专利名称：介孔纳米粉体羟基磷灰石的微生物催化合成方法
介孑lift微体羟基磷灰石的微生物催化合成方法駄领域本发明涉及一种介孑li内，体羟基磷灰石(HAp)的微生物催化合成方法。 背景駄近年来，关于纳米羟基磷灰石的制备方法的报导很多，主要有干齢成和湿齢成。而实验 室合成方法中 泛的是湿^"成，主要包括沉淀法、溶胶; 法、7jC热反应法、■,。但是现有方法制备的颗粒团聚严重，活性低，制备工艺鋭且成本高，应用效果糖，难于推广应用。HAP超细粉体的合成方法巳在国际上取得了一些进展，但多数方法还处于实验室阶段，如何选軒同的制备斜牛，控制HAp粉体的形态和粒径,进行大批量生产，以满足生物医学对羟M灰石超细粉体的需求，仍是一个需要大穀斗学工作者努力的方向。纳米结构与功能关系的研究是纳米生物技术的基础和依托核心，以复杂介孔结构纳米微粒作为抗癌药物和基因转移载体，比表面积大、生物活性高、表面活性中心多，可以进行纳米组装复 合，離癌药物、DNA和RNA難因治疗針键在纳米颗粒的介孔之中或吸附在其表面，可以 调节控制释药鹏、增加生物膜的舰性、改变在体内的分布，提高生物禾佣度、难溶药物的溶 解率、吸收率和药物疗效。研究表明，以微生物活体细胞为反应器，合成的介 LHAp/prctein纳米 复锁体药物载体具有开放的生物骨架螺旋结构和蠕虫状狭缝 Ut有棘孔结构，介 L L径分布 范围宽240nm,HAp的颗粒平均尺寸为5-20nm，蛋白质含量高恐0.85%，不需要除去模板，颗粒表 面带正电荷，會旨魏紫红荧光，具有S^光性能和较强的il7K性，并具有良好的细胞亲和性、生 物,性和生物相容性，易于在其表面耦微寺异性的靶向分子，实现基因治疗的特异性，M成 分控制和结构设计及结晶度的控制调节，生物(W的速率可以控制，并可,孕M体细胞正常代 谢物质，无毒副作用。应用微生物技术研究开发新型纳米无机载^W才料，,、割戈传统化学制 备技术，加快医用纳米生物材料产品的产业化是当代医用生t/t才料工业的一个重要发展方向。 模拟生物矿化也是近几年最前沿的研究领域，微生物催化绿色合成新技术是以微生物学和纳
米^相结合*^^合成纳米生物材料的新兴 学科，Nature和Science ^顶级国际期刊上近 年，续i^tmm。微生物是地球生物中最具多样性和最具皿能力的生物形式，微生物活体细 胞本身具有特殊精美的纳米网状结构和组装方式，由于微生物活体细胞的细胞壁、细胞间隙和细胞导管内有各种亲水介质存在，如细胞膜亲7jC表面、细胞壁纤维素多糖羟基体系及各种糖蛋白亲 水基团，均可诱导许多人体所需或能够代谢的无机元素(如磷、韩、硅、铁、锌、镁、锰、钛、 锶、硒、铜等)，在微生物活体细MJ^a行生物矿化，自组装形赂种复杂纳米结构体，M3l3fe择 不同微生物细胞结构和培养条件能精确调控无机物的纳米结构形态，利用微生物细M上关键酶 的高效催化反应，可在常温常压下用无机物来复制刻录微生物细胞的精美纳米结构，生物对无机 晶体的成核、形貌及结晶学定向等具有较好的控制。由于微生物细胞结构形貌的多样性、传代生 长速度快、培养可控性、生产成本低，微生物细胞上有许多纳米微孔和生物性质的表面功能区域 (亲脂性)，易进行基因突变、克隆重组及高效親，并易与药物鹏因结合，是合成有应用价值 的无机介 li^ltl立药物载体有效的模板剂。