树枝状聚合物组合物、合成方法、以及其应用

树枝状聚合物组合物、合成方法、以及其应用
【专利摘要】本发明涉及新型树枝状聚合物结合物和其合成方法，以及利用树枝状聚合物结合物的系统和方法(例如，在诊断和/或治疗设置中，(例如，用于递送治疗剂、成像剂和/或靶向剂(例如，在疾病诊断和/或治疗中等)。
【专利说明】树枝状聚合物组合物、合成方法、从及其应用
【背景技术】
[0001]树枝状聚合物(den化imers)是由单体组成大分子，运些单体按照围绕多官能中屯、 核的树形结构的过程(process)相关联。
[0002] 树枝状聚合物，还被称为"级联分子"，是具有限定结构的高度支化的功能性聚合 物。运些大分子实际上是聚合物，因为它们基于重复单元的缔合(association)。然而，树枝 状聚合物根本上不同于常规聚合物，因为它们具有归因于它们的树状结构的特殊性能。可 W精确控制树枝状聚合物的分子量和形状并将功能定位于树结构的末端，形成使它们易接 近的表面。
[0003] 通过重复一系列反应来逐步地构造树枝状聚合物，运一系列反应允许每个重复单 元和终端功能的倍增(multiplication)。一系列反应中的每一个形成称作"新一代"的物 质。通过重复一系列反应来构建树状结构，用一系列反应在每个反应周期结束时可W获得 新一代和越来越多的相同的分支。在几代W后，通过存在于外周的众多末端官能 (functions),树枝状聚合物呈现高度支化的并且是多官能化的球形形状。
[0004] 运样的聚合物特别描述于Launay et al. ,Angew.Qiem. Int.Ed.EnGl1994,33, 15/16,1590-1592，[ 1 ]或进一步描述于Launay et alJournal of Organometal 1 ic Qiemistry,1997,529,51-58。[2]
[0005] 缺氧性肿瘤是临床上非常难W治疗的：它们耐放疗和化疗并且经常是累积治疗 [3]。
[0006] 然而，已知缺氧性肿瘤细胞是极具侵略性的，并且快速扩散为在整个身体中的转 移["。
[0007] 由于缺氧性肿瘤不良地响应于常规治疗方法(放疗和化疗），所W其他治疗选择已 出现为高压氧，和通过生物还原作用的增敏剂[5]。
[000引在此实例中，生物还原剂如硝基咪挫的家族，被缺氧性肿瘤细胞通过胞内代谢物 所还原，导致形成细胞内反应的阴离子自由基。
[0009] 在运种"无家疗法化omeless therapeutic)"W前，动脉内给予细胞毒性剂的新方 法（放射疗法=锭福射，化学疗法=多柔比星W及一些化学同源物）已很大地改善了预后
[6]。
[0010] 原位癌症疗法是在超出全身疗法的复发和转移中、W及出于设及到抗性或超过对 于在W往的治疗中使用的抗有丝分裂药的耐受剂量的原因所选择的解决方案。
[0011] 提出通过动脉内造影给予的原位放射疗法用于治疗相对于它们的缺氧状态抗性 较大的转移灶。但到目前为止，运种技术使用非扩散性的、通常形成自吸附的锭-90的微球。
[0012] 在缺少肿瘤内扩散和所使用的产品的非特异性时，运种治疗方法仅基于电离福射 的物理路径，因而在存在较大肿瘤的情况下具有非常有限的效力。
[0013] 因此，非常需要开发可用于治疗癌症的新化合物，尤其是，可能有助于改善目前被 认为是治标的(P a 11 i a t i V e)运些患者的预后的化合物。
【附图说明】
[0014]图1示出典型的树枝状聚合物结构，其拥有具有=个官能团的核屯、。
[001引图2示出表，其汇集实施例5的生物学分布结果的统计汇总，其中注射剂量/器 官（％注射剂量/器官= l00%x(由器官/初始注射的总剂量固定的剂量)）为单位。
[0016]图3示出表，其汇集实施例5的生物学分布结果的统计汇总，其中注射剂量/g 器官（％注射剂量/g器官=[100%x(由器官/初始注射的总剂量固定的剂量）]/器官重量） 为单位。
[0017]图4和图5W图形形式分别描绘图巧P图3的结果。
[0018] 图6示出在动脉内给予产品W后在大鼠中的闪烁法图片，并且在给予W后几个小 时处死动物。在肝叶（在照片上非常强烈的点）处进行注射。采集和分离器官并通过伽玛相 机加W分析。此照片验证了本发明的树枝状聚合物结合物的祀向治疗的概念:确实，给予的 原位产物在很大程度上仍然保留在其活性部位(在几个小时W后可忽略组织生物学分布）。
[0019] 图7示出配制和给予根据本发明的树枝状聚合物结合物的方法的一般方案。
[0020] 定义
[0021 ]为了便于本发明的理解，下文定义一些术语和短语：
[0022] 如在本文中所使用的，术语"受试者"是指任何动物(例如，哺乳动物），包括但不限 于人类、非人灵长类、晒齿动物等，其是特定治疗的受体。通常，术语"受试者"和"患者"在本 文中可互换使用（在提及人受试者时）。如在本文中所使用的，术语"受试者"可W包括疑似 患有癌症的受试者、诊断患有癌症的受试者和/或具有患上癌症的风险的受试者。
[0023] 如在本文中所使用的，术语"疑似患有癌症的受试者"是指呈现一种或多种指示癌 症的症状(例如，明显的肿块（lump)或团块(mass))或被筛查出癌症(例如，在常规体检中） 的受试者。疑似患有癌症的受试者还可W具有一种或多种危险因素。疑似患有癌症的受试 者通常没有测试过癌症。然而，"疑似患有癌症的受试者"包括运样的个体，基已经收到初步 诊断（例如，CT扫描，其显示团块）但对其还没有进行确证试验（例如，活检和/或组织学检 查)或对其的癌症的阶段是未知的。该术语进一步包括曾经患有癌症的人(例如，在缓解中 的个体）。"疑似患有癌症的受试者"有时被诊断患有癌症W及有时被发现没有患上癌症。
[0024] 如在本文中所使用的，术语"诊断患有癌症的受试者"是指已经过测试并发现有癌 细胞的受试者。可W利用任何适宜的方法来诊断癌症，方法包括但不限于活检、X射线、血液 测试和本发明的诊断方法。
[0025] 如在本文中所使用的，术语"具有患上癌症的风险的受试者"是指具有一种或多种 发展特定癌症的危险因素的受试者。危险因素包括但不限于性别、年龄、遗传素质、环境暴 露，W及癌症的先前事件、预先存在的非癌症疾病和生活方式。
[0026] 如在本文中所使用的，术语"癌症的阶段"是指癌症的进展水平的定性或定量评 估。用来确定癌症的阶段的标准包括但不限于肿瘤的尺寸、肿瘤是否已经扩散到身体的其 他部位W及癌症已经扩散的位置(例如，在身体的相同器官或区域内或到另一个器官）。
[0027] 如在本文中所使用的，术语"改善预后"是指减轻癌症的存在(例如，如通过本发明 的诊断方法所确定的）对受试者的未来健康(例如，预期的发病率或死亡率、患癌症的可能 性和转移的风险）的影响。如在本文中所使用的，术语"非人动物"是指所有非人动物，包括 但不限于脊椎动物如晒齿动物、非人灵长类、羊类、牛类、反当动物、兔类动物、猪类、山羊、 马科动物、犬科动物、猫科动物、鸟纲动物(ay es)等。
[0028] 如在本文中所使用的，术语"治疗"一般意味着，至少借助于疾病的初步诊断，本发 明的化合物可W用于人类或动物。在某些实施方式中，本发明的化合物将延迟或减缓疾病 的进展，从而给予个体较长的寿命。
[0029] 如在本文中所使用的，术语"预防"意味着，当给予患者时，本发明的化合物是有用 的，该患者在给予时尚未诊断为可能患有疾病，但其通常预期会发展疾病或是处于患上疾 病的增加的风险中。本发明的化合物将减缓疾病症状的发展、延缓疾病的发作，或根本上防 止个体发展疾病。预防还包括将本发明的化合物给予由于家族遗传病史、遗传或染色体异 常和/或由于一种或多种疾病的生物标志物的存在而认被为是易患疾病的那些个体。
【具体实施方式】
[0030] 如上所述，近年来对于可用于治疗癌症的新化合物的开发方面已经有越来越大的 兴趣，尤其是，可能有助于改善目前被认为是治标的运些患者的预后的化合物。
[0031] 在运种背景下，在本文中提供了树枝状聚合物作为祀向缺氧细胞的超载体发射体 (supravector emitters)的用途。例如，它们可W是在鍊-186的络合物中的超载体发射体。
[0032] 在一个有利方面，本发明结合了 W下：
[0033] ?第一，球形超分子树枝状聚合物载体，其直径适合于栓塞肿瘤间质（基质， stroma)的新血管形成。当栓塞肿瘤新血管形成时，放射性络合物在肿瘤的空间中自由扩散 并将优先地被缺氧细胞摄取;和
[0034] ?第二，与配体载体复合的0发射体过渡金属原子(例如，鍊-186)，其优先被缺氧 细胞摄取，引起寻求的放射毒性效应。
[0035] 本发明的其他有利方面包括：
[0036] -提供用于治疗原发性和/或转移性肿瘤的新的原位祀向抗癌剂；
[0037] -提供用于诊断原发性和/或转移性肿瘤的新的放射性药剂；W及
[0038] -提供用于剖析不回应传统的抗癌疗法的低毒性化ypotoxic)肿瘤的新的诊断剂。
[0039] 有利地，本文描述的本发明的方法特别适用于相对于耐常规治疗方法的转移灶或 不能手术或无反应的肿瘤的全身疗法。
[0040] 1)本发明的树枝状聚合物结合物的一般描述
[0041] 发现，与基于树枝状聚合物的超载体形成的、与过渡金属/硝基咪挫配体络合物组 合的药物化合物可W证明对于祀向耐常规治疗的低毒肿瘤的原位抗癌疗法是有用的。
[0042] 有利地，本发明的化合物包括树枝状聚合物结合物(A)，包含G2至GlO聚赖氨酸树 枝状聚合物，其与具有W下结构的硝基咪挫配体/金属络合物结合：
[0043；
[0044] 其中
[0045] n是0至8的整数，包括端点；
[0046] R1、R2和R3独立地表示H、N02或甲基；
[0047] 1?'巧邮'2独立地表示山0山甲基、乙基或丙基；
[004引 XI、X2和X3独立地表示0:vCO或出0,如由金属M的化学价所允许的；W及
[0049] M表示选自￥、2'、抓、1〇、1'(3、咖、化、？(1、4旨、〔(1、1?6、111或511的过渡金属的放射性或非 放射性(冷)同位素。
