专利名称：一种生脉制剂及其制备方法和质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种生脉制剂及其制备方法和质量控制方法，属于中药制药技术领域。
背景技术：
生脉制剂由人参、麦冬、五味子三味中药材的提取物制成，具有益气复脉，养阴生津的作用。主要用于气阴两亏，心悸气短，脉微自汗，已取得比较满意的治疗效果。其中“生脉颗粒”、“生脉胶囊”等在国家中成药标准地标升国标内科心系分册和部颁标准第七册中均有记载。片剂为常用剂型，具有方便携带、便于服用以及服用体积小等特点，也是常规生产的剂型之一，而现有标准中生脉制剂剂型较为单一，无法满足更多的服用方式，同时已公开专利CN200510001681.4中对片剂的制备方法是水煮、醇沉、浓缩、干燥再加入辅料等常规方法，同时对辅料没有进行详细的比较和优选；另外，现有生脉口服制剂的质量标准中，五味子含量测定项下供试品的制备方法中，所选取的提取溶剂的种类、用量以及提取时间不够理想，导致五味子醇甲提取不完全，从而影响含量测定的准确度；对人参进行薄层鉴别时，只单一的使用人参皂苷Rg1为对照品，其结果是斑点背景干扰大，不能准确地鉴别制剂中人参药材；同时五味子也是制剂中起主要作用的药物，而现有质量标准没有对五味子药材进行薄层鉴别。故现有生脉制剂剂型不能满足广大患者的需要，其口服制剂的质量控制方法不能有效控制这种生脉口服制剂的质量，从而将影响该制剂的临床疗效。
发明内容
本发明的目的在于提供一种生脉制剂，这种制剂主要是指片剂；本发明的另一个目的是公开制备这种生脉片剂的方法；本发明的第三个目的在于提供这种生脉口服制剂的质量控制方法；以克服现有技术存在的问题。
本发明是这样构成的按照重量组份计算生脉制剂由人参200-300、麦冬40-60和五味子200-300制备而成。
具体的说，它由人参250g、麦冬50g和五味子250g制备成片剂。
本发明所述生脉制剂的制备方法为取人参、麦冬和五味子三味药材，粉碎成粗粉，照中国药典流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用乙醇作溶剂浸渍24-48小时后，以2-4ml/min的速度进行渗漉，收集渗漉液8000-12000ml，减压浓缩至800-1200ml，放冷，加水稀释至8000-12000ml，冷藏，离心，滤过，滤液减压浓缩至20-40℃时相对密度为1.2～1.5，真空干燥，粉碎，干膏粉与预胶化淀粉∶羟丙基纤维素∶羧甲淀粉钠＝10-1∶10-1∶1-5的辅料按1-5∶5-1的比例混匀后，用乙醇润湿制粒，干燥，整粒，细粉与硬脂酸镁混匀，再与颗粒混合，压片，包衣，即得生脉片。
准确地说，取人参、麦冬和五味子三味药材，粉碎成粗粉，照中国药典流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用65％乙醇作溶剂浸渍24小时后，以3ml/min的速度进行渗漉，收集渗漉液10000ml，减压浓缩至1000ml，放冷，加水稀释至10000ml，冷藏4小时以上，2000转/分离心，滤过，滤液减压浓缩至30℃相对密度为1.32～1.35，真空干燥，粉碎，干膏粉与预胶化淀粉∶羟丙基纤维素∶羧甲基淀粉钠＝8∶7∶3的辅料按1∶3的比例混匀后，用75％乙醇润湿制粒，干燥，整粒，细粉与0.3％硬脂酸镁混匀，再与颗粒混合，压制成1000片，包衣，即得生脉片。
本发明生脉片剂、胶囊剂和颗粒剂的质量控制方法为所述质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查以及含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括对制剂中人参、麦冬和五味子的薄层色谱鉴别；含量测定是对制剂中五味子所含五味子醇甲的含量测定。
人参的鉴别方法是以人参对照药材和人参皂苷Rg1对照品为对照，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂的薄层色谱法；麦冬的鉴别方法是以麦冬对照药材为对照，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂的薄层色谱法；五味子的鉴别方法是以五味子对照药材和五味子甲素、五味子醇甲对照品为对照，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂的薄层色谱法。
鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加氢氧化钠溶液使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取，分取正丁醇液，用正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；取人参对照药材，加氯仿，加热回流，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇，超声处理，吸取上清液，加氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇溶解作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(2)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加水使溶解，加盐酸加热回流，放冷，加乙醚振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，加65％乙醇，加热回流，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水，加盐酸，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(3)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加水使溶解，用等体积氯仿萃取，氯仿液浓缩，作为供试品溶液；另取五味子对照药材，加氯仿，加热回流，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿使溶解，制成对照药材溶液；再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿溶解制成混合对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置200-500nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-5g，研细，加0.5％氢氧化钠溶液10-30ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取1-3次，每次10-30ml，分取正丁醇液，用10-30ml正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作为供试品溶液；取人参对照药材0.5-2g，加氯仿30-50ml，加热回流1-2小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水0.1-1.0ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇5-20ml，超声处理20-40分钟，吸取上清液，加2-4倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作为对照药材溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(2)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-3g，研细，加水10-30ml使溶解，加盐酸1-3ml，加热回流1-2小时，放冷，加乙醚10-30ml振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿0.5-2ml使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材1-3g，加65％乙醇10-30ml，加热回流20-50分钟，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水至10-30ml，加盐酸1-3ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；
