专利名称：用于治疗胰岛素耐受性的邻位取代苯甲酸衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及某些新型的苯甲酸衍生物、制备该类化合物的方法、其在治疗与胰岛素耐受性有关的临床病症中的应用、其治疗应用的方法以及包含其的药物组合物。
背景技术：
胰岛素耐受性综合征(IRS)包括2型糖尿病，其涉及一系列表现，包括伴有高胰岛素血症的胰岛素耐受性、可能的2型糖尿病、动脉压过高、中心性(内脏性)肥胖、通过脂蛋白水平错乱所观察到的血脂障碍，其特征一般为VLDL(极低密度脂蛋白)、小密度LDL颗粒和HDL(高密度脂蛋白)浓度降低和纤维蛋白溶解减少。
最近的流行病学研究已经证明具有胰岛素耐受性的个体心血管发病率和致死率的风险大大增加，尤其是患心肌梗死和中风的风险大大增加。在2型糖尿病中，与动脉粥样硬化有关的病症是高至80％的死亡的原因。
在临床医学中，意识到需要增加患有IRS患者对胰岛素的敏感性，从而纠正认为是造成动脉粥样硬化进程加速的原因的血脂障碍。但是，目前这种疾病一般不能被很好地确定。
在PCT申请WO99/62872中公开了下面式C化合物2-乙氧基-3-[4-(2-{4-甲烷磺酰氧基苯基}乙氧基)苯基]丙酸的S-对映异构体。
据报道，这种化合物是过氧化物酶体增殖剂活化的受体的调节剂(PPAR，对PPAR的综述见T.M.Willson等人，J Med Chem 2000，第43卷，527)并且具有联合的PPARα/PPARγ激动剂活性(Structure，2001，第9卷，699，P.Cronet等人)。这种化合物可有效治疗与胰岛素耐受性有关的病症。
令人吃惊地是，现在发现了一系列可以作为选择性PPARα调节剂的化合物。
本发明的内容本发明提供了式I的化合物以及其可药用的盐和前药 其中n是0、1或2；R1表示卤素、可以任选地被一个或多个氟所取代的C1-4烷基、可以任选地被一个或多个氟所取代的C1-4烷氧基并且其中当n是2时取代基R1可以相同或不同；R2表示无支链的C2-7烷基；R3表示H或OCH3；和W表示O或S。
现在，下面给出式I化合物中R1、R2、R3和W的进一步的值。应当清楚的是，可以在上下文中所限定的定义、权利要求或实施方案中的任何一种来使用这些值。
在第一方面，R1是卤素、C1-4烷基或C1-4烷氧基和n是0、1或2。特别当n是1时，R1是氟、氯或三氟甲基。特别当n是2时，R1是氟。
在第二方面，R2表示乙基或己基。
在第三方面，R3表示H。
在第四方面，R3表示OMe。
在第五方面，W表示O。
在第六方面，W表示S。
术语无支链的C2-7烷基指的是具有2至7个碳原子的直链饱和脂族烃。所说烷基的实例包括乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基和正庚基。
本领域技术人员清楚的是，上面所用的被中断的术语指的是氧原子位于烷基链中而不是末端原子。本说明书中所用的术语“前药”包括在哺乳动物，特别是人体内可以被转化成羧酸基团或其盐或共轭物的羧酸基团的衍生物。应当清楚的是，虽然不受理论束缚，但是认为与该前药有关的大多数活性都来源于该前药将转化成的式I的化合物的活性。可以用本领域技术人员众所周知的常规方法来制备前药。羧基的各种前药在现有技术中是已知的。该类前药衍生物的实例例如可参见a)前药的设计(Design at Prodrugs)，H.Bundgaard主编，(Elsevier，1985)和酶学中的方法(Methods in Enzymdogy).42309-396，K.Widder等人主编(Academic Press，1985)；b)药物设计和开发教程(A Textbook of Drugs Design andDevelopment)，Krogsgaard-Larsen和H.Bundgaard主编，第5章“前药的设计和应用”，H.Bundgaard编写，第113-191页(1991)；c)H.Bundgaard，Advanced Drug Delivery Reviews，81-38(1992)；d)H.Bundgaard等人，Journal of PharmaceuticalSciences，77285(1988)；和e)N.Kakeya等人，Chem Pharm Bull，32692(1984)。
上述文献a至e在这里都被引入作为参考。
体内可裂解的酯就是一类母体分子前药。
式I的化合物具有作为药物的活性，式I的化合物特别是PPARα的选择性激动剂，即其对PPARα的EC50至少比其各自对PPARγ的EC50低四倍，优选地至少低10或50倍，其中所说的EC50是如本文后面试验部分所描述的那样来进行测量和计算的。式I的化合物有效并且具有选择性。
本发明提供了选自下面化合物的化合物2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)-乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙硫基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙硫基]苯甲酸；2-{2-[4-(2-{丁基[2-氟-4-(三氟甲基)苄基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]-乙氧基}苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-{[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-叔丁基苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸；或2-{[2-(4-{2-[(2-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸以及它们可药用的盐。
该化合物特别优选地选自2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙硫基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；或2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；还应当清楚的是，本发明的某些化合物可以以溶剂化以及未溶剂化的形式存在。应当清楚的是，本发明包括所有该类溶剂化的形式。本发明的某些化合物可以以互变异构体的形式存在。应当清楚的是，本发明包括所有该类互变异构体。
在说明书和所附的权利要求中，所给出的化学式或名称应包括其所有立体和光学异构体及其外消旋体以及不同比例的其中存在该类异构体和对映体的各对映体的混合物、以及其可药用的盐。可以用常规技术，例如色谱法或分级结晶法进行异构体的分离。可以通过例如分级结晶、拆分或HPLC将外消旋体分离来进行对映体的分离。可以通过例如分级结晶、HPLC或闪柱色谱法分离异构体混合物来进行非对映体的分离。或者，可以在不会造成外消旋作用或差向异构化作用的情况下由手性起始材料开始进行手性合成，或者通过用手性试剂衍生化来制备立体异构体。所有立体异构体均包括在本发明的范围内。
制备方法本发明化合物可如下所述进行制备。但是，本发明并不仅限于这些方法，还可以如现有技术中所描述的结构相关化合物的制备那样来制备这些化合物。可以根据标准操作或者如下面实验部分的描述来进行这些反应。
可以通过将式II化合物与去保护剂进行反应来制备式I的化合物 其中R1、R2、R3、W和n的定义如上所述，并且PG表示在标准课本“有机合成中的保护基团”Greene和Wuts，第2版(1991)中所述的羧基羟基的保护基团。所说的保护基也可以是树脂，如Wang树脂或2-氯三苯甲基氯树脂。可以用本领域技术人员众所周知的技术来除去保护基。一种该类保护基是其中PG表示C1-6烷氧基或芳基烷氧基例如苄基，从而COPG表示一种酯。可以在0-200℃的温度下或者通过使用微波辐射将该类酯与水解剂，例如氢氧化锂在存在溶剂例如THF和水的混合物的情况下进行反应，或者将其与氢氧化钾在C1-3醇例如甲醇中进行反应，得到式I的化合物。
式II的化合物可以通过将式III的化合物或其盐，例如盐酸盐与式IV的化合物或其酰氯在惰性溶剂，例如二氯甲烷中进行反应来进行制备， 其中R1、R2和n的定义如上所述， 其中R3、W和PG的定义如上所述，该反应可以任选地在存在偶合剂，例如4-二甲基氨基吡啶或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳在二亚胺盐酸盐的情况下进行，反应温度为-25℃至150℃。
式II的化合物还可以通过将式V的化合物与式VI的化合物进行反应来进行制备， 其中PG的定义如上所述， 其中R1、R2、R3、W和n的定义如上所述并且L表示一种离去基团，例如甲基磺酰氧基或卤素，例如溴，该反应可以任选地在存在溶剂，例如乙腈的情况下进行，并且可以任选地在存在碱，例如碳酸钾的情况下进行，反应温度为0至150℃。
式III、IV、V和VI的化合物可以用实施例中所描述的方法或者用与本领域技术人员已知的方法相似的方法来进行制备。
式II、III、IV和V的化合物在式I化合物的制备中是有用的中间体。认为这些化合物中的某些化合物是新的。这里所要求保护的式II、III、IV或V的新型化合物是本发明的另一方面。
可以用常规技术将本发明的化合物从反应混合物中分离出来。
本领域技术人员将意识到，为了选择替代性地或者在一些场合中以更方便的方式获得本发明的化合物，可以以不同的次序进行上述的各加工步骤，和/或可以在整个路线的不同阶段进行各反应(即由特定反应使不同的中间体进行化学转化形成上述相关的化合物)。
需要时，在上面制备方法中的任何一种中，可以用如标准教材“有机合成中的保护基团”，第2版(1991)(Greene和Wuts)所述的保护基团R，将羟基、氨基或其它反应基团保护起来。该保护基团还可以是树脂，如Wang树脂或2-氯三苯甲基氯树脂。可以在上述反应步骤的任何一步之前或之后进行官能团的保护和去保护。可以用本领域技术人员众所周知的技术来除去保护基团。
“惰性溶剂”的表述指的是不会以对目标产物的收率产生不利反应的方式与起始材料、试剂、中间体或产物发生发应的溶剂。
药物制剂本发明的化合物一般是以在可药用剂型中包含游离酸或可药用盐形式活性成分的药物制剂形式通过口服、胃肠外、静脉内、肌内、皮下或其它注射的方式、口腔、直肠、阴道、经皮和/或鼻途径和/或通过吸入来进行给药的。根据所治疗的病症和患者以及给药途径，可以将该组合物以各种剂量进行给药。
在对人进行治疗时，本发明化合物适宜的日剂量为约0.0001-100mg/kg体重，优选地为0.001-10mg/kg体重。
口服制剂特别优选地是可以用本领域技术人员公知的方法来制备从而可以提供范围在0.5mg至500mg之间，例如1mg、3mg、5mg、10mg、25mg、50mg、100mg和250mg的活性化合物剂量的片剂或胶囊。
因此，本发明另一方面提供了一种包含本发明任何一种化合物或其可药用盐与可药用的助剂、稀释剂和/或载体混合的药物制剂。
药理学性质本发明式(I)的化合物可用于预防和/或治疗与固有或诱发性胰岛素敏感性(胰岛素耐受性)降低有关的和与代谢病症(也被称为代谢综合征)有关的临床病症。这些临床病症非限制性地包括一般性肥胖、腹部肥胖、动脉压过高、高胰岛素血症、高血糖、2型糖尿病和特征为表现出胰岛素耐受性的血脂障碍。这种血脂障碍(也被称为致动脉粥样化的脂蛋白性)的特征为未酯化的脂肪酸适当升高、极低密度脂蛋白(VLDL)甘油三酯富集的颗粒增加、高Apo B水平、与低apoAI颗粒水平有关的低高密度脂蛋白(HDL)水平和在存在少量、浓密低密度脂蛋白(LDL)微粒，表型B情况下的高Apo B水平。
