专利名称：2－(3,5－二－三氟甲基－苯基)－n－甲基－n－(6－吗啉－4－基－4－邻－甲苯基－吡 ...的制作方法
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本发明涉及式Ⅰ化合物及其可药用酸加成盐 式Ⅰ化合物及其盐具有有价值的治疗特性。现已发现，本发明的化合物是神经激肽1(NK1，P物质)受体的高选择性拮抗剂。P物质是一种天然的十一肽，属于肽的速激肽家族，而速激肽名称的由来是因为该物质可以加速血管外平滑肌组织的收缩作用。P物质的受体是G蛋白-偶联的受体超家族中的一员。
P物质(NK-1)的神经肽受体遍布于哺乳动物的神经系统(特别是脑和脊神经节)、循环系统和外周组织(特别是十二指肠和空肠)，并且参与各种生物学过程的调节。
哺乳动物速激肽P物质的中枢和外周作用与多种炎性病症包括偏头痛、类风湿性关节炎、哮喘和炎性肠疾病有关，并且还与呕吐反射的介导和中枢神经系统(CNS)疾病如帕金森氏症(《神经科学研究》(Neurosci.Res.)，1996，7，187-214)、焦虑(《加拿大生理学杂志》(Can.J.Phys.)，1997，75，612-621)和抑郁(《科学》(Science)，1998，281，1640-1645)的调节有关。
在“速激肽受体和速激肽受体拮抗剂”，J.Auton.Pharmacol.，13，23-93，1993中综述了速激肽受体拮抗剂可用于疼痛、头痛，特别是偏头痛、早老性痴呆、多发性硬化、吗啡停药的衰减、心血管改变、水肿，例如热损伤引起的水肿、慢性炎性疾病如类风湿性关节炎、哮喘/支气管反应过度和其它呼吸疾病，包括过敏性鼻炎、炎性肠疾病，包括溃疡性结肠炎和节段性回肠炎、眼损伤和眼炎性疾病的证据。
此外，正在开发用于治疗与速激肽、特别是P物质过量或失衡有关的多种生理性疾病的神经激肽1受体拮抗剂。与P物质有关的病症的例子包括中枢神经系统疾病如焦虑、抑郁和精神病(WO 95/16679，WO 95/18124和WO 95/23798)。
神经激肽-1受体拮抗剂还可用于治疗运动病和诱发的呕吐。
此外，《新英格兰医学杂志》(The New England Journal ofMedicine)，340卷，No.3，190-195，1999描述了用选择性神经激肽-1受体拮抗剂来减少顺铂引起的呕吐。
在《神经肽》(Neuropeptides)，32(1)，1-49，(1998)和《欧洲药理学杂志》(Eur.J.Pharmacol.)，383(3)，297-303，(1999)还记载了神经激肽1受体拮抗剂用于治疗某些形式的尿失禁的用途。
此外，US 5，972，938记载了通过施用速激肽受体例如NK-1受体拮抗剂治疗精神免疫学疾病或身心疾病的方法。
《生命科学》(Life Sci.)，(2000)，67(9)，985-1001记载了星形细胞可以表达多种神经递质、包括P物质的功能性受体，P物质是CNS发育、感染和损伤中的反应性星形细胞的重要刺激物。在脑肿瘤中，起源于星形细胞的恶性神经胶质细胞由速激肽通过NK-1受体激发而释放出可溶性介质并增加其增殖的速率。因此，选择性的NK-1受体拮抗剂有可能在癌症的治疗中用于治疗恶性神经胶质瘤。
《自然》(Nature)(London)(2000)，405(6783)，180-183中描述了具有遗传性NK-1受体破坏的小鼠显示出吗啡奖赏特性的丧失。因此，NK-1受体拮抗剂可能可以用于治疗成瘾药物如阿片制剂和尼古丁的戒断症状并减少其滥用/成瘾。
本发明的目的是式Ⅰ化合物及其可药用盐、上述化合物的制备方法、含有该化合物的药物及其生产方法，以及上述化合物在控制或预防疾病、特别是以上所提到的疾病中的用途或在生产相应的药物中的用途。
根据本发明，首选的适应症包括，中枢神经系统疾病，例如通过施用NK-1受体拮抗剂治疗或预防某些抑郁症、焦虑或呕吐。严重抑郁发作是指，有至少两周的时间，在此期间内的几乎每一天及每天的大部分时间，有抑郁的情绪或对所有或几乎所有的活动失去兴趣或乐趣。
本文所述的术语“可药用酸加成盐”包括与无机酸和有机酸，例如盐酸、硝酸、硫酸、磷酸、柠檬酸、甲酸、富马酸、马来酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等的盐。