(3)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-5g，研细，加水10-30ml溶解，用等体积氯仿萃取1-3次，取氯仿液浓缩至0.5-2ml，作为供试品溶液；另取五味子对照药材0.5-2g，加氯仿10-30ml，加热回流20-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿0.5-2ml使溶解，制成对照药材溶液；再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿制成每1ml各含0.1-0.9mg的混合对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置200-500nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
五味子中五味子醇甲的含量测定方法是以五味子醇甲对照品为对照，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相的高效液相色谱法。
五味子醇甲的含量测定方法为照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相；检测波长为200-500nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂、片剂或颗粒剂，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，超声提取，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪测定含量；该制剂中，胶囊剂所含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
更具体的含量测定方法为照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相；检测波长为200-500nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10-100μg的溶液，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂、片剂或颗粒剂，研细，取细粉约2.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20-50ml，称定重量，超声提取20-40分钟后，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-20μl，注入液相色谱仪，测定含量；该制剂中，胶囊剂所含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
本发明所述质量控制方法包括性状对于片剂，产品为薄膜衣片，除去包衣后显淡黄色至棕黄色；味甘、微酸；对于胶囊剂，其内容物为棕黄粉末；气香，味酸、甜、微苦；
对于颗粒剂，产品为淡黄色的颗粒，味甘、微酸；鉴别(1)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加氢氧化钠溶液使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取，分取正丁醇液，用正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；取人参对照药材，加氯仿，加热回流，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇，超声处理，吸取上清液，加氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇溶解作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(2)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加水使溶解，加盐酸加热回流，放冷，加乙醚振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，加65％乙醇，加热回流，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水，加盐酸，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(3)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加水使溶解，用等体积氯仿萃取，氯仿液浓缩，作为供试品溶液；另取五味子对照药材，加氯仿，加热回流，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿使溶解，制成对照药材溶液；再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿溶解制成混合对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置200-500nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查本发明的片剂、胶囊剂或颗粒剂，应符合中国药典关于片剂、胶囊剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定五味子醇甲 照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相；检测波长为200-500nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂、片剂或颗粒剂，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，超声提取，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪测定含量；该制剂中，胶囊剂所含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
经申请人的研究发现，采用以下质量控制方法将更容易控制这种生脉口服制剂的质量，更利于保证该制剂的临床疗效。故所述质量控制方法还可包括性状对于片剂，产品为薄膜衣片，除去包衣后显淡黄色至棕黄色；味甘、微酸；对于胶囊剂，其内容物为棕黄粉末；气香，味酸、甜、微苦；对于颗粒剂，产品为淡黄色的颗粒，味甘、微酸；鉴别(1)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-5g，研细，加0.5％氢氧化钠溶液10-30ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取1-3次，每次10-30ml，分取正丁醇液，用10-30ml正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作为供试品溶液；取人参对照药材0.5-2g，加氯仿30-50ml，加热回流1-2小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水0.1-1.0ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇5-20ml，超声处理20-40分钟，吸取上清液，加2-4倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作为对照药材溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(2)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-3g，研细，加水10-30ml使溶解，加盐酸1-3ml，加热回流1-2小时，放冷，加乙醚10-30ml振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿0.5-2ml使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材1-3g，加65％乙醇10-30ml，加热回流20-50分钟，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水至10-30ml，加盐酸1-3ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(3)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-5g，研细，加水10-30ml溶解，用等体积氯仿萃取1-3次，取氯仿液浓缩至0.5-2ml，作为供试品溶液；另取五味子对照药材0.5-2g，加氯仿10-30ml，加热回流20-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿0.5-2ml使溶解，制成对照药材溶液；再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿制成每1ml各含0.1-0.9mg的混合对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置200-500nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查本发明的片剂、胶囊剂或颗粒剂，应符合中国药典关于片剂、胶囊剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定五味子醇甲 