期望本发明的化合物可用于治疗患有合并或混合的高血脂症或各种程度的高甘油三酯血症以及伴有或不伴有代谢综合征的其它表现的食后血脂障碍的患者。
期望用本发明化合物进行的治疗由于其抗血脂障碍以及抗炎性，可以降低与动脉粥样硬化有关的心血管致病率和死亡率。所说的心血管疾病病症包括造成心肌梗死、充血性心衰、脑血管疾病和下肢外周动脉机能不全的各种内部器官的大血管病。因为其胰岛素敏化作用，所以期望式I的化合物还可以预防或延迟由代谢综合征和妊娠糖尿病而导致的2型糖尿病的形成。因此，期望其可延迟与糖尿病中的慢性高血糖有关的长期并发症的形成，所说的长期并发症如引起肾疾病、视网膜损害和下肢的外周血管疾病的微血管病。此外，所说的化合物还可用于治疗无论是否与胰岛素耐受性有关的心血管系统外的各种病症，如多囊卵巢综合征、肥胖、癌症和炎性疾病状态，包括神经变性性病症如温和的认识缺损、阿耳茨海默氏病、帕金森氏病和多发性硬化。
期望本发明的化合物可用于控制患有2型糖尿病患者的葡萄糖水平。
本发明提供了一种治疗或预防血脂障碍、胰岛素耐受性综合征和/或代谢病症(如上所述)的方法，其包括给需要其的哺乳动物(特别是人)使用式I的化合物。
本发明提供了一种治疗或预防2型糖尿病的方法，其包括给需要其的哺乳动物(特别是人)使用有效量的式I的化合物。
本发明另一方面提供了式I的化合物作为药物的应用。
本发明另一方面提供了式I的化合物在制造治疗胰岛素耐受性和/或代谢病症的药物中的应用。
联合治疗本发明的化合物可以与用于治疗与动脉粥样硬化如高血压、高血脂症、血脂障碍、糖尿病和肥胖的形成和进行有关的病症的另一种治疗剂联合应用。本发明的化合物可以与降低LDL∶HDL比例的另一种治疗剂或者造成LDL-胆固醇循环水平降低的试剂联用。对患有糖尿病的患者而言，还可以将本发明的化合物与用于治疗与微血管病有关的并发症的治疗剂联用。
本发明的化合物可以与治疗代谢综合征或2型糖尿病以及其相关并发症的其它治疗剂一起使用，所说的这些治疗剂包括双胍类药物，例如二甲双胍、苯乙双胍和丁二胍、胰岛素(合成的胰岛素类似物、糊精)和口服抗高血糖药(其被分成膳食性葡萄糖调节剂和α-葡萄糖苷酶抑制剂)。α-葡萄糖苷酶抑制剂的实例有阿卡糖或伏格列波糖或米格列醇。膳食性葡萄糖调节剂的实例有瑞格列奈或那格列奈。
在本发明的另一方面，式I的化合物或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或其前药可以与另一种PPAR调节剂一起给药。PPAR调节剂非限制性地包括PPARα和/或γ和/或δ激动剂、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药。适宜的PPARα和/或γ激动剂、其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或其前药在本领域中是众所周知的。所说的这些物质包括在WO01/12187、WO01/12612、WO99/62870、WO99/62872、WO99/62871、WO98/57941、WO01/40170、J Med Chem，1996，39，665，治疗专利的专家意见(Expert Opinion onTherapeutic Patents)，10(5)，623-634(特别是列于该专利申请的第634页中所述的化合物)和J Med Chem，2000，43，527中描述的化合物，所说的文件在这里都被引入作为参考。PPARα和/或γ激动剂特别是指BMS 298585、氯贝特、非诺贝特、苯扎贝特、吉非贝特和环丙贝特；GW 9578、吡格列酮、罗格列酮、rivoglitazone、balaglitazone、KRP-297、JTT-501、SB 213068、GW 1929、GW 7845、GW 0207、L-796449、L-165041和GW 2433。PPARα和/或γ激动剂特别是指(S)-2-乙氧基-3-[4-(2-{4-甲烷磺酰氧基-苯基}乙氧基)苯基]丙酸及其可药用的盐。
此外，本发明的联合还可以与磺酰脲类例如格列美脲、格列本脲(优降糖)、格列齐特、格列吡嗪、格列喹酮、氯磺丙脲、甲苯磺丁脲、醋磺己脲、glycopyramide、氨磺丁脲、格列波脲、格列派特、格列噻唑、glibuzole、格列己脲、格列嘧啶、格列平脲、苯磺丁脲、tolcylamide和妥拉磺脲联用。磺酰脲优选地是格列美脲或格列本脲(优降糖)。磺酰脲更优选地是格列美脲。因此，本发明包括将本发明的化合物与一种、两种或多种本段中所描述的现存治疗剂联用。用于治疗2型糖尿病以及其相关并发症的其它现存治疗剂的剂量在本领域中是众所周知的并且已经获得了管理机构例如FDA的批准，并且可以在FDA所印刷的橙色书中找到。或者，联合用药所获得的益处是可以使用较低的剂量。本发明还包括本发明的化合物与降低胆固醇的试剂的联合。本申请中降低胆固醇的试剂非限制性地包括HMG-CoA还原酶(3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶)抑制剂。适宜的HMG-CoA还原酶抑制剂是选自阿伐它汀、柏伐它汀、西立伐它汀、达伐它汀、氟伐它汀、伊伐它汀、洛伐它汀、美伐它汀、nicostatin、nivastatin、帕伐它汀和新伐它汀、或其可药用的盐，尤其是钠盐或钙盐、或其溶剂化物、或该类盐的溶剂化物的它汀类物质。一种特定的它汀类物质是阿伐它汀，或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药。一种更特别的它汀类物质是阿伐它汀钙盐。但是，一种特别优选的它汀类物质是化学名为(E)-7-[4-(4-氟苯基)-6-异丙基-2-[甲基(甲基磺酰基)-氨基]-嘧啶-5-基](3R，5S)-3，5-二羟基庚-6-烯酸，[也被称为(E)-7-[4-(4-氟苯基)-6-异丙基-2-[N-甲基-N-(甲基磺酰基)-氨基]嘧啶-5-基](3R，5S)-3，5-二羟基庚-6-烯酸]的化合物或其可药用的盐或溶剂化物、或该类盐的溶剂化物。在欧洲专利申请EP-A-0521471和Bioorganic and Medicinal Chemistry，(1997)，5(2)，437-444中公开了化合物(E)-7-[4-(4-氟苯基)-6-异丙基-2-[甲基-(甲基磺酰基)-氨基]-嘧啶-5-基](3R，5S)-3，5-二羟基庚-6-烯酸以及其钙和钠盐。后一种它汀类物质现在以通用名罗苏伐它汀而被公知。
在本申请中，术语“降低胆固醇剂”还包括HMG-CoA还原酶抑制剂的化学活性或没有活性的变型，如酯、前药和代谢物。
本发明还包括与胆汁酸螯合剂，例如考来替泊或消胆胺或考来胶联合的本发明的化合物。
本发明还包括与回肠胆汁酸转运系统的抑制剂(IBAT抑制剂)联用的本发明的化合物。
已经对具有IBAT抑制活性的适宜化合物进行了描述，见例如在WO93/16055、WO94/18183、WO94/18184、WO94/24087、WO96/05188、WO96/08484、WO96/16051、WO97/33882、WO98/07749、WO98/38182、WO98/40375、WO98/56757、WO99/32478、WO99/35135、WO99/64409、WO99/64410、WO00/01687、WO00/20392、WO00/20393、WO00/20410、WO00/20437、WO01/34570、WO00/35889、WO00/47568、WO00/61568、WO01/68637、WO01/68096、WO02/08211、WO00/38725、WO00/38726、WO00/38727、WO00/38728、WO00/38729、DE19825804、JP10072371、US5070103、EP251 315、EP417 725、EP489 423、EP549 967、EP573 848、EP624 593、EP624 594、EP624 595、EP869 121、EP864 582、和EP1 070 703中所描述的化合物，这些专利申请的内容，特别是权利要求1和指定实施例中所描述的化合物在这里都被引入作为参考。
适用于本发明的特定类别的IBAT抑制剂是苯并硫杂类(benzothiepines)物质，以及在这里被引入作为参考的WO00/01687、WO96/08484和WO97/33882的权利要求，特别是权利要求1中所描述的化合物。其它适宜类别的IBAT抑制剂有1，2-苯并硫杂氮杂类物质、1，4-苯并硫杂氮杂类(benzothiazepines)物质和1，5-苯并硫杂氮杂类物质。另一类适宜的IBAT抑制剂是1，2，5-苯并硫杂二氮杂类(benzothiazepines)物质。
一种特定的具有IBAT抑制活性的适宜化合物是(3R，5R)-3-丁基-3-乙基-1，1-二氧桥-5-苯基-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并硫杂氮杂-8-基β-D-吡喃葡萄糖醛酸(EP 864 582)。其它适宜的IBAT抑制剂包括下面物质中的一种1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-1′-苯基-1′-[N′-(羧基甲基)氨基甲酰基]甲基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(羧基甲基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-1′-苯基-1′-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲酰基]甲基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-1′-苯基-1′-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲酰基]甲基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-羧基乙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N{(R)-α-[N′-(2-羧基乙基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(5-羧基戊基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-羧基乙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{α-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲酰基]-2-氟苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(R)-(2-羟基-1-羧基乙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{{R)-α-[N′-(R)-(2-羟基-1-羧基乙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-{N-[(R)-α-(N′-{(R)-1-[N″-(R)-(2-羟基-1-羧基乙基)氨基甲酰基]-2-羟基乙基)氨基甲酰基)苄基]氨基甲酰基甲氧基}-