cherbag)中。然后叶片在迷你勾衆器（mini-stomacher)中拍打3分钟，然后将每 个袋的内容物过滤回收上清液。然后将上清液连续稀释并铺板于胰蛋白酶大豆琼脂+〇. 1 % 丙酮酸钠+100ppm的萘啶酸上，并在37°C下培养24小时。抗微生物清洗液中存活的病原体 在处理后也被镀出（platedout)。进行人工计数或通过菌落计数器计数CFU(菌落形成单 位）。
[0037] 然后将每个样品获得的计数与阳性对照进行比较，阳性对照中，用0. 1重量％蛋 白胨水代替抗微生物溶液来清洗接种叶子（如表3中实施例B)。
[0038] 然后将每个样品获得的计数与阳性对照进行比较，阳性对照中，将接种叶子直接 加入到DE中和肉汤中而不先与抗微生物处理溶液接触。
[0039] 将四种不同的水性抗微生物清洗剂溶液进行了测试，该组合物列于下面的表3 :
[0040]表3
[0041] 水性抗微生物清洗剂的化学组合物
[0043]^获得的结果列于下面的表4、5和6 :
[0044]表 4
[0045] 抗微生物清洗剂降低小菠菜叶中的大肠杆菌（E.coli0157:H7)
[0046]
[0047] 抗微生物清洗剂溶液前，将小菠菜叶接种于6. 72的对数（log)CFU/g大肠杆菌 (E.coli0157:H7)中。
[0048]表5
[0049] 抗微生物清洗剂降低小菠菜叶中的沙门氏菌（Salmonella)
[0050] (4种沙门氏菌株：斯坦利（Stanley)，蒙德维多（Montevideo)，圣保罗（St.Paul) 和纽波特（Newport))
[0051]
[0052] 将小菠菜叶接种于7.43的对数（1呢)0?1]/^4种沙门氏菌株：斯坦利，蒙德维多， 圣保罗和纽波特。
[0053]表6
[0054] 抗微生物清洗剂降低小菠菜叶中单核细胞增生李斯特菌
[0055] 5种菌株，L2624(CDC2001哈密瓜爆发菌株，血清型l/2b)，L2625(CDC2011哈密瓜 爆发菌株，血清型l/2a-与L2624不同的分子类型），L008(加拿大的卷心菜/白菜爆发菌 株，血清型4b)，L499(人类隔离的历史性美国爆发菌株，血清型l/2a)，L502(历史性1994 伊利诺伊州食源性爆发菌株血清型l/2b)
[0056]
[0057] 将小菠菜叶接种于8.00的对数（log)CFU/g单核细胞增生李斯特菌。
[0058] 从上述的例子可以看出，本发明的水性抗微生物清洗剂在减少处理过的新鲜蔬菜 的微生物污染方面，比常规的抗微生物组合物更有效得多。
[0059] 上述的处理完成之后，将每个实施例中使用的洗涤液也进行病原体分析。结果发 现实施例1和2中使用的洗涤液表明本发明不含病原体积累。与此相反，在单次洗涤接种 的小菠菜后，对比例B(0. 1重量％蛋白胨水）中使用的洗涤液含有3. 77的对数（log)的大 肠杆菌（E.coli0157)，1. 73的对数（log)的沙门氏菌和2. 59的对数（log)的单核细胞增 生李斯特菌积累。
[0060] 实施例3-9
[0061] 在这个例子中，BSEN1276的一般方法是用来评估本发明的七种其它水性抗微生 物清洗剂组合物接触以降低用于处理新鲜水果和蔬菜后的洗涤水的微生物污染的有效性。 这些七种其它水性抗微生物清洗剂组合物的制备与上述实施例1和2基本相同，虽然在这 些组合物中活性成分的总浓度从最高（实施例3)到最低（实施例9)而变化。在该试验中 使用的微生物为大肠杆菌（E.coli0157)，干扰物质是牛白蛋白（bovinealbumin)且接触 时间为5分钟。
[0062] 制备含有8. 0-9. 01og/ml的浓度微生物细胞的标准测试悬浮液作为接种物。吸取 lml干扰物质移至14ml无菌试管中，接着加入lml微生物测试悬浮液并充分混合。2分钟 后，加入8ml被测试的水性抗微生物清洗剂，并使用涡旋震荡混合。5分钟接触时间后，将 lml份量转移至14ml无菌试管中，通过稀释到DE-中和肉汤中而被中和。然后将组合物铺 板于胰蛋白酶大豆琼脂+0. 1 %钠。在37°C培养24小时后，人工计数菌落形成单位（菌落 数仅为25-250/板），然后微生物的浓度以CFU/ml计，可使用公式CFU/ml=菌落数X稀释 倍数而计算得到。
[0063] 使用两种不同的干扰物质。第一种干扰物模拟"肮脏条件"，含有3g牛白蛋白 /100ml。吸取lml该干扰物移至试管中，接着加入lml微生物悬浮液。该试管中牛白蛋白 的最终浓度为0. 3%，由此模拟肮脏条件。
