Hdac抑制剂和可螯合的金属化合物的药物组合物以及金属-hdac抑制剂螯合物的制作方法

专利名称：：Hdac抑制剂和可螯合的金属化合物的药物组合物以及金属-hdac抑制剂螯合物的制作方法
技术领域：
：本发明提供了HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物的药物组合物。在一个实施方案中，本发明提供了通过给药该药物组合物来治疗癌症和减轻HDAC抑制剂的副作用的方法。在另一个实施方案中，本发明还提供了金属HDAC抑制剂螯合物的药物组合物。在另一个实施方案中，本发明提供了通过给药该药物组合物来治疗癌症的方法。本发明提供了金属HDAC抑制剂螯合物的结晶组合物及其制备方法。
背景技术：
：在整个申请中，各种出版物用括号内的阿拉伯数字来引用。这些出版物的完全引述可以在权利要求之前的说明书结尾处找到。癌症是一种细胞群体在不同程度上对正常控制增殖和分化的控制机制无反应的疾病。多年来，已有两种主要的癌症化疗对策a)通过干预性激素的产生或外周作用来阻断激素依赖性肿瘤细胞增殖；和b)通过使癌细胞接触细胞毒物质(它们同时伤害肿瘤和正常细胞群体)而直接杀死癌细胞。还尝试了通过诱导赘生性细胞的终末分化来治疗肿瘤(l)。已经有人报道在细胞培养模型中通过使细胞接触各种刺激产生分化，包括环腺苷酸和视黄酸(2,3)，阿柔比星和其它蒽环霉素类(4)。尽管在肿瘤领域中取得了许多进步，但大多数实体肿瘤在晚期仍然不能治愈。在大多数情况下使用细胞毒治疗，然而，它常常引起明显的对患者的致病，而没有显著的临床效益。正在探索低毒性的特异性更高的药剂来治疗和控制晚期恶性肿瘤。有充足的证据表明致瘤性转化未必会破坏癌细胞分化的潜在性(1,5，6)。具有许多其中对增殖的正常调节剂不反应，似乎在其分化程序的表达中被阻断，并且仍然可以被诱导分化和停止复制的肿瘤细胞的实例。许多作用剂，包括一些相对简单的极性化合物(5,7-9),维生素D和视黄酸的衍生物(10-12),甾体激素(13)，生长因子(6,14),蛋白酶类(15,16),肺瘤促进剂(17,18)以及DNA或RNA合成抑制剂(4,19-24),可以诱导各种转化细胞系和原发性人肿瘤外植体，以表达高分化特征。组蛋白脱乙酰基酶抑制剂比如辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA),属于这类作用剂，具有诱导肿瘤细胞生长阻抑、分化和/或凋亡的能力(25)。这些化合物的耙的是赘生性细胞恶变能力所固有的机制,因为它们在有效抑制动物肿瘤生长的剂量下似乎没有毒性(26)。有若干系列的证据表明，组蛋白乙酰化和脱乙酰是细胞实现转录调节的机制(27)。据认为这些效应通过改变组蛋白对核小体中的螺旋DNA的亲合力而改变染色质的结构来产生。在核小体中被鉴定的组蛋白有五种类型(表示为Hl、H2A、H2B、H3和H4)。各核小体在其核心含有各组蛋白类型的两种，但Hl除外，Hl单独存在于核小体结构外部。据信，当该组蛋白被低度乙酰化时，组蛋白对DNA磷酸骨架具有更高亲合力。该亲合力导致DNA紧密结合组蛋白，从而使DNA难以接近转录调节元件和转录机。乙酰化状态的调节通过两种酶复合物-组蛋白乙酰转移酶(HAT)和组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)_之间的活性平衡来实现。低度乙酰化状态被认为抑制了相关DNA的转录。该低度乙酰化状态通过包括HDAC酶的大的多蛋白复合物来催化。尤其，已经表明，HDAC催化从染色质核心组蛋白脱除乙酰基。SAHA(ZOLINZATM(伏林司他(vormostat)))已经证明对治疗癌症有用，选择性诱导赘生性细胞的终末分化，诱导细胞生长阻抑和/或诱导凋亡。如由X-射线晶体衍射法研究所证明的，据认为HDAC被SAHA抑制是通过与酶的催化部位直接相互作用来发生(28)。HDAC抑制的结果不被认为对基因组具有普遍化效应，而是仅仅影响基因组的小亚群(29)。使用HDAC抑制剂培养的恶性细胞系进行的DNA微阵列技术所提供的证据显示，有限(1-2%)数量的基因的产物被改变。例如，在培养物中用HDAC抑制剂处理的细胞显示了细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21的一致性诱导(30)。该蛋白在细胞周期停滞中起着重要的作用。HDAC抑制剂被认为通过在p21基因区传播组蛋白的高乙酰化状态来提高p21的转录速率，从而使该基因可接近转录机。表达不受HDAC抑制剂影响的基因没有显示在区域相关组蛋白的乙酰化方面的改变(31)
发明内容本发明提供了HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物的药物组合物。在一个实施方案中，本发明提供了通过给药该药物组合物来治疗癌症和减轻HDAC抑制剂的副作用的方法。在另一个实施方案中，本发明还提供了金属HDAC抑制剂螯合物的药物组合物。在另一个实施方案中，本发明提供了通过给药该药物组合物来治疗癌症的方法。本发明提供了金属HDAC抑制剂螯合物的结晶组合物及其制备方法。附图简述图l示出了参照胶嚢批量的SAHA的溶解分布图。该胶嚢含有约100mg的活性成分SAHA和赋型剂。图2示出了結晶铁SAHA螯合物的X射线衍射图。图3示出了用SiemansD500自动化粉末衍射仪测定的SAHA的X射线衍射图。图3A-E:I-V型SAHA。图4示出了用X'PERTProPhillipsX射线衍射仪测定的I型SAHA的X射线衍射图。