本发明的式Ⅰ化合物及其可药用盐可以通过本领域已知的方法制备，例如，通过下述方法制备，该方法包括a)将式Ⅱ化合物 与式Ⅲ化合物反应 生成式Ⅰ化合物， 以及，如果需要的话，将得到的化合物转变成可药用酸加成盐。
根据方法a)，将DIPEA(N-乙基二异丙基-胺)加入到式Ⅱ化合物和式Ⅲ化合物于二氯甲烷的混合物中，然后将混合物在35-40℃之间的温度下搅拌。经纯化后以很好的收率得到所需的式Ⅰ化合物。
盐的形成根据已知的或本领域技术人员熟知的方法在室温下进行。不仅可以形成无机酸盐，还可以形成有机酸盐。所述盐的例子是盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐等。
以下反应方案1和2及实施例1更详细地描述了式Ⅰ化合物的制备。式Ⅲ、Ⅳ和Ⅶ的原料是已知化合物，或者可以根据本领域已知的方法制得。
在反应方案中使用了如下缩写PivCl新戊酰氯THF 四氢呋喃TMEDAN，N，N′，N′-四甲基乙二胺DIPEAN-乙基二异丙基-胺反应方案Ⅰ 如前所述，式Ⅰ化合物及其可药用加成盐具有有价值的药理学特性。现已发现，本发明的化合物是神经激肽1(NK-1，P物质)受体的拮抗剂。
根据以下描述的试验对式Ⅰ化合物进行了研究。
式Ⅰ化合物对NK1受体的亲和性在用人NK1受体感染的(采用Semliki病毒表达系统)并用[3H]P物质放射性标记的(最终浓度0.6nM)的CHO细胞中的人NK1受体上进行评估。结合试验在含有BSA(0.04％)、亮抑蛋白酶肽(8μg/ml)、MnCl2(3mM)和膦酰二肽(2μM)的HEPES缓冲液(50mM，pH7.4)中进行。结合试验由250μl膜悬浮液(1.25x105细胞/分析试管)、0.125pl置换剂的缓冲液和125μl[3H]P物质组成。用至少7种化合物浓度测定置换曲线。试验试管在室温保温60分钟，然后将试管内含物通过用PEI(0.3％)预浸60分钟的GF/C滤纸在真空下迅速过滤并用2x2mlHEPES缓冲液(50mM，pH7.4)洗涤。通过闪烁计数测定滤纸上残留的放射性。所有试验均一式三份地进行至少两次。
式Ⅰ化合物对于在CHO细胞中表达的重组人神经激肽1(NK1)受体是强而选择性的拮抗剂。其在对人NK1受体的选择性比NK2和NK3受体以及50个以上已评估过的其它结合位点高两个数量级的基础上对NK1受体的亲和性(pKi)为9.0。
通过研究其对P物质诱导的Ca2+流入表达重组人NK1受体的CHO细胞的影响来测定体外活性。在这些细胞中，P物质可以引起Ca2+浓度依赖性的流入，这可以用FLIPR技术进行测定。2-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-N-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-异丁酰胺浓度的增加会引起P物质浓度响应曲线的右移。在Schild图上表示这些数据可以计算出对该化合物的拮抗剂亲和性(pA2)为8.9(Schild回归的斜率=1.1)。这些数据表明，2-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-N-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-异丁酰胺是人重组NK1受体的竞争性拮抗剂。
在体内，式Ⅰ化合物可以拮抗脑室内注射(i.c.v.)NK1受体激动剂在沙土鼠中诱导的叩足行为(foot-tapping behaviour)。计算出的该化合物在口服给药后抑制50％叩足行为的剂量为0.2mg/kg。还测定了完全拮抗该行为所需的血浆水平，我们发现，需要10ng/ml的总血浆浓度来完全阻断叩足行为。该拮抗作用持续很多小时，在该模型中的功能半衰期为8小时。
