, 2H), 2. 50 (t,J= 8. 2Hz, 2H), 2. 27 (dd,J= 15. 2, 7. 1Hz, 2H), 1. 18 (s, 6H).
[0054] 13CNMR(400MHz, CDC13)S175. 69, 167. 95, 159. 95, 151. 77, 146. 72, 141. 75, 140. 8 2, 136. 02, 134. 43, 132. 06, 130. 88, 128. 76, 126. 47, 126. 30, 126. 04, 123. 56, 123. 18, 122. 5 2, 121. 26, 117. 67, 113. 77, 101. 99, 50. 76, 47. 96, 48. 24, 26. 06, 21. 60.
[0055] 实施例2
[0056] 比率荧光探针5-2(R为3-溴丙酸）的制备，结构式如下
[0057]
[0058] 取5mL的水杨醛和2. 35g的多聚甲醛于250mL的含有20mL的浓盐酸的圆底烧瓶 中，混合液混合均匀后，开始逐滴加入1. 5mL的P0C13，在1小时内加完，混合液在室温下反 应18小时后过滤出沉淀，并用3 % NaHC03和超纯水分别洗三遍后放到真空干燥箱中烘干， 再用石油醚重结晶即得到产物1。
[0059] 在含有13mL50%的乙酸溶液中分别加入12. 5mmol产物1和16. 2mmol环六亚甲基 四胺，加热到120°C，使反应液回流，1小时后再加入6mL浓盐酸，溶液变为黄色，继续搅拌5 分钟后冰水浴，粗产物沉淀出来，过滤后得到淡黄色产物2,真空烘干后备用。
[0060] 25mL的圆底烧瓶中，以10mL乙醇作为溶剂，加入5mmol的2-氨基苯硫醇和5mmol 的产物2,混合液在室温下反应12小时后，旋干溶剂，粗产物再经过体积比为2:1的二氯甲 烷/石油醚混合溶液作为洗脱剂通过硅胶色谱柱分离提纯后可得产物3。
[0061] 在两口的圆底烧瓶中，以乙醇作为溶剂，加入0. 7mmol化合物4(C14HlsBrN02)和 0. 5_〇1产物3,以0. 7_〇1哌啶作为催化剂，通氮气加热到回流（80°C)，反应1小时后旋 蒸掉溶剂，并以体积比为10:1的二氯甲烷/甲醇混合溶液作为洗脱剂通过硅胶色谱柱分离 提纯后可得目标产物5-2。
[0062] 本实施例制备的比率荧光探针的荧光光谱图见图1
[0063] 质谱分析：ESI-MS :m/z(% ) :549. 10(M++1)
[0064] 核磁分析NMR(400MHz，CDC13) S 8. 96 (s，7H)，8. 18 (s，7H)，8. 16 (s，7H)，8. 0 5 (s, 6H), 7. 55 (dd, J = 14. 2, 6. 0Hz, 28H), 7. 29 (s, 5H), 7. 21 (s, 7H), 6. 95 (s, 7H), 6. 79 (s ,4H), 6. 18 (s, 7H), 5. 31 (s, 7H), 4. 22 (s, 5H), 3. 94 (s, 5H), 2. 76 (s, 10H), 1. 44 (s, 42H). 13C NMR (400MHz, CDC13) S 174. 90, 173. 17, 167. 95, 159. 95, 151. 77, 146. 72, 141. 75, 140. 82, 13 7. 02, 135. 46, 131. 97, 130. 95, 127. 77, 126. 57, 126. 30, 125. 84, 123. 49, 123. 18, 121. 92, 12 1. 26, 117. 87, 114. 07, 101. 99, 48. 46, 47. 20, 38. 24, 26. 06.