发明的详述术语"药学上可接受的载体"意欲包括与药物给药方式相适应的所有溶剂、分散介质、涂层剂、抗菌剂和抗真菌剂、等渗化剂和吸收延迟剂等等。适合的载体在最豸斤片反本的Remington'sPharmaceuticalSciences-本领域的标准参考教科书中有描述，该文献在本文引入供参考。还可以使用脂质体和非水性载体比如固定油类。用于药物活性物质的这些介质和作用剂的使用在本领域中是公知的。除非任何普通介质或作用剂与本发明的组合物不相容，否则它们的使用均被考虑。还可以将附加的活性化合物引入到该组合物中。术语"f2"或"F2"是指通过新的体外溶解分布图与参比体外溶解分布图的逐项对比所测定的相似系数，如等式1所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>(等式l)私是指参照物的每一时间点(t)所溶解的化合物的百分率。r,是指试验样品的每一时间点(t)所溶解的化合物的百分率。打是指用于计算的时间点的数目。50或50以上的f2值被认为反映了类似的体外溶解速率。对于本发明来说，药物组合物的整个SAHA的体外溶解速率或分布图根据实施例4的步骤和条件由整个药物组合物测定。在一个实施方案中，体外溶解速率或分布图通过使用具有在37土0.5。C的温度下的900mL的2.0%Tween(TCIAmerica,俄勒岗州波特兰)中的螺旋沉降片(QualityLabAccessoriesL丄.C.,Manville,NJ)和在lOOrpm下旋转的桨叶的USP溶解装置II来测定。该整个药物组合物包括全部SAHA和可螯合的金属化合物，如果该药物组合物含有胶嚢壳、载体、赋型剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、粘结剂或在以下药物组合物部分中所述的任何附加作用剂，该测量用这些成分进4亍。用于量方面的措词"大约"是指规定量的±10%。对于本发明的X射线衍射图来说，取决于校准、样品或仪表配置，在26的峰可以在一个方向上移动至多±0.3度(误差)。例如，在X射线衍射图中的所有峰移动至多+0.3度，或者至多-0.3度。在该误差内的X射线衍射图或峰被认为是相同或基本上相同。包括HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物的药物组合物在一个实施方案中，本发明提供了包括治疗有效量的组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂和可螯合的金属化合物以及药学上可接受的载体的药物组合物。在给药于患者时，该药物组合物可以在体内形成金属HDAC抑制剂螯合物。在一个实施方案中，该HDAC抑制剂是异羟肟酸衍生物。在另一个实施方案中，该HDAC抑制剂具有金属结合的(即铁或锌)配体，例如羰基，羟基，氨基，硫醇基，酰胺基以及在已知的HDAC抑制剂中存在的其它基团(例如苯曱酰胺)。在一个实施方案中，该HDAC抑制剂是辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)或其药学上可接受的盐或水合物或溶剂化物。在另一个实施方案中，药物组合物中的全部SAHA具有与图l所示的参比溶解分布图相比至少50-100的相似系数(f2)的体外溶解分布图。在一个实施方案中，f2是56-100。在一个实施方案中，f2是60-100。在一个实施方案中，f2是65-100。在另一个实施方案中，f2是80-100。在又一个实施方案中，该药物组合物是单个胶嚢，其中SAHA量是约100mg。在一个实施方案中，在体外，药物组合物中的全部SAHA在10分钟时43-63%溶解，在30分钟时66-86%溶解，以及在60分钟时77-97%溶解。的一个实施方案中，在体外，药物组合物中的全部SAHA在15分钟时52-72%溶解，在30分钟时66-86%溶解，以及在45分钟时73-93%溶解。在一个实施方案中，在体外，药物组合物中的全部SAHA在10分钟时43-63%溶解，在15分钟时52-72%溶解，在20分钟时58-78%溶解，在30分钟时66-86%溶解，在45分钟时73-93%溶解以及在60分钟时77-97%溶解。在一个实施方案中，在体外，药物组合物中的全部SAHA在10分钟时46-60%溶解，在15分钟时55-69°/。溶解，在20分钟时61-75%溶解，在30分钟时69-83%溶解，在45分钟时76-90%溶解以及在60分钟时80-94%溶解。在一个实施方案中，全部SAHA的至少45%但小于或等于75%在15分钟时溶解，全部SAHA的至少75%在60分钟时溶解。该HDAC抑制剂或可螯合的金属化合物可以为无定形。该HDAC抑制剂或可螯合的金属化合物可以微粒化，或者可以是附聚的，颗粒，粉末，油，油性悬浮液或任何其它固体形式。在一个特定实施方案中，该HDAC抑制剂是结晶的辛二酰苯胺异羟肝酸。在一个实施方案中，结晶的SAHA是I型SAHA,以基本上类似于图3A的X射线衍射图为特征。在另一个实施方案中，结晶的SAHA是I型SAHA,以基本上以类似于图4的X射线衍射图表征。在一个实施方案中，I型SAHA是使用铜Ka辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在9.0,9.4,17.5,19.4,20.0,24.0，24.4,24.8,25.0,28.0度29的特征峰。在另一个实施方案中，I型SAHA是使用铜Ka辐射通过X射线粉末4汙射图表征，包括在大约9.0,9.4,17.5,19.4,20.0,24.0,24.4,24.8,25.0,28.0和43.3度2e的特征峰。