照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相；检测波长为200-500nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10-100μg的溶液，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂、片剂或颗粒剂，研细，取细粉约2.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20-50ml，称定重量，超声提取20-40分钟后，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-20μl，注入液相色谱仪，测定含量；该制剂中，胶囊剂所含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
申请人对本发明制备方法中的渗漉工艺和所用辅料的种类及用量进行了研究，具体如下一、渗漉工艺研究渗漉工艺中所用溶剂、浸渍时间、渗漉速度以及渗漉液收集量都是影响渗漉工艺的因素，参照部颁《国家中成药标准汇编》内科心系中生脉颗粒的标准，参照其工艺中溶剂用量、浸渍时间以及渗漉液收集量范围，以五味子醇甲的含量和总固形物得率作为指标，重点考察渗漉速度对工艺的影响。
1、渗漉速度研究(1)样品制备称取药材，按照本发明所述的工艺以60-70％乙醇浸渍24-48小时后，分别以1ml/min、2ml/min、3ml/min、4ml/min、5ml/min的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，浓缩(2)五味子醇甲测定法照本发明质量标准含量测定项下测定。
(3)总固形物得率测定方法精密吸取渗漉液置已恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于100-110℃干燥，置干燥器中冷却，迅速称重，按下试计算总固形物得率。结果见下表。
式中W1为干膏重量，V为渗漉浓缩液体积，V1为精密吸取的体积，W为原药材的重量。
渗漉速度考察表
由表中结果可见，渗漉速度为2ml/min、3ml/min、4ml/min时，渗漉液五味子醇甲含量与总固形物得率相差不大；当渗漉速度为1ml/min、5ml/min时渗漉液五味子醇甲含量与总固形物得率相对较低，所以选择渗漉速度为2-4ml/min。
2、工艺验证称取同批药材共三份，按上述确定工艺渗漉，验证上述工艺条件。五味子醇甲测定法与总固形物得率测定方法同上(2)、(3)，结果见下表。
渗漉速度验证试验结果
上表结果显示，所得结果与实际生产一致，表明该提取工艺较稳定，质量可控，大生产可用以上方法进行提取。
二、辅料的筛选研究本发明为片剂，根据物料的性质，选用不同辅料，设计几种处方来进行考察，以改善物料的可压性、增加物料的流动性，防止压片过程中的粘冲、松裂等现象。
1、样品制备 称取干膏粉与辅料，过筛，混合均匀，75％乙醇润湿制软材，制粒，50～60℃干燥，整粒，细粉与硬脂酸镁混匀，再与颗粒混合，压片。
2、以干颗粒的休止角、吸水率、粒度(16目～20目)以及片剂的外观、崩解时限、硬度作为指标。结果见下表a、b。
a辅料种类的选择
结果表明，选择方法3制备样品，片剂的外观、硬度、崩解时限均能符合要求，故对辅料的具体用量进行考察以确定其范围。
b辅料用量的选择
通过综合考察，选择干膏粉与辅料(预胶化淀粉∶羟丙基纤维素∶羧甲淀粉钠＝10-1∶10-1∶1-5)按1-5∶5-1的比例混匀，所得干颗粒的休止角、吸水率、粒度以及片剂的外观、崩解时限、硬度都较好，最优辅料比例为预胶化淀粉∶羟丙基纤维素∶羧甲淀粉钠＝8∶7∶3，最优干膏粉与辅料比例为1∶3。将辅料与干膏粉混匀后用75％乙醇润湿制软材，制粒，50～60℃干燥，整粒，细粉与0.2-0.3％硬脂酸镁混匀，再与颗粒混合，压片，即得。
本发明的质量控制方法是经过大量的筛选试验得到的最佳方案，以下实验研究为本发明的优选过程。
一、五味子醇甲含量测定方法研究1、供试品溶液制备方法研究(1)提取溶剂种类的考察分别以甲醇、乙醇、乙醚作溶剂进行考察。取药品细粉约2g，精密称定，分别精密加入溶剂25ml，称定重量，超声提取45分钟后，放冷，用溶剂补重，摇匀，滤膜(0.45μm)滤过，测定其五味子醇甲含量，测定结果见下表。
不同提取溶剂对五味子醇甲含量测定的影响(n＝3)
试验结果表明，用甲醇超声提取效果最佳，因此选择甲醇作提取溶剂。
(2)提取溶剂用量的考察分别对甲醇的用量15ml、25ml、50ml进行考察。取药品细粉约2g，精密称定，分别精密加入甲醇15ml、25ml、50ml，称定重量，超声提取45分钟后，放冷，用甲醇补重，摇匀，滤膜(0.45μm)滤过，测定其五味子醇甲含量，测定结果见下表。
不同提取溶剂用量对五味子醇甲含量测定的影响(n＝3)
试验结果表明，用甲醇25ml可将五味子醇甲超声提取完全，因此选择超声提取溶剂用量范围为20-50ml。
(3)超声提取时间考察分别对超声提取15、30、45分钟进行考察。取药品约2g，精密称定，精密加入甲醇25ml，称定重量，分别超声提取15、30、45分钟后，放冷，用甲醇补重，摇匀，滤膜(0.45μm)滤过，测定其五味子醇甲含量，测定结果见下表。
不同超声时间对五味子醇甲含量测定的影响(n＝3)
根据试验结果可知，用甲醇超声提取30分钟可将五味子醇甲提取完全，因此选择超声提取时间范围为20-40分钟。
2、流动相的选择
流动相1以甲醇和水不同比例的混合溶液为流动相。
流动相2以乙腈和水不同比例的混合溶液为流动相。
结果以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相；阴性样品色谱图在五味子醇甲位置处无假阳性峰，五味子醇甲和相近的杂质峰分离完全(分离度＞1.5)，即在该条件下五味子醇甲与其他组分分离完全。最佳流动相为甲醇∶水＝62∶38。
3、重复性实验取药品，按本发明所述质量控制方法含量测定项下供试液的制备方法制备5份供试液，进样，测定峰面积，计算结果列入下表，淫羊藿苷平均含量为0.5133mg/g，RSD为1.52％。
制剂供试品中五味子醇甲的重复性试验
根据结果可知，该方法重现性良好。
4、稳定性实验取药品，按本发明所述质量控制方法含量测定项下供试液的制备方法制备5份供试液，分别于0、2、4、6、8小时测定五味子醇甲峰面积，平均峰面积为884517，RSD为0.28％。结果见下表。
制剂供试品中五味子醇甲的稳定性试验
表明供试品溶液中五味子在8小时内稳定。
5、回收率实验采用加样回收法，精密称取已测定含量的制剂(平均含量0.5133mg/g)适量，置具塞锥形瓶中，精密加入五味子醇甲对照品溶液(以甲醇为溶剂，制成含五味子醇甲为0.02108mg/ml)25ml，称定重量，超声提取30分钟后，放冷，甲醇补重，滤过(0.45μm)，即得供试品液。制备5份，分别精密吸取10μl注入液相色谱仪，记录色谱，测定含量，计算回收率见下表。平均回收率为99.10％，RSD为1.43％。
供试品溶液中五味子醇甲测定回收率试验
二、人参薄层鉴别研究以人参皂苷Rg1对照品、人参对照药材鉴别制剂中人参药材供试品溶液制备方法一取药物，研细，加水使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，同法制备缺人参阴性供试液。