[0065] 实施例3
[0066] 比率荧光探针5-3 (R为溴乙酸）的制备，结构式如下
[0067]
[0068] 取5mL的水杨醛和2. 35g的多聚甲醛于250mL的含有20mL的浓盐酸的圆底烧瓶 中，混合液混合均匀后，开始逐滴加入1. 5mL的P0C13，在1小时内加完，混合液在室温下反 应18小时后过滤出沉淀，并用3 %NaHC03和超纯水分别洗三遍后放到真空干燥箱中烘干， 再用石油醚重结晶即得到产物1，。
[0069] 在含有13mL50%的乙酸溶液中分别加入12. 5mmol产物1和16. 2mmol环六亚甲基 四胺，加热到120°C，使反应液回流，1小时后再加入6mL浓盐酸，溶液变为黄色，继续搅拌5 分钟后冰水浴，粗产物沉淀出来，过滤后得到淡黄色产物2,真空烘干后备用。
[0070] 25mL的圆底烧瓶中，以10mL乙醇作为溶剂，加入5mmol的2-氨基苯硫醇和5mmol 的产物2,混合液在室温下反应12小时后，旋干溶剂，粗产物再经过体积比为2:1的二氯甲 烷/石油醚混合溶液作为洗脱剂通过硅胶色谱柱分离提纯后可得产物3。
[0071] 在两口的圆底烧瓶中，以乙醇作为溶剂，加入0. 7mmol化合物4(C13H16BrN02)和 0. 5_〇1产物3,以0. 7_〇1哌啶作为催化剂，通氮气加热到回流（80°C)，反应1小时后旋 蒸掉溶剂，并以体积比为10:1的二氯甲烷/甲醇混合溶液作为洗脱剂通过硅胶色谱柱分离 提纯后可得目标产物5-3。
[0072] 本实施例制备的比率荧光探针的荧光光谱图见图1
[0073] 质谱分析：ESI-MS:m/z(% ) :535. 09(M++1)
[0074] 核磁分析NMR(400MHz, CDC13) S 8. 97 (s, 2H)，8. 18 (s, 2H)，8. 12 (s, 2H)，8. 02(s ,2H), 7. 52 (dd,J= 14. 1, 6. 0Hz, 8H), 7. 34 (s, 1H), 7. 03 (d,J= 76. 1Hz, 4H), 6. 84 (s, 1H), 5. 78 (s, 2H), 5. 32 (s, 2H), 4. 60 (s, 2H), 4. 45 (s, 2H), 1. 54 (s, 12H).
[0075] 13CNMR(400MHz,CDC13)S168. 05, 167. 56, 162. 47, 160. 03, 151. 76, 146. 72, 142. 5 7, 139. 07, 136. 02, 135. 09, 132. 08, 130. 95, 128. 63, 127. 56, 126. 30, 126. 04, 123. 49, 123. 1 5 (d,J= 18. 2Hz), 121. 26, 117. 75, 113. 42, 102. 11, 52. 36, 47. 98, 26. 96.
[0076] 实施例4
[0077] 比率荧光探针5-4 (R为碘乙烷）的制备，结构式如下
[0078]
[0079] 取5mL的水杨醛和2. 35g的多聚甲醛于250mL的含有20mL的浓盐酸的圆底烧瓶 中，混合液混合均匀后，开始逐滴加入1. 5mL的P0C13，在1小时内加完，混合液在室温下反 应18小时后过滤出沉淀，并用3 %NaHC03和超纯水分别洗三遍后放到真空干燥箱中烘干， 再用石油醚重结晶即得到产物1，。
[0080] 在含有13mL50%的乙酸溶液中分别加入12. 5mmol产物1和16. 2mmol环六亚甲基 四胺，加热到120°C，使反应液回流，1小时后再加入6mL浓盐酸，溶液变为黄色，继续搅拌5 分钟后冰水浴，粗产物沉淀出来，过滤后得到淡黄色产物2,真空烘干后备用。
[0081] 25mL的圆底烧瓶中，以10mL乙醇作为溶剂，加入5mmol的2-氨基苯硫醇和5mmol 的产物2,混合液在室温下反应12小时后，旋干溶剂，粗产物再经过体积比为2:1的二氯甲 烷/石油醚混合溶液作为洗脱剂通过硅胶色谱柱分离提纯后可得产物3。
[0082] 在两口的圆底