[0050] 有利地，本发明的化合物包括树枝状聚合物结合物(B)，包含G2至GlO环S憐腊核 屯、苯氧基甲基（甲基亚阱基)树枝状聚合物，其与配体/金属络合物结合，该配体/金属络合 物与四配位基2-氨基环戊締一二硫代簇酸醋配体（与咪挫基和金属结合)组合，配体/金属 络合物具有W下结构：
[0化1 ]
[0化2] 其中
[0053] M表示选自￥、2'、抓、1〇、1'(3、咖、化、？(1、4旨、〔(1、1?6、111或511的过渡金属的放射性或非 放射性(冷)同位素；W及
[0化4] R表示直链或支链C1-6烷基或C1-6杂烷基部分，优选-Me、-C出陆或-CH(Ofe)OEtD
[0055] 应当理解的是，所有W下实施方式可能适用于如上述所定义的树枝状聚合物结合 物(A)和/或(B)。有利地，在树枝状聚合物和配体/金属络合物之间的结合可W是非共价的， W确保在给予根据本发明的树枝状聚合物结合物W后，在受试者中和/或在细胞中释放配 体/金属络合物。
[0056] 有利地，作为原位释放载体而原位沉积的本发明的树枝状聚合物结合物可W包括 聚赖氨酸或环=憐腊核屯、苯氧基甲基（甲基亚阱基)树枝状聚合物(D)，其负载有过渡金属/ 咪挫配体络合物化-M络合物KL-M络合物包含两个不同的部分：（i)咪挫基、硝基咪挫基或 甲基-咪挫基部分，和（ii)过渡金属馨合位点（例如，二(2-皮考基)-胺或四配位基2-氨基环 戊締-二硫代簇酸醋）。因此，部分（i)祀向低毒细胞(耐常规治疗），W及部分（ii)经由馨合 的过渡金属呈现药理学/治疗活性(放射性或烷基化活性）。有利地，树枝状聚合物结合物 (A)组合负载有过渡金属/咪挫配体络合物化-M络合物)的聚赖氨酸树枝状聚合物(D)，该络 合物包含Q)咪挫基、硝基咪挫基或甲基-咪挫基部分，和Qi)二(2-皮考基)-胺过渡金属馨 合位点。有利地，树枝状聚合物结合物(B)组合负载有过渡金属/咪挫配体络合物化-M络合 物）的环=憐腊核屯、苯氧基甲基（甲基亚阱基)树枝状聚合物(D)，该络合物包含（i)咪挫基、 硝基咪挫基或甲基-咪挫基(优选咪挫基)部分，和（ii)2-氨基环戊締-二硫代簇酸醋过渡金 属馨合位点。
[0057] 有利地，当M可W是放射性同位素时，本发明的树枝状聚合物结合物可W用于成像 和放射疗法应用。在示例性的有利的实施方式中，M可W表示""Tc或issWSRe。
[0058] 有利地，当M可W是非放射性(冷）同位素时，本发明的树枝状聚合物结合物可W用 于化学疗法应用。
[0059] 如本文中所提到的，树枝状聚合物是合成聚合物，其特征在于自中屯、核发出的重 复的链分枝，引起分形状拓扑结构和大量的链终点(ending)。树枝状聚合物由核屯、、一层或 多层(或代)的支化单体和一层端基(其加倍每"代"并终止各种链)组成。
[0060] 代，G，是指在树枝状聚合物中的层数，并且Z是在树枝状聚合物的外表面上的端基 的数目。如在本文中所使用的，核屯、是代O(GO)。直接连接到核屯、的单体可被视为第一代单 体(Gl);连接到Gl单体的单体是第二代单体(G2)，等等。在此编号系统中，Z = 2W+i>。因此，对 于其中核屯、具有2个官能团的树枝状聚合物，对于60,2 = 2(2^+11)，对于Gl，Z = 4(2U+i>，等 等。
[0061] 有利地，树枝状聚合物具有至少2的代值，其中核屯、被指定为第零代。例如，树枝状 聚合物可W具有2、3、4、5、6、7、8、9或10的代值。有利地，树枝状聚合物可^具有2、3、4、5、6、 7;优选3、4、5;最优选5的代值。
[0062] 示例性树枝状聚合物包括聚k赖氨酸(P化）的树枝状聚合形式。它们可W有利地 用于树枝状聚合物结合物(A)。
[0063] 其他示例性树枝状聚合物包括环=憐腊核屯、苯氧基甲基（甲基亚阱基)树枝状聚 合物。它们可W有利地用于树枝状聚合物结合物(B)。
[0064] 随着越来越多的代，树枝状聚合物发展经过连续的分子形状:范围从开放的、扩展 的结构到楠球体、到封闭的球形球体。因为末端的数目随着代数呈指数增长，而表面积呈二 次幕地增加，所W在高代下分支的空间拥挤导致拥挤的表面;在约G5(Z = 64) W后，存在末 端的可达性的降低W及因此导致的它们的反应性的降低。较大的树枝状聚合物的高表面积 和相对较低的内部密度支持具有范围为5至15埃的直径的空腔，其可W连接于连接到表面 的通道。
[0065] 例如，可W如下表示根据本发明的树枝状聚合物：
[0066]
[0067] 其中
[0068] (a)A表示多价k的树枝状聚合物的核屯、，其中：
[0069] -k表示树突(den化on)的数目并且优选是3;
[0070] -A表示具有W下结构的核屯、合成子：
[0071]
[0072] (b)Mi表示代i的单体，其中：
[0073] -i是2至g的整数，g是树枝状聚合物的代数；
[0074] -当i = 0时，Mi表示0，并且末端分支BT则直接结合到核屯、合成子A;
[0075] -当 i〉0时，Mi 表示：
[0076]
[0077] 其中符号*表示单体Mi与下一代的单体的连接点；
[0078] (C)BT表示末端分支，并且t表示末端部分的数目，其中：
[00巧]-t是1至3的整数，优选地t是2或3;
[0080] -BT的每次出现独立地表示氨原子、簇基部分(COOH)、簇酸醋(COO-R)、径基(OH); 琉基（SH)或硫径酸醋(琉醋，thiol ester)部分(S-R)，其中R的每次出现独立地表示C1-C6 烷基或C6芳基。
[0081] 代g可W为2至10。在某些有利的实施方式中，g可W是2、3、4或5;优选地g可W是2 或3;最优选地g可W是2。
[0082] 有利地，在树枝状聚合物结合物中，所述结合包括离子键、金属键、氨键或范德华 键。
[0083] 有利地，在树枝状聚合物结合物中，树枝状聚合物可W具有W下结构：
[0084]
[0085] 有利地，在树枝状聚合物结合物中，硝基咪挫配体/金属络合物具有W下结构：
[0086]
[0087] 其中M表示选自￥、2'、抓、]?〇、1'(3、咖、化、？(1、4旨、〔(1、1?6、111或511的过渡金属的放射性 或非放射性(冷)同位素。
[0088] 有利地，在树枝状聚合物结合物中，硝基咪挫配体/金属络合物具有W下结构：
[0089]
[0090] 其中M表示选自￥、2'、抓、]?〇、1'(3、咖、化、？(1、4旨、〔(1、1?6、111或511的过渡金属的非放射 性(冷)同位素。有利地，所产生的树枝状聚合物结合物可W用于化学疗法应用。
[0091] 有利地，在树枝状聚合物结合物中，硝基咪挫配体/金属络合物具有W下结构：
[0092]
[0093] 其中M表示""Tc或isWssRe。有利地，所产生的树枝状聚合物结合物可W用于放射 疗法应用。
[0094] 根据权利要求1或2所述的树枝状聚合物结合物，其中结合物具有W下结构：
[0095
[0096] 其中 M表"Tc 或 I86Re。
[0097] -些前述化合物可W包含一个或多个不对称中屯、，因而可W W各种异构体形式存 在，例如，立体异构体和/或非对映异构体。因而，本发明的化合物W及其药物组合物可W处 于单一的对映异构体、非对映异构体或几何异构体的形式，或可W处于立体异构体的混合 物的形式。在某些实施方式中，本发明的化合物是对映纯的化合物。在某些其他实施方式 中，提供了立体异构体或非对映异构体的混合物。
[009引2)合成概述：
[0099]从业者具有用来借鉴的树枝状聚合物化学的完善的文献，与其中包含的信息组 合，用于对合成策略、保护基团、W及可用于本发明的树枝状聚合物结合物的合成的其他材 料和方法进行指导。
[0…0] 一般合成方法;
[0101] 配体合成
[0102] 可W通过在氯烷基咪挫（1)中添加胺官能来获得氯-烷基-硝基咪挫化合物(2)。可 W通过用叠氮基取代氯原子来获得叠氮基-烷基-硝基咪挫化合物(3)。可W在100°C、在硫 酸铜和抗坏血酸钢的存在下，通过在溶剂混合物二嗯烧/水中溶解烘丙基二(2-皮考基)胺 (4)和叠氮基-烷基-硝基咪挫化合物(3)来获得最终化合物硝基咪挫-烷基-1,2,3-=挫-甲 基-二(2-皮考基)胺(5)，如W下方案IA所示。
[0…引 方案IA
[0104]
[0105] 四配位基甲基2-氨基环戊締-I-二硫代簇酸醋咪挫基配体的示例性合成示于W下 方案IB:
[0…6] 方案IB
[0107]
[010引其中R表示直链或支链C1-6烷基或C1-6杂烷基部分，优选-Me、-C也Ph或-CH(C也） OEt。
[0…9] 树枝状聚合物
[0110]适合于实施本发明的聚赖氨酸树枝状聚合物是市售的（例如，GlO聚赖氨酸树枝状 聚合物可购自公司Colcom,Montpellier,Rrance;或购自Sigma-Al化ich)。
[0111] 适合于实施本发明的环=憐腊核屯、苯氧基甲基（甲基亚阱基)树枝状聚合物也是 市售的（例如，环S憐腊苯氧基甲基（甲基亚阱基）树枝状聚合物代1.5可购自Sigma- Aldrich)。
[0112] 此外，本文引用的各种专利文献和其他参考文献提供了关于制备类似于本文描述 的本发明的树枝状聚合物结合物的化合物或相关中间体的有用的背景信息。某些引用的专 利文件还含有关于可能感兴趣的上述树枝状聚合物结合物的配方、应用和给予的信息。
[0113] 许多美国专利描述了用于产生树枝状聚合物的方法和组合物。因此，树枝状聚合 物化学是广泛公知的，如由W下引用的各种专利文献所证明的，其可适合于用来制备聚赖 氨酸树枝状聚合物的合成策略，或至少提供用来制备聚赖氨酸树枝状聚合物的合成策略的 一些指导。
[0114] 下文给出一些运些专利的实例W提供在本发明中可W有用的一些树枝状聚合物 组合物的描述，然而，应当理解的是，运些仅仅是说明性的实例并且在本发明中可W使用许 多其他类似的树枝状聚合物组合物。
