123.3, 131.8, 132.6, 160.8, 166.2, 190.7.IR(KBr)cm1:3241, 2930, 1682, 1264, 961.MSm/ z:221(M+l)〇
[0028] 实施例2抗抑郁药理实验和神经毒性实验
[0029] 强制游泳实验和悬尾实验是最常用的两个用于致抑郁剂和抗抑郁研究的实验，小 鼠在水中放弃游泳挣扎和悬吊于半空中时放弃挣扎的状态的时间总和称为无动时间，反应 了小鼠无助的症状，而强制游泳实验和悬尾实验中无动时间的延长，则表现出抑郁样症状。 对本发明提供的化合物进行小鼠强迫游泳实验和小鼠旋尾实验筛选，可评价其抗抑郁效力 和安全性。
[0030](一）小鼠强迫性游泳实验：
[0031] a 方法：参见（Porsolt RD et al, Arch Int Pharmaeodyn Ther, 1997)等报道的 方法，腹腔注射给药30分钟后，将小鼠放入XSC-小鼠恒温游泳仪内（水深10cm、直径34cm 的桶内，水温25 ± 2°C )，观察6分钟内小鼠游泳情况，统计小鼠后4分钟内游泳累积不动时 间（不动即小鼠停止挣扎或小鼠呈漂浮状态，小鼠四肢有轻微动作以保持头部在水面）。
[0032] b分组：①溶媒空白组：测试前腹腔注射10mg/kg的DMS0,0.lml/20g(具体注射 剂量按大鼠体重为计）；
[0033] ②化合物I组：测试前在腹腔注射10mg/kg4'-溴-7-异戊烯氧基-2, 3-二氢 黄酮化合物0. lml/20g (具体注射剂量按大鼠体重为计）；
[0034] ③氟西汀阳性对照组：测试前在腹腔注射10mg/kg 4氟西汀0?lml/20g(具体注 射剂量按大鼠体重为计），记录3组的小鼠游泳累积不动时间，实验重复三次。
[0035] c结果如表1所示，化合物I在腹腔注射10mg/kg的剂量下与溶媒空白组相比具有 显著性差异（P〈〇. 〇〇1)，其抗抑郁活性与对照药氟西汀相似。
[0036] 表1化合物I和氟西汀对小鼠强迫游泳行为的影响('7±&
[0037]
[0038](二）转棒毒性测试
[0039] 方法：给药30min后，将小鼠置于刻花的直径为30mm的转棒仪上，转速6转/min， 记录2min内掉落的次数，以此表示其运动协调能力。每只小鼠测定3次，每次间隔时间为 30min，取3次测量的平均值。采用SPSS 13. 0统计软件进行单因素方差分析。
[0040] 表2化合物I和卡马西平小鼠神经毒性影响 [0041 ]
[0042] 其中：a TD5Q:半数中毒剂量mg/kg.
[0043]从上表中可看出，化合物I的神经毒性很低，CTD5Q>2000mg/kg)，安全性很高。
[0044](三）小鼠悬尾实验：
[0045] a方法：参见（Stem L et al. Psyehopharmacolosy, 1985)等报道的方法。腹腔注射 给药〇. lml/20g 30分钟后，距小鼠尾尖部约lcm处用胶布贴于悬尾箱（30cmX30cmX25cm) 支架上，使小鼠成倒挂状态，其头部离箱底约5cm，1次悬挂2只小鼠，中间用隔板隔开。悬 挂时间为6分钟，统计小鼠后4分钟内悬尾累积不动时间（不动状态即小鼠停止挣扎不动 或无任何活动）。
[0046] b分组：①溶媒空白组：测试前在腹腔注射10mg/kg的DMS0,0? lml/20g (具体注 射剂量按大鼠体重为计）；
[0047] ②化合物I组：腹腔注射10mg/kg 4'-溴-7-异戊烯氧基-2, 3-二氢黄酮化合 物 0? lml/20g30 分钟；
[0048] ③氟西汀阳性对照组：腹腔注射10mg/kg4'-溴-7-异戊烯氧基-2, 3-二氢黄酮 化合物0. lml/20g;记录3组小鼠4分钟内悬尾累积不动时间（不动状态即小鼠停止挣扎 不动或无任何活动）。