微生物催化雜合成新技术为发展高效、安全、无毒 的新型纳米无机载術才料掛共了新的途径，它不但可以衝共大量廉价的纳米材料合成的模板剂， 革新纳^+才料合成的传统工艺，合成目前不能生产的，^ffl化学法生产较困难的，性能优异的新 型纳米结构材料；而且反应剝牛温和易控制，工艺简单，多为常温、常压、低會辦、专一性强、 选择'断、重复 、效率高；生产成本低，产品质量高；无环境污染；投资较小易产业化。 发明内容为了解决现有财存在的战问题，本发明衝共一种介 lifi微ffi^繊灰石(HAp)的微 生物催化合成方法，以较低的成本制得高生物活性的介 LHAp纳米微粉。本发明的介 lifl^m体HAp的微生物催化合成力法步骤如下 (1)在100-200m7jC中加A20-50g/L天然微生物表面活性剂及糖助齐U30-60g/L，室温搅拌20-50 射中，然后妇5-35°0培养0.5-1小时，形成发酵乳化、m;(2) 在步骤(1)得到的发辭L化、赢中加入0.3-0.6moI/L含钙无机盐溶液40-80ml，常温下搅 #0.5-1个小时后，得到溶^B;(3) 在步骤(2)得到的溶細中按10-20滴/^H中的速度在室温下滴加03-0.6mol/L含磷无机盐
溶液，并使钙磷的摩尔比为1.6-1.8，调节pH为9-12，搅御.5-111，得到乳浊液C;
(4) 将步骤(3)得到的乳浊液C静置15-20h，得到乳浊柳，以5000-10000转/分离心3-10分 钟，得到的沉淀物水啦-3次^7K乙麟l-2次；或者将离心得到的分离液按步骤(2) _ (4)操作;
(5) 将步骤(4)得到的沉淀物在70-9(TCTi敷0-30h,顆每其以《10。C/iHt的速度升温到 600-800°C，保温14h后，得到介 li内米羟基磷灰石粉体。
所述的微生物表面活性剂是糖脂系、磷脂系、月旨肪,表面活性剂中的一种或多种。 糊旨系微生物表面活性剂为鼠李糖脂、海藻糖脂、槐糖脂之一，槐糖脂是球丝酵母或假丝酵 母在葡萄糖和正构烷烃或长御旨肪酸中培养时产生的。
磷脂系微生物表面活性剂为卵磷脂或磷脂酶，卿旨酶是由硫磺细菌发辭咅养的。 月旨肪麟微生物表面活性剂为覆盖霉菌酸或青霉孢子酸。
皿含转无机盐为硫酸朽、氯酸钙、硝酸钙、拧檬酸钙、氢氧化转、氧化转、碳酸钙中的一 种或多种。
所述含磷无机盐为磷酸二氢铵、磷酸、磷酸钠、偏磷酸钠、六偏磷酸钠中的一种或多种。 采用本发明方法，关键技术是在细胞培养、矿化时间、细胞破碎和除去微生物模板时，所形 成的介孔结构的塌陷，反应物浓度越高，介 LM厚，反之亦然。除去生ttf莫板的热处理升温速 鹏控制在《l(TC/min。另外，生物表面活性剂的种类和用量，对介孔结构的形成和孔的尺寸微 有重要的影响。
与现有技糊比，本发明方法的优良效果就在于4細廉价的天然微生物表面活性剂，利用微 生物的纳米多层泡囊结构、细鹏上关键酶的催化作用和矿化沉积过程，在温初的餅下合成介 孑LHAp纳米微粉，颗粒为蛋白质的螺旋结构，有序蠕虫状狭缝孑Lit的孔径分布为240nm,HAp的颗 粒平均尺寸为5-20nm,结晶度为3n/。左右，晶格畸变量为6.8xl0、nm)， BET高于100m2/g， 70(TC煅烧 2"4小时后仍就可以得到粒径为25-100nm范围的HAp颗粒，结晶度为12%左右，晶格畸变量为 4.3xlO"Vn)，无论是低温还是高温制备的HAp颗粒上都有结构孔，但7(KTC煅烧后有序介孔塌陷，
使孔径变大。微生物绿色催化合成方法制备的介 湖^er分体羟M灰石具有开放的生物骨架结构，