[0115] 美国专利号4,507,466、美国专利号4,558，120、美国专利号4,568,737和美国专利 号4,587,329各自描述了用于制备终端密度大于常规星形聚合物的致密星形聚合物的方 法。与常规星形聚合物，即，第=代致密星形聚合物相比，运些聚合物具有更大/更均匀的反 应性。运些专利进一步描述了酷氨基胺树枝状聚合物的特性和树枝状聚合物的3维分子直 径。
[0116] 美国专利号4,631,337描述了水解稳定的聚合物。美国专利号4,694,064描述了棒 状树枝状聚合物。美国专利号4,713,975描述了致密星形聚合物W及它们应用于表征病毒、 细菌和蛋白质(包括酶)的表面。在美国专利号4,737,550中描述了桥接的致密星形聚合物。 美国专利号4,857,599和美国专利号4,871，779描述了可用作离子交换树脂、馨合树脂的在 固定核屯、上的致密星形聚合物W及制备上述聚合物的方法。
[0117] 美国专利号5,338,532设及与至少一个单位的携带的农业、药物或其他材料缔合 的星放射状(星爆形状，Starburst)结合物。此专利描述了使用树枝状聚合物W提供方式来 递送高浓度的携带材料/单位聚合物(受控递送、祀向递送)和/或多种物质如例如，抗生素 药物、一般和特殊毒素、金属离子、放射性核素、信号发生剂、抗体、白细胞介素、激素、干扰 素、病毒、病毒片段、杀虫剂和抗微生物剂。
[0118] 美国专利号6,471，968描述了树枝状聚合物络合物，其包含共价连接的第一和第 二树枝状聚合物，其中第一树枝状聚合物包含第一剂而第二树枝状聚合物包含第二剂，其 中第一树枝状聚合物不同于第二树枝状聚合物，并且其中第一剂不同于第二剂。
[0119] 其他有用的树枝状聚合物型组合物描述于美国专利号5,387,617、美国专利号5， 393，797和美国专利号5，393，795，其中通过用能够提供疏水性外壳的疏水基团来封端W改 性致密星形聚合物。美国专利号5,527,524披露了在抗体结合物中氨基封端的树枝状聚合 物的应用。
[0120] 在美国专利号5,560,929中描述了树枝状聚合物作为金属离子载体的用途。美国 专利号5，773，527披露了具有梳放射状(梳爆形状，comb-burst)构造的非交联的聚支化聚 合物W及其制备方法。美国专利号5,631，329描述了用来产生高分子量的聚支化聚合物的 方法:形成第一组的支化聚合物保护免于分支;接枝于核屯、;脱保护第一组支化聚合物，然 后形成第二组的保护免于分支的支化聚合物并接枝于具有第一组的支化聚合物的核屯、等。
[0121] 读者可W从上述引用的专利文献引申来改变合成方法W制备根据本发明的树枝 状聚合物结合物。
[0122] -般来说，在树枝状聚合物化学中，在连续的代中通过发散型（如果开始于核屯、） 或收敛型（如果开始自一个或几个代分支)的不同方法，W-个或几个步骤可W获得不同的 代层。可W分离树枝状聚合物每代，即具有确定层数。不同的代层（内部或外部的），如核屯、， 可W是有机的、无机的，或由有机和无机要素组成。
[0123] 可W严格控制运些树枝状聚合物的结构。例如，为了构建树枝状聚合物，可W将一 系列的代分支连接到核屯、并可W形成在外周包括同样的外部官能的第一代层(代1)，然后， 通过重复用于构建第一代的一系列反应，来连接第二代层(代2)，然后第=代层、第四代层 等。
[0124] 最后代层(代g)由代g的链组成。它包含分布在外周的多个相同的化学官能，每个 官能形成或延伸最后层的所述代分支之一的自由端。在代g的运些链的末端处，可W例如用 PEG链来接枝中间链，W调节树枝状聚合物结合物的药代动力学曲线。
[0125] 可W通过许多技术来表征树枝状聚合物，运些技术包括但不限于电喷雾-离子化 质谱、I3C核磁共振波谱、Ih核磁共振波谱、高效液相色谱、具有多角度激光散射的尺寸排阻 色谱、紫外分光光度法、毛细管电泳和凝胶电泳。运些测试确保聚合物群体的均匀性并且对 于监测用于应用的树枝状聚合物制造W及在体内使用中的质量控制是重要的。
[0126] 此外，从业者被引导到在此文件中提供的具体指导和实例，其相关于各种示例性 化合物W及其中间体。
[0127] 树枝状聚合物-配体化合物与过渡金属M的络合作用
[0128] 在配体络合作用位点处的金属络合作用旨在激活树枝状聚合物-配体化合物。例 如，可W通过用水合的幾基金属化的化合物M(C0)3化2〇)3溫育树枝状聚合物-配体化合物来 实现运种激活，如示于方案3。
[0129] 方案3.通过配体-金属络合物的形成的配体活化
[0130] 络合物
[01311
[0132] xi=X2=X3 = C0、肥 0
[0133] M =过渡金属
[0134] Y(锭）值(错）；Nb(妮）;Mo(钢）；Te(得）；Ru(钉）；Rh(锭）；
[0135] Pd(钮）；Ag(银）；Cd(儒）；Re(鍊）；In(铜）；Sn(锡）
[0136] W下示出用于在金属M和四配位基甲基2-氨基环戊締-1-二硫代簇酸醋咪挫基配 体之间形成络合物的示例性合成：
[0137]
[0138] 类似地，为了用在洗脱为高鍊酸盐（Re〇4)或高得酸盐（Tc〇4)形式的发生子 (generator) W后获得的鍊(用于治疗)或得(用于诊断）来激活树枝状聚合物-配体化合物， 可W使用其他还原剂W及尤其是氯化锡（SnCb)或麟（Technetium-99m and rhenium complexes with new polydentates ligands derived from dithiocarboxylic acid. Improvement of oxo and nitrido-technetium radiopharmaceuticals for regional blood flow evaluation;H.BELHADJ-TAHA民，PhD Thesis，University Grenoble I;1996)O
[0139] 3)药物组合物
[0140] 如上文所讨论的，本发明提供了树枝状聚合物结合物，其在癌症的治疗或诊断中 可用作药剂。所有W下实施方式适用于树枝状聚合物结合物(A)和或(B)(如在本文所定义 的)。
[0141] 因此，在本发明的另一个方面，提供了药用组合物，其中运些组合物包含本文描述 的任何树枝状聚合物结合物，W及可选地包含药用载体、佐剂或媒介物(vehicle)。在某些 实施方式中，运些组合物可选地进一步包含一种或多种另外的治疗剂。
[0142] 有利地，根据本发明的组合物包含树枝状聚合物结合物，其中M是如上述所定义的 放射性同位素，如I86^8Re，并且组合物是放射性药物组合物。
[0143] 有利地，根据本发明的组合物包含树枝状聚合物结合物，其中M是如上述所定义的 放射性同位素，如""Tc并且组合物是诊断性组合物。
[0144] 在有利的实施方式中，连同适当的盐和缓冲剂一起来使用树枝状聚合物结合物W 使得能够W稳定的方式来递送组合物，从而允许被祀细胞摄取。当将树枝状聚合物结合物 引入患者时，还可W采用缓冲剂。水性组合物包含分散在药用载体或水介质中的相对于细 胞的有效量的树枝状聚合物结合物。运样的组合物还被称为接种物。短语"药学上或药理学 上可接受的"是指运样的分子实体和组合物，当给予动物或人时，其并不产生不利的、过敏 的或其他不良反应。如在本文中所使用的，"药用载体"包括任何和所有溶剂、分散介质、涂 料、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。除非任何常规介质或剂与本发明的载体或 细胞不相容，则设想其在治疗性组合物中的应用。还可W将辅助活性成分加入组合物。
[0145] 有利地，本发明的组合物可W包括经典的药物制剂。可W经由任何常见的途径来 给予根据本发明的运些组合物，只要经由上述途径，祀组织是可达到的。运包括但不限于皮 内、腹腔内或静脉内注射。还可W胃肠道外或腹腔内或肿瘤内给予树枝状聚合物结合物。
[0146] 可W在与表面活性剂如径丙基纤维素适当混合的水中制备作为游离碱或药用盐 的树枝状聚合物结合物的溶液。还可W在甘油、液体聚乙二醇和它们的混合物中W及在油 中制备分散体。在储存和使用的普通条件下，运些制剂可W含有防腐剂W防止微生物生长。
[0147] 适用于注射用的药物剂型包括无菌水溶液或分散体和用于即时制备无菌可注射 溶液或分散体的无菌粉末。载体可W是溶剂或分散介质，包括，例如，水、乙醇、多元醇（例 如，甘油、丙二醇和液体聚乙二醇等）、它们的适宜混合物、W及植物油。可W维持适当的流 动性，例如，通过使用包衣，如卵憐脂，在分散体的情况下通过保持所需的颗粒尺寸和通过 使用表面活性剂。可W通过各种抗菌剂和抗真菌剂，例如，对径基苯甲酸醋类、氯下醇、苯 酪、山梨酸、硫柳隶等获得预防微生物的作用。在许多情况下，可W优选地包括等渗剂，例 如，糖类或氯化钢。可W通过在组合物中使用延迟吸收剂，例如，单硬脂酸侣和明胶来获得 可注射组合物的延长的吸收。
[0148] 根据需要，可W通过在含有W上列举的其他成分的适当溶剂中加入所需量的树枝 状聚合物结合物，接着过滤灭菌，来制备无菌可注射溶液。通常，可W通过将各种灭菌的活 性成分加入包含基本分散介质和来自W上列举的所需其他成分的无菌媒介物来制备分散 体。在用于制备无菌可注射溶液的无菌粉末的情况下，制备的优选方法包括真空干燥和冷 冻干燥技术，其从自其先前无菌过滤的溶液产生活性成分加上任何另外的所需成分的粉 O
[0149] 在配制W后，可W W与剂型相容的方式并W治疗有效的量来给予树枝状聚合物结 合物。可W W各种剂型如可注射溶液来容易地给予制剂。对于W水溶液形式的胃肠道外给 予，例如，如果需要的话，可W适当地缓冲上述溶液，然后首先使得液体稀释剂能够与足量 的盐水或葡萄糖等渗。运些特定的水溶液尤其可W适用于静脉内和腹腔内给予。例如，可W 将一个剂量溶解于Iml等渗化Cl溶液并加入1000 ml皮下输液或在建议的输注部位处注射 (见例如，"Remington's Pharmaceutical Sciences"15th Edition,第1035-1038和1570- 1580页）。
