抗微生物清洗剂的制作方法
【专利说明】抗微生物清洗剂
[0001] 相关申请的交叉参考
[0002] 本申请基于并要求2013年5月23日提交的美国临时申请S.N. 61/826, 775的优 先权，其公开内容引入本文作为参考。
【发明内容】
[0003] -种用于处理新鲜水果和蔬菜（统称"农产品"）整体和切片的新型抗微生物清洗 剂（antimicrobialwash)，该抗微生物清洗剂可以减少微生物，尤其是人类病原体，该抗微 生物清洗剂含有过氧化氢和一种或多种果酸的水溶液。在本文中，"溶液"将被理解为指真 溶液，即组合物中所有表明的成分除了水都溶解于水相中。因此，"溶液"不包括分散体，该 分散体中所表明的成分以大于饱和浓度的浓度而存在使得至少一些这种成分以分散固体 的形式存在。
[0004] 用于此目的合适的果酸包括苹果酸（包括DL-苹果酸、L-苹果酸及其混合物）、柠 檬酸、酒石酸、扁桃酸（mandelicacid)及其混合物。优选为苹果酸、柠檬酸、酒石酸及其混 合物。
[0005] 在一种优选的实施方式中，乳酸被包含在本发明的抗微生物清洗剂中，在乳酸存 在下能够得到更好的结果。
[0006] 本发明的抗微生物清洗剂的成分浓度在处于使用形式时，即当应用于农产品时， 已列于下面的表1和2:
[0007] 轰1
[0008] 稀释（使用）形式
[0009] 成分浓度（重量％ )和重量比
[0010] 不含乳酸
[0012] 在这些水性抗微生物清洗剂中过氧化氢与果酸的比例（"过氧化氢/果酸比"）可 以有很大的不同。例如，该比例可以从低至0.01到高至10。更通常地，过氧化氢/果酸比 可以为0. 02-4. 0,或甚至为0. 03-1. 5。如果想要的话，过氧化氢/果酸比可以为0. 04-0. 5， 0· 07-0. 4,或甚至为 0· 1-0. 36。
[0013]表 2
[0014] 稀释（使用）形式
[0015] 成分浓度（重量％ )和重量比
[0016] 含有乳酸
[0017]
[0018] 在这些水性抗微生物清洗剂中乳酸与果酸的比例（"乳酸/果酸比"）可以有 很大的不同。例如，该比例可以从低至0.005到高至8。更通常地，乳酸/果酸比可以为 0· 006-3. 0,0· 01-3. 0,0· 02-2. 0,0· 03-1. 0,或甚至为0· 033-0. 25。
[0019] 相似地，在这些水性抗微生物清洗剂中过氧化氢与果酸的比例（"过氧化氢/果酸 比"）也可以有很大的不同。例如，该比例可以从低至0.01到高至10。更通常地，过氧化氢 / 果酸比可以为 〇·02-4. 0,0· 03-L5,0· 04-L0,或甚至为0· 1-0. 5。
[0020] 此外，在这些水性抗微生物清洗剂中过氧化氢与乳酸的比例（"过氧化氢/乳酸 比"）也可以有很大的不同。例如，该比例可以从低至0.05到高至50。更通常地，过氧化氢 / 乳酸比可以为 〇·1-40,0· 2-30,0· 3-10,0· 4-7. 5,0· 5-5. 0,或甚至为1. 0-3. 0。
[0021] -般地，当在使用浓度时，本发明的抗微生物清洗剂将具有大约为2. 0-4. 0的pH 值，更通常大约为2. 4-3. 5,或甚至大约为2. 5-3. 3。
[0022] 本发明的抗微生物清洗剂中优选不含或基本上不含在早期抗微生物组合物中发 现的成分。这些成分的实例包括过氧乙酸、表面活性剂、羧酸酯和除水以外的溶剂。特别 地是，本发明的抗微生物清洗剂中不含醇，包括一元醇和多元醇，以及其它的含氧有机溶剂 (oxygenated organic solvents)〇
[0023] 在一些实施方式中，本发明的抗微生物清洗剂也不含或基本上不含盐和其它能够 在水溶液中释放阳离子的成分。在其它实施方式中，钙和/或镁盐可以被包含在本发明 的抗微生物清洗剂中。如果这样，这些钙和镁盐的组合浓度将通常为大约0. 001-0. 05重 量％，更通常为大约0. 005-0. 02重量％。
[0024] 本发明的抗微生物清洗剂可以以浓缩形式制造和运输，然后在即将使用前用水稀 释。例如，浓缩物含有所有制备本发明的抗微生物清洗剂的成分，与抗微生物清洗剂有相同 的相对比例，可以被大量制造，包装在合适的容器中，储存，运输，然后在即将使用前用适量 的水稀释。该浓缩物中的过氧化氢的含量可以低至1重量％和高至35重量％，但通常大约 为1-25重量％，2-25重量％，2-15重量％，3. 5-20重量％，或甚至为3. 5-10重量％。