还将2-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-N-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-异丁酰胺作为止吐剂在Ferets中进行了测试。通过各种催吐剂(阿朴吗啡、吗啡、吐根、顺铂和硫酸铜)在Ferets中诱导呕吐。在催吐前2小时用该化合物预处理(0.3mg/kg，p.o.)可以完全阻断由所有催吐剂所引起的呕吐。对阿朴吗啡诱导的呕吐绘制完整的剂量-响应曲线，计算出ED50剂量为0.1mg/kg，p.o。
在臭鼩(suncus murinus)运动呕吐模型中，该化合物的ED50为0.2mg/kg，p.o。
因此，2-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-N-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-异丁酰胺在沙土鼠中是NK1诱导的行为的强拮抗剂，并能够以相似的效力在Ferets和臭鼩中阻断呕吐。
在大鼠和狗中评估了药物动力学参数。在大鼠中，化合物的末端半衰期为23小时，清除率为4ml/分钟/kg，体积分布为8 l/kg，口服生物利用度为50％。在狗中，该分子的半衰期为40小时，清除率为6ml/分钟/kg，体积分布为22 l/kg，口服生物利用度为30-40％。
式Ⅰ化合物及其可药用酸加成盐可以，以例如药物制剂的形式用作药物。药物制剂可以以例如片剂、包衣片剂、糖衣丸、硬和软明胶胶囊、溶液剂、乳液或混悬液的形式口服给药。但也可以，以例如栓剂的形式进行直肠给药，或以例如注射溶液的形式胃肠外给药。
式Ⅰ化合物及其可药用酸加成盐可以用药物惰性的无机或有机赋形剂进行加工来生产片剂、包衣片剂、糖衣丸和硬明胶胶囊。乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其盐可以作为所述赋形剂用于片剂、糖衣丸和硬明胶胶囊。
软明胶胶囊的适宜赋形剂是，例如植物油、蜡、脂肪、半固体和液体多元醇等。
用于生产溶液剂和糖浆的适宜赋形剂是，例如水、多元醇、蔗糖、转化糖、葡萄糖等。
用于注射溶液的适宜赋形剂是，例如水、醇、多元醇、甘油、植物油等。
用于栓剂的适宜赋形剂是，例如天然的或硬化油、蜡、脂肪、半固体或液体多元醇等。
此外，药物制剂还可以含有防腐剂、增溶剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、矫味剂、调节渗透压的盐、缓冲剂、掩蔽剂或抗氧剂。所述药物制剂还可含有其它具有治疗价值的物质。
剂量可以在宽的范围内变化，当然，所述剂量应与各个具体病例的个体需要相适应。通常，对于口服给药，适宜的每日剂量为每位患者约10至1000mg式Ⅰ化合物，但在需要时，也可以超过上述的上限。
以下实施例1对本发明进行了描述，但并不限定其范围。所有的温度均为摄氏度。
实施例12-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-N-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-异丁酰胺盐酸盐(1∶1.45)a)4-(5-硝基-2-吡啶基)-吗啉(Ⅻ)在10分钟内向20g(126mmol)2-氯-5-硝基吡啶的150ml四氢呋喃溶液中滴加27ml(315mmol)吗啉。将反应混合物继续回流2小时。冷却至室温后，真空除去溶剂并将残余物重新溶于200ml乙酸乙酯。将有机相用200ml 1N碳酸氢钠溶液洗涤，干燥(硫酸镁)然后蒸发得到27.3g(定量)黄色固体状标题化合物。
M.p.142-143℃。b)2，2-二甲基-N-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-丙酰胺(Ⅴ)向27.3g(126mmol)4-(5-硝基-2-吡啶基)-吗啉的600ml甲醇溶液中加入2.5g10％钯/活性炭。将反应混合物进行氢化(室温至约45℃，1巴)，直至已消耗了理论量的氢(约3小时)。滤除催化剂并用2x100ml甲醇洗涤。将滤液真空蒸发得到22.6g紫色的油状物，经薄层色谱分析，该油状物含有约95％的所需苯胺衍生物。