[0150] 如上文所述，本发明的药用组合物另外包含药用载体、佐剂或载体，如在本文中所 使用的，其包括任何和所有溶剂、稀释剂或其他液体载剂、分散体或悬浮助剂、表面活性剂、 等渗剂、防腐剂等，如适合于所期望的特定剂型。Remington'S Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition,E.W.Ma;rtin(Mack Publishing Co.,Easton,Pa., 1980)披露了在配制 药用组合物时所使用的各种载体W及用于其制备的已知技术。除非任何常规载体介质与本 发明的化合物不相容，如通过产生任何不良的生物效应或W有害的方式相互作用与药用组 合物的任何其他成分，则设想它的使用是在本发明的范围内。
[0151] 树枝状聚合物结合物和药用组合物的应用
[0152] 本发明的树枝状聚合物结合物可W应用于各种癌症的检测和治疗。因此，在一个 方面，本发明提供了如本文所描述的树枝状聚合物结合物用作在癌症的治疗或诊断中的药 物。因此，提供了如本文所描述的树枝状聚合物结合物或其药物组合物用作在癌症的治疗 或诊断中的药物。因此，提供了用于治疗或用于诊断癌症的方法，包括将有效量的根据本发 明的树枝状聚合物结合物或其药物组合物给予需要其的受试者。
[0153] 在又一个方面，提供了用于治疗癌症或减轻癌症的严重性的方法，包括将有效量 的树枝状聚合物结合物或包含树枝状聚合物结合物的药用组合物给予需要其的受试者。因 此，提供了如本文所描述的树枝状聚合物结合物或其药物组合物用作用于治疗癌症或减轻 癌症的严重性的药物。在本发明的某些实施方式中，树枝状聚合物结合物或药用组合物的" 有效量"是有效用于治疗癌症或减轻癌症的严重性的量。根据本发明的方法，可W利用有效 用于治疗癌症或减轻癌症的严重性的任何量和任何给予途径来给予树枝状聚合物结合物 和组合物。所需的确切量会因受试者不同而有所不同，其取决于受试者的物种、年龄和一般 状况，感染的严重性，特定药剂、其给予模式等。优选W易于给予并实现剂量的均匀性的剂 量单位形式来配制本发明的化合物。如在本文中所使用的，表达"剂量单位形式"是指适合 于待治疗的患者的剂的物理上独立的单位。然而，应当理解的是，本发明的树枝状聚合物结 合物和组合物的每日总使用量将由主治医师在合理的医学判断范围内加W决定。用于任何 特定患者或生物体的具体有效剂量水平将取决于多种因素，包括待治疗的癌症和癌症严重 性;采用的具体树枝状聚合物结合物的活性;采用的具体组合物;患者的年龄、体重、一般健 康状况、性别和饮食;采用的具体树枝状聚合物结合物的给予时间、给予途径和排泄速率； 治疗的持续时间；与采用的具体树枝状聚合物结合物组合或同时使用的药物；W及在医学 领域中公知的类似因素。如在本文中所使用的，术语"患者"是指动物，优选哺乳动物，W及 最优选人。
[0154] 有利地，M可W是放射性同位素，如Re, W及树枝状聚合物结合物组合物是放射性 药物组合物。因此，还提供了治疗癌症的方法，包括将治疗有效量的根据本发明的放射性药 物组合物给予患有或易患所述癌症的受试者，其中M可W是如在本文所定义的放射性同位 素，如isWssRe。例如，所述癌症可W选自由W下组成的组:淋己瘤、霍奇金氏病、非霍奇金氏 病、多发性骨髓瘤、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、重链病、实体瘤、肉瘤和癌、纤维肉瘤、粘 液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋己管肉瘤、淋己 管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤因氏瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、膜腺癌、脑癌、乳 癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺瘤、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状 腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、肝瘤、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞瘤、胚胎性 癌、维尔姆斯氏瘤、子宫颈癌、子宫癌、睾丸瘤、肺癌、小细胞肺癌、膀脫癌、上皮癌、胶质瘤、 星形细胞瘤、髓母细胞瘤、烦咽管瘤、脑室膜瘤、松果体瘤、成血管细胞瘤、听神经瘤、少突神 经胶质瘤、脑脊膜瘤、黑素瘤和成神经细胞瘤视网膜母细胞瘤W及所有实体瘤。
[0155] 有利地，给予的步骤包括动脉内（通过介入放射学）、瘤内或瘤周和实现治疗剂(树 枝状聚合物结合物)的原位沉积的所有种类的给予来注射组合物。有利地，给予治疗有效量 的组合物的步骤包括给予对应于5,4 l(ri2摩尔金属/kg的受试者的体重的约37MBq/kg的 I88Re和对应于9,96 IO-U摩尔金属Ag的受试者的体重的约68MBq/kg的I88Re之间的剂量。
[0156] 在有利的实施方式中，提供了在受试者中改变肿瘤生长的方法，包括:a)提供包含 根据本发明的树枝状聚合物结合物的组合物W及b)在使得所述肿瘤生长被改变的条件下 将治疗有效量的所述组合物给予需要其的受试者。例如，所述改变包括在所述受试者中抑 制肿瘤生长。在又一个实施例中，所述改变包括在所述受试者中减小所述肿瘤的尺寸。肿瘤 可W是原发性或转移性肿瘤。因此，提供了根据本发明的树枝状聚合物结合物或其药物组 合物，用作在受试者中改变肿瘤生长的药物。
[0157] 在另一个方面，提供了用于淋己系统成像的方法，包括:给予受试者图像增强量的 根据本发明的树枝状聚合物结合物，其中金属M是""Tc; W及在给予树枝状聚合物结合物W 后检测至少一部分的淋己系统的图像信号强度的差异，其中图像信号强度的差异指示转移 性癌细胞的存在。有利地，该一部分的淋己系统可W包括淋己结。有利地，给予步骤可W包 括静脉内或淋己内注射组合物。有利地，给予图像增强量的根据本发明的树枝状聚合物结 合物的步骤包括给予对应于0.6 l(ri2摩尔金属Ag的受试者的体重的约10.5MBq/kg的""Tc 和对应于1.5 l(ri2摩尔金属Ag的受试者的体重的约26.3MBq/kg的""Tc的剂量。
[0158] 放射性同位素的剂量范围变化很大，并且取决于同位素的半衰期、发射的福射的 强度和类型、W及肿瘤细胞的摄取。技术人员被引导到"Remington' S Pharmaceutical Sciences"15th Edition ,chapter 33,尤其是624-652页。取决于待治疗受试者的病症，必 然会发生剂量的一些变化。在任何情况下，负责给予的人将确定用于单独的受试者的合适 剂量。此外，对于人类给予，制剂应符合如监管管理部口（例如，美国生物制品标准FDA办公 室)所要求的无菌、致热性、一般安全性和纯度标准。
[0159] 在本发明的有利的实施方式中，可W利用树枝状聚合物结合物到癌症患者的原位 递送来最大化递送剂的疗效。类似地，可W将化疗或放射疗法引导到受试者身体的特定的、 受到影响的区域。可替代地，在某些情况下，例如，在已发生广泛转移的情况下，树枝状聚合 物结合物组合物和/或药剂的全身递送可能是合适的。
[0160] 本发明的吸引人的特点在于，通过医疗器械，可W将治疗性组合物递送到患者的 局部部位。适用于本发明的医疗器械包括用于局部递送治疗剂的已知器械。运样的器械包 括但不限于：导管如注射导管、球囊导管、双球囊导管、微孔球囊导管、通道球囊导管、输注 导管、灌注导管等，它们，例如，涂布有治疗剂或通过其给予药剂;针注射装置如皮下注射针 和针注射导管;无针注射装置如喷射注射器;涂覆的支架、分支支架、血管移植物、支架移植 物等；W及涂覆的血管闭塞装置如线圈。
[0161] 示例性装置描述于美国专利号 5,935，114、5,908,413、5,792，105、5,693,014、5， 674，192、5,876,445、5,913,894、5,868,719、5,851，228、5,843,089、5,800,519、5,800， 508、5,800,391、5,354,308、5,755,722、5,733,303、5,866,561、5,857,998、5,843,003和5， 933,145,其全部内容W引用方式结合于本文。市售的并且可W在本申请中使用的示例性支 架包括RADIUS(SCIMED LIFE SYSTEMS，Inc.)、SYMPHONY(Boston Scientific Corporation)、Wallstent(Schneider Inc.)、PRECEDENT 11(Boston Scientific Coloration)和NIR(Medinol Inc.)。通过已知技术将运样的装置递送到和/或植入身体内 的目标位置。
[0162] 在设想临床应用的情况下，在本发明的一些实施方式中，W适合于预期应用的形 式将树枝状聚合物结合物制备为药物组合物的一部分。通常，运需要制备基本上无热原、W 及可能有害于人类或动物的其他杂质的组合物。然而，在本发明的一些实施方式中，利用一 种或多种本文描述的路径，可W给予直接的（Strai曲t)树枝状聚合物配方。
[0163] 有利地，通过动脉内（通过介入放射学）、瘤内或瘤周、静脉内或淋己内和所有种类 的实现治疗剂的原位沉积的给予来注射组合物，可W将本发明的药用组合物给予人类和其 他动物。
