一种虫草栽培的复合促进剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于农业种植技术领域，具体设及一种虫草快速高效栽培技术的栽培胚料 复合促进剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 蛹虫草又名北冬虫夏草，简称虫草，属于子囊菌纲肉座菌目麦角菌科虫草属。虫草 分为子座、菌丝体、子实体，其中子实体富含多种人体必需氨基酸、有益微量元素和维生素 等营养成分，W及腺巧、虫草素、虫草酸、虫草多糖、超氧化物歧化酶（SOD)等活性成分，具 有抗肿瘤、抗病原、抗氧化W及增强人体免疫力等多种药理功能，因此，开发利用虫草属真 菌资源具有十分重要的意义，其中子实体的人工栽培是虫草资源开发利用的重要途径。
[0003] 近年来，随着人们的生活水平的提高和对健康食品需求的增加，冬虫夏草日益受 到人们的喜爱，北虫草W其与天然冬虫夏草有相同的医疗营养保健功效，及可人工规模化 生产等优势，成为天然冬虫夏草的替代品，在医疗保健、食品、餐饮等行业得到广泛应用，北 虫草的人工培养在我国已获得成功并进入产业化阶段。
[0004] 毛霉（Mucor)是接合菌亚口接合菌纲毛霉目毛霉科真菌中的一个大属，一种好气 性、生长快、易培养、分布广、产复合酶的菌株，是我国酿造传统食品酱的菌种，在国内外发 酵生产腐乳、制豆鼓、酿酒等工业上的应用有历史悠久。毛霉也可生产蛋白酶、脂肪酶、果胶 酶、凝乳酶，糖化淀粉，产生草酸、乳酸、班巧酸及甘油等，在现代食品工业中应用广泛。 阳〇化]虫草的生长和发育需要高效的营养物质，目前采用大米为主要原料制作培养基， 虫草的产量受到了限制，虫草中的虫草素含量较低，并且栽培周期较长。中国专利申请号 201410079301. 8 "绿色北虫草产业化生产方法"公布了虫草产业化生产的方法和具体规 范；中国专利申请号201310192693. 4 "蚕蛹北冬虫夏草工厂化栽培技术"对虫草工业化生 产过程中的各项条件和设备要求进行了优化；中国专利申请号201310266374. 3 "-种广 东虫草子实体规模化栽培方法"公布了虫草菌种的选育方法和深层发酵菌种的方法；中国 专利申请号201310068907. 7 "-种人工培育的冬虫夏草快速栽培技术"对虫草菌种进行 了杂交和驯化冲国专利申请号200310119105. 0 "北冬虫夏草培养液"和中国专利申请号 201110263224. 8 "-种北虫草快速栽培技术"，通过添加碳源、氮源、无机物和部分维生素来 促进虫草的生长，W上对虫草栽培的发明只是从栽培条件、菌种选育和添加营养液来优化 虫草的生长，并没有使虫草的生长周期明显缩短，高效产业化，并提高其中虫草素的含量。
[0006] 综上，目前迫切需要一种高效简易的胚料复合促进剂，W缩短栽培周期，有效节省 时间，并提高经济效益，增加活性成分含量，使虫草的生产高效产业化。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的在于利用毛霉菌丝体破碎自溶液，加W肌醇、二十八烧醇、薦果Ξ糖 和葡萄糖酸铜进行复配，从而制备成一种适合虫草生长所需的胚料复合促进剂。运种胚料 复合促进剂可明显缩短虫草生长周期，提高出草率、增加单位体积内虫草的重量，并使其虫 草素含量显著增加，且加工方法简单，成本低廉，可广泛使用，增强企业经济效益。
[0008] 为了实现本发明的目的，发明人通过大量试验研究，最终获得了如下技术方案： 一种虫草生长复合促进剂，所述的胚料复合促进剂由微生物毛霉菌体破碎自溶液的浓 缩液与肌醇、二十八烧醇、低聚果糖和葡萄糖酸铜复配而成，所述的低聚果糖为1~3个果 糖基通过β(2-1)糖巧键与薦糖中的果糖基结合生成的薦果Ξ糖。
[0009] 一种虫草生长复合促进剂的制备方法，该方法包括如下步骤： (1) 在YPG液态培养基上培养毛霉，培养溫度为30~35°C，起始Ρ册.0~7. 0,转速为 150-20化/min,时间40~6化，分离得到毛霉菌丝体； (2) 将毛霉菌丝体在如下条件下破碎自溶得到破碎自溶液：菌丝重量与水体积比为 1:1~1:5 (m/v)，超声破碎条件每次30s~60s，间隔30s~60s，循环15~30次，菌丝破碎后在 30~35 °C，静置6~1化； (3) 向步骤（2)所得的毛霉破碎自溶液中加入二十八烧醇、肌醇、低聚果糖、葡萄糖酸铜 并混合均匀，得胚料复合促进剂。其中二十八烧醇按照与毛霉菌丝体破碎自溶液的质量体 积比0. 59?^2%添加，肌醇按照与毛霉菌丝体破碎自溶液的质量体积比19?^5%添加，低聚果糖 按照与毛霉菌丝体破碎自溶液的质量体积比0. 05%。~0. 2%。添加，葡萄糖酸铜按照与毛霉 菌丝体破碎自溶液的质量体积比0. 05%。~0. 1%。添加。
