谱中分析检测的其它条件可以与所述 检测灯盏花乙素含量中的液相色谱仪的条件相同。
[0038] 在液相色谱仪中分析检测所述有关物质检查用供试品溶液的浓度优选为0. 03mg/ mL~1.0 mg/mL，所述对照溶液的浓度优选为0. 3 μ g/mL~10 μ g/mL。在一些实施方案中， 所述有关物质检查用供试品溶液的浓度为〇. 5mg/mL，所述对照溶液的浓度为5 μ g/mL。
[0039] 按照本发明，所述取所述对照溶液和有关物质检查用供试品溶液在液相色谱中分 析检测具体包括：
[0040] 取所述对照溶液注入液相色谱仪，使主成分峰高约为记录仪满量程的10% ;
[0041] 取所述对照溶液与所述有关物质检查用供试品溶液注入色谱仪，使所述供试品溶 液的有关物质峰全部显不；
[0042] 对比所述有关物质检查用供试品溶液的有关物质峰面积与所述对照品溶液的主 峰面积，得到所述有关物质的含量。
[0043] 本发明提供一种灯盏花乙素原料及其制剂的检测方法，包括：提供供试品溶液和 对照品溶液；以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以酸的水溶液或磷酸 盐的水溶液为流动相B，梯度洗脱，在液相色谱仪中检测所述供试品溶液和对照品溶液，梯 度洗脱，外标法分析得到所述灯盏花乙素的含量。该方法操作简单，重复性好，专属性强，洗 脱完全，准确度高，通过该检测方法，可以在制备灯盏花乙素过程中，提高灯盏花乙素原料 药及其制剂质量控制标准，对灯盏花乙素原料及其制剂的质量进行准确的检测，以保证最 终得到质量稳定的灯盏花乙素原料及其制剂。
【附图说明】
[0044] 为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现 有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0045] 图1示实施例1编号为20121026的灯盏花乙素原料供试品溶液的色谱图；
[0046] 图2示实施例2编号为20150126-01注射用灯盏花乙素供试品溶液的色谱图；
[0047] 图3示实施例3编号为20121030的灯盏花乙素原料供试品溶液的色谱图；
[0048] 图4示实施例4编号为20121029的灯盏花乙素原料供试品溶液的色谱图；
[0049] 图5示实施例5编号为20150126-03的注射用灯盏花乙素供试品溶液的色谱图；
[0050] 图6示实施例6编号为20150126-02注射用灯盏花乙素供试品溶液的色谱图；
[0051] 图7示实施例7按照2010年版中国药典1部中注射用灯盏花素质量标准检测注 射用灯盏花乙素供试品溶液的色谱图；
[0052] 图8示实施例7按照实施例1所述方法检测注射用灯盏花乙素供试品溶液的色谱 图；
[0053] 图9示实施例7按照实施例3所述方法检测注射用灯盏花乙素供试品溶液的色谱 图；
[0054] 图10示实施例7按照实施例5所述方法检测注射用灯盏花乙素供试品溶液的色 谱图；
[0055] 图11示实施例7按照实施例1所述方法检测空白辅料溶液的色谱图；
[0056] 图12示实施例7按照实施例1所述方法检测注射用灯盏花乙素供试品溶液的色 谱图；
[0057] 图13示实施例7按照实施例1所述方法检测高温破坏的注射用灯盏花乙素供试 品溶液的色谱图；
[0058] 图14示实施例7按照实施例1所述方法检测高湿破坏的注射用灯盏花乙素供试 品溶液的色谱图；
[0059] 图15示实施例7按照实施例1所述方法检测酸破坏的注射用灯盏花乙素供试品 溶液的色谱图；
[0060] 图16示实施例7按照实施例1所述方法检测碱破坏的注射用灯盏花乙素供试品 溶液的色谱图；
[0061] 图17示实施例7按照实施例1所述方法检测氧化破坏的注射用灯盏花乙素供试 品溶液的色谱图；
[0062] 图18示实施例7按照实施例1所述方法检测光照破坏的注射用灯盏花乙素供试 品溶液的色谱图；
[0063] 图19示实施例7注射用灯盏花乙素样品紫外分光光度法法含量测定线性关系的 标准曲线图，其中 示峰面积，-示线性。
【具体实施方式】