[0025] 可以使用任何适合的应用技术将本发明的抗微生物清洗剂应用于农产品，这些技 术包括喷涂（例如，直接喷涂，喷雾，雾化等），帘涂（curtaincoating)等。浸涂已经被发 现特别有用。无论使用何种特定的应用技术，本发明的抗微生物清洗剂与待处理的农产品 保持接触的接触时间理想为约1-10分钟，优选为约2-5分钟。
[0026] 因此，在本文中，我们公开了用于处理新鲜水果和蔬菜，以减少被处理的新鲜水果 或蔬菜表面的微生物污染的方法，此方法包括使新鲜水果或蔬菜的表面与抗微生物清洗剂 水溶液接触，该水溶液含有足够量的过氧化氢和一种或多种的果酸，以减少被处理的农产 品表面的微生物污染("微生物减少有效量")。因此，本文中使用的术语"处理（treatment) " 和"处理（treating) "将被理解为涵盖减少新鲜水果或蔬菜表面微生物污染的任何处理。
[0027] 在这方面，可以理解的是将抗微生物清洗剂用于新鲜水果和/或蔬菜的应用技术 (例如，直接喷涂、喷雾、雾化、帘涂、浸涂等）通常回收抗微生物清洗剂，以重新用于很多后 续批次的新鲜水果和/或蔬菜。水洗涤新鲜农产品通常足以从农产品表面除去微生物和病 原体，即使洗涤用水中不包含特殊的抗微生物剂。然而当该洗涤用水被再利用时，问题就出 现了。这是因为从水果或蔬菜除去的微生物保留在该洗涤用水中，在此它们迅速增多然后 污染相同的洗涤用水处理的第二批和后续的水果或蔬菜。所以，为了使抗微生物清洗剂在 该过程中有效的减少新鲜水果或蔬菜多批次的微生物污染，抗微生物清洗剂需要包含足够 的抗微生物剂，以随时间减少该洗涤用水的微生物污染。因此，在本文的公开中，过氧化氢 和一种或多种果酸的"微生物减少有效量"将被理解为是指足以减少洗涤用水相对于不含 任何抗微生物剂的洗涤用水的微生物污染的量。一般来说，理想的是选择果酸、过氧化氢和 乳酸的浓度在上述列出表1和表2的范围中。然而，准确的浓度可以通过本领域普通技术 人员通过常规的实验来确定。
[0028] 优选地，本发明的水性抗微生物清洗剂的使用量，以及其有效成分的浓度将被选 择，以避免导致被处理的新鲜水果或蔬菜损坏。当然，所需的准确量将根据所使用的特定化 合物或组合物、被处理的新鲜水果或蔬菜、该新鲜水果或蔬菜所处的环境而变化。本领域技 术人员根据本文的教导可以容易地确认所述化合物或组合物的准确量。例如，本领域技术 人员可以按照本文中所用的步骤来确定本发明的水性抗微生物清洗剂的使用量以及其中 活性成分的浓度，以达到相对于阴性对照微生物污染具有统计学上的显著减少。
[0029] 此外，应该理解的是，其它化合物可被添加到提供的本发明的抗微生物清洗剂中， 只要它们基本上不干扰其预期的活性和功效。为此，可以确定另一种化合物是否会干扰本 发明的水性抗微生物清洗剂的活性和/或功效，例如，通过本文中所用的步骤。
[0030] 处理完成后，如果需要的话，任何仍保留在农产品上的残留抗微生物清洗剂可以 通过饮用水清洗除去。
[0031] 处理和任何任选的清洗步骤完成后，处理过的农产品可以以任何常规的方式使 用。例如，处理过的农产品（包括整体和切片）可以按照通常做法包装、储存和运输。如果 这样，包装的农产品理想地储存在15_25°C，优选10-15°C，5-10°C，或甚至2-5°C。或者，处 理过的农产品可以以常规方式进行冷冻或干燥。
[0032] 最后，在包装前也可以以常规方式用抗氧化剂溶液对处理过的农产品进行处理， 以防止酶促变色。如果这样，农产品可以任选地用饮用水清洗以除去可能保留在处理过的 农产品上的任何残留的抗微生物清洗剂。 实施例
[0033] 为了更彻底地描述本发明，提供了下面的具体实施例。
[0034] 实施例1和2以及对比例A和B
[0035] 将小菠菜叶分成组，称重每组8克，之后各组放置在层流罩下的表面已消毒的试 管架顶上。然后每个菠菜叶暴露于紫外光（UV)下5分钟，以减少表面微生物的浓度。5分 钟后，每片叶子小心地用钳子或乙醇消毒的丁腈手套翻转，然后叶子的另一面再暴露于紫 外光（UV)下5分钟。
[0036] 然后每个净化的小菠菜叶接种某些人类病原体，特别是大肠杆菌 (E.coli0157:H7)，单核细胞增生李斯特菌（monocytogenes)和血清型沙门氏菌，通过将每 组叶片淹没在病原体接种物中30秒。然后用钳子抖掉多余的接种物，之后叶子在层流罩下 的表面已消毒的试管架顶上空气干燥1小时。然后将每个样品加入装有500ml的抗微生物 清洗剂处理溶液的1升或2升烧杯中，之后用无菌移液管或搅拌棒将每个烧杯的内容物搅 拌5分钟。然后将处理过的叶子从它们的抗微生物清洗剂溶液中移出，并抖动以除去多余 的液体，然后将其加入到装有32mlDE(Dey-Engley)中和肉汤的无菌/过滤/80ml的匀浆袋 (stoma