专利名称：基于mEPHX基因多态性的皮肤美容保健方法
技术领域：
本发明涉及一种皮肤美容和保健的方法，其根据mEPHX基因的多态性 (SNPs)选择护肤品和皮肤美容保健方案的方案。 技术背景皮肤美容保健是涉及人们生活质量的一个重要方面，市面上有大量不同种 类的护肤品和皮肤美容保健方式供人们选择。不同的护肤品各有特色，功能和美 容保健机理各不相同，如何选择最适合自身皮肤特点的护肤品是人们面临的一个 难题。目前人们一般只能凭肉眼观察来确定自己皮肤的一些简单特点，例如润湿 程度(干性或油性)、黑白程度以及是否有黄斑等，或者采用湿度仪等仪器对皮 肤进行简单的物理测试(主要是润湿程度)，依据这些简单的了解进行护肤品的 选择，因此选择的护肤品往往不是最适宜的，带有很大的盲目性，要么达不到理 想的美容保健想过，要么则需要经过多年反复的试用，承受试验带来的风险。出 现这些问题的根本原因是仅凭肉眼观测和对皮肤表面简单的物理测试，只能反映 巳经出现的外在问题，不能揭示皮肤的内在特点，因此不仅不能找出发生皮肤问 题的内在原因，只能是治标不治本，更不能预测的生长和发展趋势，针对皮肤出 现问题的可能性和倾向性进行预防性保健，防患于未然。人类基因的研究，为揭示人体自身的生长秘密提供了一种有力的手段。目 前人们已经开始逐渐了解到某些基因在人体皮肤健康中的重要作用。例如MnSOD 基因的表达蛋白是皮肤抗过氧化损伤的主要酶，而过氧化可以在皮肤产生自由基 分子，损伤DNA、皮肤胶原纤维和蛋白质，从而损伤皮肤组织和细胞，直接导致 皮肤老化和皮肤黄褐斑，SOD则分解这些过氧化物，避免过氧化物在细胞和组织 内聚集，减少过氧化物对皮肤的损伤；hGPXl基因的表达蛋白是皮肤分解氢过氧化物的主要酶，氢过氧化物主要来自环境污染和代谢产物，损伤DNA、皮肤胶原 纤维和蛋白质，从而损伤皮肤组织和细胞，导致皮肤老化和皮肤黄褐斑，hGPXl 则分解氢过氧化物使之成为无害物质，减少氢过氧化物对皮肤的损伤；mEPHX基 因的表达蛋白是皮肤分解环境沾染到皮肤上的某些化学物质和毒物的主要酶，例 如可以分解致癌物质polycyclic aromatic hydrocarbons (多环芳烃，PAHs)， 这种物质主要来源于汽车废气和吸烟污；TNF-alpha基因的表达蛋白在维持皮肤 免疫功能方面非常重要，能使皮肤免疫细胞保持抵抗环境感染物的能力；醒P1 基因的表达蛋白则可以分解皮肤的胶原蛋白，造成皮肤胶原断裂和皮肤老化，而 阳光中的UVB可以诱导皮肤产生醒P1蛋白，造成皮肤损伤。申请人的研究显示，与皮肤相关的某些基因中特定位点的基因型(或基因 单核苷酸多态性，SNPs，简称基因多态性)可以在很大程度上影响着皮肤中相 应的酶的活性，进而影响着皮肤的生长和健康状态，不利的基因型是导致皮肤问 题的内在原因或主要原因，决定了皮肤出现问题的可能性和倾向性。因此人们可 以根据基因多态性检测结果，发现皮肤出现问题的内在原因，预测皮肤的生产和 发展趋势，选择最适宜的护肤品和皮肤美容保健方法，有针对性地进行皮肤的美 容保健。例如，申请人对自愿接受检测的450人进行了 MnS0D基因第47C-TVU6V 位点基因多态性和皮肤清除活性氧(ROS)自由基的能力作了如下对比试验。 ROS(包括02-、 H202和OH')损伤在皮肤问题的发生方面起重要作用，而SOD 皮肤是防止ROS产生和清除ROS的主要酶。Paraquat是细胞内产生ROS的诱导物， 试验用Paraquat诱导产生细胞内ROS，然后检测皮肤ROS清除率。基因多态性为纯 合阳性的有126人(占检测总人数的2鄉)，ROS清除率26.7±3.6%;基因多态性 为杂合阳性的有234人(古抽样总数的52%)， ROS清除率74.2±13.8%;而在基 因多态性为阴性的其余人中，ROS清除率90.9±1.2%。