供试品溶液制备方法二取药物，研细，加0.5％氢氧化钠溶液使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取两次，分取正丁醇液，用正丁醇饱和的水洗涤，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，同法制备缺人参阴性供试液。
对照品溶液选择方法一取人参对照药材1g，加氯仿，加热回流，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇，超声处理，吸取上清液，加氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液。另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
对照品溶液选择方法二取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。
展开剂选择分别以氯仿、甲醇不同比例的混合溶液；乙腈、水不同比例的混合溶液；氯仿、甲醇、水不同比例的混合溶液为展开剂。
结果采用方法二制备供试品溶液，以方法一选择对照品溶液，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置分层的下层溶液为展开剂，其分离度好，斑点显色清晰，分离度好，阴性对照无干扰，方法重现性好。最佳展开剂为氯仿∶甲醇∶水＝65∶35∶10。
三、麦冬薄层鉴别研究以麦冬对照药材鉴别制剂中麦冬药材供试品溶液制备方法一取药物，研细，加水使溶解，加盐酸，加热回流，放冷，加乙醚振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿使溶解，同法制备缺麦冬阴性供试液。
供试品溶液制备方法二取药物，研细，加水，加盐酸，加热煮沸，放冷，用氯仿振摇提取，分取氯仿液，浓缩至干，用甲醇溶解，同法制备缺麦冬阴性供试液。
对照品溶液制备方法一取麦冬对照药材2g，加水，加盐酸，加热煮沸，放冷，用氯仿振摇提取，分取氯仿液，浓缩至干，用甲醇溶解，即得。
对照品溶液制备方法二取麦冬对照药材2g，加65％乙醇，加热回流，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水，加盐酸，加热回流，放冷，加乙醚振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿使溶解，即得。
展开剂选择分别以氯仿、丙酮不同比例的混合溶液；氯仿、甲醇不同比例的混合溶液；醋酸乙酯、丁酮、甲醇不同比例的混合溶液为展开剂。
结果参照“生脉颗粒”原标准中麦冬的薄层鉴别方法，采用方法一制备供试品溶液，以方法二制备对照品溶液，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂，其分离度好，斑点显色清晰，阴性对照无干扰，方法重现性好。最佳展开剂为氯仿∶丙酮＝8∶2。
四、五味子薄层鉴别研究以五味子对照药材及五味子甲素和五味子醇甲对照品鉴别制剂中五味子药材供试品溶液制备方法一取药物，研细，加水使溶解，用等体积氯仿萃取两次，将氯仿液浓缩，同法制备缺五味子阴性供试液。
供试品溶液制备方法二取药物，研细，加水使溶解，用乙醚萃取，将乙醚液浓缩，同法制备缺五味子阴性供试液。
展开剂选择分别以正己烷、乙酸乙酯不同比例的混合溶液；石油醚、甲酸乙酯、甲酸不同比例的混合溶液；甲酸乙酯、氯仿不同比例的混合溶液为展开剂。
结果采用方法一制备供试品溶液，以石油醚(30～60℃)∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂，其分离度好，斑点显色清晰，阴性对照无干扰，方法重现性好。最佳展开剂为石油醚(30～60℃)∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶5∶1。
与现有技术相比，本发明所提供的片剂密度高、体积小，其运输、携带、应用都比较方便；机械化、自动化程度都较高，产品性状稳定、剂量准确、成本及售价较低；明确了辅料的种类及用量范围，使整个生产工艺可控，更容易制备。本发明质量控制方法准确度高，重现性好，稳定性好，回收率高，提高了生脉口服制剂的质量控制标准，可有效确保该制剂的临床疗效。
具体实施例方式
本发明的实施例1人参250g、麦冬50g和五味子250g取人参、麦冬和五味子三味药材，粉碎成粗粉，照中国药典流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用65％乙醇作溶剂浸渍24小时后，以3ml/min的速度进行渗漉，收集渗漉液10000ml，减压浓缩至1000ml，放冷，加水稀释至10000ml，冷藏4小时以上，离心(2000转/分)，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.32～1.35(30℃)，真空干燥，粉碎，干膏粉与辅料(预胶化淀粉∶羟丙基纤维素∶羧甲基淀粉钠＝8∶7∶3)按1∶3的比例混匀后，用75％乙醇润湿制粒，干燥，整粒，细粉与0.3％硬脂酸镁混匀，再与颗粒混合，压制成1000片，包衣，即得生脉片。
本发明的实施例2人参200g、麦冬40g和五味子200g取人参、麦冬和五味子三味药材，粉碎成粗粉，照中国药典流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用乙醇作溶剂浸渍24小时后，以2ml/min的速度进行渗漉，收集渗漉液8000ml，减压浓缩至800ml，放冷，加水稀释至8000ml，冷藏，离心，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.2～1.32(20℃)，真空干燥，粉碎，干膏粉与辅料(预胶化淀粉∶羟丙基纤维素∶羧甲淀粉钠＝1∶10∶1)按1∶5的比例混匀后，用乙醇润湿制粒，干燥，整粒，细粉与硬脂酸镁混匀，再与颗粒混合，压片，包衣，即得生脉片。
本发明的实施例3人参300g、麦冬60g和五味子300g取人参、麦冬和五味子三味药材，粉碎成粗粉，照中国药典流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用乙醇作溶剂浸渍48小时后，以4ml/min的速度进行渗漉，收集渗漉液12000ml，减压浓缩至1200ml，放冷，加水稀释至12000ml，冷藏，离心，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.35～1.5(40℃)，真空干燥，粉碎，干膏粉与辅料(预胶化淀粉∶羟丙基纤维素∶羧甲淀粉钠＝10∶1∶5)按5∶1的比例混匀后，用乙醇润湿制粒，干燥，整粒，细粉与硬脂酸镁混匀，再与颗粒混合，压片，包衣，即得生脉片。
本发明的实施例4生脉片剂的质量控制方法包括性状对于片剂，产品为薄膜衣片，除去包衣后显淡黄色至棕黄色；味甘、微酸。
鉴别(1)取片剂3g，研细，加0.5％氢氧化钠溶液20ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取两次，每次20ml，分取正丁醇液，用20ml正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。取人参对照药材1g，加氯仿40ml，加热回流1小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水0.5ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇10ml，超声处理30分钟，吸取上清液，加3倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝65∶35∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
(2)取片剂2g，研细，加水20ml使溶解，加盐酸2ml，加热回流1小时，放冷，加乙醚20ml振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材2g，加65％乙醇20ml，加热回流30分钟，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水至20ml，加盐酸2ml，同法制成对照药材溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝8∶2为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
