酱油渣甘油酯在制备防治微型害虫或叶面真菌细菌病害制剂中的应用的制作方法

本发明涉及农药技术领域，具体涉及酱油渣甘油酯在制备防治微型害虫或叶面真菌细菌病害制剂中的应用。

背景技术：

对环境友好的油基农药，属于物理防治作用，病虫对其抗药性低，具有较好的应用前景。但真正要有市场竞争能力，要求农药的药效好且稳定、对作物无药害、使用简单且成本低廉。高品质的矿物油乳剂，因加工工艺水平高，对病虫的药效好且稳定，对作物伤害小，在高端农药市场上占有一席之地，但由于其属于不可再生原料，成本高昂，应用量有限。而目前的生物源油，虽然来源广泛(如地沟油、植物油、动物油等)，但其成分复杂，药效不稳定，且油中的有害成分太多，对作物的药害难以解决，且精细处理成本高，因此难以大面积推广应用。

酱油是我国传统的佐料，生产量巨大，而酱油渣是酱油发酵酿造产生的废弃物，其水分大、数量多，易发霉变臭，难以保存，处理不当会造成环境污染。

技术实现要素：

本发明的目的是提供酱油渣甘油酯在制备防治微型害虫或叶面真菌细菌病害农药制剂中的应用。

所述的酱油渣甘油酯主要成分为含c16-c22脂肪酸与甘油生成的甘油酯。

所述的酱油渣甘油酯的制备包括以下步骤：将酱油渣中抽提的油脂在温度为115～118℃、真空度为0.13kpa/1mmhg的条件下持续40min去除挥发性蒸馏成分后，待温度降至50～70℃时，加入1～2％(m/m)的专一性脂肪酶novozym40086和2～10％(m/m)的甘油量后持续反应，待酱油渣油脂酸价降到4mgkoh/g以下时，用孔径大小为100-200目的滤网分离出酱油渣甘油酯。

所述的微型害虫包括二斑叶螨、柑橘全爪螨、柑橘木虱或白纹伊蚊。

所述的叶面真菌细菌病害包括烟煤病。

本发明的另外一个目的是提供一种含酱油渣甘油酯的农药制剂，按质量分数计，包括酱油渣甘油酯94～95％、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯1.5～2％、聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯0.5％、无水乙醇1～2％、聚乙烯吡咯烷酮0.5％、黄原胶或海藻酸钠1％。

本发明的酱油渣甘油酯，主要成分为含c16-c22脂肪酸与甘油生成的甘油酯，对作物有害的成分显著减少，而对一些病虫的防治效果良好，将酱油渣甘油酯应用于农药产品的制备，具有良好的前景。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明以酱油渣甘油酯为主要成分，添加有效助剂制成的农药制剂，经试验处理发现，其对二斑叶螨、柑橘木虱、白纹伊蚊和柑橘全爪螨等微型昆虫，烟煤病等病害的防治效果与当前的矿物油乳剂相当，且在农作物上短期内多次施用后未显示药害。

(2)本发明提供的酱油渣甘油酯来源广泛，价格低廉，属于废物回收，利于环保，将其制成农药制剂，具有成分简单、稳定，安全性高，防虫防病效果好，对作物药害小的优点。且其主要成分和添加剂均为食品级，在环境中易降解，易于工业化标准化生产，与矿物油乳剂相比，成本低廉，具有较强的市场竞争能力。

附图说明

图1为本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂和清水处理防治二斑叶螨的效果对比。其中，a为清水处理后的叶片，叶片上的二斑叶螨一直在迅速活动；b为本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂处理后的叶片，叶片上的二斑叶螨基本死亡。

图2为本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂和清水处理防治柑橘木虱若虫的效果对比。其中，a为清水处理苗上的木虱若虫，b为本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂处理的死亡若虫。

图3为本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂和清水处理防治柑橘木虱成虫的效果对比。其中，a为清水处理苗上的木虱成虫，b为本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂处理的死亡成虫。

图4为本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂和清水处理煤烟病发病树的效果对比。其中，a为喷施本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂处理一周后的效果；b为喷施清水处理一周后的效果。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