在另一个实施方案中，I型SAHA是使用铜Ka辐射通过X射线粉末书f射图表征，包括在9.4,17.5,19.4,20.0,24.0和28.0度2e的特征峰。在另一个实施方案中，I型辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)由包括在大约9.4,17.5,19.4,20.0,24.0和28.0度26的特征峰的X射线粉末衍射图表征，其中X射线粉末衍射图用铜X射线源测定；以及进一步由通过PerkinsElmerDSC6Instrument测定的具有在大约164.4±2.0的单一最大值的差示扫描量热法(DSC)差热图表征。在另一个实施方案中，I型辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)由包括在大约9.4,17.5,19.4,20.0,24.0和28.0度26的特征峰并且缺乏在大约13.4-14.0和22.7-23.0度26的峰的X射线粉末衍射图表征，其中X射线粉末衍射图用铜X射线源测定。在又一个实施方案中，I型辛二酰苯胺异羟肟酸是使用铜X射线源的X射线粉末4汙射图表征，包括在9.1,10.8,12.3,17.2,19.2,19.8,23.7,24.1，25.7,26.8和27.7度26的特征峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度26的峰的X射线粉末衍射图。在一个实施方案中，I型SAHA是使用铜Kot辐射通过X射线粉末书亍射图表征，包括在9.0,9.4,17.5,19.4,20.0,24.0,24.4,24.8,25.0,28.0度20的特征峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度2e的峰。在另一个实施方案中，I型SAHA是使用铜Koc辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在9.0,9.4，17.5,19.4,20.0,24.0,24.4,24.8,25.0,28.0,43.3度26的特征峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度26的峰。在又一个实施方案中，I型SAHA另外由缺乏至少一个在大约<8.7,10.0-10.2,13.4-14.0,15.0-15.2,17.5-19.0,20.1-20.3,21.1-21.3,22.0,22.22,22.7-23.0,25.0-25.5:26.0-26.2和27.4-27.6度2e的峰表征。在另一个实施方案中，I型SAHA进一步由具有在大约164.4土2.0的单一最大值的差示扫描量热法(DSC)差热图表征，通过PerkmsElmerDSC6Instrument测定。在一个实施方案中，I型SAHA具有a=10.9A，b=7.9A,c=16.4A,a=90°,P=97.8°,y=90°,空间群P2!/n的晶胞参数。在一个特定实施方案中，结晶辛二酰苯胺异羟肟酸是IV型SAHA,是使用铜Ka辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在大约8.8，9.3,11.0，12.4,17.4，19.4,19.9,22.4,22.9,23.83，24.2，24.8，25.8,27.0，27.8,28.4度2e的特征峰。在一个实施方案中，本发明提供了包括大约lOOmg辛二酰苯胺异羟將酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有特征如下的体外溶解分布图在15分钟时全部SAHA的至少45%但少于或等于75%溶解，在60分钟时全部SAHA的至少75%溶解，其中SAHA是结晶的并是使用铜Kct辐射通过X射线粉末书t射图表征，包括在9.0,9.4，17.5,19.4,20.0,24.0,24.4,24.8,25.0,28.0度29的特^正峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度29的峰。在一个实施方案中，本发明提供了包括大约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有特征如下的体外溶解分布图在15分钟时全部SAHA的至少45°/"旦少于或等于75%溶解，在60分钟时全部SAHA的至少75%溶解，其中SAHA是结晶的，是使用铜Ka辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在大约9.4,17.5,19.4,20.0,24.0和28.0度26的特征峰，其中X射线4分末书t射图用铜X射线源测定；以及进一步由通过PerkmsElmerDSC6Instrument测定的具有在大约164.4±2.0的单一最大值的差示扫描量热法(DSC)差热图表征。在一个实施方案中，本发明提供了包括大约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有特征如下的体外溶解分布图在15分钟时全部SAHA的至少45%但少于或等于75%溶解，在60分钟时全部SAHA的至少75%溶解，其中SAHA是结晶的，是使用铜Koc辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在9.1,10.8,12.3,17.2,19.2,19.8,23.7,24.1,25.7,26.8和27.7度26的特征峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度26的峰。