, 冯子明, 白金叶, 姜建双
【申请人】中国医学科学院药物研究所
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年5月22日