由此显示出MnS0D基因第47C-TVU6V位点的基因多态性同皮肤MnSOD活性相关，该位点基因多态性为 纯合阳性和杂合阳性的，会导致皮肤MnSOD活性的降低，并且纯合阳性对MnSOD 活性降低的影响程度大于杂合阳性。申请人对自愿接受检测的228人进行了 hGPXl基因第593C-T\P197L位点基 因多态性和皮肤分解氢过氧化物的能力检测，作了如下对比试验。氢过氧化物 (OH')损伤在皮肤问题的发生方面起重要作用，而hGPXl是皮肤清除OH'的 主要酶。UVA是细胞内产生OH的诱导物，试验用UVA诱导皮肤表皮细胞产生OH',然 后检测皮肤OH'清除率。皮肤hGPXl的检测，基因多态性为纯合阳性的有39人 (占检测总人数的17%),皮肤OH清除率是53.2士6.3。/。；基因多态性为杂合，白 性的有109人(占检测总人数的48%)，皮肤OH清除率是73.3±8.9%;。由此显 示出hGPXl基因第xxxx位点的基因多态性同皮肤GPX1活性相关，该位点基因 多态性为纯合阳性和杂合阳性的，会导致皮肤GPX1活性的降低，并且纯合阳性 对GPX1活性降低的影响程度大于杂合阳性。。申请人对自愿接受检测的137人进行了 mEPHX基因的第 -12381^/2557<:-0/￥11311/1113911位点基因多态性和皮肤分解氢过氧化物的能力 检测，作了如下对比试验。皮肤对污染物，例如PAHs主要由mEPHX解毒，在 受试者皮肤涂抹少量PAHs然后检测PAHs的残留量。基因多态性为纯合阳性的有 14人(占检测总人数的10%)，其PAHs的残留量是91士l.l。/。；基因多态性为杂合 阳性的有66人(占检测总人数的48%)， PAHs的残留量为49±21.8%;而在基因 多态性为的阴性其余人中，PAHs的残留量是7. 8±6.4%。由此显示出mEraX基因 第xxxx位点的基因多态性同皮肤EfflX活性相关，该位点基因多态性为纯合阳性 和杂合阳性的，会导致皮肤EPHX活性的降低，并且纯合阳性对EPHX活性降低的 影响程度大于杂合阳性。申请人对自愿接受检测的137人进行了 TNF-alpha基因的麵-308G-A/-850C-T/L29S/R32W位点基因多态性和皮肤EPHX的检测和调节JUN基 因和I型胶原合成酶基因的能力检测，作了如下对比试验。TNF-alpha通过调 节JUN基因/I型胶原合成酶基因在皮肤免疫和I型胶原合成方面起重要作用， 申请人:通过检测JUN基因激活时间判定TNF-alpha的活性。阴性受检者JUN基因 激活时间与基因多态性为纯合阳性的受检者比较(有3人，占检测总人数的2%)， OR = 3.0, P = 0.02;与杂合阳性的受检者(有29人，占检测总人数的21%)， OR = 2.1, P = 0.01。由此显示出TNF-alpha基因第xxxx位点的基因多态性同皮肤免疫力相 关，该位点基因多态性为纯合阳性和杂合阳性的，会导致皮肤免疫力的降低，并 且纯合阳性对皮肤免疫力降低的影响程度大于杂合阳性。申请人对自愿接收检测的68人进行了 MMP1基因的第-1607G-GG位点基 因多态性和MMP1 mRNA检测，作了如下对比试验。UVB是细胞内产生MMP 的诱导物，试验用UVB诱导皮肤，然后检测MMP1 mRNA。基因多态性为纯合 阳性的有29(占抽样总数的42%)，在阳光中B波段紫外线的作用下MMP1 mRNA 表达高于阴性人群OR = 2.2， P = O.Ol;基因多态性为杂合阳性的有30人(占抽样 总数的44%),在阳光中B波段紫外线的作用下MMP1 mRNA表达高于阴性人群: OR = 1.6， P = 0,01 。