将该粗产物溶于240ml四氢呋喃和60ml乙醚的混合物。冷却至0℃后，一次性加入26ml(189mmol)三乙胺。继续搅拌并且在10分钟内滴加23g(189mmol)新戊酰氯。移走冰浴并将反应混合物室温搅拌1小时。然后，真空蒸除溶剂并将残余物悬浮在200ml 1N碳酸氢钠溶液中。将产物用3×200ml二氯甲烷萃取3次，干燥(硫酸钠)然后蒸发。将固体残余物用乙酸乙酯/己烷1∶8重结晶得到28.6g(86％)白色结晶状标题化合物。
MS m/e(％)∶264(M+H+，100)。c)N-(4-碘-6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-2，2-二甲基-丙酰胺(Ⅵ)将28.4g(108mmol)2，2-二甲基-N-(6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-丙酰胺和49ml(324mmol)N，N，N′，N′-四甲基乙二胺的600ml四氢呋喃溶液在氩气氛下于干冰浴中冷却至-78℃。1小时内，滴加202ml(324mmol)1.6N正丁基锂的己烷溶液。将反应混合物升温至-35℃过夜。再次冷却至-78℃后，在15分钟内滴加溶于60ml四氢呋喃的37g(146mmol)碘。将干冰浴换成冰浴，当反应混合物的温度达到0℃时，在10分钟内加入90g(363mmol)硫代硫酸钠五水合物的250ml水溶液。然后，加入1000ml乙醚并分出有机层。将水层用500ml二氯甲烷萃取两次，将合并的有机层干燥(硫酸镁)然后蒸发。经快速色谱得到15.6g(37％)浅棕色油状标题化合物，其在室温放置后形成结晶。
MS m/e(％)∶389(M+，71)，358(25)，304(43)，57(100)。d)2，2-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-丙酰胺(Ⅷ)将3.50g(9.0mmol)N-(4-碘-6-吗啉-4-基-吡啶-3-基)-2，2-二甲基-丙酰胺、35ml甲苯、18ml2N碳酸钠溶液、312mg(0.27mmol)四(三苯膦)合钯(0)和1.34g(9.9mmol)邻-甲苯基硼酸的混合物在氩气氛下于80℃加热12小时。冷却至室温后，分出水相并用乙酸乙酯洗涤两次。将合并的有机层用50ml盐水洗涤，干燥(硫酸钠)然后蒸发。经快速色谱纯化得到3.23g(定量)白色泡沫状标题化合物。
MS m/e(％)∶354(M+H+，100)。e)6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基胺(Ⅸ)将2.93g(8.28mmol)2，2-二甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-丙酰胺在80ml 3N盐酸溶液和5ml1-丙醇中的悬浮液于90-95℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，用3x20ml乙醚洗涤然后用硅藻土过滤。将滤液用20ml水稀释并在用冰冷却下加入28％氢氧化钠溶液调至pH7-8。将产物用4×100ml二氯甲烷萃取。将合并的有机层用50ml盐水洗涤，干燥(硫酸镁)然后蒸发得到2.31g(定量)白色泡沫状标题化合物。
MS m/e(％)∶269(M+，100)。f)甲基-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-胺(Ⅱ)将2.24g(8.3mmol)6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基胺在17ml原甲酸三甲酯和3滴三氟乙酸中的溶液于130℃加热2小时。将反应混合物蒸发并真空干燥30分钟。将残余的油状物溶于5ml四氢呋喃并在用冰冷却下滴加到630mg(16.6mmol)氢化铝锂的20ml四氢呋喃溶液中。将反应混合物室温搅拌1小时，再次冷却至0℃并通过加入28％盐酸溶液进行酸化(pH1-2)。搅拌5分钟后，加入28％氢氧化钠溶液达到pH10。将溶液用硅藻土过滤，蒸发并通过快速色谱纯化得到1.56g(66％)白色泡沫状标题化合物。