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{α-[N′-(羧基甲基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{α-[N′-((乙氧基)(甲基)磷酰基-甲基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3-丁基-3-乙基-5-苯基-7-甲硫基-8-{N-[(R)-α-(N′-{2-[(羟基)(甲基)磷酰基]乙基}氨基甲酰基)苄基]氨基甲酰基甲氧基}-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N′-(2-甲硫基-1-羧基乙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-{N-[(R)-α-(N′-{2-[(甲基)(乙基)磷酰基]乙基}氨基甲酰基)-4-羟基苄基]氨基甲酰基甲氧基}-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-{N-[(R)-α-(N′-{2-[(甲基)(羟基)磷酰基]乙基}氨基甲酰基)-4-羟基苄基]氨基甲酰基甲氧基}-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[(R)-N′-(2-甲基亚磺酰基-1-羧基乙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲氧基-8-[N-{(R)-α-[N′-(2-磺基乙基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基]-2，3，4，5-四氢-1，5-苯并硫杂氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-(R)-1-羧基-2-甲硫基-乙基)氨基甲酰基}-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基-2-(R)-羟基丙基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基-2-甲基丙基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基丁基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-((N-{R)-α-[N-((S)-1-羧基丙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基乙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基-2-(R)-羟基丙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-(2-磺基乙基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基乙基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((R)-1-羧基-2-甲硫基乙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-{(S)-1-[N-((S)-2-羟基-1-羧基乙基)氨基甲酰基]丙基}氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基-2-甲基丙基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-((S)-1-羧基丙基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-[N-((R/S)-α-{N-[1-(R)-2-(S)-1-羟基-1-(3，4-二羟基苯基)丙-2-基]氨基甲酰基}-4-羟基苄基)氨基甲酰基甲氧基]-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-(2-(S)-3-(R)-4-(R)-5-(R)-2，3，4，5，6-五羟基己基)氨基甲酰基]-4-羟基苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；和1，1-二氧代-3，3-二丁基-5-苯基-7-甲硫基-8-(N-{(R)-α-[N-(2-(S)-3-(R)-4-(R)-5-(R)-2，3，4，5，6-五羟基己基)氨基甲酰基]苄基}氨基甲酰基甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，2，5-苯并硫杂二氮杂；或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或其前药。
本发明另一方面提供了一种联合治疗，其包括任选地与带有可药用稀释剂或载体一起使用有效量式I的化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药，同时、相继或独立地使用一种或多种选自下面的试剂CBTP(胆固醇酯转移蛋白)抑制剂，例如在WO00/38725(其在这里被引入作为参考)第7页第22行-第10页第17行所引用和描述的试剂；胆固醇吸收拮抗剂，例如氮杂环丁烷酮如SCH 58235和在US5,767,115(其在这里被引入作为参考)中所描述的试剂；MTP(微粒体转移蛋白)抑制剂，例如在Science，282，751-54，1998(其在这里被引入作为参考)中所描述的试剂；烟酸衍生物，包括缓释和组合产品，例如烟酸(烟碱酸)、阿西莫司和烟酸戊四醇酯；
植物甾醇化合物，例如stanols；普罗布考；抗肥胖化合物，例如奥利斯特(EP 129,748)和西布曲明(GB2,184,122和US 4,929,629)；ω-3脂肪酸，例如OmacorTM；抗高血压化合物，例如血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂、血管紧张素II受体拮抗剂、肾上腺素能(andrenergic)阻滞剂、α肾上腺素能阻滞剂、β肾上腺素能阻滞剂例如美托洛尔、混合α/β肾上腺素能阻滞剂、肾上腺素能兴奋剂、钙通道阻滞剂、AT-1阻滞剂、排盐利尿药、利尿剂或血管舒张药；CB1拮抗剂或反向激动剂，例如在WO 01/70700和EP 65635中所描述的物质；阿司匹林；黑色素浓缩激素(MCH)拮抗剂；PDK抑制剂；或核受体调节剂，例如LXR、FXR、RXR和RORα；或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药，可任选地将其与可药用的稀释剂或载体一起给药于需要该类治疗的温血动物，如人。
可以与式I的化合物联用的特定的ACE抑制剂或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或其前药非限制性地包括下面的化合物阿拉普利、alatriopril、莫维普利钙、血管紧张肽转化酶抑制肽、贝那普利、盐酸贝那普利、贝那普利拉、苯甲酰基卡托普利(benzoylcaptopril)、卡托普利、卡托普利-半胱氨酸、卡托普利-谷胱甘肽、西那普利、ceranopril、西罗普利、西拉普利、西拉普利拉、地拉普利、地拉普利-二酸、依那普利、依那普利拉、enapril、epicaptopril、foroxymithine、fosfenopril、fosenopril、fosenopril钠、福辛普利、福辛普利钠、福辛普利拉、fosinoprilicacid、glycopril、hemorphin-4、伊曲普利、咪达普利、吲哚普利、吲哚普利拉(indolaprilat)、赖苯普利、赖诺普利、lyciumin A、lyciumin B、mixanpril、莫苷普利、莫苷普利拉、莫维普利、muraceinA、muracein B、muracein C、喷托普利、培哚普利、培哚普利拉、pivalopril、匹伏普利、喹那普利、盐酸喹那普利、喹那普利拉、雷米普利、雷米普利拉、螺普利、盐酸螺普利、螺普利拉、spiropril、盐酸spiropril、替莫普利、盐酸替莫普利、替普罗肽、群多普利、群多普利拉、乌替普利、扎普利、扎普利拉、佐芬普利和佐芬普利拉。用于本发明的优选的ACE抑制剂是雷米普利、雷米普利拉、赖诺普利、依那普利和依那普利拉。用于本发明的ACE抑制剂更优选地是雷米普利和雷米普利拉。
与式I的化合物联用的优选的血管紧张素II拮抗剂、其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或其前药非限制性地包括下面的化合物坎地沙坦，坎地沙坦西酯、氯沙坦、缬沙坦、依贝沙坦、他索沙坦、替米沙坦和依普沙坦。用于本发明的血管紧张素II拮抗剂或其可药用的衍生物特别优选地是坎地沙坦和坎地沙坦西酯。
因此，本发明的另一个特征是提供了一种治疗需要该类治疗的温血动物，如人的2型糖尿病以及其并发症的方法，其包括给所说的哺乳动物使用有效量的式I的化合物或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药并同时、相继或独立地使用有效量的一种在这种联合部分所描述的其它化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药。
因此，本发明的另一个特征是提供了一种治疗需要该类治疗的温血动物，如人的高血脂情况的方法，其包括给所说的哺乳动物使用有效量的式I的化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药，并同时、相继或独立地使用有效量的一种在这种联合部分所描述的其它化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药。
本发明另一方面提供了一种包含式I的化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药，和一种在这种联合部分所描述的其它化合物或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药，以及可药用的稀释剂或载体的药物组合物。
本发明另一方面提供了一种包含式I的化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药，和一种在这种联合部分所描述的其它化合物或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药的试剂盒。
本发明另一方面提供了一种试剂盒，它包含a)第一单位剂型形式的式I的化合物，或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药；b)第二单位剂型形式的一种在这种联合部分所描述的其它化合物或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药；和c)用于包含所说的第一和第二剂型的容器装置。
本发明另一方面提供了一种试剂盒，它包含a)第一单位剂型形式的具有可药用的稀释剂或载体的式I的化合物，或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药；b)第二单位剂型形式的一种在这种联合部分所描述的其它化合物或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药；和c)用于包含所说的第一和第二剂型的容器装置。