在另一个实施方案中，本发明提供了包括大约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有与图1所示的参照溶解分布图相比至少50-100的相似系数(f2)的体外溶解分布图，其中SAHA是结晶的和是使用铜Ka辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在9.0,9.4,17.5,19.4,20.0,24.0,24.4,24.8,25.0,28.0度2e的特征峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度2e的峰。在另一个实施方案中，本发明提供了包括大约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有与图1所示的参照溶解分布图相比至少50-100的相似系数(f2)的体外溶解分布图，其中SAHA是结晶的和是使用铜Ka辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在9.4,17.5,19.4,20.0,24.0和28.0度26的特征峰的X射线粉末衍射图，其中X射线粉末衍射图用铜X射线源测定；以及进一步由通过PerkmsElmerDSC6Instrument测定的具有在大约164.4±2.0的单一最大值的差示扫描量热法(DSC)差热图表征。在另一个实施方案中，本发明提供了包括大约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有与图1所示的参照溶解分布图相比至少50-100的相似系数(f2)的体外溶解分布图，其中SAHA是结晶的和是使用铜Ka辐射测定的X射线粉末衍射图表征，包括在9.1,10.8,12.3,17.2,19.2,19.8,23.7,24.1,25.7,26.8和27.7度26的特征峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度2e的峰。在又一个实施方案中，本发明提供了包括大约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有特征在于在10分钟时43-63%溶解、在30分钟时66-86%溶解和在60分钟时77-97%溶解的体外溶解分布图，其中SAHA是结晶的和是用铜Koc辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在9.0,9.4,17.5,19.4,20.0，24.0,24.4，24.8,25.0,28.0度26的特征峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度26的峰。在又一个实施方案中，本发明提供了包括大约100mg辛二酰苯胺异羟坊酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有特征在于在10分钟时43-63%溶解、在30分钟时66-86%溶解和在60分钟时77-97%溶解的体外溶解分布图，其中SAHA是结晶的和是使用铜Ka辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在9.4,17.5,19.4,20.0,24.0和28.0度26的特征峰，其中X射线衍射用铜X射线源测定；并且进一步由通过PerkinsElmerDSC6Instrument测定的具有在大约164.4±2.0的单一最大值的差示扫描量热法(DSC)差热图表征。在又一个实施方案中，本发明提供了包括大约100mg辛二酰苯胺异羟肟酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有特征在于在10分钟时43-63%溶解、在30分钟时66-86%溶解和在60分钟时77-97%溶解的体外溶解分布图，其中SAHA是结晶的和是使用铜Ka辐射通过X射线粉末衍射图表征,包括在9.1,10.8,12.3,17.2,19.2,19.8,23.7,24.1,25.7,26.8和27.7度26的特征峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度2e的峰。在又一个实施方案中，本发明提供了包括大约100mg辛二酰苯胺异羟月亏酸和可螯合的金属化合物的单个胶嚢，其中全部SAHA具有特征在于在10分钟时43-63%溶解、在30分钟时66-86%溶解和在60分钟时77-97%溶解的体外溶解分布图，其中SAHA是结晶的和是使用铜Ka辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在9.0,9.4,17.5,19.4,20.0,24.0,24.4，24.8,25.0,28.0度26的特征峰并且缺乏在13.4-14.0和22.7-23.0度26的峰。在一个实施方案中，该可螯合的金属化合物包括铁。该4失化合物可以是原位形成铁HDAC抑制剂螯合物的患者可生物利用的任何形式，例如药物组合物形式，如片剂或胶嚢形式。