(3)取片剂2.5g，研细，加水20ml溶解，用等体积氯仿萃取两次，取氯仿液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取五味子对照药材1g，加氯仿20ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1ml使溶解，制成对照药材溶液。再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿制成每1ml各含0.5mg的混合对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以石油醚(30～60℃)∶甲酸乙酯∶甲酸＝15∶6∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查本发明片剂应符合中国药典关于片剂项下的有关规定。
含量测定五味子醇甲 照高效液相色谱法测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇∶水＝62∶38为流动相；检测波长为254nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含40μg的溶液，即得对照品溶液；取片剂装量差异项下的内容物，研细，取细粉约2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声提取30分钟后，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过(0.45μm)，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定含量。本片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
本发明的实施例5生脉胶囊剂的质量控制方法包括性状对于胶囊剂，其内容物为棕黄粉末；气香，味酸、甜、微苦。
鉴别(1)取胶囊剂1g，研细，加0.5％氢氧化钠溶液10ml使溶解，加水饱和的正丁醇30ml振摇提取，分取正丁醇液，用10ml正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为供试品溶液。取人参对照药材0.5g，加氯仿30ml，加热回流1小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水0.1ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇5ml，超声处理20分钟，吸取上清液，加2倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇0.5ml使溶解，作为对照药材溶液。另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝10∶100∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
(2)取胶囊剂1g，研细，加水10ml使溶解，加盐酸1ml，加热回流1小时，放冷，加乙醚10ml振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材1g，加65％乙醇10ml，加热回流20分钟，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水至10ml，加盐酸1ml，同法制成对照药材溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝1∶10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
(3)取胶囊剂1g，研细，加水10ml溶解，用等体积氯仿萃取1次，取氯仿液浓缩至0.5ml，作为供试品溶液。另取五味子对照药材0.5g，加氯仿10ml，加热回流20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿0.5ml使溶解，制成对照药材溶液。再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿制成每1ml各含0.1mg的混合对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10∶10∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置200nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查本发明胶囊剂应符合中国药典关于胶囊剂项下的有关规定；含量测定五味子醇甲 照高效液相色谱法测定色谱柱为C4柱，以甲醇∶水＝10∶90为流动相；检测波长为200nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10μg的溶液，即得对照品溶液。取胶囊剂装量差异项下的内容物，研细，取细粉约2.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定重量，超声提取20分钟后，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl，注入液相色谱仪，测定含量。本胶囊剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
本发明的实施例6生脉颗粒剂的质量控制方法包括
性状对于颗粒剂，产品为淡黄色的颗粒，味甘、微酸。
鉴别(1)取颗粒剂5g，研细，加0.5％氢氧化钠溶液30ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次10ml，分取正丁醇液，用30ml正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。取人参对照药材2g，加氯仿50ml，加热回流2小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水1.0ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇20ml，超声处理40分钟，吸取上清液，加4倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为对照药材溶液。另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝100∶10∶100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在110℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
(2)取颗粒剂3g，研细，加水30ml使溶解，加盐酸3ml，加热回流2小时，放冷，加乙醚30ml振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材3g，加65％乙醇30ml，加热回流50分钟，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水至30ml，加盐酸3ml，同法制成对照药材溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝10∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
(3)取颗粒剂5g，研细，加水30ml溶解，用等体积氯仿萃取3次，取氯仿液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取五味子对照药材2g，加氯仿30ml，加热回流50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿2ml使溶解，制成对照药材溶液。再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿制成每1ml各含0.9mg的混合对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝100∶1∶10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置500nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查本发明颗粒剂应符合中国药典关于颗粒剂项下的有关规定。