由此显示出MMP1基因的第-1607G-GG位点的基因多态性同 皮辟胶原蛋白分解程度相关，该位点基因多态性为纯合阳性和杂合阳性的，在阳 光中B波段紫外线的作用下，会导致皮肤胶原蛋白分解程度的升高，并且纯合阳 性对皮肤胶原蛋白分解的影响程度大于杂合阳性。上述检测是在大量的基因位点分析和筛选基础上进行的，其中基因多态性 检测采用目前公认的测序技术和SNP快速诊断技术，检测结果根据被检测序列 分为纯合阳性、杂合阳性或阴性，例如TNF-alpha基因的第-3-850C-T位点， 呈C/C型的为阴性，呈C/T型的为杂合阳性，呈T/T型的为纯合阳性。检测酶 活性的方法采用目前公认的ELISA法，检测皮肤免疫力的方法采用目前公认的RT-PCR方法，检测皮肤胶原蛋白分解程度的方法为目前公认的RT-PCR方法。 发明内容为克服现有技术下皮肤美容保健的盲目性，本发明提供了一种基于mEPHX 基因多态性的皮肤美容保健方法，这种方法可以发现皮肤内在的特点，根据皮肤 特点选择最适宜的皮肤美容保健方案。本发明实现上述目的技术方案是 一种基于mEPHX基因多态性的皮肤美 容保健方法，包括下列步骤(1)对与皮肤美容保健相关的基因位点进行基因多 态性检测；(2)由基因多态性的检测结果，对皮肤特点进行判断；(3)针对皮肤 特点，选择符合皮肤特点的美容保健方案，所述与皮肤美容保健相关的基因位点 是mEPHX基因的第-1238T-A/2557C-G/Y113H/H139R位点，当检测结果为纯合 阳性或杂合阳性时，判断皮肤具有EPHX活性降低的可能性和倾向性，易于出现 病理性老化、生痤疮、解毒功能不良问题，其中检测结果为纯合阳性时皮肤EPHX 活性降低的可能性、倾向性以及降低程度一般均会高于该基因多态性为杂合阳性 时。本发明的有益效果是通过相关基因多态性的检测，可以从基因层次上发 现皮肤的特点，有效地判断出出现皮肤问题的内在原因和皮肤出现问题的可能性 和倾向性，有针对性的进行皮肤美容和保健，消除了选择护肤品和皮肤美容保健 方案时的盲目性，提高了美容保健效果。
具体实施方式
本发明的方法主要由下列三个步骤构成(1) 对与皮肤美容保健相关的基因位点进行基因多态性检测；(2) 由基因多态性的检测结果，对皮肤特点进行判断；(3) 针对皮肤特点，选择符合皮肤特点的美容保健方案。这里，所谓美 容保健方案在通常情况下主要是指对护肤品的选择，也可以包括护肤品的使用，或者采用使用护肤品之外的其他护理方式。而使用护肤品的护理方式和使用护肤 品之外的其他护理方式可以同时使用，也可以单独使用。.首先，应选择好基因和位点，这些基因和位点应经过验证，使其同皮肤美 容保健的相关性得到肯定。现代基因科学的发展，为发现和证实这种相关性提供 了基础。目前公认的基因理论和申请人已有的研究成果已经证实存在这样的基因 和位点，其基因多态性对皮肤生长和健康起到重要的作用，其不利形态构成了皮 肤问题的内在原因。随着科研的发展，还可能发现新的基因和位点与皮肤的美容 和保健问题相关，这些发现均可以应用于本发明中，为本发明的实施提供更为广 泛的前景。在进行基因多态性检测时，可以采用各种现有的基因检测技术，例如测序 技术、酶切技术、芯片技术SNP快速诊断技术、微卫星技术、real time PCR技 术和质谱技术等。可以根据不同检测技术的特点和使用者的实际条件选择具体的 检测方法。随着科技的发展，将会有越来越多、越来越方便的基因检测技术出现， 这些技术均可以应用在本发明中。.所述与皮肤美容保健相关的基因位点可以是MnSOD基因的第47C-T/A16V 位点，该位点的多态性影响着皮肤MnSOD的活性，当检测结果为纯合阳性或杂合 阳性时，提示皮肤MnSOD活性降低的可能性和倾向性。由此可以做出的判断是皮 肤具有MnSOD活性降低的可能性和倾向性，易于出现过敏生痤疮、病理性老化、 色素沉着黄斑和修复再生不良等问题。