[0164] 依照已知技术并利用适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂，可W配制可注射制剂，例 如，无菌可注射水性或油性混悬剂。无菌可注射制剂还可W是在无毒胃肠道外可接受的稀 释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如，作为在1,3-下二醇中的溶液。在可 W采用的可接受的媒介物和溶剂中有水、林格氏液、U.S.P.和等渗氯化钢溶液。此外，无菌 的固定油通常用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可W采用任何溫和的固定油，包括合成的单 或二甘油醋。此外，在可注射物的制备中可W使用脂肪酸如油酸。
[0165] 可W灭菌注射用制剂，例如，通过经由细菌截留过滤器的过滤，或通过W无菌固体 组合物的形式加入灭菌剂，在使用前，可W将上述无菌固体组合物溶解或分散在无菌水或 其他无菌可注射介质中。
[01W 联合疗法
[0167] 还应当理解的是，可W在联合疗法中使用本发明的树枝状聚合物结合物和药用组 合物，即，可W在一种或多种其他所需治疗剂或医疗程序(手术，procedure)的同时、之前或 之后，给予树枝状聚合物结合物和药用组合物。在联合方案中采用的疗法(治疗剂或程序） 的具体组合将考虑到所需治疗剂和/或程序的相容性W及要实现的所期望的治疗效果。还 应当理解的是，采用的疗法可W实现对相同疾病的预期效果(例如，可W与用来治疗相同疾 病的另一种药剂的同时给予本发明的树枝状聚合物结合物），或它们可W实现不同的效果 (例如，任何不良影响的控制）。如在本文中所使用的，通常给予W治疗或预防特定疾病或病 症的另外的治疗剂被称为"适合于待治疗的疾病或病症"。
[0168] 例如，其他疗法、化疗剂或其他抗增生剂可W与本发明的树枝状聚合物结合物组 合来治疗增生性疾病和癌症。可W与本发明的抗癌剂组合使用的疗法或抗癌剂的实例包括 手术，放射疗法(仅W-些实例，T福射、中子束放射疗法、电子束放射疗法、质子疗法、近距 治疗和全身放射性同位素，仅举几例），内分泌疗法，生物反应调节剂(干扰素、白细胞介素 和肿瘤坏死因子(T F)，仅举几例），体溫过高和冷冻疗法，减弱任何不良影响的药剂(例如， 止吐剂），和其他批准的化疗药物，包括但不限于烧化剂药物(氮芥、苯下酸氮芥、环憐酷胺、 美法仑、异环憐酷胺），抗代谢物(氨甲噪岭），嚷岭括抗剂和喀晚括抗剂(6-琉基嚷岭、5-氣 尿喀晚、阿糖胞巧(切tarabile)、吉西他滨），纺键体毒素（长春花碱、长春新碱、长春瑞滨、 紫杉醇），鬼白毒素(依托泊巧、伊立替康、托泊替康）、抗生素（多柔比星、博来霉素、丝裂霉 素），亚硝基脈(卡莫司汀、洛莫司汀），无机离子(顺销、卡销），酶(天冬酷胺酶），和激素(他 莫昔芬、亮丙瑞林、氣他胺和甲地孕酬），Gleevec?(格列卫），亚德里亚霉素，地塞米松，和环 憐酷胺。对于更新的癌症疗法的更综合的讨论，见The Merck Manual ,Nineteenth Ed.2011，其全部内容W引用方式结合于本文。另见化tional Cancer Institute(CNI)网址 (WWW.nci.nih.gov)和化〇(1 and Drug Administration(抑A)网址，对于抑A批准的肿瘤药 物的清单(WWW? fd曰.gov/cder/c曰ncer/druglistframe-见附录）。
[0169] 在有利的实施方式中，根据本发明的树枝状聚合物可W与一种或多种抗癌剂结 么 n O
[0170] 可替代地或另外地，可W连同化疗剂或抗致癌性药剂一起共同给予包含树枝状聚 合物结合物的组合物。例如，化疗剂可W选自由W下组成的组:销络合物、维拉帕米、鬼白毒 素、卡销、丙卡己阱、氮芥、环憐酷胺、喜树碱、异环憐酷胺、美法仑、苯下酸氮芥、白消安、亚 硝基脈、亚德里亚霉素、更生霉素(dactinomycin)、柔红霉素、多柔比星、博来霉素、普卡霉 素(plicomycin)、丝裂霉素、博来霉素、依托泊巧、他莫昔芬、紫杉醇(pacli化xel)、紫杉酪 (taxo 1 )、反式销、5-氣尿喀晚、长春新碱、长春花碱和氨甲噪岭。
[0171] 治疗试剂盒
[0172] 在其他实施方式中，本发明设及用于方便和有效地实施按照本发明的方法的试剂 盒。一般而言，药物包或试剂盒包括填充有本发明的药物组合物的一种或多种成分的一个 或多个容器。运样的试剂盒特别适合于递送可注射剂型。运样的试剂盒优选包括若干单位 剂量，并且还可W包括卡，其具有W它们的预期使用的顺序而定向的剂量。如果需要的话， 可W提供记忆辅助工具，例如为数字、字母的形式或其他记号或借助于日历插页，其指定在 治疗时间表中可W给予剂量的日期。可选地伴随运样的容器，可W是具有由调控医药产品 的制造、使用或销售的政府机构规定的形式的通告，该通告反映了用于人给予的制造、使用 或销售的机构的认可。
[0173] 等同物
[0174] W下代表性的实施例旨在帮助说明本发明，而并不旨在，它们也不应被解释为，限 制本发明的范围。确实，依据此文件的全部内容，包括随后的实施例W及本文引用的科学和 专利文献的参考文献，对于本领域技术人员而言，除本文说明和描述的那些之外，本发明的 各种改进W及其许多进一步的实施方式将变得明显的。还应该理解的是，那些引用参考文 献的内容W引用方式结合于本文W帮助说明现有技术的状态。
[0175] W下实施例包含重要的附加信息、例证和指导，在它的各种实施方式W及其等同 物中其可适应于本发明的实践。
[0176] 实施例
[0177] 通过实施例，其说明一些方法，借此来制备或使用运些化合物，可W进一步了解本 发明的树枝状聚合物结合物和它们的制备。然而，将会理解的是，运些实施例并不限于本发 明。本发明的变化(现在已知的或进一步发展的)被认为属于如本文所描述的和下文所要求 的本发明的范围之内。
[0178] 实施例1-合成4-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2，3-S挫-甲基-二(2-皮考基)胺
[C
[C
[C
[0182]通常，在氯仿中、在亚硫酷氯的存在下，通过使4-硝基-IH-咪挫（1)和低聚甲醒反 应来获得1-(氯甲基)-4-硝基-IH-咪挫（2)。通过在50°C下在DMF中使1-(氯甲基)-4-硝基- IH-咪挫（2)和叠氮化钢反应来合成^(叠氮基甲基)-4-硝基-IH-咪挫（3)。在乙腊中、在碳 酸钟的存在下，二(2-皮考基)胺和烘丙基漠的反应W87%的产率产生为烘丙基二(2-皮考 基)胺(4)[和此化合物W及不同的芳基叠氮化物（苄基-、蔥基-或蔥基甲基叠氮化物）的点 击反应W26-60%的产率产生N，N'-二（2-化晚基甲基)-r-(4-S挫基甲基)氨基S脚架馨 合体系"，借助于异质铜的点击过程来束缚得-99m馨合剂和鍊络合物。评估新的放射性标记 的葡萄糖结合物的馨合性能和生物学分布。Erie Benoist,Yvon Coulais,Mehdi Almant, Jose Kovensky,Vincent Moreau , David Lesur,Marine Artigau, Claude Picarda, Chantal Galaup，Sebastien G.GOuin.Carbohydrate 民esearch,Volume 346,Issue 1,201 I,Pages 26-34,[7]和Eric Benoist et al.，"A Click procedure with heterogeneous copper to tether technetium-99m chelating agents and rhenium complexe.Evaluation of the chelating properties and biodistribution of the new radiolabelled Glucose conjugates"，Carbohydrate 民esearch,Volume 346, Issue l，3January 201 !,Pages 26-34][8]。在硫酸铜、抗坏血酸钢的存在下，在10(TC下，通过在 溶剂二曝焼/水的纔合物中溶解烘丙基3-二(2-皮考基)胺(4)和1-(叠氮基甲基)-4-硝基- IH-咪蜂(3)来获得4-硝基-IH-咪蜂-甲基-1，2,3-SP坐-甲基-二(2-皮考基)胺(5)。
[0183] 配体4-硝基-IH-咪蜂-甲基-1，2,3-SP坐-甲基-二(2-皮考基)胺(5)还可W购买自 HOLIS Technologies SA,Toulouse,France〇
[0184] 实施例2-树枝状聚合物
[018日]GlO和G5聚赖氨酸树枝状聚合物购买自公司Col com ,Cap Alpha ,Clapiers， Fr过打Ce O
[0186] 运些树枝状聚合物W它们在人类中的安全性而闻名(VivaGel?(S化7013 Gel):候 选树枝状聚合物-杀微生物剂，用于HIV和HSV感染的预防。Richard R叩P ,Susan L 民osenthal,Lawrence 民 Stanberry and Richard 民upp，International Journal of Nanomedicine 2007:2(4)561-566)。[9]
[0187] 尤其是，第五代树枝状聚合物的特征如下：分子量为172300gW及估计的直径为 16nm。已表明此第五代树枝状聚合物在血管内注射直接到lOOmg/L的浓度W后是安全的。 [H.BELHADJ-TAHAR et al.,"Etudes de Toxicocinetique et de biodistribution de dendrimeres de cinquieme generation",Semes Journees Canceropole Grand Sud Quest 10-12 octobre 2012,MontpellierLett,9(2007),pp.4999-5002].[10]