对人体无有害成分，颗粒表面带正电，具有左旋光性能和较强的疏水性及生物亲和性，并能发射
紫红荧光，活性高，希恪工艺简单，无需排除有机摸板，成本低，无污染，赫约为其他方法的
50%以下。
图l是实施例2中得到的介 LHAp纳微條品的謝线衍射图谱。 節是实施例2中得到的介 LHAp纳微储品的 L径分布曲线和吸附平衡等温曲线。 節是实施例2中得到的介 LHAp纳微储品的高^M电子显微镜照片(a.)、晶格条纹像(b) 和HAp/protein纳米复合颗粒的形成示意图(c)。
图4是实施例2中得到的介 LHAp纳微,品的原子力显微镜照片。
郞是实施例2中得到的介子LHAp纳微储品的翻电子显微镜照片和电子衍射照片。
图6是实施例2中得到的介 LHAp纳微储品的紫外吸收光谱图。
下面结合附图和实施例对本发明作进一步地详细说明，但是本发明要求保护的范围并不局限 于实施例,的范围。
实施例l:将150ml的25g/L的糖脂系生物表面活性剂槐糖脂球丝酵母7jC溶液在室温下加糖助剂 6g，室温搅拌20倂中，25'C乳化培养50辦中，得到发麟L化船，然后，将50ml的0.5mol/L的CaCb 溶働倒乳化淑中，继繊力搅拌30倂中，让Ca2+能充分的吸附在微生物细胞的纳米泡囊结构中。 以^H中10滴繊缓慢滴加0.5mol/L磷酸溶液，并使Ca/P(摩尔比H.67，用5mol/L的NaOH溶液调 节pH-10，继续磁力搅荆.5h让细胞结构部分矿化沉积，然后静S20b以5000转/分高速离心5分钟， 水洗两次im—次，除去C1' 、 Na+和H20。最后将沉淀物在千燥箱中70'C烘干20h后，得到介孔 HAp/protein纳米复，##品，其颗粒尺寸为18-37nm,其介孔尺寸为2-50nm, BET大于100m2/g。 以3'C/min的升鹏度，在60(TC热处理3h得到介孑LHAp纳M储品，其颗粒尺寸为36-70nm ， 孔尺寸为12-90nm， BE，6m2/g0
实施例2:将150ml的50g/L的糖脂系生物表面活性剂鼠李糖脂水溶液在室温下加糖助剂4.5g， 室温搅拌50射中，35'C乳化培养30辦中，得到发辭L化、^A，然后将1.65gCa(OH)2粉体加到乳化液 A中，继繊力搅拌50溯，让Ca、统分的吸附在微生物细胞的纳米泡囊结构中。以每射中20滴速度缓慢滴加0.3mol/L磷酸二氢铵溶液，并使Ca/P(摩尔比"1.67，继，力搅拌lh^让细胞结构部 分矿化沉积，然后静置15h以5000转/分的速度离心3分钟，7jC船次齢fe2次，除去0H"禾PNH4+以及 H20。最后将沉淀物在千燥箱中80。C烘干24h后，得到介 LHAp/protein纳米复锁鹏品，其颗粒 尺寸为10-17nm,其介孑L尺寸为240nm， BET大于100m2/g。以5'C/min的升温速度，在700'C热处 您h得到介 LHAp纳^H^品，其颗粒尺寸为1640nm，介孔孔尺寸为840nm, BET高于86m2/g。 图l是实施例2中8(rC烘干24小时后和煅烧到700'C后，样品的X射线衍射图谱，纵坐标为衍射 强度，横坐标为衍射角，样品煅烧前后的广角衍射峰与均与标准的羟M灰5HAp (JCPDS No.09432) —致，并且衍射峰都有不同程度的宽化现象，表明 前后的样品都有纳米尺寸效应， 由(002)晶面计算的没有煅烧样品的结晶度为3%，晶粒尺寸为10.9^,晶格畸变量为6.8xl0^nm; 700卩煅烧后样品的结晶度为12%，晶粒尺寸为17.2nm，晶格畸变量为43xl(rtim;煅烧前样品的 小角衍射图妇0=1.31°出现了强衍射峰，表明样品含棘靴孔结构，其有积1^径为6.7411111， {鹏 烧后的样品没有出现小角衍射峰，表明有序介 L结构在煅烧过程中已经塌陷。
