专利名称：一种与抗虫相关蛋白及其编码基因与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种与抗虫相关蛋白及其编码基因与应用。
背景技术：
当前在世界范围内，由于昆虫侵害对农作物造成的产量损失是非常巨大的。传统 上控制昆虫侵害最普遍采用的途径是大量施用化学杀虫剂。化学杀虫剂的使用在取得了一 定经济效益的同时，也带来了农药残毒、环境污染、生态破坏、害虫抗药性和再猖獗等严重 问题。为适应农业可持续发展、环境保护和人类安全的需要，大力加强农业生物性灾害的可 持续控制研究，是人类共同面临的问题，也是该领域科学研究面临的严峻挑战。因此，研究 和利用植物的自身抗性基因从而有效控制农业虫害成为人类孜孜以求的目标。在长期的进化过程中，植物为了抵抗来自昆虫的捕食，建立起了复杂多样的抗性 反应机制。而植物激素茉莉酸在调控植物对昆虫侵害、病原物入侵及机械伤害等生物性和 非生物性胁迫的防御性反应中起重要作用。茉莉酸在调控植物对病虫抗性方面的作用发现 于上世纪90年代初，此后人们经过十多年的努力，在模式植物拟南芥和番茄中研究茉莉酸 的生物合成和信号转导方面都取得了重要进展。目前人们认识到的茉莉酸信号途径包括3 个在拟南芥和番茄中都保守的重要信号转导元件C0I1，JAZ蛋白和转录因子MYC2。C0I1编 码一个F-box蛋白，在体内形成SCFam泛素连接酶复合体，最近的研究表明COIl是活性茉 莉酸(JA-Ile)的受体。遗传和生化证据表明JAZ家族蛋白是SCFam泛素连接酶复合体的 底物，在茉莉酸诱导的基因表达中起到抑制因子的作用。茉莉酸诱导的基因表达受到MYC2 和其它转录因子的调控。在正常情况下，JAZ蛋白抑制MYC2的转录激活活性，茉莉酸信号 途径处于关闭状态；而在病原菌或昆虫侵害的情况下，活性茉莉酸促进COIl和JAZ蛋白的 相互作用并把后者降解，进而释放MYC2的功能而诱导相关基因的表达。
发明内容
本发明的目的是提供一种与植物抗虫相关的蛋白及其编码基因。本发明所提供的与植物抗虫相关的蛋白的编码基因，名称为S1NAC072，来源于番 前属番前(Solanum lycopersicon)。本发明所提供的与植物抗虫相关的蛋白是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋 白DSEQ ID NO 2所示的蛋白质；2)将SEQ ID NO :2所示的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/ 或缺失和/或添加且与植物抗虫性相关的由1)衍生的蛋白质。本发明所提供的与植物抗虫相关的蛋白的编码基因是如下1)-4)中任一所述的 基因1) SEQ ID NO 1 所示的 DNA 分子；2) SEQ ID NO 1中第28-1077位核苷酸所示的DNA分子；
3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA分子杂交的DNA分子；4)与1)或2)限定的DNA分子具有90%以上的同源性且编码所述蛋白的基因。所述严格条件为用0. IXSSPE(或0. 1XSSC)，0. IXSDS的溶液，在65°C下杂交 并洗膜。为了使蛋白S1NAC072便于纯化，可在SEQ ID NO :2所示的氨基酸序列组成的蛋白 质的氨基末端或羧基末端连接上如表1所示的标签。表1.标签的序列
权利要求
1.一种蛋白，是如下1)或幻的蛋白质1)由SEQID NO :2所示氨基酸序列组成的蛋白质；2)将SEQID NO :2所示的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或 缺失和/或添加且与植物抗虫性相关的由1)衍生的蛋白质。
2.权利要求1所述的蛋白的编码基因。
3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于所述编码基因为如下1)-4)中任一 所述1)SEQ ID NO 1所示的DNA分子；2)SEQ ID NO 1中第观-1077位核苷酸所示的DNA分子；3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA分子杂交的DNA分子；4)与1)或2)限定的DNA分子具有90%以上的同源性且编码所述蛋白的基因。
4.含有权利要求2或3所述编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于所述重组载体为在 PCAMBIA2300-35S-0CS的多克隆位点间插入权利要求2或3所述编码基因得到的重组表达 载体。
6.扩增权利要求2或3所述编码基因中任一片段或其全长的引物。
7.一种培育抗虫性增强的转基因植物的方法，是将权利要求2或3所述的编码基因转 入出发植物中，得到抗虫性强于所述出发植物的转基因植物。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于权利要求2或3所述的编码基因是通过 权利要求4或5所述的重组表达载体导入所述出发植物中。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于所述出发植物为双子叶植物；所述双 子叶植物为番茄。
10.根据权利要求7或8或9所述的方法，其特征在于所述虫为昆虫；所述昆虫为棉 铃虫。
全文摘要
本发明公开了一种与抗虫相关蛋白及其编码基因与应用。该蛋白是如下1)或2)的蛋白质1)SEQ ID NO2所示的蛋白质；2)将SEQ ID NO2所示的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗虫性相关的由1)衍生的蛋白质。本发明培育转基因植物的方法具有重要的理论及实际意义，可用于农牧业和生态环境治理所需的抗虫植物品种的培育与鉴定。
文档编号C12N15/29GK102146126SQ201110002809
公开日2011年8月10日 申请日期2011年1月7日 优先权日2011年1月7日
发明者李传友, 杜敏敏, 王保, 蒋红玲, 赵久海 申请人:中国科学院遗传与发育生物学研究所