本发明的另一特征是提供了式I的化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药，和一种在这种联合部分所描述的其它化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药在制造用于治疗温血动物如人的代谢综合征或2型糖尿病以及其有关的并发症的药物中的应用。
本发明另一特征是提供了式I的化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药，和一种在这种联合部分所描述的其它化合物、或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药在制造治疗温血动物如人的高血脂病症的药物中的应用。
本发明另一方面提供了一种联合治疗，其包括给需要该类治疗的温血动物如人任选地与可药用的稀释剂或载体一起使用有效量的式I的化合物，或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药，并且同时、相继或独立地任选地与可药用的稀释剂或载体一起使用有效量的一种在这种联合部分所描述的其它化合物，或其可药用的盐、溶剂化物、该类盐的溶剂化物或前药。
加工实施例1H NMR和13C NMR测量是用Varian Mercury 300或Varian UNITY加400、500或600分光计进行的，其是分别在300、400、500和600MHz的1H频率下和75、100、125和150MHz的13C频率下进行的。测量是以δ刻度(δ)为基础进行的。
除非另外说明，所给出的化学位移是在使用作为内标的溶剂的情况下以ppm为单位给出的。
缩写IRS 胰岛素耐受性综合征TLC 薄层色谱HOBT1-羟基苯并三唑水合物DIBAH 氢化二异丁基铝DMSO二甲基亚砜EtOAc 乙酸乙酯DMF N，N-二甲基甲酰胺THF 四氢呋喃HPLC高效液相色谱MeCN乙腈TFA 三氟醋酸Pd/C钯披炭HATUO-(7-氮杂苯并三唑基-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓(uronium)六氟磷酸盐DCM 二氯甲烷TBTUO-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓四氟硼酸盐DIPEA N，N-二异丙基乙基胺DMAP4-二甲氨基吡啶三胺三(羟甲基)氨基甲烷ISOLUTEFLASH Si是一种适于色谱法的二氧化硅柱聚合物载体上的硼氢化合物是位于Amberlite IRA-400(得自Aldrich)的硼氢化物。
LC-MS 液相色谱-质谱RT 室温T 三重峰S 单峰D 双峰Q 四重峰
Qvint五重峰M多重峰br 宽峰bs 宽单峰dm 多重峰的双峰bt 宽三重峰dd 成对的双峰实施例1a)[4-(2-羟基乙基)苯氧基]乙酸叔丁酯将溶解于乙腈(25ml)中的4-(2-羟基乙基)苯酚(3.8ml，25.834mmol)、碳酸钾(7.085g，51.267mmol)和溴乙酸叔丁酯(5.000g，25.834mmol)的混合物在回流下煮沸16小时。将溶剂减压蒸发。将残余物溶解于EtOAc中并用盐水和水对其进行洗涤，用MgSO4干燥然后减压蒸发，得到目标产物(6.00g，收率92.8％)1H-NMR(400MHz，CDCl3)1.52(s，9H)，2.98(t，2H)，3.46(t，2H)，4.92(s，2H)，6.89-6.97(m，4H)b)(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯将[4-(2-羟基乙基)苯氧基]乙酸叔丁酯(6.000g，23.781mmol)和三乙胺(9.9ml，71.341mmol)溶解于DCM中。将该混合物冷却至-10℃并向该混合物中滴加甲磺酰氯(2.8ml，35.671mmol)。使该反应混合物达到室温并将其搅拌16小时。将该混合物用DCM进行稀释。将有机层用水、盐水和0.3M KHSO4进行洗涤，用MgSO4干燥，然后减压蒸发。得到7.5g浅黄色晶体(收率95.5％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)1.52(s，9H)，2.98(t，2H)，3.10(s，3H)，3.46(t，2H)，4.92(s，2H)，6.89-6.97(m，4H)c)2-{2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸甲酯将水杨酸甲酯(2.7ml，21.187mmol)溶解于乙腈中，并向其中加入碳酸钾(5.856g，42.373mmol)。将该混合物冷却至-10℃，然后向其中加入(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯。将该混合物在回流下煮沸16小时，然后将溶剂减压蒸发。将残余物溶解于EtOAc中，用水和盐水洗涤，然后将有机层用MgSO4干燥并通过蒸发除去溶剂。将该粗产物用闪柱色谱进行纯化(硅胶60 0.004-0.063mm)用EtOAc∶甲苯50∶50作为洗脱剂。汇集包含目标产物的级分，并将溶剂蒸发。得到5.0g纯品(收率61.1％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)；1.48(s，9H)，3.08(s，3H)，3.87(t，2H)，4.18(t，2H)，4.49(s，2H)，6.84(d，2H)，6.90-6.98(m，2H)，7.20-7.26(m，2H)，7.38-7.43(m，1H)，7.7(dd，1H)d)(4-{2-[2-(甲氧基羰基)苯氧基]乙基}苯氧基)乙酸将2-{2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸甲酯(0.400g，1.0351mmol)溶解于DCM中并向其中加入三氟乙酸(0.8ml，8.281mmol)。将该混合物在室温下搅拌3h。将溶剂蒸发，得到325mg白色粉末。
1H-NMR(600MHz，CDCl3)；3.08(t，2H)，3.86(s，3H)，4.18(t，2H)，4.64(s，2H)，6.84-6.96(m，4H)，7,23(d，2H)，7.37-7.42(m，1H)，7.75(dd，1H)e)2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]-苯甲酸甲酯将(4-{2-[2-(甲氧基羰基)苯氧基]乙基}苯氧基)乙酸(0.200mg，0.605mmol)溶解于DMF中并将其在冰浴上进行冷却。向其中加入N-(2-氟苄基)乙胺(0.102g，0.666mmol)、TBTU(0.214g，0.666mmol)和DIPEA(0.22ml，1.271mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌16h。加入EtOAc并将有机相用两份各20ml的NaCO3(饱和)进行洗涤。将有机相用MgSO4干燥并通过蒸发除去溶剂。将粗品用制备HPLC纯化(开始使用乙腈/缓冲剂60/40，然后在25分钟将乙腈浓度增加至100％乙腈，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵(0.1M)的混合物，柱KR-100-7-C8，50*500，流速80ml/min)。在冷冻干燥后得到145mg目标产物(收率71.1％)1H-NMR(400MHz，CD3CO)(旋转异构体)；1.08，1.17(t，t，3H)，2.96(s，3H)，3.07(m，2H)，3.31，3.36(m，2H)，4.21(m，2H)，4.85(s，2H)，4.56-4.82(m，2H)，6.18(d，1H)，6.88-7.06(m，3H)，7.18-7.35(m，6H)，7.42(m，1H)，7.70(d，1H)f)2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸在Smith合成器小瓶中将2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(0.200g，0.115mmol)溶解于3ml THF中然后向该小瓶中加入1.5ml水和氢氧化锂(0.032g，1.335mmol)。给该小瓶盖上帽，并将其放到微波炉(Smith合成器)中。然后将该反应加热至150℃加热6分钟。根据LC-MS确定反应进行完全。将溶剂蒸发掉。将残余物溶解于乙醚(30ml)中并用NaHCO3(饱和)(2×20ml)洗涤。将碱性水层用2M HCl酸化至pH1。将水层用三份DCM(每份20ml)进行萃取，将萃取液合并，干燥，蒸发，得到160mg纯的目标产物。
1H-NMR(400MHz，CD3CO)(旋转异构体)；1.07，1.15(t，t，3H)，3.10(m，2H)，3.30，3.36(m，m，2H)，4.21(m，2H)，4.55-4.67(m，2H)，4.90(s，2H)，6.20(d，1H)，6.87-7.06(m，3H)，7.18-7.35(m，6H)，7.40(m，1H)，7.70(d，1H)实施例2a)2-溴-N-(2，4-二氟苄基)-N-庚基乙酰胺将N-(2，4-二氟苄基)-N-庚基胺(2.004g，8.304mmol)溶解于DCM(30ml)中。然后将其在冰浴上进行冷却。向其中加入三乙胺(1.092g，10.796mmol)，然后向其中滴入溴乙酰氯(1.438g，9.135mmol)。将该混合物搅拌2小时(冰浴)。然后将其用水(加有1％盐酸，pH～3)、水和盐水进行洗涤，然后干燥(硫酸镁)和蒸发。将粗品油溶解于DCM中，然后将其负载到一种柱上(ISOLUTESI 5g/25ml)并用更多的DCM进行洗脱。得到2.412g油状产物，收率80％1H NMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ0.88-0.93(m，3H)，1.27-1.34(m，8H)，1.52-1.68(m，2H)，3.28-3.35(m，2H)，3.90-4.15(m，2H)，4.61，4.63(s，s，2H)，6.81-6.94(m，2H)和7.15-7.20，7.34-7.39(m，1H).
b)N-(2，4-二氟苄基)-N-庚基-2-[4-(2-羟基乙基)-2-甲氧基苯氧基]乙酰胺将2-溴-N-(2，4-二氟苄基)-N-庚基乙酰胺(135mg，0.373mmol)、高香草醇(homovanillyl alcohol)(63mg，0.373mmol)和无水碳酸钾(77mg，0.559mmol)在乙腈(10ml)中进行混合。将该混合物加热回流4小时，然后将其蒸发至干。将残余物(另外加入DCM，1ml×2)负载到一种柱上(ISOLUTESI，1g/6ml)。用DCM，然后用MeOH/DCM(0.5∶99.5，然后1∶99)进行洗涤。将产物级分合并并蒸发。得到132mg油状产物，收率79％。
1H NMR(旋转异构体，400MHz，CDCl3)δ0.82-0.87(m，3H)，1.17-1.28(m，8H)，1.43-1.68(m，2H)，2.75-2.80(m，2H)，3.24-3.32(m，2H)，3.73-3.84(m，5H)，4.58，4.66(s，s，2H)，4.74，4.76(s，s，2H)，6.67-6.86(m，5H)和7.08-7.14，7.23-7.29(m，1H).