实施例1

酱油渣甘油酯的制备，包括以下步骤：

将酱油渣中抽提的油脂在温度为115℃、真空度为0.13kpa/1mmhg的条件下持续40min去除挥发性蒸馏成分后，待温度降至50℃时，加入1％(m/m)的专一性脂肪酶novozym40086和5％(m/m)的甘油量后持续反应，待酱油渣油脂酸价降到4mgkoh/g以下时，用孔径大小为100目的滤网分离出酱油渣甘油酯。

含酱油渣甘油酯的农药制剂的制备：

(1)配方：按质量百分比计，含酱油渣甘油酯的农药制剂含有酱油渣甘油酯94％、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯2％、聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯0.5％、无水乙醇1％、聚乙烯吡咯烷酮0.5％、黄原胶1％。

(2)制备：以上述各成分按比例充分混和后，得到含酱油渣甘油酯的农药制剂。可以兑水60倍(体积比)，搅拌均匀备用。

实施例2

酱油渣中抽提的油酯，包括以下步骤：

将酱油渣中抽提的油脂在温度为118℃、真空度为0.13kpa/1mmhg的条件下持续40min去除挥发性蒸馏成分后，待温度降至70℃时，加入2％(m/m)的专一性脂肪酶novozym40086和10％(m/m)的甘油量后持续反应，待酱油渣油脂酸价降到4mgkoh/g以下时，用孔径大小为200目的滤网分离出酱油渣甘油酯。

含酱油渣甘油酯的农药制剂的制备：

(1)配方：按质量百分比计，含酱油渣甘油酯的农药制剂含有酱油渣甘油酯95％、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯1.5％、聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯0.5％、无水乙醇1％、聚乙烯吡咯烷酮0.5％、海藻酸钠1％。

(2)制备：以上述各成分按比例充分混和后，得到含酱油渣甘油酯的农药制剂。可以兑水60倍(体积比)，搅拌均匀备用。

实施例3

酱油渣甘油酯的制备，包括以下步骤：

将酱油渣中抽提的油脂在温度为116℃、真空度为0.13kpa/1mmhg的条件下持续40min去除挥发性蒸馏成分后，待温度降至60℃时，加入1.5％(m/m)的专一性脂肪酶novozym40086和2％(m/m)的甘油量后持续反应，待酱油渣油脂酸价降到4mgkoh/g以下时，用孔径大小为150目的滤网分离出酱油渣甘油酯。

含酱油渣甘油酯的农药制剂的制备：

(1)配方：按质量百分比计，含酱油渣甘油酯的农药制剂含有酱油渣甘油酯94％、聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯1.5％、聚氧乙烯山梨醇酐单硬脂酸酯0.5％、无水乙醇2％、聚乙烯吡咯烷酮0.5％、海藻酸钠1％。

(2)制备：以上述各成分按比例充分混和后，得到含酱油渣甘油酯的农药制剂。可以兑水60倍(体积比)，搅拌均匀备用。

试验例一、含酱油渣甘油酯的农药制剂对微型害虫的防治效果

1、试验材料：实施例1制得的含酱油渣甘油酯的农药制剂(兑水60倍(体积比)，搅拌均匀备用)；矿物油乳剂(将矿物油兑水60倍(体积比)，搅拌均匀，即得；其中矿物油由法国道达尔公司提供，产品名称为：希翠)；二斑叶螨、柑橘全爪螨、白纹伊蚊和柑橘木虱为室内繁殖种群，均饲养了3代或以上，未施用任何农药。

2、试验方法

(1)对二斑叶螨的防治：选取3棵二斑叶螨发生的龙葵，分别喷施兑水稀释的实施例1制得的含酱油渣甘油酯的农药制剂、兑水稀释的矿物油乳剂，以及清水作为对照。每个处理5个重复。24h观察二斑叶螨死亡率，及龙葵叶片的药害发生情况。

(2)对柑橘全爪螨的防治：选取3株柑橘全爪螨发生严重的柑橘苗，施药前调查全爪螨的初始种群数量，每株苗按四个方位进行调查，每个方位调查2-3片叶片，合计8-12片叶片，记录调查结果。之后3株苗分别喷施兑水稀释的实施例1制得的含酱油渣甘油酯的农药制剂、兑水稀释的矿物油乳剂，以及清水作为对照。一周后相同方法调查种群数量，并与喷药前调出数据进行对比分析。每个处理5个重复。

