一种纳米硒贻贝粉的制备方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及一种贻贝粉的制备方法，具体地说是一种纳米硒贻贝粉的制备方法， 属于水产品加工技术领域。
【背景技术】
[0002] 根据现有文献报道，贻贝蛋白肽和贻贝多糖均具有体外抗氧化活性，因此对贻贝 蛋白提取、酶解和贻贝多糖的提取进行了大量研究，但是这些研究都是针对贻贝中的单一 成分(蛋白肽或多糖)进行提取及抗氧化活性研究，而针对同时提取蛋白质和多糖类物质的 提取工艺以及蛋白肽-多糖复合物的协同抗氧化活性方面的研究还未见报道。
[0003] 硒是人体生命中必须的重要微量元素，具有增强机体免疫能力、抵抗自由基损伤、 防病和调节甲状腺机能等多种功能。研究表明，硒化能够显著增强体内抗氧化活性。目前硒 化的方法包括化学硒化、纳米硒化和生物硒化。化学硒化就是利用化学反应使待硒化物的 某些基团与硒共价结合;生物硒化是在生物体(酵母、植物、动物)的饲料、肥料中加入硒，通 过生物转化作用使硒富集结合在生物体的生物分子中；纳米硒化是在亚硒酸钠还原为单质 硒的化学反应中，利用生物大分子作为模板调控单质硒的粒径在纳米范围。纳米硒生物吸 收性尚，能尚效清除自由基，抗氧化活性尚，是一种有效的补砸广品。但是目如还未见利用 贻贝提取物进行硒化的研究，在纳米硒的研究中也只是局限于以多糖为模板。由于模板单 一，调控效果差，要求反应体系中的模板浓度低(约100-400ppm)，给后续浓缩、干燥带来麻 烦。
【发明内容】
[0004] 针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种纳米硒贻贝粉的制备方法。该方 法简单易行，提高生产效率。利用贻贝中的蛋白质和多糖作为混合模板，对单质硒的调控能 力增强，得到的纳米硒粒径小而均匀；充分利用贻贝中的蛋白质和多糖，避免浪费，二者协 同作用，体外抗氧化活性大大增加。
[0005] 本发明采用以下技术方案： 一种纳米硒贻贝粉的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤： 1) 贻贝前处理:贻贝取肉后，用清水清洗，去除足丝、杂质等，控干水分，置于组织捣碎 机中匀浆，浆液用95%乙醇萃取，重复萃取2次，过滤除去脂肪，滤饼用少量乙醇冲洗，真空干 燥、粉碎过100目筛，得脱脂贻贝粉； 2) 贻贝蛋白多糖同提：将步骤1)所制的脱脂贻贝粉用碱性蛋白酶60°C条件下酶解 180min，然后加热到95°C保持lOmin，降温至70°C下抽提45min;抽提液过滤除去残渣，真空 浓缩后喷雾干燥，得贻贝蛋白-多糖复合物； 3) 贻贝蛋白-多糖复合物的纳米硒化:将步骤2)所得贻贝蛋白-多糖复合物配成0.2%水 溶液，加热至60°C，然后加入亚硒酸钠和Vc，维持在60°C下继续反应，反应结束后将反应液 真空浓缩、喷雾干燥后即得纳米硒贻贝粉。
[0006] 所述步骤1)中萃取温度为50°C，萃取时间为6h，95%乙醇用量为浆液体积的4倍。 [0007] 所述步骤2)中酶解的料液比为1:40, 3000U/g，pH为10.0。
[0008] 所述步骤3 )中亚硒酸钠的终浓度为2mM，Vc的终浓度为1 OmM。
[0009] 所述步骤3)中反应时间为3h。
[0010] 本发明的优点在于：1、充分利用贻贝中的蛋白质和多糖，避免浪费，二者协同作 用，体外抗氧化活性大大增加。2、利用贻贝中的蛋白质和多糖作为混合模板，对单质硒微粒 的形成和聚集调控能力增强，有效减少了粒子间的团聚作用，纳米硒粒径约为20_40nm，稳 定而均匀地分散于溶液中，体外抗氧化活性大大增加且反应体系中模板的浓度高达0.2%， 比现有文献报道中仅用多糖做模板的浓度高10倍左右，提高了后续浓缩、干燥的生产效率。
【附图说明】
[0011] 图1是本发明实施例1制备的纳米硒贻贝粉产品透射电镜图。
【具体实施方式】
[0012] 下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明。
[0013] 实施例1 纳米硒贻贝粉的制备 1.贻贝前处理： 贻贝取肉后，用清水清洗，去除足丝、杂质等，控干水分，置于组织捣碎机中匀浆，浆液 用95%乙醇(4倍体积)在50 °C萃取6 h，重复2次，过滤除去脂肪，滤饼用少量乙醇冲洗后，真 空干燥后粉碎过100目筛，即得脱脂贻贝粉。
[0014]
贻贝脱脂的目的是为了进一步富集蛋白质、多糖类物质，同时防止贻贝粉的氧化。本例 采用4倍体积的95%乙醇对贻贝进行脱脂，脱脂率达98%，有效消除脂肪对后续实验及制品的 不利影响。