[0188] 实施例3-混合物树枝状聚合物-配体
[0189] Wl/1000的比例，使配体与树枝状聚合物混合，即，配体浓度是4.8毫摩尔/升 (4.8mM/L) W及树枝状聚合物浓度是4.9微摩尔/升(4，化M /L)。
[0190] 在室溫下，远离光源和湿气，在特别设计W达到运种效果的房间里存储测试项目。 在制备W后的2小时内使用溶解在无菌水中的产品。
[0191] 实施例4-与过渡金属的络合作用
[0192] 通过使33化1的l，725mM 1-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2,3-S挫-甲基-二(2-皮考基） 胺和7,03iiMG5树枝状聚合物的生理溶液与放射性幾基得(28.86mCi)反应并在60°C下加热 1小时来制备剂量为0. 〇87mCi AU (3.34MBq/uL)的树枝状聚合物结合物的溶液。
[0193] 相同于实施例5和6的实验协议
[0194] 物种:Wi S tar大鼠 Rj化n: Wi (无特定病原体）
[01巧]来源：Laboratoire JANVIER S.A.S,France。由供应商运送的动物伴有健康评估 (W设置驯化）
[0196] 数量和性别和体重:6只健康成年大鼠（雄性），平均体重为300g
[0197] 驯化:在测试开始W前的24小时期间
[0198] 体重:D0,在测试的相关步骤W前的那天，称重动物。
[0199] 计算平均体重并推导可接受的限度，动物的极端的个体体重不应该是在平均体重 的±20% W内。
[0200] ID:通过在皮毛（coat)上用难脱落的黑拉(black felt)标记来识别动物(雄性大 鼠编号1至6)。
[0201] 住处：在配有不诱钢盖的31cm x46cm xl9cm的聚丙締笼中安置最多达3只动物/ 笼。将笼放置在限制进入的房间中，除了在洗涂周期期间，维持在轻微的压力（IOmm最低水） 下，在溫度受控的气氛下(T = 22±2°C)和受控相对湿度(畑=50±20%)下并具有过滤的已 经通过示例的方式表示空气的交换化EP A筛选），每个小时10个循环。
[0202] 寝具，定期更新，包括无尘和丫射线灭菌的银末。
[0203] 人工照明提供12小时的日光和12小时的黑暗。
[0204] 食品：W颗粒形式A04-10来供给全价配合饲料
[0205] 饮料:将正常过滤水分布在配有不诱钢奶嘴的聚丙締瓶中，至少每六个月取水样 品并送去进行物理化学和细菌学分析。
[0206] 实施例5-在大鼠中静脉内和腹腔内给予《树枝状聚合物G5U-硝基-IH-咪挫-甲 基-1,2-=挫-甲基-二(2-皮考基)胺}》W后的急性毒性试验和生物学分布
[0207] 巧聯项目：
[0208] 树枝状聚合物G5 U-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2，3-S挫-甲基-二(2-皮考基)胺}
[0209] *测试总结：
[0210] 该研究的目的是，通过静脉内和腹腔内给予单一给予预定剂量的63,4316皮摩尔/ kg(33，17mCi/kg或1226MBq/kg)体重(对应于在8倍人等效剂量下的危险因素后，定性和 定量地评估用蒸馈水稀释的测试项目的毒性效应和出现的延迟。
[0211] 分两个阶段进行实验：
[0212] 第一步骤 脚引 3组雄性大鼠：
[0214]-组1("G5"):2只大鼠（1和2)，接受0.1ml的单独树枝状聚合物的标记溶液，一只通 过静脉内给予，另一只则通过腹腔内给予。
[0215]-组2("G5-HLS") : 2只大鼠（3和4)，接受0 . Iml的测试项目"G5树枝状聚合物U-硝 基-IH-咪挫-甲基-1，2,3-立挫-甲基-二(2-皮考基）}胺"的一只通过静脉内给予，另一只则 通过腹腔内给予。
[0216]-组3("HLS") :2只大鼠（n°4和5)，接受0.1 ml的标记的1-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2， 3-立挫-甲基-二(2-皮考基)胺，一只通过静脉内给予，另一只则通过腹腔内给予。
[0217] 第二阶段
[0218] -7号大鼠：接受0.1ml的单独的树枝状聚合物的标记溶液，通过静脉内给予
[0219] -8号大鼠：接受0.1 ml的测试项目"G5树枝状聚合物{1-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2， 3-=挫-甲基-二(2-皮考基)胺}"的溶液，通过静脉内给予
[0220] -9号大鼠：0.1ml的1-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2,3-S挫-甲基-二（2-皮考基)胺的 标记溶液，通过静脉内给予
[0221] 在给予后观察动物1小时并注意毒性征兆(死亡率...）。
[0222] 此测试提供允许测试项目的立即无害和组织分布确认的结果。
[0223] 单独用树枝状聚合物标记的样品
[0224] 通过使33化I的G5树枝状聚合物生理溶液(7,0化M )和放射性幾基得(28.86mCi) 反应并在60°C下加热1小时来制备剂量为0.087mCi/L(3.34MBq/(化）的标记的树枝状聚合 物溶液。
[0225] 测试项目的标记的样品
[0226] 通过使330化的l，725mM 1-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2,3-S挫-甲基-二(2-皮考基） 胺和7，03iiMG5树枝状聚合物的生理溶液与放射性幾基得(28.86mCi)反应，然后在60°C下 加热1小时，来制备测试项目的剂量为0. 〇87mCi/L(3.34MBq/iiL)的溶液。
[0227] 单独的1-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2,3-S挫-甲基-二(2-皮考基)胺的标记的样品 [022引通过使330化的1-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2，3-S挫-甲基-二（2-皮考基）胺的 1 .725mM生理溶液与放射性幾基得（28.86mCi)反应并在60°C下加热1小时，来制备在 0.087111(：1/化(3.34189/化)下测定的标记的单独的1-硝基-化-咪挫-甲基-1，2,3-^挫-甲 基-二(2-皮考基)胺的溶液。
[02巧]将每个样品保持在I型15mL无菌玻璃小瓶（类型Elumatic International CisBio)中。
[0230] 结果：
[0231] 在63,4316皮摩尔/kg(33，17mCi/kg= 1226MBq/kg)(对应于在8倍人等效剂量下的 危险因素）的剂量下0%死亡率。
[02创 *结论；
[0233] 证实剂量为63,4316皮摩尔/^;(33，17111(：1/1^ = 1226189/'1^)的用蒸馈水稀释的 测试项目；（对应于在8倍人等效剂量下的危险因素）。
[0234] 实施例6-在大鼠中通过直接肝内注射来原位给予《树枝状聚合物G5U-硝基-IH- 咪挫-甲基-1，2,3-S挫-甲基-二(2-皮考基)胺} W后的急性毒性试验和生物学分布。
[0235] *测试项目：
[0236] 树枝状聚合物G5{ 1-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2，3-S挫-甲基-二(2-皮考基)胺}
[0237] *测试总结：
[0238] 该研究的目的是，在单次原位肝内给予预定剂量为5.72mCi/kg(209.969MBq/kg) 体重的用蒸馈水稀释的测试项目W后，定性和定量地评估毒性效应和出现的延迟。
[0239] 实验进行如下:3只雄性大鼠：
[0240] -大鼠 1:在全身麻醉下的剖腹术W后，通过直接肝注入'右手'叶，接受0.1ml的单 独的树枝状聚合物的标记溶液
[0241] -鼠2:在全身麻醉下的剖腹术W后，通过直接肝注入'右手'叶，接受0.1 mL的测试 项目G5树枝状聚合物U-硝基-IH-咪挫-甲基-1，2，3-立挫-甲基-二(2-皮考基)胺}的溶液
[0242] -大鼠 3:在全身麻醉下的剖腹术W后，通过直接肝注入'右手'叶，接受0.1ml的1- 硝基-IH-咪挫-甲基-1，2,3-S挫-甲基-二(2-皮考基)胺的标记溶液
[0243] 在给予后观察动物1小时并注意毒性征兆(死亡率...）。然后，处死所有动物并进 行生物学分布研究。
[0244] 鉴于测试项目的特性，测试开始于一只动物（步骤1)，其接受33.17mCi/kg (1226MBq/kg)的剂量的测试项目。在此第一步骤W后，依据OECD的方法和建议，在和步骤1 的动物相同的条件下，对其他动物继续测试，其中上述其他动物接受剂量为33.17mCi/kg (1226MBq/kg)体重的测试项目。
[0245] 测试项目的给予
[0246] 已初步将给予体积Ag体重确定为33.17mCi/kg。对于每只大鼠，计算待给予的测 试项目的体积。测试项目的储存液的浓度是0. 〇87mCi AiL/(3.34MBqAiL)。
[0247] 使用配有合适尺寸的针头的适宜体积的注射器，静脉内和腹腔内给予测试项目一 次。
[024引尸检
[0249] 在T = 60分钟时，通过腹腔内注射剂量为1.16ml/kg的戊己比妥钢骇6%来安乐死 在60分钟观察结束时存活的所有动物并在股动脉处放血。尸检它们并用显微镜观察主要器 官。W为此目的保留的文件的形式记录所有病理变化。
[0250] 生物学分布
[02川称重移除的器官(脑、肾、肝、屯、脏、肠、肺、性腺、血液、尿液)并用Nal伽玛相机来计 数它们的活性。
[0252]此测试提供结果，其允许确认测试项目的立即无害和组织分布。