(3)对柑橘木虱的防治：选取2株有柑橘木虱若虫的柑橘苗，套入网笼内35cm×35cm×55cm，分别喷施兑水稀释的实施例1制得的含酱油渣甘油酯的农药制剂和清水(对照)，每个处理5个重复，24h观察网笼内木虱若虫的死亡情况。

(4)对白纹伊蚊的防治：选一网笼45cm×45cm×45cm，放入白纹伊蚊成蚊50头，手持喷雾器对网笼内均匀喷施兑水稀释的实施例1制得的含酱油渣甘油酯的农药制剂，清水为对照，24h后观察成蚊存活情况。每个处理4个重复。

3、试验结果

(1)对二斑叶螨的防治效果：本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对二斑叶螨的防治效果见表1和图1。由表1可以看出，本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂与矿物油乳剂比较，两者对二斑叶螨的平均致死率无显著差异，均达到95％以上；与清水处理比较，本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂或矿物油乳剂对二斑叶螨的平均致死率均具有极显著差异(p＜0.01)。由图1可知，清水处理后叶片上的二斑叶螨一直在迅速活动，而使用本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂处理后的叶片上的二斑叶螨基本死亡，由此可知，本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对二斑叶螨具有较佳的防治效果。

表1各药剂对二斑叶螨的防治效果

注：同列相同字母表示差异不显著(p＞0.05)。

(2)对柑橘全爪螨的防治效果：本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对柑橘全爪螨的防治效果见表2。由表2可知，本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对柑橘全爪螨成螨有非常好的防治效果，致死率高达97.50％，与矿物油的防治效果相当，无显著差异，但与清水处理比较，差异极显著。

表2各药剂对柑橘全爪螨成螨的防治效果

注：同列相同字母表示差异不显著(p＞0.05)。

(3)对柑橘木虱的防治效果：本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对柑橘木虱的防治效果见表3、图2和图3。由表3可知，本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对柑橘木虱若虫有非常好的防治效果，致死率高达99.47％，与清水处理比较，具有极显著差异(p＜0.01)。另，从图2也可以看出，经药剂处理的木虱若虫，致死效果非常好(图2a为清水处理苗上的木虱若虫，b为含酱油渣甘油酯的农药制剂处理的死亡若虫)。喷药过程中，会飞的成虫容易躲避药剂的触杀，但被药剂喷施到的成虫，也会立即死亡，见图3(a为清水处理后，苗上的木虱成虫，b为含酱油渣甘油酯的农药制剂喷施到的死亡成虫)。

由图2和图3可以看出清水处理后柑橘苗上的木虱成虫和若虫一直在迅速活动，而使用本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂处理后的柑橘苗上的木虱成虫和若虫大部分死亡，由此可知，本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对柑橘木虱具有较佳的防治效果。

表3各药剂对柑橘木虱若虫的防治效果

(4)对白纹伊蚊的防治效果：本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对白纹伊蚊的防治效果见表4。由表4可以看出，本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对白纹伊蚊具有较佳的防治效果，致死率高达98％，与清水处理比较，具有极显著差异(p＜0.01)。

表4各药剂对白纹伊蚊的防治效果

注：p为配对样本t检验中平均值检验显著值(双尾检测)。

试验例二、含酱油渣甘油酯的农药制剂对叶面真菌细菌病害的防治效果

1、试验材料：实施例1制得的含酱油渣甘油酯的农药制剂(兑水60倍(体积比)稀释)；矿物油乳剂(将矿物油兑水60倍(体积比)，搅拌均匀，即得；其中矿物油由法国道达尔公司提供，产品名称为：希翠)；煤烟病为柑橘煤烟病。

2、试验方法

选取煤烟病发生的柑橘树，分别喷施兑水稀释的实施例1制得的含酱油渣甘油酯的农药制剂、兑水稀释的矿物油乳剂，以及清水作为对照。每个处理5个重复。持续观察柑橘叶片的症状和药害发生情况。

3、试验结果

本发明提供的含酱油渣甘油酯的农药制剂对柑橘煤烟病的防治效果见图4。由图4可以看出，将本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂喷施煤烟病发生严重的柑橘苗，一周后，叶片上无明显煤烟病症状，且无药害产生，而使用清水喷施后，叶片上煤烟病症状无变化，表明本发明含酱油渣甘油酯的农药制剂对柑橘煤烟病具有较佳的防治效果。

以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。