本申请要求2014年9月12日提交的美国临时申请No.62/049,969的权益，所述临时申请的全部内容通过引用并入本文。
技术领域：
本公开涉及抗微生物组合物，其包含次氯酸盐、铜(II)盐，和任选地，作为无机酸、有机酸或其组合的酸，并具有0.1至300ppm的氯浓度和0.1至300ppm的铜(II)浓度。还描述了这些组合物的制备和使用方法。
背景技术：
：毒性水平的细菌和病毒对表面的污染是一个重要的问题。用于食品工业中的抗微生物组合物不仅必须能够减少表面微生物的数量，而且它们必须对人类消费安全。此外，抗微生物组合物不应有害地影响所处理的食品的质量。用于食品上的抗微生物组合物也应该易于施用且相对便宜。需要安全、有效、易于施用且经济的新型抗微生物组合物。技术实现要素：本公开涉及组合物，其包含次氯酸盐、铜(II)盐，和任选地，作为无机酸、有机酸或其组合的酸；和任选地，缓冲剂，其中所述组合物具有0.1至300ppm的氯浓度和0.1至300ppm的铜(II)浓度。描述了这些组合物的制备方法。还描述了这些组合物在抗微生物应用中的使用方法。具体实施方式优选实施方式的以下描述本质上仅仅是示例性的，并且决不意图限制本发明、其应用或用途。如全文所用的，范围用作描述在所述范围内的每一个值的简写。可以选择所述范围内的任何值作为所述范围的末端。现在已经确定，包含次氯酸盐、铜(II)盐和任选地酸且具有0.1至300ppm的氯浓度和0.1至300ppm的铜(II)浓度的组合物可有效减少表面(例如硬质表面和食品表面)上的微生物数量。在一些实施方式中，这些组合物还可包括缓冲剂。漂白剂，例如次氯酸钠和次氯酸钙，是已知的抗微生物剂。但高浓度的漂白剂可能会对食品和硬质表面造成损害。此外，漂白剂在较高浓度下具有令人厌恶的气味，这在食品工业中是不期望的。另外，暴露于较高浓度的漂白剂可能具有不利的健康影响。此外，为了保持“有机”认证，食品必须具有最小的残留氯。铜(II)盐在低浓度下对抗微生物活性具有非常小(如果有的话)的影响。然而，次氯酸盐、铜(II)盐和任选地酸(无机酸、有机酸或其组合)和任选地缓冲剂的组合，其中所述组合具有0.1ppm至300ppm的氯浓度和0.1ppm至300ppm的铜(II)浓度，导致组合物相比于单独的次氯酸盐、铜(II)盐或酸具有显著更大的抗微生物活性。如本文所用，“食品”是指可由人类或驯养动物食用的固体食品。固体食品包括诸如家禽产品(鸡、鸭和火鸡产品)、蛋、牛肉产品、猪肉产品和海产品(鱼和贝类)等肉类产品。固体食品还包括农产品，例如水果、蔬菜、种子、谷物、豆芽、豆类、大豆和坚果。固体食品还包括乳制品，例如硬、软和半软干酪。如本文所用，“硬质表面”是指木材、陶砖、混凝土、瓷砖、油毡、层压板、复合材料、不锈钢、塑料等。如本文所用，“微生物”包括细菌和病毒。可以使用本公开的组合物减少的细菌的实例包括革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌，例如肠炎沙门氏菌(salmonellaenteritidis)、单核细胞增多性李斯特菌(listeriamonocytogenes)、大肠杆菌(Escherichiacoli)、肉毒梭菌(clostridiumbotulinum)、弯曲杆菌(campylobacter)和其组合。可以使用本公开的组合物减少的病毒的实例包括肠道病毒、诺如病毒、流感、轮状病毒和其组合。本公开的组合物可包括呈次氯酸的盐形式的次氯酸盐，作为氯源。次氯酸盐包括次氯酸钠、次氯酸钙、次氯酸镁和其组合。优选的次氯酸盐是次氯酸钠。本公开的次氯酸盐可以以约0.1ppm至约300ppm范围内的量存在。