蓝莓组织培养方法与流程

文档序号:11879590阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种蓝莓组织培养方法,其特征在于,所述蓝莓组织培养方法包括:

(1)取当年生的蓝莓嫩枝条,剪取3-4cm带芽茎段;

(2)将上述带芽茎段用浓度为70-75体积%的酒精消毒10-30s,再用浓度为0.08-0.12体积%的升汞消毒6-8min,冲洗后备用;

(3)将上述带芽茎段切成1-2cm长的带芽的单茎段;

(4)将上述单茎段的下端插入初代培养基中进行初代培养;其中,所述初代培养基中还含有玉米素和吲哚丁酸,且相对于1L的初代培养基,所述玉米素的含量为0.8-1.2mg,所述吲哚丁酸的含量为0.38-0.42mg;

(5)将经过初代培养后的单茎段接种到增殖培养基中进行增殖培养;其中,所述增殖培养基中还含有玉米素和吲哚丁酸,且相对于1L的增殖培养基,所述玉米素的含量为1.4-1.6mg,所述吲哚丁酸的含量为0.08-0.12mg;

(6)将经过增殖培养后的单茎段接种到生根培养基中进行生根培养;其中,所述生根培养基中还含有玉米素和吲哚丁酸,且相对于1L的生根培养基,所述玉米素的含量为0-0.1mg,所述吲哚丁酸的含量为0.28-0.32mg;

所述初代培养基、增殖培养基、生根培养基为WPM培养基或MS培养基。

2.根据权利要求1所述的组织培养方法,其特征在于,所述生根培养基为MS培养基,且所述MS培养基包括有硝酸铵、硝酸钾、七水硫酸镁、磷酸二氢钾和氯化钙;

且相对于1L的MS培养基,所述硝酸铵的含量为14-16g,所述硝酸钾的含量为18-20g,所述七水硫酸镁的含量为36-38g,所述磷酸二氢钾的含量为15-18g,所述氯化钙的含量为2-3g。

3.根据权利要求1所述的组织培养方法,其特征在于,所述生根培养基为WPM培养基,且所述WPM培养基包括有硫酸钾、七水硫酸镁、磷酸二氢钾、硝酸铵和四水硝酸钙;

且相对于1L的WPM培养基,所述硫酸钾的含量为9-12g,所述七水硫酸镁的含量为3.6-3.8g,所述磷酸二氢钾的含量为1.6-1.8g,所述硝酸铵的含量为3.8-4.2g,所述四水硝酸钙的含量为27-28g。

4.根据权利要求1所述的蓝莓组织培养方法,其特征在于,所述初代培养、增殖培养和生根培养的培养条件相同,且所述培养条件为:温度为22-28℃,光照时长为12-16h/d,光照强度为1900-2100lx。

5.根据权利要求1所述的蓝莓组织培养方法,其特征在于,所述蓝莓组织培养方法还包括:将步骤(2)中所述带芽茎段浸泡于70-80体积%的酒精中震荡消毒10-30s,之后浸泡至0.08-0.12体积%的升汞中震荡消毒6-10min。

6.根据权利要求1所述的蓝莓组织培养方法,其特征在于,步骤(2)中所述冲洗采用灭菌水,冲洗次数为5-6次,且每次冲洗时间为4-5min。

7.根据权利要求1所述的蓝莓组织培养方法,其特征在于,步骤(3)中还包括将所述单茎段用无菌滤纸将其表面水分吸干。

8.根据权利要求1所述的蓝莓组织培养方法,其特征在于,所述初代培养基、增殖培养基和生根培养基中还含有蔗糖和琼脂,且每种培养基中所述蔗糖的浓度为28-32g/L,所述琼脂的浓度为6-7g/L。

9.根据权利要求1所述的蓝莓组织培养方法,其特征在于,步骤(4)在酒精灯周围进行。

10.根据权利要求1所述的蓝莓组织培养方法,其特征在于,所述初代培养的时间为30天以上,所述增殖培养的时间为30天以上。

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