一种羊精液稀释保存液及其制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种羊精液稀释保存液及其制作方法，它由如下原料制作而成：柠檬酸钠1.2～2.0g、果糖1.8～2.5g、葡萄糖0.3～0.6g、D-半乳糖0.2～0.5g、L-赖氨酸1.0～1.3g、新鲜卵黄离心上清液10～20ml、亚硒酸钠2.5～6.0mg、α-生育酚75～180IU、灭菌双蒸水100.0ml。本发明的三种糖类，可更好地为精子提供能量，延长精子存活时间。本发明的L-赖氨酸，有助于减缓精子死亡，增加精子运动能力，提高精子活力。本发明中的亚硒酸钠和α-生育酚，具有较强的生物抗氧化功能，可以保护精子质膜不被过氧化物损伤，从而稳定精子结构和维持其功能。
【专利说明】一种羊精液稀释保存液及其制作方法
【技术领域】
[0001]本发明属于动物繁殖【技术领域】，具体说涉及一种用于提高羊新鲜精液长途运输后品质及受精率的精液稀释保存液及其制作方法。
【背景技术】
[0002]羊人工授精采用的精液主要有两种，即新鲜精液和冷冻精液，前者常简称为鲜精，后者简称为冻精。为提高种公羊的利用率，便于精液的保存及运输，一些种羊场及家畜改良工作站常制作冻精，用于羊的配种工作。但生产冻精的设备昂贵，保存运输过程需要及时补充液氮，精液解冻技术要求较高，羊冻精的受精率较低等，针对羊冻精的这些缺点，很难普及应用到各养殖场和养殖户；因而使用冻精大大限制了羊同期发情及人工授精相关技术的推广应用。
[0003]生产一线常常采用鲜精多用生理盐水进行稀释，这种方法仅可以满足现场采精，现场稀释，即时输精的生产需求。然而在优质种羊数量有限，精液需求区域面积较广的情况下，就需要把优质鲜精进行长途运输，保存时间需要达到6h以上，特殊情况下甚至需要保存48h至72h。因此，良好的羊鲜精稀释保存液成为提高人工输精受精率的关键因素。
[0004]目前，市场上拥有大量的羊冻精稀释液及稀释保存液；鲜精稀释液及稀释保存液较少，其主要组份多为葡萄糖、柠檬酸钠、抗菌素，其精子活率，质膜完整率，顶体完整率不尽理想，且在48小时以后都有较大幅度的降低，见表1。
【发明内容】
[0005]本发明的目的在于提供一种羊精液稀释保存液及其制作方法，它可延长鲜精运输过程中精子存活时间，保持精子活力，提高精子顶体完整率，质膜完整率，提高受精率。
[0006]本发明的技术方案如下:
[0007]一种羊精液稀释保存液，它由如下原料制作而成:
[0008]梓檬酸钠1.2~2.0g、果糖1.8~2.5g、葡萄糖0.3~0.6g、D_半乳糖0.2~0.5g、L-赖氨酸1.0~1.3g、新鲜卵黄离心上清液10~20ml、亚硒酸钠2.5~6.0mg> α -生育酌.75~180IU、灭菌双蒸水100.0ml。
[0009]上述配方的进一步方案为:柠檬酸钠1.4g、果糖2.0g、葡萄糖0.55g、D-半乳糖0.45g、L-赖氨酸1.25g、新鲜卵黄离心上清液15ml、亚硒酸钠5.0mg、α -生育酚150IU、灭菌双蒸水100.0ml ο
[0010]本发明所述羊精液稀释保存液其制作方法由如下步骤组成:
[0011]1.1、量取100.0ml双蒸水，于11(TC高压灭菌1min,获得灭菌双蒸水A ；
[0012]1.2、准确称取柠檬酸钠1.2~2.0g,葡萄糖0.3~0.6g, D-半乳糖0.2~0.5g,L-赖氨酸1.0~1.3g，分别加入到灭菌双蒸水A中，于50~60°C水浴加热，并进行顺时针搅拌溶解5~lOmin，然后于110°C高压灭菌lOmin，获得溶液B ;
[0013]1.3、无菌吸取新鲜卵黄液，用灭菌生理盐水进行1:1稀释后，加入到灭菌的离心管中，于4°C 7500g离心10min，吸取上清液1~20ml，于20~30°C静置lOmin，获得卵黄离心上清液C ；