MS m/e(％)∶283(M+，100)。g)2-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-N-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-异丁酰胺(Ⅰ)将1.46g(5.15mmol)甲基-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-胺和1.32ml(7.73mmol)N-乙基二异丙基胺的15ml二氯甲烷溶液在冰浴中冷却并滴加1.8g(5.67mmol)2-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-2-甲基-丙酰氯。将反应混合物升温至35-40℃3小时，然后再次冷却至室温并加入25ml饱和碳酸氢钠溶液进行搅拌。分出有机层，将水相用二氯甲烷萃取。将合并的有机层干燥(硫酸镁)然后蒸发。将残余物通过快速色谱纯化得到2.9g(定量)白色结晶状标题化合物。M.p.131-132℃。h) 2-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-N-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-异丁酰胺盐酸盐(1∶1.45)用冰冷却下，向2.9g(5.13mmol)2-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-N-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-异丁酰胺的50ml乙醚溶液中加入2.8ml3N盐酸的乙醚溶液。于0℃搅拌15分钟后，将悬浮液蒸发至干，重新悬浮在100ml醚中，过滤并真空干燥得到2.82g(89％)白色结晶状标题化合物。
MS m/e(％)∶566(M+H+，100)，588(M+Na+，11)。
实施例A以常规方式生产具有如下组成的片剂mg/片活性物质5乳糖 45玉米淀粉 15微晶纤维素 34硬脂酸镁1片剂重量100实施例B生产具有如下组成的胶囊mg/胶囊活性物质 10乳糖 155玉米淀粉 30滑石 5胶囊总重量 200将活性物质、乳糖和玉米淀粉首先在混合器中混合，然后在粉碎机中混合。混合物返回混合器中，向其中加入滑石并充分混合。将混合物用机器填充到硬明胶胶囊中。
实施例C生产具有如下组成的栓剂mg/栓剂活性物质 15栓剂基质 1285总量 1300将栓剂基质在玻璃或钢容器中熔融，充分混合然后冷却至45℃。此时，向其中加入活性物质的细粉末并搅拌至完全分散。将混合物倒入适宜大小的栓剂模具中，冷却，然后从模具中取出栓剂并在蜡纸或金属箔中单个包装。
权利要求
1．式Ⅰ化合物
2．权利要求1的化合物，所述化合物是2-(3，5-二-三氟甲基-苯基)-N-甲基-N-(6-吗啉-4-基-4-邻-甲苯基-吡啶-3-基)-异丁酰胺。
3．含有权利要求1和2所述化合物以及可药用赋形剂的药物。
4．权利要求3的药物，用于治疗与NK-1受体有关的疾病。
5．权利要求1所定义的式Ⅰ化合物的制备方法，该方法包括，a)将式Ⅱ化合物 与式Ⅲ化合物反应 生成式Ⅰ化合物， 以及，如果需要的话，将得到的化合物转变成可药用酸加成盐。
6．通过权利要求5所定义的方法或等同的方法制备的权利要求1和2中任意一项所述的化合物。
7．式Ⅰ化合物用于治疗疾病用途。
8．权利要求7所述的式Ⅰ化合物的用途，用于治疗与NK-1受体有关的疾病。
9．权利要求1和2中任意一项所述的式Ⅰ化合物在生产用于治疗与NK-1受体有关之疾病的药物中的用途。
10．权利要求9所述的式Ⅰ化合物的用途，用于生产治疗抑郁、焦虑或呕吐的药物。
全文摘要
本发明涉及式Ⅰ化合物:该化合物是2－(3,5－二－三氟甲基－苯基)－N－甲基－N－(6－吗啉－4－基－4－邻－甲苯基－吡啶－3－基)－异丁酰胺。该化合物对NK－1受体具有高亲和性,因此可用于治疗与该受体有关的疾病。
文档编号A61P25/22GK1297888SQ00134260
公开日2001年6月6日 申请日期2000年11月29日 优先权日1999年11月29日
发明者T·M·布拉德, G·A·希金斯, T·霍夫曼, S·M·博利, A·斯雷特 申请人:弗·哈夫曼-拉罗切有限公司