所述次氯酸盐可以以0.1ppm至275ppm、0.1ppm至250ppm、0.1ppm至225ppm、0.1ppm至200ppm、0.1ppm至175ppm、0.1ppm至150ppm、0.1ppm至125ppm、0.1ppm至100ppm、0.1ppm至75ppm、0.1ppm至50ppm、0.1ppm至25ppm、0.1ppm至10ppm、0.1ppm至4ppm或0.1ppm至5ppm的浓度存在于本公开的组合物中。其它优选的本公开组合物包括约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290或约300ppm的次氯酸盐。本公开组合物中次氯酸盐的量可以按质量计算。本公开的组合物具有0.1ppm至300ppm的氯(在本领域中也称为“游离氯”)浓度。本领域技术人员可以使用本领域中已知的方法，例如分光光度法或电流分析法，来测定包含本公开的组合物的水溶液的氯浓度。根据本公开，氯离子浓度可以基于质量计算。本公开组合物中的氯浓度的确认可以使用利用相应的用于游离有效氯(FAC)的安瓿的HachDR/890比色计来确定。氯浓度可以以约0.1ppm至约300ppm范围内的量存在。在其它实施方式中，氯浓度可以以0.1ppm至275ppm、0.1ppm至250ppm、0.1ppm至225ppm、0.1ppm至200ppm、0.1ppm至175ppm、0.1ppm至150ppm、0.1ppm至125ppm、0.1ppm至100ppm、0.1ppm至75ppm、0.1ppm至50ppm、0.1ppm至25ppm、0.1ppm至10ppm、0.1ppm至4ppm或0.1ppm至5ppm的量存在。其它优选的本公开组合物具有约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290或约300ppm的氯浓度。本公开的组合物还包括铜(II)盐。优选的铜(II)盐包括硫酸铜(II)、氯化铜(II)、溴化铜(II)等，以及其组合。优选的铜(II)盐是硫酸铜(II)。本公开的组合物包含约0.1ppm至约1200ppm的铜(II)盐。所述铜(II)盐以0.1ppm至1000ppm、0.1ppm至750ppm、0.1ppm至500ppm、0.1ppm至275ppm、0.1ppm至250ppm、0.1ppm至225ppm、0.1ppm至200ppm、0.1ppm至175ppm、0.1ppm至150ppm、0.1ppm至125ppm、0.1ppm至100ppm、0.1ppm至75ppm、0.1ppm至50ppm、0.1ppm至25ppm、0.1ppm至10ppm或0.1ppm至5ppm的浓度存在于本公开的组合物中。其它优选的本公开组合物包括约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、11、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100或约1200ppm的铜(II)盐。存在于本公开的组合物中的铜(II)盐的量可以基于质量确定。本公开的组合物具有0.1至300ppm的铜(II)浓度。本领域技术人员可以使用本领域中已知的方法，例如分光光度法，来确定包含本公开的组合物的水溶液的铜(II)浓度。铜(II)浓度可以以约0.1ppm至约300ppm范围内的量存在。可选地，本公开的组合物中的铜(II)浓度是0.1ppm至275ppm、0.1ppm至250ppm、0.1ppm至225ppm、0.1ppm至200ppm、0.1ppm至175ppm、0.1ppm至150ppm、0.1ppm至125ppm、0.1ppm至100ppm、0.1ppm至75ppm、0.1ppm至50ppm、0.1ppm至25ppm、0.1ppm至10ppm、或0.1ppm至5ppm。