[0巧3] 通过PURPAN的化arma巧Usage Indoor(PUI)来确保药品质量。它包括：
[0巧4] -PH值控制
[0巧日]-通过气相色谱法(通过册LIS Technology)来控制固体产品的化学纯度
[0256] -无菌控制(事后）
[0257] -热原的控制(事后）。
[0巧引结果：
[0259] 在5,72111(：1/4旨(209.969189/4旨）的剂量(对应于在1，3倍人等效剂量下的危险因 素）下，0%的死亡率。测试项目的肝结合率被估计为53.7%，基于加载有测试项目的肝质 量，其对应于33.5%的初始注射剂量，然后通过原位/血管内获得的肝结合的比率被计算为 2190%(33,5%DIg/l，53%DIg)。
[0260] 结果解释：
[0261 ]考虑到的测试项目的毒性的评估标准是：
[0%2]-临床和行为征兆
[0263] -尸检观察
[0264] -死亡率(死亡数，mortality),表示为归因于测试项目的死亡动物的数目。
[0265] -作为动物体重的函数的测试项目的活性
[0266] 结论；
[0267] 在5,72111(：1/1^(209.969189/1^的剂量(对应于在1，3倍人等效剂量下的危险因素） 下，证实用蒸馈水稀释的测试项目。测试项目的肝结合率被估计为53.7%，基于加载有测试 项目的肝质量，其对应于33.5 %的初始注射剂量，然后原位/血管内的比率被计算为 2190%。
[0268] 药理学特性
[0269] 实施例5和实施例6的结果描绘于图2至图6。
[0270] 通过对雄性Wistar大鼠进行的研究证明，根据本发明的树枝状聚合物结合物没有 急性毒性，甚至在W63.4316皮摩尔Ag(活性33.17mCi/kg或1226MBq/kg)的浓度(对应于8 倍等效剂量的给予人类的产品的安全系数)在血流中静脉内直接注射W后也是如此。类似 地，在注射部位没有观察到沉淀或血栓形成。
[0271] 治疗效果是基于鍊对癌细胞的放射毒性作用。运种效果祀向癌细胞，运是为何我 们谈论祀向治疗的概念的原因，并且运是由于本发明的树枝状聚合物结合物的巧中效应：
[0272] 1.运可能要归功于优先积累在癌细胞中的配体。
[0273] 2.树枝状聚合物结合物的原位给予。原位给予树枝状聚合物结合物的方式的实 例：（i)通过直接引入直接在肿瘤上沉积树枝状聚合物结合物，（i i)借助于介入放射学动脉 内给予。
[0274] 3.使用树枝状聚合物作为超载体溶液来准确地沉积热放射性元素。
[0275] 此外，在雄性Wi star大鼠中的原位给予，其设及剖腹术和直接注入肝段，显示在引 入部位处树枝状聚合物结合物几乎是保持稳定的。事实上，相对于通过血管内给予所获得 的肝固定，测试项目的原位固定率被估计为2190%。放射性评估是对单独的各种器官和畜 体、尿液和全血进行的。
[0276] 图6是注射W后的生物学分布的闪烁图像。应当指出的是，仅肝脏、胃和肠是可辨 别的。注意，为了获得最高灵敏度，我们获得600循环/分钟，时间为10分钟:树枝状聚合物结 合物没有从它的沉积部分移动很多，并且生物学分布在注射部位处达到最大。
[0277] 因此，它可W有资格担任祀向治疗，运是因为在祀向位点W外的放射性元素生物 学分布是可忽略的。
[0278] 运种疗法允许通过诊断性伽玛相机来跟踪治疗剂(树枝状聚合物结合物）：无需添 加不透射线的赋形剂来监测给予，包括动脉内给予。
[0279] 实施例7-示例性医药产品形式
[0280] 放射性核素：
[0%1]我们具有188鍊、186鍊和放射性痕迹量级。同位素和188鍊、186鍊是高能的0发射 体（E(6 = 77化ev和E(6 = 326.1keV)和分别为0.71天和3.78天的短半衰期。
[0282] 待注射的剂量
[0283] 1.3GBq(35mCi)剂量，其在人类中并不全身诱导显著毒性。
[0284] 在具有骨转移的前列腺癌患者中，用径亚乙基二麟酸鍊-188进行的剂量递增研 究。Palmedo H,Guhlke S,Bender H,Sartor J,Schoeneich G,Risse J,Griinwald F, Kna卵 FF Jr'Biersack 町.Eur J Nucl Med.2000 Feb;27(2):123-30]〇[11]
[02化]配体载体：
[0286] 我们具有四配位基配体，其具有型式:与咪挫禪合的2-甲基-I-氨基环戊締二硫代 簇酸醋。此示踪剂显示对缺氧细胞的高亲和力和特异性。
[0287] [Conceptu曰Iization 曰nd 曰ssessment of original probes for hypoxic cell exploration .H.Belhadj-Tahar,Y.COULAIS and M.VIDAL.2nd Symposium"NoveI Targeting drugs and radiotherapy,14-15 June 2007,Toulouse(France)][12]
[0288] 络合作用方法；
[0289] 在高亲和力部位(配体)处复合放射性金属。相比于祀向缺氧细胞的生物分子(咪 挫）的位点特异性识别，在运些位点处的连接是动力学上更有利的。
[0290] 超载体
[0291] 使用的树枝状聚合物是环=憐腊-苯氧基甲基（甲基亚阱基）树枝状聚合物，代 1.5。运是大分子，其分子量为2855.51g/摩尔分布的体积，因而限制定位在肿瘤间质处的扩 散。
[0292] *CAS 89939-12-6:非危险物质，如按照Directive 67/548/邸C所分类的 [0巧引销售的示例性最终制造的产品
[0巧4] 在密封瓶中的冷试剂盒前体:
[0巧日]试剂盒含有冻干产品，其包括载体多配位基(polyden化te)二氨基硫醇，其对于金 属具有降低的亲和力，W及还含有还原剂(氯化锡)和巧樣酸（临时参与返回产品的缓冲作 用)。
[0巧6] a)描述瓶A:
[0297] 冻干物配体
[029引巧樣酸(pH调节）
[0299] 氯化锡
[0300] b)描述瓶B
[0301] 无菌冻干的聚赖氨酸 [030。C)临时瓶A的制备:
[0303] 将在烧瓶A中的高鍊酸钢引入恒溫于40°C的振荡器中的烧瓶。
[0304] d)临时瓶B的制备
[0305] 转移在瓶中获得的小瓶A和B的内含物;在室溫下并在摇动筛中溫育1小时。
[030y 在给予^前，制备给予产品
[0307]制剂制成自 [030引 ?冷试剂盒前体
[0309] ?来自盐水的放射性金属和无菌新鲜洗脱的发生剂鹤-鍊:对来自放射性药剂师 (radiopharmacist)的洗脱液进行放射性控制。
[0310] 将待递送的产物插入密封小瓶。
[0311] 在制备[^后4小时，给予是最大的。
[0312] 由放射科医师进行给予。
[0313] 根据本发明的树枝状聚合物结合物的配制和给予的方法的一般方案说明于图7。
[0314] 给予途径:
[0315] 给予途径是动脉内途径，运就是说，由放射科医师来原位沉积产品。
[0316] 树枝状聚合物的存在将限制鍊相对于咪挫的组织分布，不同于锭，其W珠的形式 被沉积，W及咪挫的存在更会增加结合的鍊运送到癌细胞。事实上，癌变进程会诱导缺氧 [13 ]并且咪挫衍生物被缺氧细胞和/或癌最好地捕获。
[0317] 因此，给予途径和动脉内药物设计将极大地减小放射性鍊的组织分布并且还将极 大地减小放射性鍊在正常细胞中的扩散。[14]
[0318] 给予频率:
[0319] 鉴于鍊的为几天的半衰期W及鉴于放射科医师对于我们的临床锭的经验，治疗包 括单次注射包含放射性鍊的药物制剂。
[0320] 实施例8-示例性医药产品形式
[0321] 重复实施例7,其中使用聚赖氨酸树枝状聚合物G5来代替环兰麟膳-苯氧基甲基 (甲基亚阱基)树枝状聚合物，代1.5，^及1-硝基-IH-咪蜂-甲基-1，2,3-SP坐-甲基-二（2- 皮考基)胺来代替四配位基配体，其具有与咪蜂禪合作为配体的型式2-甲基-1-氨基环戊締 二硫代簇酸醋。
[0322] 虽然我们已描述了本发明的若干实施方式，但显而易见的是，可W改变我们的基 本实施例^提供采用本发明的化合物和方法的其他实施方式。因此，将会理解的是，本发明 的范围是由所附权利要求而不是由已经通过示例的方式来描述的【具体实施方式】所限定。
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[0339] [16]U.S.ht.No.4,507,466，U.S.Pat.No.4,558，120，U.S.Pat.No.4,568,737， U.S.ht.No.4,587,329，U.S.Pat.No.4,631，337，U.S.Pat.No.4,694,064，U.S.ht.No.4, 713,975，U.S.Pat.No.4,737,550，U.S.Pat.No.4,857,599，U.S.Pat.No.4,871，779， U.S.化t. No.5,338,532，U.S. Pat. No.6,471,968，U.S. Pat. No.5,387,617，U.S.化t. No.5, 393,797,U.S.Pat.No.5,393,795,U.S.Pat.No.5,527,524,U.S.Pat.No.5,560,929, U.S.ht.No.5,773,527，U.S.Pat.No.5,631，329，U.S.Pat.Nos.5,935，114;5,908,413;5, 792,105；5,693,014；5,674,192；5,876,445；5,913,894；5,868,719；5,851,228；5,843, 089;5，800，519;5，800，508;5，800，391;5，354，308;5，755，722;5，733，303;5，866，561;5， 857,998;5,843,003;和5,933,145.