该基因多态性为纯合阳性时皮肤MnSOD活 性降低的可能性、倾向性以及降低程度一般均会高于该基因多态性为杂合阳性 时。所述与皮肤美容保健相关的基因位点可以是hGPXl基因的第 593C-T/P197L位点，该位点的多态性影响着皮肤GPX1的活性，当检测结果为 纯合阳性或杂合阳性时，提示皮肤GPX1活性降低的可能性和倾向性。由此可以做出的判断是皮肤具有GPX1活性降低的可能性和倾向性，易于出现过敏、生痤 疮、病理性老化、免疫功能不良和修复再生不良等问题。该基因多态性为纯合阳 性时皮肤GPX1活性降低的可能性、倾向性以及降低程度一般均会高于该基因多 态性为杂合阳性时。所述与皮肤美容保健相关的基因位点可以是mEPHX基因的第 -12381^/25570^/￥11311/1113911位点，该位点的多态性影响着皮肤EPHX的活 性，当检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，提示皮肤EPHX活性降低的可能性和 倾向性。由此可以做出的判断是皮肤具有EPHX活性降低的可能性和倾向性，易 于出现病理性老化、生痤疮、解毒功能不良等问题。该基因多态性为纯合阳性时 皮肤EPHX活性降低的可能性、倾向性以及降低程度一般均会高于该基因多态性 为杂合阳性时。所述与皮肤美容保健相关的基因位点可以是TNF-alpha基因的第 -3080-^-850<:-171^98/1132\^位点，该位点的多态性影响着皮肤的免疫力，当检 测结果为纯合阳性或杂合阳性时，提示皮肤免疫力降低的可能性和倾向性。由此 可以做出的判断是皮肤具有免疫力降低的可能性和倾向性，易于出现病理性老 化、血液循环不良和修复再生不良等问题。该基因多态性为纯合阳性时皮肤免疫 力降低的可能性、倾向性以及降低程度一般均会高于该基因多态性为杂合阳性 时。所述影响皮肤生长和健康的基因的相关位点可'以是MMP1基因的第 -1607G-GG位点，该位点的多态性影响着皮肤胶原蛋白的分解程度，当检测结果 为纯合阳性或杂合阳性时，提示易于在日光中的B波段紫外线的激活下，直到 合成MMP1，降解皮肤细胞间质。由此可以做出的判断是皮肤具有在日光中的B 波段紫外线激活下直到合成MMP1的可能性和倾向性，易于出现生理老化、病 理性老化和日光性老化等问题。该基因多态性为纯合阳性时皮肤胶原蛋白的分解程度高于该基因多态性为杂合阳性时的分解程度。根据基因多态性检测的结果及其反映出来的皮肤出现问题的可能性和倾向 性，可以对皮肤进行有针对性的美容保健方面的护理。在将检测结果分为阴性、 杂合阳性和纯合阳性三种的情况下，相应的皮肤护理也可以分为三个级别普通 护理、强化护理和特别强化护理。所谓普通护理对应于没有基因多态性引发皮肤出现问题的可能性和倾向 性。在这种情况下，可以根据皮肤的外部物理特征(润湿程度、黑白程度等)和 环境状况选用普通功能的护肤品，进行滋润、保湿和/或增白等护理。这些护肤 品可以直接在市场中购买，无需特别的添加剂或特别的护理配方。对于上述的5 种基因位点的多态性，这种护理可适于检测结果为阴性的人，也适于检测结果为 纯合阳性和杂合阳性的人的普通护理。所谓强化护理和特别强化护理是在基因多态性检测显示存在皮肤不良可能 性和倾向性时进行的有针对性护理，主要是施加特殊的护理成分(可称为强化成 分)，用以抵消特定基因型带来的不良影响。例如在上述5种基因多态性检测中， 检测结果为杂合阳性和纯合阳性的基因型均会引起相应酶活性的降低或其他相 应问题，导致某种不良的可能性和倾向性。因此，要抵消这些特定基因型带来的 不良影响，就应当补充相应的酶，或者施加可以起到与这种酶相同作用的其他有 益成分，或者施加可以改善皮肤相应状况的其他有益成分，或者实施其他有效的 皮肤美容保健方法。施加强化成分的剂量应依据强化成分本身的性质、不良可能性和倾向性的 强弱、使用方式等具体情况而定。