c)2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)乙基甲磺酸酯将N-(2，4-二氟苄基)-N-庚基-2-[4-(2-羟基乙基)-2-甲氧基苯氧基]乙酰胺(A)(132mg，0.294mmol)溶解于DCM(10ml)中。将其在冰浴上冷却。向其中加入三乙胺(0.05ml，0.352mmol)，然后向其中滴入甲磺酰氯(37mg，0.323mmol)。在30分钟后除去该冷却浴。将该混合物在室温下搅拌过夜。LS-MS表明有约50％的A没有反应。将该混合物在冰浴上冷却并向其中加入0.05ml三乙胺，然后加入0.025ml甲磺酰氯。在加入后，除去该冷却浴并将该混合物再搅拌5小时。然后，将其用水(x2)和盐水进行洗涤，干燥(硫酸镁)和蒸发。剩下138mg油状产物，然后不需要进一步纯化而将其用于下一步。
d)2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯将2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)乙基甲磺酸酯(138mg，0.262mmol)溶解于乙腈(10ml)中，向其中加入2-羟基苯甲酸甲酯(40mg，0.262mmol)，然后向其中加入无水碳酸钾(54mg，0.392mmol)。将该混合物回流过夜，然后蒸发至干。向其中加入水(10ml)和乙酸乙酯(10ml)并将两相分开。将有机相用水和盐水进行洗涤，干燥(硫酸镁)和蒸发。将残余物上柱色谱(ISOLUTESI，2g/6ml)，用DCM，MeOH/DCM(1∶99)作为洗脱剂，得到78mg目标产物，收率45％(两步)。
1H NMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ0.87-0.91(m，3H)，1.22-1.32(m，8H)，1.48-1.63(m，2H)，3.09-3.14(m，2H)，3.28-3.35(m，2H)，3.80，3.89(s，s，3H)，3.89(s，3H)，4.21-4.25(m，2H)，4.62，4.71(s，s，2H)，4.79，4.81(s，s，2H)，6.77-7.01(m，7H)，7.28-7.33(m，1H)，7.13-7.18，7.28-7.33(m，m，1H)，7.45(t，1H)和7.81(d，1H).
e)2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)乙氧基]苯甲酸将溶解于THF(2ml)中的2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(74mg，0.127mmol)与溶解于水(1ml)中的氢氧化锂(6.1mg，0.254mmol)进行混合。将该混合物在微波炉(Smith合成器)中在150℃下辐射8分钟。LC-MS表明该反应不完全。将其在该炉中再辐射10分钟，LC-MS表明几乎没有变化。向其中再加入3mg氢氧化锂，其后将其在该炉中在150℃下再处理8分钟。LC-MS表明其仍然与之前相同。向其中再加入3mg氢氧化锂和1ml水。将所得的混合物在该炉中在150℃下再处理10分钟，LC-MS表明反应完全。蒸发除去THF。将残余物用1％盐酸酸化至pH约为5，然后用乙酸乙酯(10ml)萃取。将萃取物干燥(硫酸镁)和蒸发。将残余物用柱色谱(ISOLUTESI，1g/6ml)进行纯化，用DCM，然后用MeOH/DCM(1∶99)作为洗脱剂，得到60mg目标产物，收率83％。
1H NMR(旋转异构体，400MHz，CDCl3)δ0.82-0.87(m，3H)，1.18-1.28(m，8H)，1.43-1.61(m，2H)，3.10-3.15(m，2H)，3.24-3.31(m，2H)，3.77，3.85(s，s，3H)，4.39-4.44(m，2H)，4.59，4.66(s，s，2H)，4.77，4.78(s，s，2H)，6.72-6.91(m，5H)，7.01(d，1H)，7.09(t，1H)，7.10-7.17，7.26-7.32(m，m，1H)，7.51(t，1H)和8.13(d，1H).
13C NMR(旋转异构体，75MHz，CDCl3)δ14.07，22.55，26.79，27.02，28.57，28.93，31.70，35.18，41.30，41.34，44.02，45.89，46.99，55.71，55.82，68.19，68.94，70.66，103.38(t)，103 88(t)，111.35(d)，111.39(d)，112.32，112.41，112.46，114.76，117.64，119.60(dd)，120.07(dd)，120.53，122.06，129.50(dd)，130.54，130.59，131.55(dd)，133.60，134.78，146.26，146.39，149.67，157.10，161.60(dd)，160.68(dd)，161.97(dd)，162.24(dd)，165.12，167.75和167.93实施例3a)N-(4-氯苄基)乙酰胺将乙酸(1.321g，22.000mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入1-(4-氯苯基)甲胺(2.804g，19.800mmol)并将该混合物冷却至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(7.770g，24.200mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(5.971g，46.200mmol)。将该溶液在室温下搅拌2小时。向其中加入EtOAc(20ml)，将有机相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂。将残余物用制备HPLC纯化(最初的流动相用乙腈/缓冲剂60/40等度洗脱，然后将乙腈浓度增至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。将包含产物的级分汇集并通过蒸发除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)并将有机相用两份盐水进行洗涤，干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到2.337g N-(4-氯苄基)乙酰胺(收率57.8％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ1.96(s，3H)，4.31(d，2H)，6.46(bs，1H)，7.16(d，2H)，7.25(d，2H).
b)N-(4-氯苄基)-N-乙基胺将N-(4-氯苄基)乙酰胺(2.337g，12.726mmol)溶解于THF(100ml)中并将其在氩气气氛下冷却至0℃。向其中加入含有硼烷的(甲硫基)甲烷化合物(1∶1)并将该混合物在室温下回流过夜。逐渐向其中加入HCl(15ml，10％)并将其搅拌过夜。通过蒸发除去溶剂。向其中加入乙醚(20ml)并用K2CO3(3×15ml)将产物萃取到水相中。将水相用HCl(10ml，10％)酸化并用EtOAc(3×15ml)将产物萃取到有机相中。将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂得到0.938g N-(4-氯苄基)-N-乙基胺(收率43.4％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ1.11(t，3H)，2.65(q，2H)，3.74(s，2H)，7.23-7.28(m，4H).
c)2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯将(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巯基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸钾(4.795g，34.694mmol)。将该溶液在60℃下搅拌10小时。向其中加入EtOAc(40ml)并将有机相用两份盐水(2×40ml，aq)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯。将这种材料不进行进一步纯化地用于下一步。
d)[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]-硫基}乙基)-苯氧基]乙酸将2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)在室温下处理4h。将该混合物蒸发并与甲苯一起共沸。将该粗品用制备HPLC纯化(最初的流动相为等度洗脱的乙腈/缓冲剂60/40，然后将乙腈浓度增至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，将有机相用两份盐水进行洗涤，然后干燥(MgSO4).通过蒸发除去溶剂，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]-硫基}乙基)-苯氧基]乙酸(两步的总收率为63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.93-2.98(m，2H)，3.12-3.17(m，2H)，3.92(s，3H)，4.67(s，2H)，6.88(d，2H)，7.13-7.21(m，3H)，7.33(d，1H)，7.41-7.46(m，1H)，7.96(dd，1H).
e)2-{[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙基]硫基]苯甲酸甲酯将[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.200g，0.577mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-(4-氯苄基)-N-乙基胺(0.108g，0.635mmol)并将该混合物冷却至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(0.204g，0.635mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.157g，1.212mmol)。将该溶液在室温下搅拌过夜。向其中加入水(100ml)并将水相用乙醚(3×20ml)进行萃取。将有机相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂。将残余物用闪柱色谱进行纯化(用等度洗脱的庚烷/EtOAc 30/70开始，然后将EtOAc浓度增至100％，(硅胶600.004-0.063mm)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去溶剂，得到0.085g 2-{[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸甲酯(收率29.6％)。
1HNMR(旋转异构体，300MHz，CDCl3)δ1.09-1.21(m，3H)，2.91-2.99(m，2H)，3.11-3.18(m，2H)，3.32-3.43(m，2H)，3.92(s，3H)，4.57-4.75(m，4H)，6.78，6.92(d，d，2H)，7.12-7.46(m，9H)，7.96(d，1H).