图2是实施例2中80'C烘干24小时后和70(TC煅您小时后，样品的孔径分布曲线和吸附平衡等 温曲线。煅烧前样品呈现IV型吸附平,温线和H4迟滞环，表明样品具有皿和尺寸均匀的狭缝 状介孔 L3t (见原子力显微镜图4) ， BJH L径分布妇40nm范围。煅烧后样品呈5则型吸附平衡 等温线,没有出现迟滞环，表明样品在煅烧过程中有靴孔 Ut结构己经塌陷，介孔孔体积明显降 低，BJH介孑L孔径分布在840nm范围，由于蛋白质摸板的排除而出现了大孔结构(〉50nm)。
節是实施例2中8(TC烘干24小时后介孑LHAp/prctein纳米复合粉体样品的高分辨电子显微镜 照片(a)、晶格条纹像(b)和HAp/protein纳米复合颗粒的形成示意图(c)。图3 (a)呈现出蛋白质 的二级左螺旋纳米骨架结构，并且在颗粒上呈现出HAp (211)晶面的晶格条纹像，(211)晶面 的晶面间距为0,281nm，其旋转角为7()0 (见图3b)，这表明HAp沉积在了蛋白质的表面上并复制 了蛋白质的二,螺旋纳米结构(见图3c)。
图4是实施例2中8(TC烘干24小时后介 LHAp/protein纳米复合粉條品的原子力显微镜照片， 图中显示出样品的表面纳米结构呈现开放生物骨架螺旋结构和蠕虫状狭缝孔道有序介孔结构，这 也进一步证明了HAp对蛋白质的二级纳米结构进行了复制刻录
图5是实施例2中80'C烘干24小时后和70(TC煅傲小时后，样品的翻电子显微镜照片和电子 衍射照片(图中左上角)，'m前样品平均颗粒尺寸为16.8nm，较大的颗粒上可见到结构孔，其 电子衍射图呈鹏内米级晶粒的衍射环。70(TC煅烧后样品的晶粒长大，平均晶粒尺寸变为31.21!111， 但其电子衍射图仍然呈现纳米级晶粒的衍射环。图6是实施例2中80'C烘干24小时后和70(TC纟鹏小时后，样品的紫外吸收光谱图。在图6a中 纯的微生物表面活性剂的蛋白质含量为45.99(wt0/。)，波长妇60nm为DNA的特征吸收峰，妇80nm 为蛋白质的特征吸收峰。在图6b中8(TC烘干24小时后介 LHAp/protein纳米复，体的蛋白质含量 为30.85(wt0/。)，波长在260nm为DNA的特征吸收峰，在280nm为蛋白质的特征吸收峰，并且在 200-250nm波长范围内出现了HAp的两个吸收峰。在700'C煅傲小时后的样品的紫外吸收光谱图 (图6c)中，DNA和蛋白质的特征吸收峰都消失，蛋白质含量为00.00(wt"/。)，.表明微生鹏板已 经完全被排除掉，得到纯介 LHAp纳皿体。实施例3:将150ml的20g/L的糖脂系生物表面活性齐嗨藻糖脂7jC溶液在室温下加糖助剂9g搅 拌、室温搅拌30射中，20。C乳化培养l小时，得到乳化赢，再)^40ml的0.6mol/L的Ca (N03) 2溶 液加到乳化m中，继繊力搅拌l小时，让C^+能充分的吸附在微生物细胞的纳米泡囊结构中。 以^H中15滴舰缓漫滴加0.6mol/L磷酸钠溶液，并使Ca/P(摩尔比;H.8，用5mol/L的NaOH溶液调 节pH-12，继繊力搅淋5颁,让细胞结构部分矿化沉积，然后静置181^高速离心分离(5000转/分， IO射中)，7K洗两次,一次，除去N03-禾附a+以^H20。