其它优选的本公开组合物包括约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、11、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290或约300ppm的铜(II)浓度。本公开组合物中的铜(II)的量可以使用利用相应的用于铜的安瓿的HachDR/890比色计来确定。本公开的组合物任选地包括作为无机酸、有机酸或其组合的酸。示例性酸包括例如抗坏血酸、柠檬酸、乳酸、月桂酸、盐酸、磷酸、硫酸等，以及其组合。优选的酸包括硫酸、乳酸、柠檬酸和其组合。当存在时，酸可以以任何量存在，以实现如本文所述的预定pH。在本公开的一些实施方式中，所述组合物还可包括缓冲剂，即将组合物的pH控制在预选范围内的化合物。缓冲剂在本领域中本身是已知的，并且包括例如酸的共轭盐。优选的缓冲剂包括硫酸盐，例如硫酸铵、硫酸钙和硫酸钠以及其组合。以所述组合物的重量计，缓冲剂可以以约0.1至约1.0重量百分比的量存在。例如，以所述组合物的重量计，缓冲剂可以以约0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％或约1.0％存在。本公开的一些组合物基本上由次氯酸盐、铜(II)盐和酸组成，其中氯和铜(II)浓度如本文所述。也就是说，本公开设想如下的组合物，其包括次氯酸盐、铜(II)盐、酸，以及如本文所述的氯和铜(II)浓度，和只有那些不会实质上影响本文所公开发明的基本和新颖特征的额外材料。本公开的其它组合物基本上由次氯酸盐、铜(II)盐、酸和缓冲剂组成，其中氯和铜(II)浓度如本文所述。也就是说，本公开设想如下的组合物，其包括次氯酸盐、铜(II)盐、酸、缓冲剂，以及如本文所述的氯和铜(II)浓度，和只有那些不会实质上影响本文所公开发明的基本和新颖特征的额外材料。本公开的一些组合物基本上由次氯酸盐和铜(II)盐组成，其中氯和铜(II)浓度如本文所述。也就是说，本公开设想如下的组合物，其包括次氯酸盐和铜(II)盐，以及如本文所述的氯和铜(II)浓度，和只有那些不会实质上影响本文所公开发明的基本和新颖特征的额外材料。本公开的一些组合物基本上由水、次氯酸盐、铜(II)盐和酸组成，其中氯和铜(II)浓度如本文所述。也就是说，本公开设想如下的组合物，其包括水、次氯酸盐、铜(II)盐、酸，以及如本文所述的氯和铜(II)浓度，和只有那些不会实质上影响本文所公开发明的基本和新颖特征的额外材料。本公开的一些组合物基本上由水、次氯酸盐、铜(II)盐、酸和缓冲剂组成，其中氯和铜(II)浓度如本文所述。也就是说，本公开设想如下的组合物，其包括水、次氯酸盐、铜(II)盐、酸、缓冲剂，如本文所述的氯和铜(II)浓度，和只有那些不会实质上影响本文所公开发明的基本和新颖特征的额外材料。本公开的一些组合物基本上由水、次氯酸盐和铜(II)盐组成，其中氯和铜(II)浓度如本文所述。也就是说，本公开设想如下的组合物，其包括水、次氯酸盐和铜(II)盐，如本文所述的氯和铜(II)浓度，和只有那些不会实质上影响本文所公开发明的基本和新颖特征的额外材料。本公开的水溶液可以具有中性pH(约pH7)或酸性pH(pH小于7)或微碱性pH(pH高达约9)。在优选实施方式中，pH是约1至7。在一些实施方式中，pH是约2至7。在其它实施方式中，pH是约3至7。在其它实施方式中，pH是约4至7。优选地，本公开的水溶液的pH是约1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5或约9。根据本公开，除非另有说明，否则使用本领域中已知的方法，在约25℃下测试水溶液的pH。本领域技术人员容易理解，本公开的水溶液的pH可以通过调节溶液中的酸和/或碱的量来调节。在其它实施方式中，组合物是包含本文所述量的次氯酸盐、铜(II)盐和任选地酸和任选地缓冲剂的固体组合物。这些固体组合物包含10重量％或更少的水/水分。