f)2-{[2-(4{-2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸将2-{[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙基]硫基}苯甲酸甲酯(0.085g，0.170mmol)溶解于乙腈/水(1/1，4ml)混合物中并向其中加入氢氧化锂(0.008g，0.341mmol)。该反应在单节微波炉(5min，150℃)中进行。通过蒸发除去溶剂，然后向其中加入HCl(2ml，1M)。将水相用两份EtOAc(20ml)萃取。将所合并的有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.073g油状物形式的2-{[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸(收率88.4％)，通过冷却和放置使其固化。
1HNMR(旋转异构体，400MHz，CDCl3)δ1.09-1.20(m，3H)，2.91-2.98(m，2H)，3.11-3.17(m，2H)，3.33-3.42(m，2H)，4.58-4.77(m，4H)，6.79，6.92(d，d，2H)，7.11-7.49(m，9H)，8.10(d，1H)13C NMR(旋转异构体，100MHz，CDCl3)δ12.23，13.77，33.70，33.82，41.09，41.30，47.42，49.64，67.37，67.91，114.69，114.81，123.97-135.58(复杂多重峰)，142.22，156.45，156.57，168.20，170.63用相似的方式制备下面的两个实施例实施例42-[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸。
实施例52-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸。
实施例6a)将乙酸(1.321g，22.000mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入1-[4-(三氟甲基)苯基]甲胺(3.468g，19.800mmol)并将该混合物冷却至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(7.770g，24.200mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(5.971g，46.200mmol)。将该溶液在室温下搅拌2小时。向其中加入EtOAc(20ml)并将有机相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂。将粗品用制备HPLC纯化(开始用等度洗脱的乙腈/缓冲剂60/40，然后将乙腈浓度增至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，将有机相用两份盐水进行洗涤，然后干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到3.085g N-[4-(三氟甲基)苄基]乙酰胺(收率64.6％)。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ2.0(s，3H)，4.42(d，2H)，6.58(bs，1H)，7.35(d，2H)，7.55(d，2H)b)将N-[4-(三氟甲基)苄基]乙酰胺(3.085g，14.204mmol)溶解于THF(100ml)中并将其在氩气下冷却至0℃。向其中加入含有硼烷的(甲硫基)甲烷化合物(1∶1)(2.698g，35.511mmol)并将该混合物在室温下回流过夜。逐渐向其中加入HCl(15ml，10％)并将其搅拌过夜。通过蒸发除去溶剂。向其中加入乙醚(20ml)并用K2CO3(3×15ml)将产物萃取到水相中，将水相用HCl(10ml，10％)酸化并用EtOAc(3×15ml)将产物萃取到有机相中。将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.809g N-[4-(三氟甲基)苄基]乙胺(收率28％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ1.05(t，3H)，1.3(s，1H)，2.62(q，2H)，3.78(s，2H)，7.38(d，2H)，7.3(d，2H)c)将(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巯基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸钾(4.795g，34.694mmol)。将该溶液在60℃下搅拌10小时。向其中加入EtOAc(40ml)并将有机相用两份盐水(2×40ml，aq)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯粗品。将该粗品不进一步纯化地用于下一步。
d)将2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并将其在室温下用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)处理4h。将该混合物蒸发并与甲苯一起共沸。将粗品用制备HPLC纯化(开始用等度洗脱的乙腈/缓冲剂60/40，然后将乙腈浓度增至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，将有机相用两份盐水进行洗涤并干燥(MgSO4)。通过蒸发除去溶剂，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(两步的总收率为63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.82(t，2H)，3.15(t，2H)，3.82(s，3H)，4.35(s，2H)，6.78(d，2H)，7.18(d，2H)，7.23(t，1H)，7.51(d，1H)，7.55(t，1H)，7.85(d，1H)e)将[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.200g，0.577mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-[4-(三氟甲基)苄基]乙胺(0.129g，0.635mmol)并将该混合物冷却至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(0.204g，0.635mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.157g，1.212mmol)。将该溶液在室温下搅拌过夜。向其中加入水(100ml)并将水相用乙醚(3×20ml)进行萃取。将有机相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂。将粗品用闪柱色谱进行纯化(开始使用等度洗脱的庚烷/EtOAc30/70，然后将EtOAc浓度增至100％，(硅胶60 0.004-0.063mm)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去溶剂，得到0.085g 2-({2-[4-(2-{乙基[4-(三氟甲基)苄基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(收率27.7％)。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ1.1-1.23(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.42(m，2H)，3.9(s，3H)，4.7-4.82(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，7.1-7.5(m，9H)，7.97(d，1H)f)将2-({2-[4-(2-{乙基[4-(三氟甲基)苄基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]-乙基}硫基)苯甲酸甲酯(0.085g，0.160mmol)溶解于乙腈/水(1/1，4ml)的混合物中，然后向其中加入氢氧化锂(0.008g，0.320mmol)。该反应是在单节微波炉(5min，150℃)中进行的。通过蒸发除去溶剂和加入HCl(2ml，1M)来进行后处理。用两份EtOAc(20ml)对水相进行萃取，将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.07773g 2-({2-[4-(2-{乙基[4-(三氟甲基)苄基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸(收率93.0％)。
1HNMR(旋转异构体，400MHz，CDCl3)δ1.02-1.25(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.38(m，2H)，4.60-4.82(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，7.1-7.5(m，9H)，7.97(d，1H)实施例7将2-{2-[4-(2-{丁基[2-氟-4-(三氟甲基)苄基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸甲酯(0.230g，0.410mmol)溶解于THF/水(1/1，4ml)的混合物中，向其中加入氢氧化锂(0.015g，0.617mmol)。该反应是在单节微波炉中进行的(14min，150℃)。通过蒸发除去溶剂并加入HCl(2ml，1M)来进行后处理。将水相用两份EtOAc(20ml)进行萃取。将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.212g 2-{2-[4-(2-{丁基[2-氟-4-(三氟甲基)苄基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸(收率94.5％)。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ0.82-1.0(bm，3H)，1.2-1.4(bm，2H)，1.65-1.7(bm，2H)，3.13(m，2H)，3.32(m，2H)，4.4(m，2H)，4.63-4.8(M，4H)，6.7-7.6(bm，10H)，8.1(d，1H)实施例8a)将(4-{2-[2-(甲氧基羰基)苯氧基]乙基}苯氧基)乙酸(0.150g，0.454mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-(2，4-二氟苄基)-N-丙基胺(0.084g，0.454mmol)并将该混合物冷却至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(0.160g，0.499mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.123g，0.954mmol)。将该溶液在室温下搅拌2小时。向其中加入EtOAc(20ml)并将水相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.220g 2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(收率97.4％)。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ0.8-1.0(bm，3H)，1.45-1.7(bm，2H)3.1(m，2H)，3.28(bm，2H)，3.9(s，3H)，4.2(q，2H)，4.6-4.75(M，4H)，6.7-7.0(bm，6H)，7.1-7.3(bm，3H)，7.4(m，1H)，7.78(d，1H)b)将2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(0.22g，0.442mmol)溶解于THF/水(1/1，4ml)混合物中。向其中加入氢氧化锂(0.021g，0.884mmol)。该反应是在单节微波炉中进行的(14min，150℃)。通过蒸发除去溶剂并加入HCl(2ml，1M)来进行后处理。用两份EtOAc(20ml)对水相进行萃取，将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.180g 2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(丙基)-氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸(收率84.2％)。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ0.8-1.0(bm，3H)，1.45-1.7(bm，2H)，3.14(m，2H)，3.28(bm，2H)，4.4(q，2H)，4.62(s，2H)，4.75(s，2H)，6.7-7.35(bm，9H)，7.52(t，1H)，8.12(d，1H)实施例9a)将(4-{2-[2-(甲氧基羰基)苯氧基]乙基}苯氧基)乙酸(0.150g，0.454mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-苄基-N-乙基胺(0.061g，0.454mmol)并将该混合物冷却至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)-(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(0.160g，0.499mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.123g，0.954mmol)。将该溶液在室温下搅拌2小时。向其中加入EtOAc(20ml)并将有机相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.138g 2-[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(收率67.9％)。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ1.07-1.22(bm，3H)，3.1(m，2H)，3.20(bm，2H)，3.9(s，3H)，4.2(q，2H)，4.6-4.8(M，4H)，6.8-7.02(bm，4H)，6.18-7.5(bm，8H)，7.78(d，1H)b)将2-[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(0.138g，0.308mmol)溶解于THF/水(1/1，4ml)的混合物中。向其中加入氢氧化锂(0.015g，0.617mmol)。该反应是在单节微波炉中进行的(14min，150℃)。通过蒸发除去溶剂并加入HCl(2ml，1M)来进行后处理。将水相用两份EtOAc(20ml)萃取，将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.146g 2-[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ1.02-1.22(bm，3H)，3.1(m，2H)，3.25-3.5(bm，2H)，4.2(q，2H)，4.55-4.8(M，4H)，6.8-7.4(bm，11H)，7.5(m，1H)，8.1(d，1H).