[0010] (4)将制备好的虫草生长胚料复合促进剂加入到原有的胚料中，灭菌，接种，培养 49天即可采收。
[0011] 优选地，如上所述虫草生长复合促进剂的制备方法，其中所述的毛霉为普雷恩毛 霉CICC3115。
[0012] 本发明人发现，毛霉菌丝在缺乏营养的条件下，菌丝体内部的各种酶系开始分解 细胞壁和生物大分子。超声加速细胞壁的破碎，胞内营养物质流出，同时在酶的作用下，胞 内蛋白质、核酸、多糖进一步水解。在破碎自溶过程中菌丝体释放出来的氨基酸、蛋白质、核 酸和糖类具有很高的营养价值。构成菌体主要成分的干物质中约有50%蛋白质、6%核酸、 16%的糖、11%的氨基酸、6%的脂质。毛霉菌丝破碎自溶出大量的酶，多肤、氨基酸、糖类等营 养物质和核酸等风味物质，另外毛霉在破碎自溶过程不仅溶出大量氨基酸、蛋白质、核酸、 糖类，还溶出草酸、乳酸、班巧酸及甘油等。
[0013] 二十八烧醇是一种天然存在的一元高级脂肪醇，是世界公认的抗疲劳功能性物 质。作为一种天然醇，二十八烧醇具有良好的生物降解性，易为动物体吸收及利用。肌醇广 泛分布在动物和植物体内，是动物、微生物的生长因子，广泛存在于食物中的一种物质，结 构类似于葡萄糖。低聚果糖是一种天然活性物质。甜度为薦糖的0.3-0. 6倍；既保持了薦 糖的纯正甜味性质，又比薦糖甜味清爽，具有调节肠道菌群，增殖双歧杆菌，促进巧的吸收， 调节血脂，免疫调节，抗離齿等保健功能的新型甜味剂，被誉为继抗生素时代后最具潜力的 新一代添加剂一促生物质；铜为胞内多种重要酶系的成分，并能够促进铁的吸收和利用，葡 萄糖酸铜作为有机物易被微生物所利用。
[0014] 与现有技术相比，本发明充分地利用了毛霉培养过程中产生的菌丝，对菌丝进行 破壁和自溶处理，获得胞内丰富的蛋白质、多肤、核酸、糖、脂质、有机酸、多元醇，经浓缩后 与肌醇、二十八烧醇、低聚果糖和葡萄糖酸铜，按照一定比例进行复配。在通常的虫草生长 所需的胚料中添加此复配剂，可W有效地促进虫草生长，缩短生长周期，提高出草率和虫草 素含量，增加企业的经济效益，且加工简单，成本较低廉，可广泛使用。
【具体实施方式】
[0015] W下结合实施例进一步对本发明进行说明，但本发明的内容不仅仅局限于下面的 实施例。各实施例中所采用的毛霉为普雷恩毛霉CICC3115,来自中国工业微生物菌种保藏 管理中屯、。
[0016] 实施例1: (1)将毛霉CICC3115抱子悬液接种在115°C灭菌15min的YPG液态培养基中，培养溫 度为30°C，起始抑6. 0,转速为15化/min,时间60h。
[0017] (2)毛霉培养结束后，过滤出菌丝体并清洗，然后对滤出菌丝进行冷冻超声破碎， 菌丝重量与水体积比（m/v)为1:5,超声破碎条件为每次30s，间隔60s，循环30次，菌丝破 碎后在35°C，静置化，得到破碎自溶液。
[0018] (3)向步骤（2)所得的毛霉破碎自溶液中加入二十八烧醇、肌醇、低聚果糖(为1~ 3个果糖基通过β(2-1)糖巧键与薦糖中的果糖基结合生成的薦果Ξ糖)、葡萄糖酸铜并 混合均匀，得胚料复合促进剂；其中二十八烧醇按照与毛霉菌丝体破碎自溶液的质量体积 比1%添加，肌醇按照与毛霉菌丝体破碎自溶液的质量体积比1. 5%添加，低聚果糖按照与毛 霉菌丝体破碎自溶液的质量体积比0. 05%。添加，葡萄糖酸铜按照与毛霉菌丝体破碎自溶液 的质量体积比0. 06%。添加。
[0019] (4)将制备好的虫草生长胚料复合促进剂加入到原有的胚料中混拌均匀，灭菌，接 种，培养49天即可采收。
[0020] 实施例2: (1)将毛霉CICC3115抱子悬液接种在115°C灭菌15min的YPG液态培养基中，培养溫 度为30°C，起始抑6. 0,转速为15化/min,时间60h。
[0021] (2)毛霉培养结束后，过滤出菌丝体并清洗。然后对滤出菌丝进行冷冻超声破碎， 菌丝重量与水体积比（m/v)为1:4,超声破碎条件为每次30s，间隔60s，循环30次，菌丝破 碎后在35°C，静置化，得到破碎自溶液。
[0022] (3 )向步骤（2 )所得的毛霉破碎自溶液中加入