[0064] 第二种干扰物模拟"干净条件"，含有0. 3g牛白蛋白/100ml。吸取lml该干扰物 移至试管中，接着加入lml微生物悬浮液。该试管中牛白蛋白的最终浓度为0. 03%，由此模 拟干净条件。
[0065] 得到的结果列于下面的表7:
[0066] 表 7
[0067] 根据BSEN方法（2009)的大肠杆菌（E.coli0157)在"肮脏"和"干净"条件下的 失活
[0068]
[0069] 从该表中可以看出，除了实施例9浓度最小的组合物，所有这些本发明的水性抗 微生物清洗剂在该测试"干净"和"肮脏"条件下都能实现大肠杆菌的浓度减少至至少6. 9 的对数。此外，即使是实施例9浓度最小的组合物，在该测试"干净"条件下都能实现大肠 杆菌的浓度减少至至少6. 9的对数。这清楚地表明，本发明的抗微生物清洗剂会很高效的 降低循环利用的清洗液与多批抗微生物处理的新鲜水果和蔬菜接触的微生物污染。
[0070] 虽然上面仅描述了本发明的一些实施例，但应该理解的是，在不脱离本发明的精 髓和范围下可以做出许多修改。所有这样的修改的目的均应包括在本发明的范围中，这仅 通过以下权利要求的范围来限定。
【主权项】
1. 一种用于处理新鲜水果和蔬菜的抗微生物清洗剂，该抗微生物清洗剂含有过氧化氢 和一种或多种果酸的水溶液。2. 根据权利要求1所述的抗微生物清洗剂，其中，所述果酸为苹果酸、柠檬酸、酒石酸 和扁桃酸中的一种或多种。3. 根据权利要求2所述的抗微生物清洗剂，其中，所述果酸为苹果酸、柠檬酸和酒石酸 中的一种或多种。4. 根据权利要求1所述的抗微生物清洗剂，其中，所述水溶液含有0. 02-0. 45 %过氧化 氢和0. 1-1. 2重量％果酸，进一步地，水溶液中过氧化氢/果酸比为0. 1-0. 8。5. 根据权利要求1所述的抗微生物清洗剂，其中，所述水溶液还含有乳酸。6. 根据权利要求5所述的抗微生物清洗剂，其中，所述果酸为苹果酸、柠檬酸、酒石酸 和扁桃酸中的一种或多种。7. 根据权利要求6所述的抗微生物清洗剂，其中，所述果酸为苹果酸、柠檬酸和酒石酸 中的一种或多种。8. 根据权利要求5所述的抗微生物清洗剂，其中，所述水溶液含有0. 02-0. 20%过氧 化氢，0. 05-1. 0重量％果酸和0. 005-0. 15重量％乳酸，进一步地，水溶液中乳酸/果酸比 为0. 02-2. 0,水溶液中过氧化氢/果酸比为0. 04-1. 0,且水溶液中过氧化氢/乳酸比为 0· 4-7. 5〇9. 一种处理新鲜水果或蔬菜以减少新鲜水果或蔬菜表面微生物污染的方法，该方法包 括将权利要求1所述的抗微生物清洗剂与新鲜水果或蔬菜的表面进行接触。10. 根据权利要求9所述的方法，其中，所述果酸为苹果酸、柠檬酸、酒石酸和扁桃酸中 的一种或多种。11. 根据权利要求10所述的方法，其中，所述果酸为苹果酸、柠檬酸和酒石酸中的一种 或多种。12. 根据权利要求9所述的方法，其中，所述水溶液含有0. 02-0. 45 %过氧化氢和 0. 1-1. 2重量％果酸，进一步地，水溶液中过氧化氢/果酸比为0. 1-0. 8。13. 根据权利要求9所述的方法，其中，所述水溶液还含有乳酸。14. 根据权利要求13所述的方法，其中，所述果酸为苹果酸、柠檬酸、酒石酸和扁桃酸 中的一种或多种。15. 根据权利要求14所述的方法，其中，所述果酸为苹果酸、柠檬酸和酒石酸中的一种 或多种。16. 根据权利要求13所述的方法，其中，所述水溶液含有0. 02-0. 20%过氧化氢， 0. 05-1. 0重量％果酸和0. 005-0. 15重量％乳酸，进一步地，水溶液中乳酸/果酸比为 0. 02-2. 0,水溶液中过氧化氢/果酸比为0. 04-1. 0,且水溶液中过氧化氢/乳酸比为 0· 4-7. 5〇17. 根据权利要求9所述的方法，其中，该方法在多批新鲜水果和/或新鲜蔬菜上实施， 进一步地，用于处理这些批次中的至少一批的抗微生物清洗剂在处理这些批次中的至少另 一批中进行循环再利用。
【专利摘要】一种用于处理新鲜水果和蔬菜的新型抗微生物清洗剂，该抗微生物清洗剂可以减少微生物，尤其是人类病原体，该抗微生物清洗剂含有过氧化氢和一种或多种果酸的水溶液。
【IPC分类】C11D3/39
【公开号】CN105283535
【申请号】CN201480029782
【发明人】X·董, J·B·居尔特勒, R·李, S·A·桑托斯
【申请人】自然封印公司, 美国政府农业部
【公开日】2016年1月27日
【申请日】2014年5月22日
【公告号】CA2912378A1, EP2999777A1, US20140348945, WO2014190113A1