专利名称：西多福韦脂质体及其制备方法
技术领域：
本发明涉及西多福韦脂质体及其制备方法，属于医药技术领域。
背景技术：
西多福韦(cidofovir，HPMPC，GS-504)是开环核苷酸类似物，能抑制病毒DNA聚合酶，对人CMV有很强的抑制作用，对其它疱疹病毒如单疱病毒(HSV)I型和II型、水痘一带状疱疹病毒(VZV)、E～B病毒、疱疹6型病毒(HHV-6)及腺病毒、人乳头瘤状病毒(HPV)也有很强的活性。西多福韦注射液由Gilead公司开发，于1996年5月15日经美国FDA批准上市，商品名为Vistide，用于治疗艾滋病患者巨细胞病毒引起的视网膜炎。该药在疗效、耐受性及治疗指数方面明显优于已上市的药物更昔洛韦及膦甲酸钠，然而由于西多福韦存在严重的毒副作用，特别是肾毒性，严重的限制了其在临床的应用。
发明内容本发明针对现有技术的不足，提供了一种辅料易得、制备简单、包裹率高、毒副作用小、疗效好的新型西多福韦脂质体。
本发明为西多福韦脂质体，其特征在于，包含以下组分，均为重量百分比1～10％西多福韦，40～68％卵磷脂，10～17％胆固醇，0.5～3％去氧胆酸钠和2％～48.2％蔗糖组成。卵磷脂选自蛋黄中提取的天然卵磷脂或从大豆中提取的大豆卵磷脂。
本发明公开的西多福韦脂质体制备方法包括下列步骤1、称取处方量的卵磷脂、胆固醇，用无水乙醇溶解后混合后使其成为脂质溶液。
2、将上述脂质溶液用旋转蒸发器蒸发，减压除乙醇，制备脂质膜。
3、称取处方量的西多福韦溶解于pH6～8的磷酸缓冲液中，制备西多福韦磷酸盐缓冲溶液。
4、在上述西多福韦磷酸盐缓冲溶液中加入处方量的去氧胆酸钠和蔗糖充分混合溶解后，加到制备的脂质膜中混合，高压匀浆器粉碎制备脂质体，检查脂质体粒径合格，凝胶柱分离出脂质体溶液，0.45μm微孔滤膜澄清过滤，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，罐装，冷冻，干燥即得。包封率≥80％，粒径≤1um。
用本发明脂质体进行有关毒理和药效试验，结果如下毒性试验用本发明得西多福韦脂质体冻干制剂分别给予家兔及猕猴静脉注射给药，观察动物的毒性试验，并同时测定未包封脂质体的西多福韦静脉给药于家兔及猕猴做比较，试验结果如下西多福韦脂质体单剂量不出现致死的最大剂量为家兔＞189mg/kg；猕猴＞72mg/kg；未包封脂质体的西多福韦单剂量不出现致死的最大剂量为家兔＞100mg/kg；猕猴＞40mg/kg。肾毒性为西多福韦用药后最主要毒副作用，西多福韦脂质体出现肾毒性的剂量为家兔为94mg/kg；猕猴为208mg/kg；未包封脂质体的西多福韦出现肾毒性的剂量为家兔为60mg/kg；猕猴为150mg/kg。可以看出西多福韦脂质体比未包封脂质体的西多福韦的单剂量毒性小约2倍，对肾毒性也小得多。
药效试验在MRC-5D的细胞培养内，西多福韦抑制CMV AD-169实验病毒株50％空斑形成的浓度(IC50)为0.007μg/ml，抑制17株临床分离病毒株的平均IC50为0.069μg/ml，而西多福韦脂质体IC50为0.0023μg/ml，西多福韦脂质体的的选择指数(50％细胞毒性浓度与IC50的比值)比西多福韦高30倍。在CMV AD-169感染48小时后加入西多福韦脂质体仍有很强的抑制作用。豚鼠胚胎细胞感染豚鼠CMV和人二倍体成纤维细胞感染人CMV后，西多福韦脂质体的IC50分别为0.0073和0.017μg/ml。对这两种细胞的50％毒性浓度分别为毒性浓度分别为2.8和3.8mol/l，其选择指数均在400以上。
上述试验证明，本发明西多福韦脂质体显著降低了原西多福韦的毒性，增强了其抗病毒的药效。
具体实施方式
实施例1西多福韦脂质体，组分如下西多福韦 1g
卵磷脂40g胆固醇10g去氧胆酸钠0.5g蔗糖 48.5g制备方法如下称取卵磷脂40g，加入500ml无水乙醇，加入胆固醇10g，搅拌溶解，用旋转蒸发器减压蒸发成膜。称取1g的西多福韦，加入300ml PH6.86的磷酸缓冲液溶解，加入0.5g去氧胆酸钠和48.5g蔗糖后与卵磷脂混合，制备混悬液，高压匀浆混匀制备脂质体，凝胶柱分离脂质体溶液，澄清过滤后用0.22um微孔膜过滤，罐装，冷冻干燥即得西多福韦脂质体。