[0015] 2.贻贝蛋白多糖同提： 将上述制备的脱脂贻贝粉用碱性蛋白酶在料液比1:40、pH10.0，总活性为3000U/g，60 °C条件下酶解180min，加热到95 °C保持lOmin，降温至70 °C下抽提45min。抽提液过滤除去残 渣，真空浓缩后喷雾干燥，即得贻贝蛋白-多糖复合物。
[0016] 本步骤总得率、多糖回收率、蛋白质回收率分别为81.06%、93.59%和92.01%。本步 骤得到的贻贝蛋白-多糖复合物中蛋白质含量为62.46%，多糖含量31.64%，水分5.08%。
[0017] 3.贻贝蛋白-多糖复合物的纳米硒化 将上述制得的贻贝蛋白-多糖复合物配成0.2%水溶液，加热至60°C，加入亚硒酸钠使其 浓度为2mM，加入Vc使其浓度为10mM，维持在60°C下反应3h，然后真空浓缩、喷雾干燥后即得 纳米硒贻贝粉。
[0018] 本步骤所制的产品硒粒径在20-40M1，分散性PDI为0.22，透射电镜图如图1所示。 本发明样品含硒量达到2.07%，蛋白质含量为60.36%，多糖含量为31.65%。
[0019] 对比例 按照常规方法制备贻贝粉:贻贝取肉后，用清水清洗，去除足丝、杂质等，控干水分，置 于组织捣碎机中匀浆，加水适量，过滤去渣，滤液采用均质机均质后喷雾干燥即得贻贝粉。
[0020] 将实施例中制得的纳米硒贻贝粉和贻贝蛋白-多糖复合物以及对比例所得的贻贝 粉进行抗氧化试验研究，分别研究三种产品对DPPH自由基、超氧自由基、羟基自由基三种自 由基的半数清除浓度(清除率为50%所需的浓度），实验结果如下表1所示。
通过上述结果可以看出，本发明制备的纳米硒贻贝粉对DPPH自由基、超氧自由基、羟基 自由基三种自由基的半数清除浓度要明显低于不含硒的贻贝蛋白-多糖复合物，以及常规 方法制备的贻贝粉。这是由于本发明的纳米硒贻贝粉利用贻贝中的蛋白质和多糖作为混合 模板，二者协同作用，对单质硒微粒的形成和聚集调控能力增强，有效减少了粒子间的团聚 作用，纳米硒粒径约为20_40nm，稳定而均匀地分散于溶液中，体外抗氧化活性大大增加。
【主权项】
1. 一种纳米硒贻贝粉的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤： 1) 贻贝前处理：贻贝取肉后，用清水清洗，去除足丝、杂质等，控干水分，置于组织捣碎 机中匀浆，浆液用95%乙醇萃取，重复萃取2次，过滤除去脂肪，滤饼用少量乙醇冲洗，真空干 燥、粉碎过100目筛，得脱脂贻贝粉； 2) 贻贝蛋白多糖同提：将步骤1)所制的脱脂贻贝粉用碱性蛋白酶60°C条件下酶解 180min，然后加热到95°C保持lOmin，降温至70°C下抽提45min;抽提液过滤除去残渣，真空 浓缩后喷雾干燥，得贻贝蛋白-多糖复合物； 3) 贻贝蛋白-多糖复合物的纳米硒化:将步骤2)所得贻贝蛋白-多糖复合物配成0.2%水 溶液，加热至60°C，然后加入亚硒酸钠和Vc，维持在60°C下继续反应，反应结束后将反应液 真空浓缩、喷雾干燥后即得纳米硒贻贝粉。2. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中萃取温度为50°C，萃取 时间为6h，95%乙醇用量为浆液体积的4倍。3. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中酶解的料液比为1:40， 3000U/g， pH为10.0。4. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中亚硒酸钠的终浓度为 2mM，Vc的终浓度为1 OmM。5. 根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中反应时间为3h。
【专利摘要】本发明公开了一种纳米硒贻贝粉的制备方法，属于水产品加工技术领域。该方法包括以下步骤：1）贻贝前处理、2）贻贝蛋白多糖同提、3）贻贝蛋白-多糖复合物的纳米硒化。本发明采用蛋白多糖同提技术，得到贻贝蛋白-多糖复合提取物，二种成分的协同作用大大增加体外抗氧化活性。贻贝多糖和蛋白肽协同作用，共同作为模板调控单质硒的聚集，调控能力增强，硒的粒径更小更均匀，体外抗氧化活性大大增加，反应体系模板的浓度更高，提高后续浓缩、干燥的生产效率。
【IPC分类】A23L17/50
【公开号】CN105614759
【申请号】CN201511002681
【发明人】郭晓华, 黄海, 李玉环, 孙爱华
【申请人】山东美佳集团有限公司
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2015年12月29日