[0049] c结果如图1所示，化合物I在10mg/kg剂量下与溶媒空白组相比具有显著性差异 (p〈0. 001)，其抑制小鼠悬尾不动时间与氟西汀相似，说明化合物I (4'-溴-7-异戊烯氧 基-2, 3-二氢黄酮）具有较强的抗抑郁活性。
[0050] 实施例3开放性实验自主活动
[0051] 开放性自发活动试验主要用于评估实验动物的自主活动行为，是一个中枢神经系 统安全药理学评价及神经科学学科研究的常用方法，能为包括中枢神经系统安全药理学研 究在内的多种药理学研究目的提供参数的重要方法实验。
[0052] a方法：在一个不透明的塑料箱子（80cmX60cmX30cm)，塑料箱底部划分为48个 10cmX 10cm大小的正方形格子。将塑料箱置于安静的房间内，用60W灯泡给予光照，灯泡高 于塑料箱中心lm左右。
[0053] b分组：取雄性小鼠20只，随机分为2组，每组10只，分别为空白对照组和药物组。 测试前30min，化合物I组：溶于DMS0溶液中，以10mg/kg的剂量腹腔注射0. 10ml/20g，空 白对照组腹腔注射同体积的DMS0溶液。将小鼠置于塑料箱底中心方格内，手动记录移动次 数（四肢均穿过方格）和竖立次数（用后肢站立），记录3min。采用SPSS 13. 0统计软件 处理，数据用x±s表示，组间比较用t检验。p〈0. 05有统计学意义。
[0054] c结果如图2所示，实验结果显示小鼠自主活动次数与对照组相比没有明显的变 化。说明化合物I不会改变小鼠的自主活动，排除了化合物I的抗抑郁假阳性结果。
【主权项】
1. 一种由式（I)表示的4'-溴-7-异戊烯氧基-2, 3-二氢黄酮：2. 药物组合物，其包含作为活性成份的依据权利要求1中的4'-溴-7-异戊烯氧 基-2, 3-二氢黄酮以及一种或多种惰性的、无毒性的可药用载体。3. -种制备如权利要求1所述的4'-溴-7-异戊烯氧基-2, 3-二氢黄酮，其特征在 于：以通式II为起始物质：与对溴苯甲醛反应，得到产物经重结晶得由通式I表示的化合物。4. 根据权利要求3所述的4'-溴-7-异戊烯氧基-2, 3-二氢黄酮的制备方法，其特 征在于：所述的反应包括如下步骤： 步骤一：取4mmol的化合物II (2-羟基-4-异戊稀氧基苯乙酮）0. 50g，向化合物II加 入对溴苯甲醛（8mmol)，在氮气流保护下，边搅拌边滴加由4. 89g KOH和43.60ml无水乙 醇配成的14%的KOH溶液，室温反应8h，TLC跟踪反应直至原料点消失，停止反应，将反应 液倾倒入冰水中，用HCl调PH至中性，用乙醚萃取，合并乙醚层，减压蒸除乙醚，使用规格为 300-400目的硅胶铺柱，以石油醚/乙酸乙酯[V(石油醚）/V(乙酸乙酯）]=20:1过柱，得 到黄色针状晶体4'-溴-2-羟基-4-异戊烯氧基查尔酮； 步骤二：取步骤一制得的4'-溴-2-羟基-4-异戊烯氧基查尔酮0. 50g，加无水乙酸 钠〇. 80g及无水乙醇40mL，回流24h，用乙醚萃取；合并乙醚层，粗品以石油醚/乙酸乙酯 [V(石油醚/V(乙酸乙酯）]=20:1过柱，得白色固体I。5. -种根据权利要求1所述的4'-溴-7-异戊烯氧基-2, 3-二氢黄酮在制备抗抑郁 药中的应用。6. -种根据权利要求2所述的4'-溴-7-异戊烯氧基-2, 3-二氢黄酮的药物组合物 在在制备抗抑郁药中的应用。
【专利摘要】本发明涉及一种抗抑郁的新型化合物及其可药物盐，它是由式(I)表示的4′-溴-7-异戊烯氧基-2,3-二氢黄酮：其合成方法为以通式为起始物质，与对溴苯甲醛反应，得到产物经重结晶得由通式Ⅰ表示的化合物，本发明的化合物从小鼠的急性毒性实验结果表明其全身的毒性很低，是一种有效地作为抗抑郁的药物。
【IPC分类】A61P25/24, C07D311/32, A61K31/352
【公开号】CN105153090
【申请号】CN201510425005
【发明人】关丽萍, 彭舟, 甄兴华, 曲有乐, 韩焱
【申请人】浙江海洋学院
【公开日】2015年12月16日
【申请日】2015年7月17日