含量测定五味子醇甲 照高效液相色谱法测定色谱柱为C8柱，以甲醇∶水＝90∶10为流动相；检测波长为500nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含100μg的溶液，即得对照品溶液。取装量差异项下的颗粒剂，研细，取细粉约2.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，超声提取40分钟后，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定含量。本颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
本发明的实施例7本发明生脉制剂的质量控制方法可以包括性状对于片剂，产品为薄膜衣片，除去包衣后显淡黄色至棕黄色；味甘、微酸；对于胶囊剂，其内容物为棕黄粉末；气香，味酸、甜、微苦；对于颗粒剂，产品为淡黄色的颗粒，味甘、微酸。
鉴别(1)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂2g，研细，加水25ml使溶解，加盐酸2ml，加热回流2小时，放冷，加乙醚25ml振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿1.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取麦冬对照药材2g，加65％乙醇25ml，加热回流40分钟，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水至25ml，加盐酸2ml，同法制成对照药材溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝4∶6为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
(2)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂4g，研细，加水25ml溶解，用等体积氯仿萃取2次，取氯仿液浓缩至1.5ml，作为供试品溶液。另取五味子对照药材1.5g，加氯仿25ml，加热回流40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1.5ml使溶解，制成对照药材溶液。再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿制成每1ml各含0.7mg的混合对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各4μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10∶1∶1的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点检查本发明的片剂、胶囊剂或颗粒剂，应符合中国药典关于片剂、胶囊剂或颗粒剂项下的有关规定。
本发明的实施例8生脉制剂的质量控制方法可以包括性状对于片剂，产品为薄膜衣片，除去包衣后显淡黄色至棕黄色；味甘、微酸；对于胶囊剂，其内容物为棕黄粉末；气香，味酸、甜、微苦；对于颗粒剂，产品为淡黄色的颗粒，味甘、微酸。
鉴别分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂4g，研细，加0.5％氢氧化钠溶液25ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取2次，每次25ml，分取正丁醇液，用25ml正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1.5ml使溶解，作为供试品溶液。取人参对照药材1.5g，加氯仿45ml，加热回流2小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水0.8ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇15ml，超声处理35分钟，吸取上清液，加3倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇1.5ml使溶解，作为对照药材溶液。另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含1.5mg的溶液，作为对照品溶液。照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各8μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝10∶10∶10在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。
含量测定五味子醇甲 照高效液相色谱法测定色谱柱为C18柱，以甲醇∶水＝30∶70为流动相；检测波长为365nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得对照品溶液。取装量差异项下的胶囊剂、片剂或颗粒剂，研细，取细粉约2.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇40ml，称定重量，超声提取35分钟后，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl，注入液相色谱仪，测定含量。该制剂中，胶囊剂所含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
权利要求
1.一种生脉制剂，其特征在于按照重量组份计算它由人参200-300、麦冬40-60和五味子200-300按照下述方法制备而成取人参、麦冬和五味子三味药材，粉碎成粗粉，照中国药典流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用乙醇作溶剂浸渍24-48小时后，以2-4ml/min的速度进行渗漉，收集渗漉液8000-12000ml，减压浓缩至800-1200ml，放冷，加水稀释至8000-12000ml，冷藏，离心，滤过，滤液减压浓缩至20-40℃时相对密度为1.2～1.5，真空干燥，粉碎，干膏粉与预胶化淀粉∶羟丙基纤维素∶羧甲淀粉钠＝10-1∶10-1∶1-5的辅料按1-5∶5-1的比例混匀后，用乙醇润湿制粒，干燥，整粒，细粉与硬脂酸镁混匀，再与颗粒混合，压片，包衣，即得生脉片。
2.按照权利要求1所述的生脉制剂，其特征在于它由人参250g、麦冬50g和五味子250g按照下述方法制备成片剂取人参、麦冬和五味子三味药材，粉碎成粗粉，照中国药典流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用65％乙醇作溶剂浸渍24小时后，以3ml/min的速度进行渗漉，收集渗漉液10000ml，减压浓缩至1000ml，放冷，加水稀释至10000ml，冷藏4小时以上，2000转/分离心，滤过，滤液减压浓缩至30℃相对密度为1.32～1.35，真空干燥，粉碎，干膏粉与预胶化淀粉∶羟丙基纤维素∶羧甲基淀粉钠＝8∶7∶3的辅料按1∶3的比例混匀后，用75％乙醇润湿制粒，干燥，整粒，细粉与0.3％硬脂酸镁混匀，再与颗粒混合，压制成1000片，包衣，即得生脉片。
3.一种生脉制剂的质量控制方法，所述制剂包括片剂、胶囊剂和颗粒剂，其特征在于所述质量控制方法主要包括性状、鉴别、检查以及含量测定项目中的部分或全部；其中鉴别包括对制剂中人参、麦冬和五味子的薄层色谱鉴别；含量测定是对制剂中五味子所含五味子醇甲的含量测定。
4.按照权利要求3所述生脉制剂的质量控制方法，其特征在于人参的鉴别方法是以人参对照药材和人参皂苷Rg1对照品为对照，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂的薄层色谱法；麦冬的鉴别方法是以麦冬对照药材为对照，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂的薄层色谱法；五味子的鉴别方法是以五味子对照药材和五味子甲素、五味子醇甲对照品为对照，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂的薄层色谱法。