对于不良可能性和倾向性较强的，施加强化成 分的剂量就应该大一些，这就是所谓的特别强化护理；对于不良可能性和倾向性 较弱的，补充强化成分的剂量就应小一些，这就是所谓的强化护理。由于在上述 5种检测中，纯合阳性引发的不良可能性和倾向性相对较高，应进行相应的特别强化护理，杂合阳性引发的不良可能性和倾向性相对较低，应进行相应的强化护理。强化成分的使用方法和剂型等应根据使用上的便利和该成分本身的特点而 定。可以将强化成分添加在普通护肤品中，形成相应的强化配方或特别强化配方， 以便在使用护肤品的同时获得相应的强化护理或特别强化护理；也可以将强化成 分单独使用，例如将含有该强化成分的膏剂(包括各种可以涂敷在皮肤表面的剂 型)涂敷在皮肤表面或者口服含相应强化成分的药品，或者是进行含相应强化成 分药品的注射等。可根据现有技术或者其他各种可能的技术选择强化成分。随着科技的发展，可供选择的强化成分将越来越多。例如，在MnSOD基因的第47C-T/A16V位点 检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，皮肤的不良可能性和倾向性是皮肤MnSOD活 性降低，使用的强化成分可以是活性SOD;在hGPXl基因的第593C-T/P197L位 点检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，皮肤的不良可能性和倾向性是皮肤GPX1 活性降低，要消除皮肤GPX1活性降低的不良后果，可以使用VC作为强化成分； 在mEPHX基因的第-1238T-A/2557C-G/Y113H/H139R位点检测结果为纯合阳性 或杂合阳性时，皮肤的不良可能性和倾向性是皮肤EPHX活性降低，使用的强化 成分可以是现有技术下用于防止皮肤病理性老化的海藻提取物；在TNF-alpha基 因的第-308G-AA850C-T/L29S/R32W位点检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，皮 肤的不良可能性和倾向性是皮肤的免疫力降低，使用的强化成分同样可以是现有 技术下用于防止皮肤病理性老化的海藻提取物；在MMP1基因的第-1607G-GG 位点检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，皮肤的不良可能性和倾向性是易于在日 光中的B波段紫外线的激活下直到合成MMP1，使用的强化成分可以是透明质 酸，或者采用其他防止紫外线的措施。所述基因多态性检测一般可以在未出现皮肤问题时进行，以便防患于未然，针对皮肤的不良可能性和倾向下进行美容保健。所述基因多态性检测也^T以在出 现皮肤问题后进行，以便找出出现皮肤问题的真正原因，对症下"药"。例如对 于皮肤老化问题，可能是日光性老化，也可能是化学毒物损伤，当MMP1基因 的第-1607G-GG位点基因多态性检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，提示日光性 老化的可能性，当mEPHX基因的第-1238T-A/2557C-G/Y113H/H139R位点基因 多态性检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，提示化学污染物引发老化的可能性， 在确定老化原因后，可能采用相应的强化护理或特别强化护理，并可以采取其他 防止措施(例如避免日光照射或远离化学污染物)。申请人采用上述介绍的方式，对自愿接受试验的39人进行了皮肤美容保健 护理试验。根据对受试人员调查，通过持续时间6-12个月在皮肤细腻润滑程度、 白皙程度、防止老化(去皱)等方面感觉明显改善的占69%;通过持续时间12-24 个月在消除黄褐斑方面感觉明显改善的占51%; 85%的人认为这种美容保健的 效果优于他们以往采用的美容保健效果相比，剩余15 《的人认为与以往美容保 健效果无明显差异。