[0014]1.4、准确称取亚硒酸钠2.5~6mg，α -生育酚75~180IU，分别加入到卵黄离心上清液C中，顺时针搅拌混匀，获得溶液D ；
[0015]1.5、取出溶液B，待其温度降到100°C以下时，准确称取果糖1.8~2.5g，加入到溶液B中，并进行顺时针搅拌溶解，获得溶液E ；
[0016]1.6、待溶液E温度降到30~37°C时，将溶液D缓缓倒入，混匀即可。
[0017]本发明的优点在于:本发明配方使精子活率、质膜完整率、顶体完整率都比现有的精液稀释液配方有提闻，在二天内随时间延长提闻幅度加大。见表1。
[0018]1、本发明的羊精液稀释保存液采用的三种糖类，是模拟精浆中的糖类成分含量进行配比组合添加的，可以更好地为精子提供能量，延长精子存活时间。
[0019]2、本羊精液稀释保存液中的L-赖氨酸，补充了稀释后精液L-赖氨酸含量的降低，有助于减缓精子死亡，增加精子运动能力，提闻精子活力。
[0020]3、本羊精液稀释保存液中的亚硒酸钠和α -生育酚，具有较强的生物抗氧化功能，可以保护精子质膜不被过氧化物损伤，从而稳定精子结构和维持其功能。
[0021]4、本羊精液稀释保存液均是无菌配制，且不添加任何抗生素，可以在避免滥用抗生素的基础上减少疫病感染和传播。
[0022]5、本羊精液稀释保存液成本低廉，制作方法简单。
[0023]本发明的精液稀释保存液与现有稀释液保存液进行常规对比试验，结果如表1:
[0024]表1本发明配方与现有的精液稀释保存液效果对比表
[0025]
【权利要求】
1.一种羊精液稀释保存液，其特征在于:它由如下原料制作而成: 柠檬酸钠1.2~2.0g、果糖1.8~2.5g、葡萄糖0.3~0.6g、D-半乳糖0.2~0.5g、L-赖氨酸1.0~1.3g、新鲜卵黄离心上清液10~20ml、亚硒酸钠2.5~6.0mg> α -生育酌.75~180IU、灭菌双蒸水100.0ml。
2.根据权利要求1所述的配方的羊精液稀释保存液，其特征在于:它由如下原料制作而成: 柠檬酸钠1.4g、果糖2.0g、葡萄糖0.55g、D-半乳糖0.45g、L_赖氨酸1.25g、新鲜卵黄离心上清液15ml、亚硒酸钠5.0mg> α -生育酹150IU、灭菌双蒸水100.0ml。
3.根据权利要求1所述羊精液稀释保存液的制作方法，其特征在于:它由如下步骤组成: .1.1、量取100.0ml双蒸水，于11(TC高压灭菌1min,获得灭菌双蒸水A ； .1.2、准确称取柠檬酸钠1.2~2.0g,葡萄糖0.3~0.6g，D-半乳糖0.2~0.5g，L_赖氨酸1.0~1.3g，分别加入到灭菌双蒸水A中，于50~60°C水浴加热，并进行顺时针搅拌溶解5~lOmin，然后于110°C高压灭菌lOmin，获得溶液B ; .1.3、无菌吸取新鲜卵黄液，用灭菌生理盐水进行1:1稀释后，加入到灭菌的离心管中，于4°C 7500g离心10min，吸取上清液10~20ml，于20~30°C静置lOmin，获得卵黄离心上清液C ； .1.4、准确称取亚硒酸钠2.5~6mg，α -生育酚75~180IU，分别加入到卵黄离心上清液C中，顺时针搅拌混匀，获得溶液D ； .1.5、取出溶液B，待其温度降到100°C以下时，准确称取果糖1.8~2.5g，加入到溶液B中，并进行顺时针搅拌溶解，获得溶液E ； .1.6、待溶液E温度降到30~37°C时，将溶液D缓缓倒入，混匀即可。
【文档编号】A01N1/02GK104068013SQ201410341051
【公开日】2014年10月1日 申请日期:2014年7月17日 优先权日:2014年7月17日
【发明者】韩天龙, 王敏, 毛冉, 李清泉, 石岩, 王丽萍, 李志明 申请人:赤峰市农牧科学研究院