5.按照权利要求3或4所述生脉制剂的质量控制方法，其特征在于鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加氢氧化钠溶液使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取，分取正丁醇液，用正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；取人参对照药材，加氯仿，加热回流，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇，超声处理，吸取上清液，加氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇溶解作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(2)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加水使溶解，加盐酸加热回流，放冷，加乙醚振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，加65％乙醇，加热回流，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水，加盐酸，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(3)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加水使溶解，用等体积氯仿萃取，氯仿液浓缩，作为供试品溶液；另取五味子对照药材，加氯仿，加热回流，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿使溶解，制成对照药材溶液；再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿溶解制成混合对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置200-500nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6.按照权利要求5所述生脉制剂的质量控制方法，其特征在于具体的鉴别方法包括以下项目的部分或全部(1)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-5g，研细，加0.5％氢氧化钠溶液10-30ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取1-3次，每次10-30ml，分取正丁醇液，用10-30ml正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作为供试品溶液；取人参对照药材0.5-2g，加氯仿30-50ml，加热回流1-2小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水0.1-1.0ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇5-20ml，超声处理20-40分钟，吸取上清液，加2-4倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作为对照药材溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(2)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-3g，研细，加水10-30ml使溶解，加盐酸1-3ml，加热回流1-2小时，放冷，加乙醚10-30ml振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿0.5-2ml使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材1-3g，加65％乙醇10-30ml，加热回流20-50分钟，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水至10-30ml，加盐酸1-3ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(3)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-5g，研细，加水10-30ml溶解，用等体积氯仿萃取1-3次，取氯仿液浓缩至0.5-2ml，作为供试品溶液；另取五味子对照药材0.5-2g，加氯仿10-30ml，加热回流20-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿0.5-2ml使溶解，制成对照药材溶液；再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿制成每1ml各含0.1-0.9mg的混合对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置200-500nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7.按照权利要求3所述生脉制剂的质量控制方法，其特征在于五味子中五味子醇甲的含量测定方法是以五味子醇甲对照品为对照，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相的高效液相色谱法。
8.按照权利要求3或7所述生脉制剂的质量控制方法，其特征在于五味子醇甲的含量测定方法为照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相；检测波长为200-500nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂、片剂或颗粒剂，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，超声提取，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪测定含量；该制剂中，胶囊剂所含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
9.按照权利要求8所述生脉制剂的质量控制方法，其特征在于更具体的含量测定方法为照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相；检测波长为200-500nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10-100μg的溶液，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂、片剂或颗粒剂，研细，取细粉约2.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20-50ml，称定重量，超声提取20-40分钟后，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-20μl，注入液相色谱仪，测定含量；该制剂中，胶囊剂所含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