最后将沉淀鹏干燥箱中90。C烘干30h后， 得到介孑LHAp/protein纳米复锁体样品，其颗粒尺寸为25-37nm，其介孔尺寸为2-50nm， BET大 于9(W/g。。以9'C/min的升鹏度，在80(TC热处理1.5h^得到介孑LHAp纳M解品，其颗粒尺 寸为56-79nm ，孑L尺寸为6-80nm， BET高达76m2/g。实施例4:将150ml的25g/L的糖脂系生物表面活性剂卵磷脂在室温下加糖助齐U6g，室温搅拌20 辦中，25'C乳化培养50辦中，得到发辭L化、)tA,然后，将60ml的0.3mol/L的CaS04溶液加到乳化 ^A中，继续磁力搅拌30餅，让Ca2+能充分的吸附在微生物细胞的纳米泡囊结构中。以鄉中IO 滴速度缓慢滴加0.3mol/L偏磷,溶液，并使Ca/P(摩尔比^1.67，用511101/1的^011溶液调1^11= 10，继续磁力搅荆.5h让细胞结构部分矿化沉积，然后静置20h^000转/分离心5射中，水洗两次醇
洗一次，除去SO厶Na+和H20。最后将沉淀物在千燥箱中7(TC烘干20h后。升M3I度为10'C/mi^热 处理温度为750。C。煅烧前介孑LHAp/protein纳米复合粉体样品，其颗粒尺寸为18-37nm，其介孔尺 寸为2-50nm， BET大于100m2/g。煅烧后介孑LHAp纳M,品，其颗粒尺寸为46^90nm，孑L尺寸 为22-90nm， BET高达77m2/g。实施例5:将150!!11的50^的糖脂系生物表面活性剂磷脂酶在室温下加糖助剂4.58，室温搅拌 50併中，35'C乳化培养30^H中，得到发酵乳化^，然后将70ml的0.4mol/L的拧檬酸钙溶働口到乳 化、赢中，继繊力搅拌50^H中，让Ca2+能充分的吸附在微生物细胞的纳米泡奪结构中。以每倂中 20滴鹏缓漫滴加0.4mol/L六偏磷酸钠溶敝4ml，并使Ca/P(摩尔比户1.6，用5mol/L的NaOH溶液调 节pH4，继纟繊力搅拌化让细胞结构部分矿化沉积，静置15h以10000转/分的速度离心3^Ht， 水啦次,次，除去Na+、 ^t酸根离子以及H20。最后将沉淀t/^干燥箱中80。C烘干24h后， 得到介孑LHAp/protein纳米复，体样品，升温速度为10。C/mi^热处理温度为750。C。煅烧前介孔 HAp/protein纳米复^###品，其颗粒尺寸为18-35nm，其介孔尺寸为2-60nm， BET大于100m2/g。 煅烧后介孑LHAp纳微储品，其颗粒尺寸为29-65nm ，孔尺寸为26-85nm， BET高达89m2/g。实施例6:将100ml的50g/L的糖脂系生物表面活性剂霉菌^7K溶液在室温下加糖助剂3g，室温 搅拌50，， 35"C孚L化培养30辦中，得到发酉转L化狼，然后将80ml的0.4mol/i:的CaO溶液加到乳 化、g中，继续磁力搅拌50，，让Ca"能充分的吸附在微生物细胞的纳米泡囊结构中。以每射中 20滴鹏缓厦滴加0.4mol/L磷酸二氢铵和磷酸钠溶淑4m1,并使Ca/P(摩尔比戶1.8，用5mol/L的 NaOH溶液调节pH,,继续磁力搅拌lh让细胞结构部分矿化沉积，然后静置15h,以5000转/分的速 度离心3射中，7K舶次1I^2次，除去Na+、 OH-禾UNH4+以^SH20。