这样的固体组合物的实例包括丸剂、颗粒剂、粉剂和片剂。这些固体组合物可以包括本文所述浓度的氯和铜(II)。可选地，所述固体组合物可用于制备包括本文所述浓度的氯和铜(II)的其它组合物。在其它实施方式中，所述组合物是被包裹在水溶性膜(例如，聚乙烯醇膜、脂族聚醚膜或聚乙二醇膜)中的固体组合物。这类膜是本领域中已知的。合适的膜在高于约5℃的温度下将可完全溶解或分散在水中。所述膜将具有约0.5mls至约5mls、优选地约1至3mls的厚度。水溶性膜可以使用例如本领域中已知的加热或超声波密封方法来密封。本公开的其它实施方式包括如下的方法，其包括将铜(II)盐和任选地，作为无机酸、有机酸或其组合的酸加入到包含次氯酸盐的第一水溶液，和制备包含所述次氯酸盐、所述铜(II)盐和所述任选的酸的第二水溶液。所述第一水溶液还可任选地包含缓冲剂。所述第二水溶液将具有低于7的pH，0.1ppm至300ppm的氯浓度，和0.1ppm至300ppm的铜(II)浓度。根据这些方法，所述第二水溶液接触表面。优选地，将第二水溶液施用到表面。可选地，可以将第一水溶液施用到表面，接着将铜(II)盐和任选的酸施用到表面。所述表面可以是本文所述的硬质表面或食品表面中的任一种。使用这些方法，可以实现表面上的微生物减少。次氯酸盐可以以0.1ppm至275ppm、0.1ppm至250ppm、0.1ppm至225ppm、0.1ppm至200ppm、0.1ppm至175ppm、0.1ppm至150ppm、0.1ppm至125ppm、0.1ppm至100ppm、0.1ppm至75ppm、0.1ppm至50ppm、0.1ppm至25ppm、0.1ppm至10ppm、0.1ppm至4ppm或0.1ppm至5ppm的量存在于本公开的第一水溶液中。其它优选的本公开的第一水溶液包括约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290或约300ppm的次氯酸盐。优选的次氯酸盐是次氯酸钠或次氯酸钙，其中次氯酸钠是特别优选的。在优选的实施方式中，第一水溶液具有小于7的pH。优选地，将约0.1ppm至约1200ppm的铜(II)盐加入到第一水溶液。可选地，将0.1ppm至1000ppm、0.1ppm至750ppm、0.1ppm至500ppm、0.1ppm至275ppm、0.1ppm至250ppm、0.1ppm至225ppm、0.1ppm至200ppm、0.1ppm至175ppm、0.1ppm至150ppm、0.1ppm至125ppm、0.1ppm至100ppm、0.1ppm至75ppm、0.1ppm至50ppm、0.1ppm至25ppm、0.1ppm至10ppm、或0.1ppm至5ppm的铜(II)盐加入到第一水溶液。在其它实施方式中，将0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、11、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100或约1200ppm的铜(II)盐加入到第一水溶液。优选的铜(II)盐包括硫酸铜(II)、氯化铜(II)、溴化铜(II)等。优选的铜(II)盐是硫酸铜(II)。任选地将作为无机酸、有机酸或其组合的酸加入到第一水溶液。示例性酸包括例如抗坏血酸、柠檬酸、乳酸、月桂酸、盐酸、磷酸、硫酸等，以及其组合。优选的酸包括硫酸、乳酸、柠檬酸和其组合。当使用时，酸的量将是实现如本文所述的预定pH所需的量。在一些实施方式中，向第一水溶液添加作为包含铜(II)盐和任选的酸的第三水溶液的铜(II)盐和任选的酸。在优选的实施方式中，第二水溶液具有小于7的pH。例如，第二水溶液具有1至6.9、2至6.9、3至6.9、4至6.9、或5至6.9的pH。