权利要求
1.一种基于mEPHX基因多态性的皮肤美容保健方法，包括下列步骤(1)对与皮肤美容保健相关的基因位点进行基因多态性检测；(2)由基因多态性的检测结果，对皮肤特点进行判断；(3)针对皮肤特点，选择符合皮肤特点的美容保健方案，所述与皮肤美容保健相关的基因位点是mEPHX基因的第-1238T-A/2557C-G/Y113H/H139R位点，当检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，判断皮肤具有EPHX活性降低的可能性和倾向性，易于出现病理性老化、生痤疮、解毒功能不良问题，其中检测结果为纯合阳性时皮肤EPHX活性降低的可能性、倾向性以及降低程度一般均会高于该基因多态性为杂合阳性时。
2. 如权利要求l所述的基于mEPHX基因多态性的皮肤美容保健方法，其 特征在于采用的基因检测技术为下列方法中的一种或几种测序技术、酶切技术、 芯片技术、SNP快速诊断技术、微卫星技术、real time PCR技术和质谱技术等。
3. 如权利要求1或2所述的基于mEPHX基因多态性的皮肤美容保健方法， 其特征在于根据基因检测结果的阴性、杂合阳性和纯合阳性三种情况，所述皮肤 美容保健方面的护理相应地分为级别普通护理、强化护理和特别强化护理，其 中普通护理对应于没有因基因多态性引发皮肤出现问题的可能性和倾向性，根据 皮肤的外部物理特征和环境状况选用普通功能的护肤品，进行滋润、保湿和/或 增白护理；所谓强化护理和特别强化护理是在基因多态性检测显示存在皮肤不良 可能性和倾向性时进行的有针对性护理，主要是施加特殊的强化成分，用以抵消 特定基因型带来的不良影响，所述强化成分是相应的酶，或者是与这种酶有相同 作用的有益成分，或者是可以改善皮肤相应状况的有益成分，其中强化成分在特. 别强化护理中剂量大于在强化护理中的剂量。
4. 如权利要求3所述的基于mEPHX基因多态性的皮肤美容保健方法，其 特征在于在mEPHX基因第-1238T-A/2557C-G/Y113H/H139R位点检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，使用的强化成分是用于防止皮肤病理性老化的海藻提取 物。
5.如权利要求3所述的基于mEPHX基因多态性的皮肤美容保健方法，其 特征在于所述基因多态性检测在未出现皮肤问题时进行，或者在出现皮肤问题后 进行，所述施加强化成分的方式是将强化成分添加在普通护肤品中，形成相应的 强化配方或特别强化配方，或者是将含有该强化成分的膏剂涂敷在皮肤表面，或 者是口服含相应强化成分的药品，或者是进行含相应强化成分药品的注射。
全文摘要
本发明涉及一种基于mEPHX基因多态性的皮肤美容保健方法，包括下列步骤(1)对与皮肤美容保健相关的基因位点进行基因多态性检测；(2)由基因多态性的检测结果，对皮肤特点进行判断；(3)针对皮肤特点，选择符合皮肤特点的美容保健方案，所述与皮肤美容保健相关的基因位点是mEPHX基因的第-1238T-A/2557C-G/Y113H/H139R位点，当检测结果为纯合阳性或杂合阳性时，判断皮肤具有EPHX活性降低的可能性和倾向性，易于出现病理性老化、生痤疮、解毒功能不良问题。本发明可以从基因层次上发现皮肤的特点，找到皮肤出现问题的内在原因，消除了在皮肤美容保健的盲目性，极大地提高了美容保健的效果。
文档编号A61K8/18GK101240331SQ20071016633
公开日2008年8月13日 申请日期2006年4月7日 优先权日2006年4月7日
发明者甄二真, 祝艺伦 申请人:甄二真;祝艺伦