【主权项】
1. 一种树枝状聚合物结合物，包含与具有以下结构的硝基咪唑配体/金属络合物结合 的G2至GlO聚赖氨酸树枝状聚合物：其中 η是0至8的整数，包括端点； R1、R2和R3独立地表示Η、Ν〇2或甲基； 尺'1和1?'2独立地表示!1、0!1、甲基、乙基或丙基； Χ1、Χ2和Χ3独立地表示0、CO或H2O,如由金属M的化学价所允许的；以及 M表示选自￥、21*、他、]\1〇、1'(3、1?11、1?11、？(1、48、0(1、1^、111或511的过渡金属的放射性或非放射 性(冷)同位素。2. 根据权利要求1所述的树枝状聚合物结合物，其中，所述结合包括离子键、金属键、氢 键或范德华键。3. 根据权利要求1或2所述的树枝状聚合物结合物，其中，所述树枝状聚合物具有以下 结构：4. 根据权利要求1或2所述的树枝状聚合物结合物，其中，所述硝基咪唑配体/金属络合 物具有以下结构：其中M表示99mTc或186A88Re。（两种同位素是感兴趣的）5. 根据权利要求1或2所述的树枝状聚合物结合物，其中，所述结合物具有以下结构：其中 M表示 99mTc 或186/188Re。6. 根据权利要求1至5中任一项所述的树枝状聚合物结合物，作为癌症的治疗或诊断中 的药物使用。7. -种药物组合物，包含根据权利要求1至5中任一项所述的树枝状聚合物结合物和药 用载体。8. 根据权利要求7所述的组合物，其中，M是186/188Re并且所述组合物是放射性药物组合 物。9. 根据权利要求7所述的组合物，其中，M是99mTc并且所述组合物是诊断性组合物。10. -种用于治疗或减轻癌症的严重性的方法，包括给予患有或易患所述癌症的受试 者治疗有效量的根据权利要求7所述的组合物。11. 根据权利要求10所述的方法，其中，所述癌症选自由以下各项组成的组:淋巴瘤、霍 奇金氏病、非霍奇金氏病、多发性骨髓瘤、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症、重链病、实体瘤、 肉瘤和癌、纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮 肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤因氏瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、 结肠癌、胰腺癌、脑癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺瘤、皮 脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、肝瘤、胆管癌、绒毛膜 癌、精原细胞瘤、胚胎性癌、维尔姆斯氏瘤、子宫颈癌、子宫癌、睾丸瘤、肺癌、小细胞肺癌、膀 胱癌、上皮癌、胶质瘤、星形细胞瘤、髓母细胞瘤、颅咽管瘤、脑室膜瘤、松果体瘤、成血管细 胞瘤、听神经瘤、少突神经胶质瘤、脑脊膜瘤、黑素瘤和成神经细胞瘤、视网膜母细胞瘤以及 所有实体瘤。12. 根据权利要求10或11所述的方法，其中，给予包括动脉内、瘤内或瘤周注射所述组 合物以及实现所述治疗剂的原位沉积的所有种类的给予，动脉内注射所述组合物是通过介 入放射学进行的。13. 根据权利要求10至12中任一项所述的方法，其中，给予治疗有效量的所述组合物包 括给予对应于5,4 10_12摩尔金属/kg所述受试者的体重的约37MBq/kg的188Re和对应于9,96 10 一12摩尔金属/kg所述受试者的体重的约68MBq/kg的188Re之间的剂量。14. 一种在受试者中改变肿瘤生长的方法，包括:a)提供包含根据权利要求7所述的树 枝状聚合物结合物的组合物以及b)在改变所述肿瘤生长的条件下给予需要其的受试者治 疗有效量的所述组合物。15. 根据权利要求14所述的方法，其中，所述改变包括在所述受试者中抑制肿瘤生长。16. 根据权利要求14所述的方法，其中，所述改变包括在所述受试者中减小所述肿瘤的 尺寸。17. 根据权利要求14至16中任一项所述的方法，其中，所述肿瘤是原发性肿瘤或转移性 肿瘤。18. 根据权利要求14所述的方法，其中，连同化疗剂或抗致癌性药剂一起共同给予包含 树枝状聚合物结合物的所述组合物。19. 根据权利要求18所述的方法，其中，所述化疗剂选自由以下各项组成的组：铂络合 物、维拉帕米、鬼白毒素、卡铂、丙卡巴肼、氮芥、环磷酰胺、喜树碱、异环磷酰胺、美法仑、苯 丁酸氮芥、白消安、亚硝基脲、亚德里亚霉素、更生霉素、柔红霉素、多柔比星、博来霉素、普 卡霉素、丝裂霉素、博来霉素、依托泊苷、他莫昔芬、紫杉醇、紫杉酚、反式铂、5-氟尿嘧啶、长 春新碱、长春花碱和氨甲喋呤。20. -种用于淋巴系统成像的方法，包括:给予受试者图像增强量的根据权利要求1至5 中任一项所述的树枝状聚合物结合物，其中金属M是 99mTc;以及在给予所述树枝状聚合物结 合物以后，检测至少一部分的所述淋巴系统的图像信号强度的差异，其中图像信号强度的 差异指不转移性癌细胞的存在。21. 根据权利要求20所述的方法，其中，所述部分的所述淋巴系统包括淋巴结。22. 根据权利要求20或21所述的方法，其中，给予包括静脉内或淋巴内注射组合物。23. 根据权利要求20至22中任一项所述的方法，其中，给予成像增强量的所述树枝状聚 合物结合物包括给予对应于〇. 6 10_12摩尔金属/kg所述受试者的体重的约10.5MBq的99mTc 和对应于1.5 10_12摩尔金属/kg所述受试者的体重的约26.3MBq的99mTc之间的剂量。24. 根据权利要求7所述的组合物，作为用于治疗或减轻癌症的严重性的药物使用。25. 根据权利要求24所述的作为药物使用的组合物，其中，所述癌症选自由以下各项组 成的组：淋巴瘤、霍奇金氏病、非霍奇金氏病、多发性骨髓瘤、瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血 症、重链病、实体瘤、肉瘤和癌、纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索 瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤因氏瘤、平滑肌 肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、胰腺癌、脑癌、乳癌、卵巢癌、前列腺癌、鳞状细胞癌、基底细胞 癌、腺癌、汗腺瘤、皮脂腺癌、乳头状癌、乳头状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管癌、肾细胞癌、 肝瘤、胆管癌、绒毛膜癌、精原细胞瘤、胚胎性癌、维尔姆斯氏瘤、子宫颈癌、子宫癌、睾丸瘤、 肺癌、小细胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、胶质瘤、星形细胞瘤、髓母细胞瘤、颅咽管瘤、脑室膜瘤、 松果体瘤、成血管细胞瘤、听神经瘤、少突神经胶质瘤、脑脊膜瘤、黑素瘤和成神经细胞瘤视 网膜母细胞瘤以及所有实体瘤。26. 根据权利要求7所述的组合物，作为用于在受试者中改变肿瘤生长的药物使用。27. 根据权利要求26所述的作为药物使用的组合物，其中，所述改变包括在所述受试者 中抑制肿瘤生长。28. 根据权利要求26所述的作为药物使用的组合物，其中，所述改变包括在所述受试者 中减小所述肿瘤的尺寸。29. 根据权利要求26至28中任一项所述的作为药物使用的组合物，其中，所述肿瘤是原 发性肿瘤或转移性肿瘤。30. 根据权利要求7所述的组合物，作为用于淋巴系统成像的药物使用。31. 根据权利要求30所述的作为药物使用的组合物，其中，部分的所述淋巴系统包括淋 巴结。
【文档编号】A61K49/12GK105934464SQ201480074074
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2014年1月13日
【发明人】哈菲德·贝勒哈吉-塔希尔, 努尔丁·萨迪克, 伊冯·库莱
【申请人】哈菲德·贝勒哈吉-塔希尔, 杨光华, 努尔丁·萨迪克