本发明涉及一种三七花药愈伤组织的诱导培养基及其制备方法，属于植物离体培养试剂技术领域。
背景技术：
三七panaxnotoginseng(burk.)f.h.chen为五加科araliaceae人参属panaxlinn.多年生草本植物，是我国特有的名贵中药材，主产于云南文山。具有止血散淤、消肿止痛、补虚强壮等功效。三七用作日常保健具有悠久的历史，最早可追述到唐代。近年来由于三七在心脑血管方面的独特疗效越来越被人们所认可，需求量也越来越大。三七对生长生态环境具有特殊要求，其适宜栽培区域小。加之生长周期长、病虫害严重等问题，使得三七品种选育十分困难。
采用植物组织培养技术对其进行无性繁殖是保存和利用该物种资源的重要途径，且繁殖周期短、效率高。花药培养可产生来源于花粉的单倍体植株，在作物育种上具有重要价值。不仅纯合速度快，可选择效率高，而且可提高育种效率，克服远缘杂交不育，创造新种质等。每个植物都有其对应的诱导愈伤培养基，有些植物的诱导培养是激素种类以及配比的不同，有些甚至是基本培养基都不一样，迄今，有关三七花药的组织培养基研究未见报道。
技术实现要素：
为了克服现有技术的不足，本发明的第一个目的在于提供一种三七花药愈伤组织的诱导培养基，该诱导培养基针对三七花药的组织培养进行研究，改善了培养基中植物生长调节剂浓度配比，以较高的诱导率获得了花药愈伤组织。
本发明的第二个目的在于提供一种上述三七花药愈伤组织的诱导培养基的制备方法。
实现本发明的第一个目的可以通过采取如下技术方案达到：一种三七花药愈伤组织的诱导培养基，该诱导培养基包括按重量份计的以下有效成分：
进一步地，诱导培养基包括按重量份计的以下有效成分：
进一步地，所述大量元素包括按重量份计的以下成分：
进一步地，所述微量元素包括按重量份计的以下成分：
进一步地，所述钙盐为氯化钙。
进一步地，所述铁盐为edta螯合亚铁。
进一步地，所述有机组分包括按重量份计的以下成分：
实现本发明的第二个目的可以通过采取如下技术方案达到：一种三七花药愈伤组织的诱导培养基的制备方法，包括：
溶液预配步骤：分别配制大量元素溶液、微量元素溶液、钙盐溶液、铁盐溶液、有机组分溶液、2,4-d溶液和6-ba溶液；
混合步骤：将大量元素溶液、微量元素溶液、钙盐溶液、铁盐溶液、有机组分溶液、2,4-d溶液、6-ba溶液、蔗糖和琼脂混合并溶解，调节ph为5.4-5.8后定容，即得。
进一步地，混合步骤中，调节ph为5.6。
进一步地，得到的诱导培养基中的有效成分浓度为54-66g/l；所述有效成分为大量元素、微量元素、钙盐、铁盐、有机组分、2,4-d、6-ba和蔗糖。
相比现有技术，本发明的有益效果在于：
本发明的诱导培养基是针对三七花药的组织培养特点进行进一步的研究，改善了培养基中植物生长调节剂浓度配比，大大提高了三七花药愈伤组织的诱导率，本发明对三七花药愈伤组织的诱导率达到90％以上。
附图说明
图1为实施例2培养基用于组织培养30d愈伤组织生长情况；
图2为实施例2培养基用于组织培养90d愈伤组织生长情况。
具体实施方式
下面，结合具体实施方式，对本发明做进一步描述：
一种三七花药愈伤组织的诱导培养基，包括按重量份计的以下有效成分：
表格1三七花药愈伤组织的诱导培养基的有效成分
三七花药愈伤组织的诱导培养基的制备方法，包括：
溶液预配步骤：分别配制大量元素溶液、微量元素溶液、钙盐溶液、铁盐溶液、有机组分溶液、2,4-d溶液和6-ba溶液；
其中大量元素溶液中，硝酸钾的浓度为160-190g/l，硝酸铵的浓度为188-200g/l，硫酸镁的浓度为36-40g/l，磷酸二氢钾的浓度为16-20g/l；
其中微量元素溶液中，碘化钾的浓度为4-9g/l，硼酸的浓度为59-67g/l，硫酸锰的浓度为205-230g/l，硫酸锌的浓度为80-90g/l，钼酸钠的浓度为1.6-3g/l，硫酸铜的浓度为0.2-0.5g/l，氯化钴的浓度为0.2-0.5g/l；
其中钙盐溶液的浓度为30-35g/l；
其中铁盐溶液中，edta螯合亚铁的浓度为6-7g/l；以edta-2na(乙二胺四乙酸二钠)和硫酸亚铁混合得到铁盐溶液；
其中有机组分溶液中，肌醇的浓度为9.8-10.2g/l，烟酸的浓度为0.05-0.07g/l，盐酸吡哆醇的浓度为0.05-0.07g/l，维生素b1的浓度为5-12mg/l，甘氨酸的浓度为0.1-0.19g/l；
2,4-d溶液的浓度为0.05-0.16g/l，6-ba溶液的浓度为0.025-0.06g/l；
混合步骤：取大量元素溶液10ml、微量元素溶液1ml、钙盐溶液10ml、铁盐溶液10ml、有机组分溶液10ml、2,4-d溶液10ml、6-ba溶液10ml、蔗糖50-60g和琼脂5g混合并溶解，调节ph为5.6后定容至1l；
灭菌步骤：置于温度为121-125℃、压力0.10-0.12mpa条件下灭菌22-24min，最终得到的诱导培养基。
实施例1-3：
实施例1-3为配置1l的三七花药愈伤组织的诱导培养基，包括以下步骤：
溶液预配步骤：分别配制大量元素溶液、微量元素溶液、钙盐溶液、铁盐溶液、有机组分溶液、2,4-d溶液和6-ba溶液；各溶液中成分浓度如表格2所示；
表格2预配溶液中的成分浓度
混合步骤：取大量元素溶液10ml、微量元素溶液1ml、钙盐溶液10ml、铁盐溶液10ml、有机组分溶液10ml、2,4-d溶液10ml、6-ba溶液10ml、蔗糖55g和琼脂5g混合并溶解，调节ph为5.6后定容至1l；
灭菌步骤：置于温度为121-125℃、压力0.10-0.12mpa条件下灭菌22-24min，最终得到的诱导培养基。
所得到的培养基中，各成分浓度如表格3所示：
表格3培养基中的成分浓度
将实施例1-3的培养基分别用于组织培养，诱导三七花药得到愈伤组织，实施例1的诱导率为90.33％，实施例2的诱导率为92.03％，实施例3的诱导率为91.5％；3个实施例的诱导率均为90％以上。愈伤组织诱导情况如图1和2所示，图1为利用实施例2培养30d的愈伤组织生长情况，图2为利用实施例2培养90d的愈伤组织生长情况。
对于本领域的技术人员来说，可根据以上描述的技术方案以及构思，做出其它各种相应的改变以及变形，而所有的这些改变以及变形都应该属于本发明权利要求的保护范围之内。