最后将沉淀物在干燥箱中8(TC烘 干24h后，得到介 LHAp/protein纳米复合粉体样品，以5'C/min的升M3l度，在70(TC热处a^得 到介孑LHAp纳^iH^品，其颗粒尺寸为26"40nm，介孔孔尺寸为18-70nm， BET高于76m2/g。实施例7:将200ml的50g/L的糖脂系生物表面活性剂青霉孢子M7K溶液在室温下加糖助剂6g, 室温搅拌50射中，35'C孚L化培养30辦中，得到发酵乳化m，然后将1.76g的CaC03粉体加到乳化液 A中，继纟繊力搅拌50辦中，让C +能充分的吸附在微生物细胞的纳米泡囊结构中。以20滴/她 度滴加0.4mol/L磷酸二氢铵、磷酸和磷酸钠的混合溶淑4ml，并使Ca/P(摩尔比)^.66，用5mol/L的 NaOH溶液调节pH,,继续磁力搅拌11^让细胞结构部分矿化沉积，然后静置15比以6000转/分的速 度离心5iHt, 7K齠次^t2次，除去C(V 、 Na+、 OH"WV以^H20。将分离液中加入1.76g的 CaC03粉体，继续磁力搅拌50射中，让Ca2+能充分的吸附在微生物细胞的纳米泡囊结构中。以20 滴/^IS滴加0.4mol/L磷酸二氢铵、磷酸和磷酸钠的混合溶敝4ml，并使Ca/P(摩尔比^1.6，用 5mol/L^NaOH溶液调节pH-9，磁力搅拌lh，让细胞结构部分矿化沉积，静置15辻以5000转/分的 鹏离心3颁，7jC妇次醇淑次，再次除去OH"禾PNH4+以^H20。最后将沉淀物在千燥箱中80。C 烘干24h后，得到介 LHAp/protein纳米复合粉体样品，以5"/min的升,度，在700'C热处S2h^ 得到介孑LHAp纳^m,品，其颗粒尺寸为36-50nm，介孔孔尺寸为18-60nm，. BET高于69m2/g。实施例8:将200ml的50g/L的表面活性剂霉菌酸和卵磷月旨的7K溶液在室温下加糖助齐ij6g，室温 搅拌50併中，35'C孚L化培养30^H中，得到发辭L化^A，然后将30ml的0.4mol/L的CaCl2溶液和1.08g 的Ca(OH)2粉体加到乳化^A中，继续磁力搅拌50射中，让C +能充分的吸附在微生物细胞的纳米 泡囊结构中。以^H校0滴速度缓漫滴加0.4mol/L六偏磷酸钠溶慰4ml，并使Ca/P(摩尔比)^.6, 继续磁力搅拌lh让细胞结构部分矿化沉积，然后静置15h以5000转/分的速度离心3辦巾，水、舶 次,次，除去OIT、 CI— 、 Na+以及H20。最后将沉淀物在千燥箱中8CTC烘干24h后，得到介孔 HAp/protein纳米复，,品，以5'C/min的升温速度，在70(rC热处S2h得到介孑LHAp纳， ##品，其颗粒尺寸为16-50nm，介孔孔尺寸为9-70nm， BET高于73m2/g。实施例9:将150ml的50g/L的表面活性剂鼠李糖脂、磷脂和霉菌斷]0溶液在室温下加糖助剂 5.5g，室温搅拌50射中，35'C乳化培养30分钟，得到发辭L化液A，然后将20ml的0.4mol/L的CaO 和20ml的0.4mol/L的CaSO4溶液及1.08g的Ca(OH)2粉体加到乳化躯中，继续磁力搅拌50分钟， 让Ca2+能充分的吸附在微生物细胞的纳米泡囊结构中。以每^Ht20滴速度缓侵滴加0.4mol/L磷酸二 氣铵、六偏磷酸钠和磷酸钠的混合溶液44ml，并使Ca/P(摩尔比"1.6，用5mol/L^!NaOH溶液调节 pH=9，继乡繊力搅拌lh让细胞结构部分矿化沉积，静置15h,以5000转/分的速度离心3併中，水洗 3次醇、啦次，除去OH" 、 Na+、 S(V禾DNH4+以朋20。最后将沉淀物在千燥箱中80。C烘干24h后， 得到介子LHAp/protein纳米复^体样品，以5'C/min的升温速度，在700'C热处S2b得到介孔 HAp纳，Wf品，其颗粒尺寸为19-59nm，介孔孔尺寸为6-610nm， BET高于74m2/g。