在一个实施方案中，该铁化合物是葡糖酸亚铁、葡糖酸铁、硫酸亚铁、硫酸铁、富马酸亚铁、富马酸铁、氨基酸铁螯合物或双-甘氨酸亚铁形式的铁补充剂。该铁补充剂可以同时含有其它维生素类和矿物质。在另一个实施方案中，在该药物组合物中的HDAC抑制剂和铁的化学计量比是5:1,4:1,3:1,2:1,1:1或2:1。在一个实施方案中，该药物组合物包括约100mg的SAHA和约1-10摩尔当量的铁补充剂。在另一个实施方案中，该药物组合物包括约150mg的SAHA和约1-10摩尔当量的4失补充剂。在又一个实施方案中，该药物组合物包括约200mg的SAHA和约1-IO摩尔当量的铁补充剂。在一个供选^奪的实施方案中，该药物组合物包括约50mg的SAHA和约1-10摩尔当量的铁补充剂。在一个实施方案中，该可螯合的金属化合物包括锌。该锌化合物可以是原位形成锌HDAC抑制剂螯合物的患者可生物利用的任何形式，例如药物组合物形式，如片剂或胶嚢形式。在一个实施方案中，该锌化合物葡糖酸锌、吡啶甲酸锌、柠檬酸锌、氨基酸锌螯合物或氧化锌形式的锌补充剂。该锌补充剂可以同时含有其它维生素类和矿物质。在另一个实施方案中，在该药物组合物中的SAHA与锌的化学计量比是5:1，4:1,3:1,2:1,1:1或2:1。在一个实施方案中，该药物组合物包括约100mg的SAHA和约1-IO摩尔当量的锌补充剂。在另一个实施方案中，该药物组合物包括约150mg的SAHA和约1-10摩尔当量的锌补充剂。在又一个实施方案中，该药物组合物包括约200mg的SAHA和约1-10摩尔当量的锌补充剂。包括金属HDAC抑制剂螯合物的药物组合物在一个实施方案中，本发明提供了包括治疗有效量的HDAC抑制剂螯合物或其水合物或溶剂化物和药学上可接受的载体的药物组合物。该金属HDAC抑制剂螯合物可以为无定形。该金属HDAC抑制剂螯合物可以是结晶的，或者可以是附聚的，颗粒，粉末，油，油性悬浮液或任何其它固体形式。该金属HDAC抑制剂螯合物或其水合物或溶剂化物可以是任何晶形。在一个实施方案中，该HDAC抑制剂是异羟肟酸衍生物。在一个实施方案中，该HDAC抑制剂是SAHA。在一个实施方案中，本发明提供了包括治疗有效量的铁SAHA螯合物或其水合物或溶剂化物和药学上可接受的载体的药物组合物。在一个实施方案中，铁与SAHA比率是1:3,1:2或1:1。在一个实施方案中，该铁SAHA螯合物是结晶的并且由基本上类似于图1的X射线衍射图表征。在另一个实施方案中，该铁SAHA螯合物使用铜Ka辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在8.8、14.5和21.8度2e的特征峰。在又一个实施方案中，该4失SAHA螯合物使用铜Ka辐射通过X射线并分末衍射图表征，包括在8.8，13.3,14.5，20.3,21.8和24.6度2e的特征峰。在又一个实施方案中，该铁SAHA螯合物使用铜Koc辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在8.8,13.3,14.5,18.5,20.3,21.8,24.6,25.8和33.3度2e的特;f正峰。在另一个实施方案中，本发明提供了包括治疗有效量的锌SAHA螯合物或其水合物或溶剂化物和药学上可接受的载体的药物组合物。在一个实施方案中，锌与SAHA比率是1:3、1:2或1:1。本发明还涵盖了包括金属HDAC抑制剂螯合物或SAHA的水合物或溶剂化物的药物组合物。该术语"水合物"包括但不限于半水化合物，一水合物，二水合物，三水合物等等。药物组合物该药物组合物中的药学上可接受的载体可以是固体颗粒形式。通常用作载体或稀释剂的任何惰性赋型剂可以用于本发明的制剂，例如树胶，淀粉，糖，纤维素材料，丙烯酸酯或它们的混合物。在一个实施方案中，稀释剂是微晶纤维素。本发明的组分(例如，HDAC抑制剂；可螯合的金属化合物；HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物；或金属HDAC抑制剂螯合物)可以进一步包括崩解剂(例如，交联羧曱基纤维素钠)和润滑剂(例如，硬脂酸镁)，并且另外可以包括一种或多种选自粘结剂、緩冲剂、蛋白酶抑制剂、表面活性剂、增溶剂、增塑剂、乳化剂、稳定剂、增粘剂、增甜剂、成膜剂或它们的任何结合物中的添加剂。此外，本发明的组分可以是控释或立即释放制剂的形式。在一个实施方案中，本文所述的药物组合物可以进一步包括微晶纤维素、交联羧曱基纤维素钠和硬脂酸镁。制剂中的本发明的组合物和各种赋型剂的百分率可以变〗匕。例如，该药物组合物可以包4舌在约20-90wt%,约50-80wt。/o或约60-70wtQ/。的本发明的组合物。此外，该药物组合物可以包括约10-70wt%,约20-40wt%，约25-35wt。/。的作为载体或稀释剂的孩i晶纤维素。此外，该药物组合物可以包括在约1-30wt%,约1-10wt%,约2-5wt。/。的作为崩解剂的交联羧甲基纤维素钠。此外，该药物组合物可以包括约0.1-5wt。/。或约0.5-1.5wt。/o的作为润滑剂的硬脂酸镁。在一个实施方案中，该本发明的药物组合物包括大约50-80wt。/o的本发明的组分；约20-40wt。/o微晶纤维素；约1-10城％交联羧曱基纤维素钠；和约0.1-5wt。/o硬脂酸镁。在另一个实施方案中，该本发明的药物组合物包括大约60-70wt。/。的本发明的组分；约25-35wtM微晶纤维素；约2-5wt。/。交联羧曱基纤维素钠；和约0.5-1.5wt。/。硬脂酸镁。在一个实施方案中，所述药物组合物包括约50-200mg或50-600mg的I型SAHA。