实施例2西多福韦脂质体，组分如下西多福韦 5g卵磷脂52g胆固醇12g去氧胆酸钠1g蔗糖 30g制备方法同实施例1，实施例3西多福韦脂质体，组分如下西多福韦 10g卵磷脂68g胆固醇17g去氧胆酸钠3g蔗糖 2g制备方法同实施例1。
实施例4射用西多福韦脂质体，组分如下西多福韦37.5g卵磷脂 200g胆固醇 40.5g去氧胆酸钠 10g蔗糖5g制备方法如下称取卵磷脂200g加入1000ml无水乙醇，40.5g胆固醇，搅拌溶解，用旋转蒸发器减压蒸发成膜。称取37.5g西多福韦，加入350mlPH7.04磷酸缓冲液中溶解，加入10g去氧胆酸钠和5g蔗糖混合溶解后加到制备的脂质膜中混合，高压匀浆器粉碎制备脂质体，检查脂质体粒径合格后，凝胶柱分离出脂质体溶液，0.45um微孔滤膜过滤澄清，0.22um微孔滤膜除菌，罐装100瓶，冷冻干燥即得注射用西多福韦脂质体。
实施例5西多福韦脂质体片，组分如下西多福韦脂质体 100g淀粉10g微晶纤维素 15g微粉硅胶3g硬脂酸镁1g5％PVP水溶液适量制备方法如下称取西多福韦脂质体干粉100g过100目筛，称取淀粉、微晶纤维素过100目筛，充分混合后，加入5％PVP水溶液适量做软材，过20目筛，50℃真空干燥1小时，20目筛整粒，加入3g微粉硅胶和1g硬脂酸镁混匀后压片，羟丙基纤维素包薄膜衣即得。
实施例6西多福韦脂质体胶囊，组分如下
西多福韦脂质体150g微晶纤维素20g微粉硅胶 3g5％PVP醇溶液 适量称取西多福韦脂质体150g过100目筛，称取微晶纤维素20g，过100目筛，混匀，加入5％PVP乙醇溶液适量做软材，过20目筛，50℃真空干燥1小时，20目筛整粒，加入3g微粉硅胶，装入胶囊即可。
实施例7西多福韦脂质体颗粒，组分如下西多福韦脂质体200g糊精 100g甜蜜素0.5g称取西多福韦脂质体200g，加入糊精100g，甜蜜素0.5g，用乙醇制软材，16目筛制颗粒，40℃真空干燥，12目筛整粒，分装成袋即可。
权利要求
1.本发明为西多福韦脂质体，包含以下组分，均为重量百分比1～10％西多福韦，40～68％卵磷脂，10～17％胆固醇，0.5～3％去氧胆酸钠，2％～48.2％蔗糖。
2.权利要求1所述的西多福韦脂质体的制备方法，其特征在于，该脂质体的制备包括下列步骤1)称取处方量的卵磷脂、胆固醇，用无水乙醇溶解后混合后使其成为脂质溶液。2)将口述脂质溶液用旋转蒸发器蒸发，减压除乙醇，制备脂质膜。3)称取处方量的西多福韦溶解于pH6～8的磷酸缓冲液中，制备西多福韦磷酸盐缓冲溶液。4)在上述西多福韦磷酸盐缓冲溶液中加入处方量的去氧胆酸钠和蔗糖充分混合溶解后，加到制备的脂质膜中混合，高压匀浆器粉碎制备脂质体，检查脂质体粒径合格，凝胶柱分离出脂质体溶液，0.45μm微孔滤膜澄清过滤，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，罐装，冷冻，干燥即得。
全文摘要
本发明涉及一种西多福韦脂质体及制备方法，属于医药技术领域。一种西多福韦脂质体，包含以下组分，均为重量百分比1～10％西多福韦，40～68％卵磷脂，10～17％胆固醇，0.5～3％去氧胆酸钠和2％～48.2％蔗糖。称取处方量的卵磷脂、胆固醇，用无水乙醇溶解后混合用旋转蒸发器蒸发得脂质膜；再将西多福韦溶于磷酸缓冲液，加入处方量的去氧胆酸钠和蔗糖后，加到制备的脂质膜中混合，高压匀浆器粉碎制备脂质体，然后经微孔滤膜过滤、除菌，罐装，冷冻干燥即得。该药可用于治疗艾滋病患者巨细胞病毒感染引起的视网膜炎。该药降低了药物的毒副作用，增强了药物的疗效。
文档编号A61K31/7052GK1698643SQ20051004358
公开日2005年11月23日 申请日期2005年5月27日 优先权日2005年5月27日
发明者肖广常, 张颖, 孙锦光, 王淑娟 申请人:山东恒瑞医药科技发展有限公司