当在约25℃下测试时，第二水溶液的优选pH是0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6或6.5。本公开的第二水溶液具有0.1至300ppm的氯浓度。氯浓度可以以约0.1ppm至约300ppm范围内的量存在。第二水溶液的氯浓度可以是0.1ppm至275ppm、0.1ppm至250ppm、0.1ppm至225ppm、0.1ppm至200ppm、0.1ppm至175ppm、0.1ppm至150ppm、0.1ppm至125ppm、0.1ppm至100ppm、0.1ppm至75ppm、0.1ppm至50ppm、0.1ppm至25ppm、0.1ppm至10ppm、0.1ppm至4ppm或0.1ppm至5ppm。本公开的其它优选的实施方式具有约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290或约300ppm的氯浓度。本公开的第二水溶液具有0.1至300ppm的铜(II)浓度。第二水溶液的铜(II)浓度可以以约0.1ppm至约300ppm范围内的量存在。本公开的第二水溶液中的铜(II)浓度是0.1ppm至275ppm、0.1ppm至250ppm、0.1ppm至225ppm、0.1ppm至200ppm、0.1ppm至175ppm、0.1ppm至150ppm、0.1ppm至125ppm、0.1ppm至100ppm、0.1ppm至75ppm、0.1ppm至50ppm、0.1ppm至25ppm、0.1ppm至10ppm、或0.1ppm至5ppm。在其它优选的实施方式中，本公开的第二水溶液具有约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、11、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290或约300ppm的铜(II)浓度。本公开的组合物可有效减少表面上的微生物数量。也就是说，与尚未用本公开的组合物处理的表面相比，用本公开的组合物处理表面减少了细菌和/或病毒在表面上的生长和/或繁殖(例如，通过杀死细菌或病毒)。例如，与尚未用本公开的组合物处理的表面相比，本公开的组合物可有效地将微生物数量减少约10％。在其它实施方式中，当与尚未用本公开的组合物处理的表面相比时，本公开的组合物在减少表面上的微生物中的有效性高约20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、110％、120％、130％、140％、150％、160％、170％、180％、190％、200％、300％、400％、500％或更大。可以通过本领域中已知的任何方法处理表面。例如，在优选的实施方式中，本公开的任何组合物可以通过喷洒、喷雾、漂洗、浸泡、浸渍、洗涤等施用到食品的表面。本发明的方法在施用约3分钟内实现微生物负荷的减少。例如，在本公开的组合物已经施用到表面之后，在约1分钟、约2分钟或约3分钟后，将观察到微生物负荷的减少。在更长的时间段，例如约15分钟、约30分钟、约1小时、约1.5小时、约2小时、约2.5小时、约3小时或更长时间后，也将观察到微生物负荷的减少。提供以下实施例以说明本文所述的组合物、方法和性质。所述实施例仅仅是说明性的，而不旨在将本公开限制于其中所阐述的材料、条件或工艺参数。实施例材料和方法一般细菌测定：在测试前一天从当地杂货店购买两个完整的屠体。将屠体放置在37℃的培养箱中约14小时以确保足够的细菌生长。然后使用每个屠体400mL无菌缓冲的蛋白胨水漂洗整个屠体，并将细菌漂洗液合并在单个玻璃容器中。细菌漂洗液通过陶瓷布氏漏斗真空过滤，第二次使用无菌针筒过滤器过滤。使用制造商的说明(VivioneBiosciences,LLC,PineBluff,AR)进行VivioneRAPID-B仪器启动。