实施例10a)将(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巯基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸钾(4.795g，34.694mmol)。将该溶液在60℃下搅拌10小时。向其中加入EtOAc(40ml)并将有机相用两份盐水(2×40ml，aq)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯粗品。将该粗品不进行进一步纯化地用于下一步中。
b)将2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)在室温下处理4h。将该混合物蒸发并与甲苯一起共沸。将粗品用制备HPLC纯化(开始使用等度洗脱的乙腈/缓冲剂60/40，然后将乙腈浓度增加至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，将有机相用两份盐水进行洗涤，然后干燥(MgSO4)。通过蒸发除去溶剂，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)-苯氧基]乙酸(两步的总收率为63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.82(t，2H)，3.15(t，2H)，3.82(s，3H)，4.35(s，2H)，6.78(d，2H)，7.18(d，2H)，7.23(t，1H)，7.51(d，1H)，7.55(t，1H)，7.85(d，1H)c)将[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.200g，0.577mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入N-苄基-N-乙基胺(0.086g，0.635mmol)并将该混合物冷却至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(0.204g，0.635mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.157g，1.212mmol)。将该溶液在室温下搅拌过夜。向其中加入水(100ml)并将水相用乙醚(3×20ml)萃取。将有机相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂。将粗品用闪柱色谱进行纯化(开始使用等度洗脱的庚烷/EtOAc 30/70，然后将EtOAc浓度增至100％，(硅胶600.004-0.063mm)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去溶剂，得到0.137g 2-{[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙基]硫基}苯甲酸甲酯(收率51.2％)。
d)将2-{[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸甲酯(0.137g，0.296mmol)溶解于乙腈/水(1/1，4ml)的混合物中，向其中加入氢氧化锂(0.014g，0.591mmol)。该反应是在单节微波炉中进行的(5min，150℃)、通过蒸发除去溶剂并加入HCl(2ml，1M)来进行后处理。将水相用两份EtOAc(20ml)进行萃取，将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.111g 2-{[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸(收率83.5％)。
1HNMR(旋转异构体，400MHz，CDCl3)δ1.02-1.30(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.40(m，2H)，4.58(s，2H)，4.63-4.92(bm，4H)，6.85-7.0(bm，2H)，7.0-7.53(m，10H)，7.97(d，1H)实施例11a)N-(4-叔丁基苄基)-N-乙基胺(0.143g，0.746mmol)在N2下溶解于干燥乙腈中并向其中加入N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.371g，2.867mmol)。将该混合物搅拌30分钟并向其中加入2-{2-[4-(2-氯-2-氧代乙氧基)苯基]乙氧基}苯甲酸甲酯(0.200g，0.573mmol)。将该溶液在室温下搅拌过夜。将粗品用闪柱色谱法进行纯化(开始使用等度洗脱的庚烷/EtOAc 50/50，然后将EtOAc浓度增至100％，(硅胶60 0.004-0.063mm)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去EtOAc，得到0.229g 2-[2-(4-{2-[(4-叔丁基苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(收率79.3％)。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ1.07-1.23(bm，3H)，2.23(m，9H)，3.08(m，2H)，3.30-3.5(bm，2H)，3.87(s，3H)，4.18(m，2H)，4.58(d，2H)，4.63-4.8(m，2H)6.77-7.43(m，11H)，7.78(d，1H)b)将2-[2-(4-{2-[(4-叔丁基苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(0.2290g，0.455mmol)溶解于THF(新蒸馏的)/水(2/1，3ml)的混合物中，向其中加入氢氧化锂(0.218g，0.909mmol)。该反应是在单节微波炉中进行的(5min，150℃)。通过蒸发除去THF。加入水(10ml)并将碱性水相用乙醚(2×10ml)进行洗涤。加入HCl(2ml，1M，pH1)。将水相用两份DCM(20ml)进行萃取，将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.163g 2-[2-(4-{2-[(4-叔丁基苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸(收率73.2％)。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ1.07-1.21(bm，3H)，2.28(m，9H)，3.12(m，2H)，3.28-3.5(bm，2H)，4.4(m，2H)，4.58(d，2H)，4.63-4.78(m，2H)6.80-7.55(m，11H)，8.1(d，1H)实施例12a)将乙酸(1.321g，22.000mmol)溶解于DMF(10ml)中，向其中加入1-(4-氟苯基)甲胺(2.478g，19.800mmol)并将该混合物冷却至0℃。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(7.770g，24.200mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(5.971g，46.200mmol)。将该溶液在室温下搅拌2小时。向其中加入EtOAc(20ml)并将有机相用Na2CO3(3×20ml，aq)和HCl(0.5M，2×10ml)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂。将粗品用制备HPLC纯化(开始使用等度洗脱的乙腈/缓冲剂60/40，然后将乙腈浓度增至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，将有机相用两份盐水进行洗涤，然后干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到1.344g N-(4-氟苄基)乙酰胺(收率36.5％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ1.98(s，3H)，4.35(d，2H)，6.25(bs，1H)，6.95-7.25(bm，4H)b)将N-(4-氟苄基)乙酰胺(1.344g，8.039mmol)溶解于THF(100ml)中并将其在氩气下冷却至0℃。向其中加入含有硼烷的(甲硫基)甲烷化合物(1∶1)(1.527g，20.098mmol)并将该混合物在室温下回流过夜。逐渐向其中加入HCl(15ml，10％)并将其搅拌过夜。通过蒸发除去溶剂。向其中加入乙醚(20ml)并用K2CO3(3×15ml)将产物萃取到水相中。用HCl(10ml，10％)将水相酸化并用EtOAc(3×15ml)将产物萃取到有机相中。将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.309g N-(4-氟苄基)乙胺(收率25.1％)。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(t，3H)，1.1(s，1H)，2.58(q，2H)，3.64(s，2H)，6.9(t，2H)，7.2(t，2H).
c)将N-(4-氟苄基)乙胺(0.114g，0.745mmol)在N2下溶解于干燥乙腈中并向其中加入N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.371g，2.876mmol)。将该混合物搅拌30分钟并向其中加入2-{2-[4-(2-氯-2-氧代乙氧基)苯基]-乙氧基}苯甲酸甲酯(0.200g，0.573mmol)。将该溶液在室温下搅拌过夜。将粗品用闪柱色谱法进行纯化(开始使用等度洗脱的庚烷/EtOAc 50/50，然后将EtOAc浓度增至100％，(硅胶600.004-0.063mm)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去EtOAc，得到0.223g 2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸甲酯(收率83.5％)。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ1.07-1.23(bm，3H)，3.08(m，2H)，3.30-3.45(bm，2H)，3.87(s，3H)，4.18(m，2H)，4.58(s，2H)，4.63-4.8(m，2H)6.77-7.45(m，11H)，7.78(d，1H)d)将2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)-乙氧基]苯甲酸甲酯(0.223g，0.479mmol)溶解于THF(新蒸馏的)/水(2/1，3ml)的混合物中，向其中加入氢氧化锂(0.229g，0.958mmol)。该反应是在单节微波炉中进行的(5min，150℃)。通过蒸发除去THF。加入水(10ml)并将碱水相用乙醚(2×10ml)进行洗涤。加入HCl(2ml，1M，pH1)。将水相用两份DCM(20ml)进行萃取，将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.196g 2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸(收率90.6％)。
1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ1.03-1.21(bm，3H)，3.1(m，2H)，3.23-3.4(bm，2H)，4.38(m，2H)，4.55(s，2H)，4.63-4.78(m，2H)，6.75-7.22(m，10H)，7.47(t，1H)，8.07(d，1H)实施例13a)将(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巯基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸钾(4.795g，34.694mmol)。将该溶液在60℃下搅拌10小时。向其中加入EtOAc(40ml)并将有机相用两份盐水(2×40ml，aq)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯。该粗品不进行进一步纯化地被用于下一步。
b)将2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)在室温下处理4h。将该混合物蒸发并与甲苯一起共沸。将粗品用制备HPLC纯化(开始使用等度洗脱的乙腈/缓冲剂60/40，然后将乙腈浓度增至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去乙腈。向其中加入EtOAc(10ml)，将有机相用两份盐水进行洗涤，然后干燥(MgSO4)。通过蒸发除去溶剂，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]-醋酸(两步的总收率为63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.82(t，2H)，3.15(t，2H)，3.82(s，3H)，4.35(s，2H)，6.78(d，2H)，7.18(d，2H)，7.23(t，1H)，7.51(d，1H)，7.55(t，1H)，7.85(d，1H).