本发明的一个特定实施方案是在明胶胶嚢中含有的本发明的组分与微晶纤维素，NF(AvicelPh101)、交联羧甲基纤维素钠，NF(AC-Di-Sol胶)和硬脂酸镁，NF的固态制剂。另一个实施方案是包括约100mg本发明的组合物、约44.3mg的微晶纤维素、约4.5mg的交联羧甲基纤维素钠和约1.2mg的硬脂酸镁的药物组合物。在一个实施方案中，该药物组合物口服给药，那么，因此以适合于口服给药的形式配制，即作为固体形式或液体形式。适合的固体口服制剂包括例如片剂，胶嚢剂，丸剂，颗粒，小丸等等。适合的液体口服制剂包括例如乳液、油剂等。在本发明的一个实施方案中，该组合物配制为胶嚢剂。根据该实施方案，除了本发明的组分和惰性载体或稀释剂以外本发明的药物组合物还包括硬明胶胶嚢。固体载体/稀释剂包括，但不限于树胶，淀粉(例如，玉米淀粉，预胶凝淀粉)，糖(例如，乳糖，甘露糖醇，蔗糖，葡萄糖)，纤维素材料(例如，微晶纤维素)，丙烯酸酯(例如，聚甲基丙烯酸甲酯)，碳酸钙，氧化镁，滑石或它们的混合物。对于液体制剂，药学上可接受的载体可以是非水溶液、悬浮液，乳液或油。非水溶剂的实例是丙二醇，聚乙二醇以及可注射的有机酯比如油酸乙酯。油的实例是石油、动物油、才直物油或合成来源的油，例如，花生油，豆油，矿物油，橄榄油，向日葵油和鱼肝油。悬浮液还可以包括下列成分固定油类，聚乙二醇，甘油，丙二醇或其它合成溶剂；抗菌剂比如千醇或羟苯甲酸甲酯；抗氧化剂比如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂比如乙二胺四乙酸(EDTA)。另外，该药物组合物可以进一步包括粘结剂(例如，阿拉伯树胶，玉米淀粉，明胶，卡波姆，乙基纤维素，瓜尔胶，羟基丙基纤维素，羟丙基曱基纤维素，聚维酮)，崩解剂(例如，玉米淀粉，马铃薯淀粉，海藻酸，二氧化硅，交联羧曱基纤维素钠，交联聚乙烯吡咯烷酮，瓜尔胶，淀粉羟基乙酸钠，羧曱基淀粉钠(Primogel)),洗涤剂(例如，吐温20,吐温80,PluromcF68,胆汁酸盐)，蛋白酶抑制剂，表面活性剂(例如，十二烷基硫酸钠)，渗透增强剂，增溶剂(例如，甘油，聚乙烯甘油)，助流剂(例如，胶体二氧化石圭)，抗氧化剂(例如，抗坏血酸，焦亚石克酸钠，丁基羟基茴香醚)，稳定剂(例如，羟基丙基纤维素，羟丙基曱基纤维素)，增粘剂(例如，卡波姆，胶体二氧化硅，乙基纤维素，瓜尔胶)，增甜剂(例如，蔗糖，阿斯巴特，柠檬酸)，增香剂(例如，薄荷，水杨酸曱酯，或者橙香料)，防腐剂(例如，硫汞撒，千醇，对羟基苯甲酸酯类)，润滑剂(例如，硬脂酸，硬脂酸镁，聚乙二醇，月桂基硫酸钠)，流动助剂(例如，胶体二氧化硅)，增塑剂(例如，邻苯二曱酸二乙酯，柠檬酸三乙酯)，乳化剂(例如，卡波姆，羟基丙基纤维素，十二烷基硫酸钠)，聚合物涂层剂(例如，泊洛沙姆或poloxammes)，涂层和涂力莫形成剂(例如，乙基纤维素，丙烯酸酯，聚甲基丙烯酸酯)和/或助剂。在一个实施方案中，本发明的组分用防止该组分在体内快速清除的载体制备，例如控释制剂，包括植入物和包微嚢的输送系统。可以使用可生物降解的、生物相容性聚合物，比如乙烯-乙酸乙烯酯共聚物，聚酐类，聚乙醇酸，胶原，聚原酸酯和聚乳酸。制备这种制剂的方法对于本领域的技术人员来说是显而易见的。这些材料还可以从AlzaCorporation和NovaPharmaceuticals,Inc购买。还可以-使用脂质7本悬浮液(包4舌用病毒抗原的单克隆抗体以受感染细胞为靶的的脂质体)作为药学上可接受的载体。它们可以按照本领域技术人员已知的方法如美国专利No.4,522,811中所述的方法来制备。含有活性成分的药物组合物的制备在本领域中是公知的，例如通过混合、制粒或片剂形成方法。对于口服给药，活性剂与该目的常用的添加剂如载体、稳定剂或惰性稀释剂混合，如以上详细描述的，通过常用方法转化为适于给药的形式，例如片剂、包衣片剂、硬或软明胶胶嚢、水溶液、醇溶液或油溶液等。在一个实施方案中，为了便于给药和剂量的均一性，该口服组合物配制为单位剂型。这里所使用的单位剂型是指适合作为所要治疗的患者的单一剂量的物理上分立的单位；每一单位含有经计算可产生所需治疗效应的预定量的本发明的组分与所需的药物载体。本发明的单位剂型的规格受以下因素的支配并且直接取决于以下因素本发明的组分的独特性质，所要获得的特定治疗效果，以及配合用于治疗个体的这种活性化合物的技术中固有的限制。在某些实施方案中，该单位剂型含有约600mg、550mg、500mg、450mg、400mg、350mg、300mg、250mg、200mg、150mg、110mg、105mg、100mg、95mg、90mg、85mg、80mg、75mg、70mg、65mg、60mg、55mg、50mg、45mg或者40mg的本发明的组分。在一个实施方案中，本发明组分的量是大约100mg。该药物组合物可以与给药说明书一起在容器、包装或者分配器中包含。在一个实施方案中，该药物组合物是单个胶嚢，其中本发明的组分的量是约100mg。在一个实施方案中，该药物组合物是两个胶嚢，其中本每一胶嚢含有约50mg的本发明的组分。获得金属HDAC抑制剂螯合物和结晶的方法
技术领域：