根据制造商的说明执行性能验证，以验证性能和识别任何潜在的问题。然后准备Rapid-B系统用于运行一般细菌总平板计数测定。然后基于所测试的方案制备处理溶液。溶液以99:1接种；意味着99mL处理溶液与1mL细菌鸟冲洗液合并，产生10-2稀释度。使用无菌缓冲的蛋白胨水进行连续稀释(通常使用10-3稀释度)以放大稀释因子。通过将570μl无菌缓冲的蛋白胨水、330μlTPC(总平板计数)试剂和100μl来自所测试的稀释管的物质组合到反应管中来制备样品。这个过程将样品再稀释10-1倍(因此，10-4是所测试的一般稀释度)。将样品反应管放置15分钟，定期涡旋。打开Vivione机器上的一般细菌方案，并按照VivioneBiosciences手册中所指示来确认操作设置。15分钟后，将反应管置于样品臂上并移动到运行位置中以开始分析。一旦样品运行，臂返回到冲洗位置，以允许在完成时冲洗。商购获得五水合硫酸铜(II)和次氯酸钠。实施例1：铜(II)在一般细菌测定中的作用如数据所示，铜(II)在5ppm和50ppm浓度下对细菌具有可忽略的活性。参见表1。铜(II)盐的量以铜的ppm表示。在溶液相中，仅利用铜盐，短暴露时间(15分钟或更短)产生很小(如果有的话)抗微生物作用，特别是在50ppm或更小的浓度下(参见表1)。表1铜pH*基线平均活菌数5ppm5.681562163350ppm4.7115621666*接种时的pH实施例2：次氯酸盐在一般细菌测定中的作用次氯酸盐在约5ppm下具有可忽略的抗菌作用。参见表2。次氯酸盐的量以氯的ppm表示。表2氯pH*基线平均活菌数5ppm6.57156214525ppm7.1340840510ppm6.65156285910ppm7.1140838720ppm7.0240890*接种时的pH实施例3：酸在一般细菌测定中的作用仅pH可以在非常低的pH下有效地减少细菌负荷。但是它仅在pH2-3下适度有效，这被认为是安全操作的pH范围。参见表3。铜(II)盐的量以铜的ppm表示。次氯酸盐的量以氯的ppm表示。表3*接种时的pH实施例4：铜(II)+次氯酸盐在一般细菌测定中的作用铜(II)盐(50ppm或更大)和次氯酸盐的组合导致细菌负荷的协同减少。这种协同作用不仅仅是低pH的结果。表4*接种时的pH实施例5：沙门氏菌测定沙门氏菌培养物在标准暴露时间下在预定pH值、氯浓度和铜水平下暴露于液体消毒，然后计数。将暴露之前的攻击生物体的群体与暴露后存在的群体进行比较，以确定消毒剂的杀菌能力和参数组合。为此研究制备以下攻击微生物：·肠道沙门氏菌阿邦尼血清型(ATCC#9270)根据制造商的说明从冻干制剂(KWIK-STIKTM，Microbiologics,St.Cloud,MN)或从储备平板制备每种培养物。将培养物转移到胰蛋白酶大豆肉汤(TSB，Neogen,Lansing,MI)中并在35±2℃下温育最少24±2小时，直到出现浑浊。在温育后，将培养物离心(MultifugeX1R，ThermoScientific,Waltham,MA)，在无菌蛋白胨水中洗涤并再悬浮至其原始体积。将培养物以适当的稀释度铺在胰蛋白酶大豆琼脂(TSA，Neogen)上，以确定实际的最终浓度。制备含有99mL每种pH改性和/或添加氯的消毒剂溶液的250mL锥形瓶，以及另外的含有99mLButterfield磷酸盐稀释剂(BPB)的烧瓶作为对照。轻轻涡旋消毒剂烧瓶以产生残余液体运动，然后在每个烧瓶的中心加入1mL等份的测试培养物，在接种期间回避烧瓶的颈部和侧面。将每个烧瓶涡旋1分钟以充分混合内容物，然后将1mL份的混合物加入到9mL管中的卵磷脂中和溶液(根据AOAC960.09制备)。在处理和中和后，将样品用胰蛋白胨葡萄糖提取物琼脂(TGEA，Neogen)以至多10-6的连续稀释度倾注铺板(以10-1处理中和的管)。