10.按照权利要求3所述生脉制剂的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法包括性状对于片剂，产品为薄膜衣片，除去包衣后显淡黄色至棕黄色；味甘、微酸；对于胶囊剂，其内容物为棕黄粉末；气香，味酸、甜、微苦；对于颗粒剂，产品为淡黄色的颗粒，味甘、微酸；鉴别(1)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加氢氧化钠溶液使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取，分取正丁醇液，用正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液；取人参对照药材，加氯仿，加热回流，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇，超声处理，吸取上清液，加氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为对照药材溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇溶解作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(2)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加水使溶解，加盐酸加热回流，放冷，加乙醚振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材，加65％乙醇，加热回流，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水，加盐酸，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(3)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂，研细，加水使溶解，用等体积氯仿萃取，氯仿液浓缩，作为供试品溶液；另取五味子对照药材，加氯仿，加热回流，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿使溶解，制成对照药材溶液；再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿溶解制成混合对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置200-500nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查本发明的片剂、胶囊剂或颗粒剂，应符合中国药典关于片剂、胶囊剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定五味子醇甲 照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相；检测波长为200-500nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇溶解，制成对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂、片剂或颗粒剂，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇，称定重量，超声提取，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液，注入液相色谱仪测定含量；该制剂中，胶囊剂所含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
11.按照权利要求10所述生脉制剂的质量控制方法，其特征在于所述质量控制方法包括性状对于片剂，产品为薄膜衣片，除去包衣后显淡黄色至棕黄色；味甘、微酸；对于胶囊剂，其内容物为棕黄粉末；气香，味酸、甜、微苦；对于颗粒剂，产品为淡黄色的颗粒，味甘、微酸；鉴别(1)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-5g，研细，加0.5％氢氧化钠溶液10-30ml使溶解，加水饱和的正丁醇振摇提取1-3次，每次10-30ml，分取正丁醇液，用10-30ml正丁醇水饱和的水洗涤正丁醇液，取正丁醇液蒸干，残渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作为供试品溶液；取人参对照药材0.5-2g，加氯仿30-50ml，加热回流1-2小时，弃去氯仿液，药渣挥干溶剂，加水0.1-1.0ml拌匀湿润后，加水饱和的正丁醇5-20ml，超声处理20-40分钟，吸取上清液，加2-4倍量氨试液，摇匀，放置分层，取上层液蒸干，残渣加甲醇0.5-2ml使溶解，作为对照药材溶液；另取人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶甲醇∶水＝100-10∶10-100∶10-100在10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在100-110℃加热至斑点显色清晰，日光检视，供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(2)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-3g，研细，加水10-30ml使溶解，加盐酸1-3ml，加热回流1-2小时，放冷，加乙醚10-30ml振摇提取，分取乙醚液，低温蒸干，残渣加氯仿0.5-2ml使溶解，作为供试品溶液；另取麦冬对照药材1-3g，加65％乙醇10-30ml，加热回流20-50分钟，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水至10-30ml，加盐酸1-3ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各1-10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿∶丙酮＝10-1∶1-10为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，加热至斑点显色清晰，日光下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；(3)分别取片剂、胶囊剂或颗粒剂1-5g，研细，加水10-30ml溶解，用等体积氯仿萃取1-3次，取氯仿液浓缩至0.5-2ml，作为供试品溶液；另取五味子对照药材0.5-2g，加氯仿10-30ml，加热回流20-50分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿0.5-2ml使溶解，制成对照药材溶液；再取五味子甲素、五味子醇甲对照品，加氯仿制成每1ml各含0.1-0.9mg的混合对照品溶液；照中国药典薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各1-5μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以30～60℃石油醚∶甲酸乙酯∶甲酸＝10-100∶10-1∶1-10的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置200-500nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；检查本发明的片剂、胶囊剂或颗粒剂，应符合中国药典关于片剂、胶囊剂或颗粒剂项下的有关规定；含量测定五味子醇甲 照高效液相色谱法测定色谱柱为C18或C4或C8柱，以甲醇∶水＝90-10∶10-90为流动相；检测波长为200-500nm；理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含10-100μg的溶液，即得对照品溶液；取装量差异项下的胶囊剂、片剂或颗粒剂，研细，取细粉约2.0g，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20-50ml，称定重量，超声提取20-40分钟后，放冷，甲醇补重，摇匀，滤过，即得供试品溶液；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-20μl，注入液相色谱仪，测定含量；该制剂中，胶囊剂所含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；片剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g；颗粒剂中含五味子以五味子醇甲计，不得少于0.30mg/g。
全文摘要
本发明提供了一种生脉口服制剂及其制备方法和质量控制方法，这种制剂主要是指片剂，按照重量组份计算它由人参200－300、麦冬40－60和五味子200－300制备而成。与现有技术相比，本发明所提供的片剂密度高、体积小，其运输、携带、应用都比较方便；机械化、自动化程度都较高，产品性状稳定、剂量准确、成本及售价较低；明确了辅料的种类及用量范围，使整个生产工艺可控，更容易制备。本发明质量控制方法准确度高，重现性好，稳定性好，回收率高，提高了生脉口服制剂的质量控制标准，可有效确保该制剂的临床疗效。
文档编号A61P9/00GK1970035SQ200610201320
公开日2007年5月30日 申请日期2006年12月19日 优先权日2006年12月19日
发明者叶湘武, 周黎亚, 武燕, 简高华 申请人:贵州益佰制药股份有限公司