：本发明还提供获得金属HDAC抑制剂螯合物的方法，包括在反应介质中添加可螯合的金属化合物和碱以及HDAC抑制剂的步骤。在一个实施方案中，反应介质是有机溶剂或有才几溶剂和水的混合物。在一个实施方案中，有机溶剂是乙醇。在一个实施方案中，该可螯合的金属化合物包括铁或锌。在另一个实施方案中，该可螯合的金属化合物、碱和HDAC抑制剂可溶于反应介质。在一个实施方案中，该石咸是N,N-二异丙基乙胺或乙醇钠。在一个实施方案中，该可螯合的金属化合物是氯化铁或氯化锌。本发明还提供获得结晶金属HDAC抑制剂螯合物的方法，包括让螯合物在有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中结晶的步骤。在一个实施方案中，该金属是锌或铁。在一个特定实施方案中，该结晶金属HDAC抑制剂螯合物从有机溶剂中结晶。该有机溶剂可以是醇比如曱醇、乙醇或异丙醇。在一个实施方案中，该有机溶剂是甲醇，乙醇，乙腈，异丙醇和乙酸中的一种或多种。在一个实施方案中，有机溶剂是乙醇。在一个特定实施方案中，反应介质中使用的有机溶剂与结晶中的有机溶剂相同。在另一个实施方案中，有机溶剂和水的混合物包括约1-99%有4几溶剂和约99-1%的水。在另一个实施方案中，该混合物包括40-99%乙醇和60%-1%的水。在一个实施方案中，该混合物包括约15-85%有机溶剂和约1-15%水。在一个实施方案中，该混合物包括约85%有机溶剂和约15%水。在另一个特定实施方案中，该混合物包括l:l乙醇和水。在又一个特定实施方案中，该混合物包括9:1乙醇和水。有才几溶剂与水的比率或百分率在这里按体积计。在一个特定实施方案中，该有机溶剂是醇(例如甲醇，乙醇，异丙醇等等)。然而，本领域技术人员显而易见的是，这里所述的结晶或反应可以在任何适合的溶剂或溶剂混合物中进行，这可以容易地由有机合成领域的技术人员来选择。在这里使用的的这种适合的有机溶剂例如可以不带限制地包括氯化溶剂类，烃熔剂，醚溶剂，极性质子溶剂和极性非质子溶剂。适合的囟化溶剂包括，但不限于，四氯化碳，溴二氯曱烷，二溴氯甲烷，三溴甲烷，氯仿，溴氯曱烷，二溴甲烷，丁基氯，二氯甲烷，四氯乙烯，三氯乙烯，1,1,1-三氯乙烷，1,1,2-三氯乙烷，1,1-二氯乙烷，1,2-二氯乙烷，异丙基氯，六氟苯，1,2,4-三氯苯，邻二氯化苯，氯苯，氟代苯，一氟三氯曱烷，氯三氟曱烷，一溴三氟曱烷，四氟化碳，二氯氟曱烷，氯二氟甲烷，三氟曱烷，1，2-二氯四氟乙烷和六氟乙烷。适合的烃熔剂包括，但不限于，苯，环己烷，戊烷，己烷，曱苯，环庚烷，甲基环已烷，庚烷，乙基苯，间-、邻-或对二曱苯，辛烷，二氢化茚，壬烷。适合的醚溶剂包括，但不限于，二甲氧基曱烷，四氢呋喃，1,3-二喁烷，1,4-二喁烷，呋喃，二乙醚，乙二醇二曱醚，乙二醇二乙醚，二甘醇二甲醚，二甘醇二乙醚，三甘醇二异丙醚，苯曱醚或叔丁基甲基醚。适合的极性质子溶剂包括，但不限于，甲醇，乙醇，2-硝基乙醇，2-氟乙醇，2,2,2-三氟乙醇，乙二醇，l-丙醇，2-丙醇，2-曱氧基乙醇，1-丁醇，2-丁醇，异丁基醇，^又丁基醇，乙二醇单乙醚，二甘醇，l-、2-或3-戊醇，新戊醇，叔戊醇，二乙二醇一曱醚，二甘醇-单乙醚，环己醇，千醇，苯酚和甘油。适合的极性非质子溶剂包括，但不限于，二甲基甲酰胺(DMF),二甲基乙酰胺(DMAC),1,3-二曱基-3,4,5,6-四氬-2(1H)-嘧啶酮(DMPU)，1,3-二甲基-2-咪唑啉酮(DMI),N-甲基吡咯烷酮(NMP)，曱酰胺，N-曱基乙酰胺，N-甲基甲酰胺，乙腈(ACN),二甲亚砜，丙腈，甲酸乙酯，乙酸曱酯，六氯丙酮，丙酮，乙基甲基酮，乙酸乙酯，醋酸异丙酯，乙酸叔丁基酯，环丁砜，N,N-二曱基丙酰胺，硝基曱烷，硝基苯，六曱基磷酰胺。治疗方法具有金属结合区的HDAC抑制剂如异羟肟酸衍生物能够多价螯合某些内源性盐，比如铁和锌。这些盐是生物系统长期健康和存活所必需的。另外，可螯合的盐比如铁是许多酶和蛋白质如以下这些维持正常功能所必需的脂氧合酶，P-450酶超家族，单胺氧化酶，血红素和许多其它酶。锌是细胞分裂和生长所必不可少的，并且参与DNA的形成。锌对于胰岛素适当发挥功能也是很重要的，并且涉及免疫系统健康。缺锌可以引起肠粘膜萎缩，贫血，腹泻，水和营养吸收降低(脱水和厌食)，味觉损害，脱发，胸腺萎缩，睾丸萎缩；高血糖症，提高血清葡萄糖，肌酸提高，肾功能不全、损害或衰竭。在癌症病人的治疗中已经观察到了SAHA的临床上的有害感受或副作用比如腹泻，疲劳，恶心，血小板减少症，厌食，味觉障碍，体重减轻，肌肉痉挛，脱发，贫血，血肌酐提高，呕吐，寒战，其中一些可能与铁或锌离子与SAHA的金属结合区螯合而导致的缺铁或缺锌有关。SAHA临床前的毒性包括涉及所有动物种类的体重减轻或食欲不振、免疫的抑制(白血球减少，淋巴细胞减少，胸腺萎缩)；涉及大鼠的血小板减少；涉及狗的胃肠毒性(粘膜萎缩，急性炎，坏死，多发性损害)、脱水，电解质损失、睾丸萎缩。同样地，其它锌螯合剂具有与HDAC抑制剂相似的毒性或副作用。例如，Lithostat(乙酰氧肟酸)引起副作用比如恶心，呕吐，厌食，疲劳，不适感，网状细胞增多，贫血，血小板减少症，白血球减少症和头痛。去铁酮引起副作用比如疲劳，骨髓萎缩，胸腺萎缩和中性粒细胞减少。因此，HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物如铁或锌的共同给药/共同配制，将有利于保持铁，锌和其它可螯合的盐贮库的利用度，并且消除了HDAC抑制剂的副作用。除共同给药和共同配制之外，预计预先形成金属HDAC抑制剂螯合物会具有类似的效应。因此，在一个实施方案中，本发明提供了治疗癌症并减轻HDAC抑制剂的副作用的方法，包括将治疗有效量的HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物共同给药于患者的步骤。