[0064] 下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述， 显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的 实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都 属于本发明保护的范围。
[0065] 为了进一步了解本发明，下面结合实施例对本发明进行阐述。其中本发明实施例 中所用的测试样品灯盏花乙素原料编号为20121026、20121029、20121030，测试样品注射用 灯盏花乙素编号为20150126-01、20150126-02、20150126-03，均购自昆明制药集团。
[0066] 实施例1
[0067] 使用仪器为：岛津（Shimadzu)公司生产的LC-20AD高效液相色谱仪：包括 Shimadzu LC-20AD泵、D⑶-20ASR组合在线脱气装置、SIL-20A自动进样器、SPD-M20A二 极管阵列检测器、CT0-20AC柱温箱，Lcsolution工作站，色谱柱为Luna C18150X4.6mm。 梅特勒XP205型电子天平。灯盏花乙素的对照品均购自中国药品生物制品检定所（批号 110842-201207,纯度为92. 1% )。灯盏花乙素原料、注射用灯盏花乙素由昆药集团股份有 限公司提供。实验用水为超纯水；磷酸、甲醇、乙腈为色谱纯。
[0068] 用十八硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，0. 02 %磷酸水溶液为流动相 B，按下表1梯度洗脱。
[0069] 表1洗脱程序
[0070]
[0071] 流速每分钟为1.0 mL ;检测波长为335nm ;柱温35°C。检测波长为335nm，理论板数 按灯盏花乙素峰计算5000。
[0072] 取编号为20121026的灯盏花乙素原料测试样品，加入甲醇溶解并稀释得到浓度 为50 μ g/mL的溶液作为供试品溶液，量取所述供试品溶液10 μ L注入液相色谱仪，记录色 谱图，结果如图1所示。色谱分析结果如表2。
[0073] 表2编号为20121026的灯盏花乙素原料供试品溶液的色谱分析结果
[0074]
[0075] 取中国药品生物制品检定所提供的灯盏花乙素对照品（又名野黄芩苷，批号 110842-201207)，加入甲醇溶解并稀释得到浓度为50 μ g/mL的溶液，作为对照品溶液，量 取所述对照品溶液IOuL注入液相色谱仪，记录色谱图；使用单点外标法计算含量。通过计 算所述供试品溶液和对照品溶液的峰面积的比值即得所述供试品的灯盏花乙素的含量。各 测试样品的结果如表3。
[0076] 表3各测试样品灯盘花乙素的含量结果
[0077]
[0078] 实施例2
[0079] 所用色谱仪、填充剂、流动相与实施例1相同。
[0080] 取注射用灯盏花乙素样品，用水溶解制成0. 5mg/mL的供试品溶液；取部分所述供 试品溶液用水稀释制成5 μ g/mL的对照品溶液。
[0081] 取所述对照品溶液10 μ L注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分峰高约为 记录满量程的10% ;
[0082] 取所述对照品溶液和供试品溶液各10 μ L注入液相色谱仪检测，记录色谱图至主 成分峰保留时间的2倍。
[0083] 其中编号为20150126-01注射用灯盏花乙素供试品溶液色谱图如图2所示，有关 物质峰已全部显示。色谱分析结果如表4。
[0084] 表4编号为20150126-01注射用灯盏花乙素供试品溶液的色谱分析结果
[0085]
[0086] 通过计算所述供试品溶液和对照品溶液的峰面积的比值即得所述供试品的有关 物质含量。各测试样品的有关物质含量结果如表5。
[0087] 表5各测试样品有关物质的含量结果
[0088]
[0089] 结果显示各测试样品的有关物质含量均小于2. 0%。
[0090] 实施例3
[0091] 使用仪器为：岛津（Shimadzu)公司生产的LC-20AD高效液相色谱仪，包括 Shimadzu LC-20AD泵、D⑶-20ASR组合在线脱气装置、SIL-20A自动进样器、SPD-M20A二极 管阵列检测器、CT0-20AC柱温箱，Lcsolution工作站，色谱柱为Luna C18150X4.6mm。梅 特勒XP205型电子天平。灯盏花乙素对照品（又名野黄芩