c)将[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.250g，0.722mmol)溶解于DCM(10ml)中，向其中加入N-(2-氟苄基)乙胺(0.105g，0.686mmol)。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(0.255g，0.794mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.187g，1.443mmol)。将该溶液在室温下搅拌2小时。将粗品用闪柱色谱进行纯化(开始使用等度洗脱的DCM100％，然后将MeOH浓度从0.5％增至20％，(硅胶600.004-0.063mm)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去EtOAc。所需的物质需要再进行纯化并用制备HPLC对其进行纯化(开始使用等度洗脱的乙腈/缓冲剂60/40，然后将乙腈浓度增至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去乙腈。通过将该产物冷冻干燥过夜除去乙酸铵，得到0.1g 2-{[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸甲酯(收率29.1％)1HNMR(旋转异构体，500MHz，CDCl3)δ1.03-1.23(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.40(m，2H)，3.9(s，3H)，4.6-4.8(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，6.97-7.5(m，9H)，7.97(d，1H)d)将2-{[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}-苯甲酸甲酯溶解于THF(新蒸馏的)/水(2/1，3ml)的混合物中，向其中加入氢氧化锂(0.015g，0.629mmol)。该反应是在单节微波炉中进行的(5min，150℃)。通过蒸发除去THF。加入水(10ml)并将碱性水相用乙醚(2×10ml)进行洗涤。加入HCl(2ml，1M，pH1)。将水相用两份DCM(20ml)进行萃取，将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.095g 2-{[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]-硫基}苯甲酸(收率96.9％)1HNMR(旋转异构体，400MHz，CDCl3)δ1.02-1.25(bm，3H)，2.95(q，2H)，3.15(q，2H)，3.42(m，2H)，4.60-4.80(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，6.95-7.5(m，9H)，8.1(d，1H)实施例14a)将(4-{2-[(甲基磺酰基)氧基]乙基}苯氧基)乙酸叔丁酯(5.454g，17.347mmol)溶解于乙腈(100ml)中，向其中加入2-巯基苯甲酸甲酯(3.502g，20.816mmol)和碳酸钾(4.795g，34.694mmol)。将该溶液在60℃下搅拌10小时。向其中加入EtOAc(40ml)并将有机相用两份盐水(2×40ml，aq)进行洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到6.931g 2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯粗品。该粗品不进行进一步纯化地用于下一步。
b)将2-({2-[4-(2-叔丁氧基-2-氧代乙氧基)苯基]乙基}硫基)苯甲酸甲酯(4.630g，11.502mmol)用DCM(50ml)吸收并用三氟乙酸(44.40g，389.405mmol)在室温下处理4h。将该混合物蒸发并与甲苯一起共沸。将粗品用制备HPLC纯化(开始使用等度洗脱的乙腈/缓冲剂60/40，然后将乙腈浓度增至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去乙腈.向其中加入EtOAc(10ml)，将有机相用两份盐水进行洗涤，然后干燥(MgSO4)。通过蒸发除去溶剂，得到3.825g[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(两步的总收率为63.9％)。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ2.82(t，2H)，3.15(t，2H)，3.82(s，3H)，4.35(s，2H)，6.78(d，2H)，7.18(d，2H)，7.23(t，1H)，7.51(d，1H)，7.55(t，1H)，7.85(d，1H)。
c)将[4-(2-{[2-(甲氧基羰基)苯基]硫基}乙基)苯氧基]乙酸(0.250g，0.722mmol)溶解于DCM(10ml)中并向其中加入N-(2-氯苄基)-N-乙基胺(0.116g，0.686mmol)。向其中加入N-[(1H-1，2，3-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-N-甲基甲铵四氟硼酸盐(0.255g，0.794mmol)和N-乙基-N，N-二异丙基胺(0.187g，1.443mmol)。将该溶液在室温下搅拌2小时。将粗品用闪柱色谱进行纯化(开始使用等度洗脱的DCM100％，然后将MeOH浓度从0.5％增至20％，(硅胶60 0.004-0.063mm)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去EtOAc。该物质需要再进行纯化并用制备HPLC对其进行纯化(开始使用等度洗脱的乙腈/缓冲剂60/40，然后将乙腈浓度增至100％，所说的缓冲剂是乙腈/水10/90和乙酸铵的混合物(0.1M，柱KR-100-7-C8，50mm×250mm，流速40ml/min)。汇集包含产物的级分并通过蒸发除去乙腈。通过将该产物冷冻干燥过夜来除去乙酸铵，得到0.111g 2-{[2-(4-{2-[(2-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸甲酯(收率30.9％)。
1HNMR(旋转异构体.500MHz，CDCl3)δ1.10-1.25(bm，3H)，2.95(m，2H)，3.15(m，2H)，3.40(m，2H)，3.9(s，3H)，4.6-4.8(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，7.02-7.5(m，9H)，7.95(d，1H)d)将2-{[2-(4-{2-[(2-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}-苯甲酸甲酯溶解于THF(新蒸馏的)/水(2/1，3ml)的混合物中，向其中加入氢氧化锂(0.015g，0.629mmol)。该反应是在单节微波炉中进行的(5min，150℃)。通过蒸发除去THF。加入水(10ml)并将该碱性水相用乙醚(2×10ml)进行洗涤。加入HCl(2ml，1M，pH1)。将水相用两份DCM(20ml)进行萃取。将有机相干燥(MgSO4)并通过蒸发除去溶剂，得到0.103g 2-{[2-(4-{2-[(2-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}-苯甲酸(收率95.5％)1HNMR(旋转异构体，400MHz，CDCl3)δ1.07-1.25(bm，3H)，2.95(m，2H)，3.15(m，2H)，3.42(m，2H)，4.62-4.85(bm，4H)，6.75-6.95(m，2H)，7.02-7.5(m，9H)，8.1(d，1H)。
生物学活性配制将化合物溶解于DMSO中，得到16mM的储备液。在试验前，用DMSO和培养基对储备液进行稀释。
一般化学品和试剂荧光素酶试验试剂购自Packard，USA。限制酶得自Boehringer和Vent聚合酶得自New England Biolabs。
细胞系和细胞培养条件U2-OS，(成骨肉瘤，人)购自ATCC，USA。使这些细胞生长并从第六代起将其成批再冷冻。将细胞在含有25mM葡萄糖、2mM谷酰胺或4m ML-丙氨酰-L-谷酰胺、10％胎牛血清的Dulbecco改性的Eagle介质(DMEM)中在5％CO2下进行培养。使用没有加入钙或镁的磷酸盐缓冲盐水(PBS)。所有的细胞培养试剂都得自Gibco(USA)，96-孔细胞培养板购自Wallach。
异种表达的质粒构造如Ausubel(7)所述进行标准的重组DNA技术。荧光素酶报道载体，pGL5UAS(由五个GAL4 DNA结合序列的副本，5′-CGACGGAGTACTGTCCTCCGAGCT-3′所组成的克隆被克隆到pGL3-启动子(Promega)的SacI/XhoI部位中)。用退火(annealed)的重叠低聚核苷酸来构造带有UAS部位的SacI/XhoI片段。
所用的表达载体是以pSG5(Stratagene)为基础的。所有的载体都包含编码GAL4的DNA结合区域(编码数据库登记号为P04386的1-145位氨基酸)的EcoRI/NheI片段，其之后被符合读框地融合至得自多形瘤病毒的T抗原的编码核定位化序列的片段上。所说的核定位化序列是用产生NheI/KpnI粘端(5′-CTAGCGCTCCTAGAAGAAACGCAAGGTTGGTAC-3′)的退火重叠低聚核苷酸来构造的。得自人和小鼠PPARα以及人和小鼠PPARγ的配体结合区域是被放大为KpnI/BamHI片段的PCR，并且被符合读框地克隆到GAL4 DNA结合区域和核定位化序列上。所用所有质粒构造的序列都是通过排序来进行证实的。
用下面的表达载体来进行瞬时转染
1指的是用于表达配体结合区域的数据库入口的核苷酸位置。
瞬时转染将得自第六代的冷冻的细胞原料解冻并在转染前使其生长至第八代。将融合的细胞用胰蛋白酶消化，洗涤，并通过在270xg下离心2分钟来使其成粒。将该细胞粒重新悬浮于冷PBS中，使细胞浓度为约18×106个细胞/ml。在加入DNA后，将该细胞悬浮液在冰上培养约5分钟，然后，将其在Biorad′s Gene PulserTM中以0.5ml的批量在230V，960μF下电穿孔。向各0.5ml批量的细胞中一共加入50μg DNA，其包括2.5μg表达载体、25μg报道载体和22.5μg非特异性DNA(pBluescript，Stratagene)。
在电穿孔后，在没有苯酚红的DMEM中将细胞稀释至320′000个细胞/ml的浓度，并以约25′000个细胞/孔将其接种到96-孔板中。为了使细胞恢复，在加入试验化合物前，将进行了接种的板在37℃下培养3-4小时。在对PPARα的试验中，细胞基质还加入进行了树脂-炭剥离的胎牛血清(FCS)以避免FCS的脂肪酸组分的背景活化作用。树脂-炭剥离的FCS的制备如下对于500ml热灭活的FCS而言，加入10g炭和25g Bio-Rad分析级阴离子交换树脂(200-400目)，将该溶液在室温下在磁力搅拌器上放置过夜。第二天，将FCS离心并将该剥离操作重复4-6小时。在第二次处理后，将FCS离心并过滤灭菌以除去残余的炭和树脂。
试验方法在样板中将化合物在DMSO中的储备液稀释至适宜的浓度范围。从该样板，将化合物用培养介质进行稀释从而得到最后剂量的试验化合物溶液。
在将各孔细胞基质的数量调节至75μl后，加入50μl试验化合物溶液。在进行荧光素酶探测试验前，将瞬时转染的细胞与该化合物接触约24小时。对于荧光素酶试验而言，向各孔中手动加入100μl试验试剂并将该板放置约20分钟以使细胞溶解。在溶胞后，用得自Wallach的1420多孔计数器，Victor对荧光素酶活性进行测量。
参照化合物用TZD吡格列酮作为人和鼠PPARγ活化的参照物质。用5，8，11，14-二十碳四酸(Eicosatetrayonicacid)(ETYA)作为人PPARα的参照物质。
计算和分析对于EC50值的计算而言，确立一种浓度-效应曲线。所用的值得自两次或三次独立测量的平均值(该平均值是减去背景均值后的值)并将其表示为参照化合物所得最大活化作用的百分比。用该值对试验化合物浓度的对数作图。通过数据点之间的线性相关和计算达到参照化合物所获得的最大活化的50％所需的浓度来估算EC50值。
式I的化合物对于PPARα的EC50小于50μmol/l，而参照化合物的EC50小于5μmol/l。例如实施例的一些化合物对于人PPARα的EC50值为实施例3 0.499μmol/l；和实施例5 0.048μmol/l
权利要求
1.式I的化合物及其可药用的盐和前药 其中n是0、1或2；R1表示卤素、可以任选地被一个或多个氟所取代的C1-4烷基、可以任选地被一个或多个氟所取代的C1-4烷氧基并且其中当n是2时，所说的取代基R1可以相同或不同；R2表示无支链的C2-7烷基；R3表示H或OCH3；和W表示O或S。
2.根据权利要求1的化合物，其中W是O。
3.根据权利要求1的化合物，其中W是S。
4.一种选自下列化合物的化合物及其可药用的盐2-[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(2，4-二氟苄基)(庚基)氨基]-2-氧代乙氧基}-3-甲氧基苯基)-乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基)苯基)乙硫基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-三氟甲基苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙硫基]苯甲酸；2-{2-[4-(2-{丁基[2-氟-4-(三氟甲基)苄基]氨基}-2-氧代乙氧基)苯基]-乙氧基}苯甲酸；2-[2-(4-{2-[2，4-二氟苄基)(丙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-{[2-(4-{2-[苄基(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸；2-[2-(4-{2-[(4-叔-丁基苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-[2-(4-{2-[乙基(4-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙氧基]苯甲酸；2-{[2-(4-{2-[乙基(2-氟苄基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸；或2-{[2-(4-{2-[(2-氯苄基)(乙基)氨基]-2-氧代乙氧基}苯基)乙基]硫基}苯甲酸。
5.一种包含根据前面任意一项权利要求的化合物与可药用的助剂、稀释剂和/或载体混合的药物制剂。
6.一种治疗或预防胰岛素耐受性的方法，其包括给需要其的哺乳动物使用根据权利要求1-4中任意一项的化合物。
7.根据权利要求1至4中任意一项的化合物在制备治疗胰岛素耐受性的药物中的应用。
8.一种制备式I的化合物的方法，其包括将式II的化合物与去保护剂进行反应 其中R1、R2、R3、W和n的定义如前所述并且PG表示一种羧羟基保护基。
9.如权利要求8所述的式II的化合物。
10.一种联合治疗，其包括将根据权利要求1至4中任意一项的化合物与可用于治疗与动脉粥样硬化如高血压、高血脂症、血脂障碍、糖尿病和肥胖的形成和发展有关的病症的另一种治疗剂联用。
全文摘要
本发明提供了一种式(I)的化合物以及其可药用的盐和前药，其中n是0、1或2；R
文档编号A61P9/12GK1674883SQ03819853
公开日2005年9月28日 申请日期2003年6月17日 优先权日2002年6月20日
发明者L·李 申请人:阿斯特拉曾尼卡有限公司