权利要求
1.一种介孔纳米粉体羟基磷灰石的微生物催化合成方法，其特征在于包括如下步骤(1)在100-200ml水中加入20-50g/L天然微生物表面活性剂以及糖助剂30-60g/L，搅拌20-50分钟，然后在25-35℃培养0.5-1小时，形成发酵乳化液A；(2)在步骤(1)得到的发酵乳化液A中加入0.3-0.6mol/L含钙无机盐溶液40-80ml，搅拌0.5-1个小时后，得到溶液B；(3)在步骤(2)得到的溶液B中按10-20滴/分钟的速度滴加0.3-0.6mol/L含磷无机盐溶液，并使钙与磷的摩尔比为1.6-1.8，调节pH为9-12，搅拌0.5-1h，得到乳浊液C；(4)将步骤(3)得到的乳浊液C静置15-20h，得到乳浊液D，以5000-10000转/分离心3-10分钟，得到的沉淀物水洗2-3次，无水乙醇洗1-2次；或者将离心得到的分离液再按步骤(2)-(4)操作；(5)将步骤(4)得到的沉淀物在70-90℃干燥20-30h，再将其以≤10℃/分钟的速度升温到600-800℃，保温1-4h后，得到介孔纳米羟基磷灰石粉体。
2. 根据权利要求l臓的合成方法，其特征在于臓的微生物表面活性剂是糖脂系、磷脂系、 脂肪麟表面活性剂中的一种或多种。
3. 根据权利要^2,的合成方法，其特征在于戶，糖脂系微生物表面活性剂为鼠李糖脂、 海藻糖脂或槐糖脂。
4. 根据权利要救戶腿的合成方法，其特征在于戶腐磷脂系微生物表面活铢剂为卵磷脂或磷 脂酶。
5. 根据权利要彩臓的合成方法，其特征在于戶;M脂肪縣微生物表面活性剂为覆盖霉菌酸或青霉孢子酸。
6.淑据权禾頓求1戶脱的合成方法，其特征在于臓含转无机盐为硫,、氯酸钙、硝酸鈣、 柠檬酸钙、氢氧化钙、氧化钙、碳酸钙中的一种或多种。
7.根据权利要求1戶脱的合成方法，其特征在于戶诚含紙机盐为磷酸二氢铵、磷酸、磷酸钠、 偏磷酸钠、六偏磷酸钠中的一种或多种。
全文摘要
本发明涉及一种介孔纳米粉体羟基磷灰石的微生物催化合成方法，在水中加入天然微生物表面活性剂及糖助剂，搅拌，培养形成发酵乳化液；再加入含钙无机盐溶液，搅拌后滴加含磷无机盐溶液，并使钙与磷的摩尔比为1.6-1.8，调节pH为9-12，搅拌、静置、离心，将离心得到的沉淀物水洗醇洗；或者将离心得到的分离液按前述步骤重复操作一次；将得到的沉淀物干燥，升温，保温后得到介孔纳米羟基磷灰石粉体。本发明的合成方法工艺简单、成本低、无污染，所制备的纳米复合粉体样品具有开放的生物骨架螺旋结构和蠕虫状狭缝孔道有序介孔结构，不需要除去模板，颗粒表面带正电荷，具有左旋光性能和较强的疏水性及生物细胞亲和性，无毒副作用。
文档编号C12P3/00GK101153288SQ20071003065
公开日2008年4月2日 申请日期2007年9月29日 优先权日2007年9月29日
发明者文 何, 尹诗衡, 王迎军, 郑华德, 陈晓峰, 陈景帝, 坤 魏 申请人:华南理工大学