将TGEA板在36±1℃下温育24-30小时。在温育后，使用Quebec菌落计数器(型号#3325，ReichertTechnologies,Depew,NY)对平板计数。记录处理样品和未处理样品的菌落数观测值。将每个样品的原始计数观测值转换为log10cfu/mL。将处理样品中存在的攻击生物体的量与对照样品中存在的量进行比较，以确定攻击生物体的对数减少。一式三份地重复该程序。基于质量计算次氯酸钠和五水合硫酸铜的浓度，并且使用利用相应的用于游离有效氯(FAC)和铜的安瓿的HachDR/890比色计确认。实施例6-酸在沙门氏菌测定中的作用(病原菌实例)仅pH可以在低pH水平下有效地减少沙门氏菌。在较高pH下，观察到最小的影响。参见表5。用pH为7.2的Butterfield磷酸盐稀释剂制备这些该实施例的对照样品。加入由硫酸和硫酸铵组成的基本消毒剂以相应地调节pH。将每个样品的原始计数观测值转换为log10cfu/mL。将处理样品中存在的攻击生物体的量与对照样品中存在的量进行比较，以确定攻击生物体的对数减少。每种条件一式三份地操作以产生所述值。关于测试方案，参见实施例5。表5**n＝3实施例7-次氯酸盐在沙门氏菌测定中的作用(病原菌实例)次氯酸盐在较低ppm下在6.0的最佳固定氯pH操作水平下具有有限的抗微生物作用。参见表6。用pH为7.2的Butterfield磷酸盐稀释剂制备对照样品。基于质量计算次氯酸钠和五水合硫酸铜的所需浓度，并且使用利用相应的用于游离有效氯(FAC)和铜的安瓿的HachDR/890比色计确认。将每个样品的原始计数观测值转换为log10cfu/mL。将处理样品中存在的攻击生物体的量与对照样品中存在的量进行比较，以确定攻击生物体的对数减少。每种条件一式三份地操作以产生所述值。关于测试方案，参见实施例5。表6*氯浓度铜浓度溶液pH对照样品基线处理样品减少15ppm0ppm6.06.75log4.77log*n＝3实施例8-铜(II)在沙门氏菌测定中的作用(病原菌实例)铜在较低ppm下具有有限的抗微生物作用(参见表7)。铜离子在溶液中更长的停留时间导致更大的细菌减少。基于质量计算次氯酸钠和五水合硫酸铜的所需浓度，并且使用利用相应的用于游离有效氯(FAC)和铜的安瓿的HachDR/890比色计确认。将每个样品的原始计数观测值转换为log10cfu/mL。将处理样品中存在的攻击生物体的量与对照样品中存在的量进行比较，以确定攻击生物体的对数减少。每种条件一式三份地操作以产生所述值。关于测试方案，参见实施例5。表7*氯浓度铜浓度溶液pH对照样品基线处理样品减少0ppm10ppm6.07.02log3.83log*n＝3实施例9-较低的铜和氯浓度在较高pH下的协同作用铜(II)盐和次氯酸盐的组合导致病原菌负荷的协同减少。参见表8。这种协同作用不仅仅是低pH或停留时间的结果。注意，在较低的浓度水平下，铜和氯的组合允许在溶液中显著更少的停留时间和更大的总细菌减少(参见表4和表8的结果)。铜(II)盐的量以铜的ppm表示。次氯酸盐的量以氯的ppm表示。基于质量计算次氯酸钠和五水合硫酸铜的所需浓度，并且使用利用相应的用于游离有效氯(FAC)和铜的安瓿的HachDR/890比色计确认。将处理样品中存在的攻击生物体的量与对照样品中存在的量进行比较，以确定攻击生物体的对数减少。每种条件一式三份地操作以产生所述值。关于测试方案，参见实施例5。在数据确定时，当与酸和缓冲剂和氯一起配制时，当细菌在15分钟或更少的停留时间下暴露于溶液时，铜显示出显著的细菌减少功效。表8*氯浓度铜浓度溶液pH对照样品基线处理样品减少15ppm10ppm6.06.81log>5.81log*n＝3。当前第1页1 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