在另一个实施方案中，本发明还提供了HDAC抑制剂用于制备治疗癌症并减轻HDAC抑制剂的副作用的药物的用途，包括将治疗有效量的HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物共同给药于患者的步骤。在一个实施方案中，该可螯合的金属化合物每曰给药于患者。在另一个实施方案中，该可螯合的金属化合物在HDAC抑制剂的给药之前或之后给药。在另一个实施方案中，该可螯合的金属化合物与HDAC抑制剂同时给药。在又一个实施方案中，本发明提供了一种试剂盒，包括至少一种药物学上有效的单位剂量的HDAC抑制剂，以及通过共同给药可螯合的金属化合物与HDAC抑制剂来治疗癌症并减轻HDAC抑制剂的副作用的说明书。该药物学上有^t的单位剂量的SAHA、其药学上可接受的盐或水合物可以是200mg,300mg，400mg，500mg或600mg。该可螯合的金属化合物可以为药物组合物的形式，例如维生素补充剂或矿物质补充剂，它还可以包纟舌其它维生素类和矿物质。在另一个实施方案中，本发明还提供了治疗癌症并减轻HDAC抑制剂的副作用的方法，包括将含有HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物的药物组合物给药于患者的步骤。在另一个实施方案中，本发明提供了包括HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物的药物制剂用于治疗癌症并减轻HDAC抑制剂的副作用的用途。在又一个实施方案中，本发明提供了用于治疗癌症并减轻HDAC抑制剂的副作用的包括HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物的药物组合物。在一个实施方案中，该可螯合的金属化合物包括铁或锌。在另一个实施方案中，该HDAC抑制剂是辛二酰苯胺异鞋肝酸(SAHA)。在一个实施方案中，该副作用是恶心，呕吐，腹泻，厌食，肠粘膜萎缩或胃肠毒性。在另一个实施方案中，该副作用是贫血、疲劳或血小板减少。在又一个实施方案中，该副作用是恶心，呕吐，腹泻，厌食，肠粘膜萎缩，胃肠毒性，疲劳或血小板减少。在又一个实施方案中，本发明进一步提供治疗癌症的方法，包括将治疗有效量的金属HDAC抑制剂螯合物或其水合物或溶剂化物给药于患者的步骤。在另一个实施方案中，本发明提供了包括治疗有效量的金属HDAC抑制剂螯合物或其水合物或溶剂化物的药物制剂用于治疗癌症的用途。在又一个实施方案中，本发明提供了用于治疗癌症的、包括金属HDAC抑制剂螯合物或其水合物或溶剂化物的药物组合物。本发明进一步提供了治疗癌症的方法，包括将治疗有效量的在上述实施方案中提到的锌或铁SAHA螯合物或其水合物或溶剂化物给药于患者的步骤。在一个实施方案中，本发明的方法用于治疗癌症病人。然而，该方法还有可能有效治疗其它哺乳动物的癌症。癌症包括^旦不限于由赘生性细胞增殖所引起的任何癌症，比如肺癌，急性淋巴骨髓瘤，霍奇金淋巴瘤，非霍奇金淋巴瘤，膀胱黑色素瘤，肾癌，乳腺癌，前列腺癌，卵巢癌或结肠直肠癌。根据本发明，该药物组合物可^^皮用于治疗各种癌症，包括但不限于实性肺瘤(例如，头颈部、肺、乳房、结肠、前列腺、膀胱、直肠、脑、胃组织、骨、卵巢、甲状腺或子宫内膜的胂瘤)，血液恶性肺瘤(例如，白血病，淋巴瘤，骨髓瘤)，癌(例如膀胱癌，肾癌，乳腺癌，结肠直肠癌)，神经母细胞瘤或黑色素瘤。这些癌症的非限制性例子包括弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL),T细胞淋巴瘤或白血病，例如，皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL),非皮肤外周T细胞淋巴瘤，与人T细胞嗜淋巴细胞病毒(HTLV)有关的淋巴瘤，成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL)以及急性淋巴细胞性白血病，急性非淋巴细胞白血病，急性骨髓性白血病，慢性淋巴细胞性白血病，慢性骨髓性白血病，霍奇金病，非霍奇金淋巴瘤，骨髓瘤，多发性骨髓瘤，间皮瘤，儿童期实性肺瘤，脑神经母细胞瘤，视网膜母细胞瘤，神经胶质瘤，维耳姆斯瘤，骨癌和软组织肉瘤，成年人普通实性肺瘤比如头和颈部癌症(例如，口腔，喉和食道的癌症)，泌尿生殖系统癌症(例如，前列腺、膀胱、肾脏、子宫、卵巢、睾丸、直肠和结肠的癌症)，肺癌(例如，小细力包癌和非小细力包肺癌，包括鳞状上皮癌和腺癌)，乳腺癌，胰腺癌，黑色素瘤和其它皮肤癌，皮肤基底细胞癌，转移性皮肤癌，溃疡或乳头状类型的鳞状上皮癌，胃癌，脑癌，肝癌，肾上腺癌，肾癌，甲状腺癌，髓样癌，骨肉瘤，软组织肉瘤，尤因氏肉瘤，网状组织(veticulum)细胞肉瘤和卡波济氏肉瘤。还包4舌这里所述的任何癌症的儿科类型。给药方法在本文所述的所有方法中，药物组合物可以在明月交月交嚢中口服给药。该组合物可以按照本文所述的方法按单位剂量每日一次、每日两次或每日三次给药。每曰给药然后连续重复几天到几年的日期。口服治疗可以持续一周到患者的寿命。在一个实施方案中，该给药进行五个连续日，在此之后可以评价患者以确定是否需要进一步的给药。该给药可以是连续或间歇的，即，治疗多个连续日，然后是休息期。本发明的药物组合物可以按照25-4000mg/m2的(例如，约25到1000mg、50-1000mg、100mg、200mg、300mg、400mg、600mg、800mg、1000mg/m2等等)的总日剂量口服给药。典型地，在将至多400mg的量给药于患者时，该化合物作为一次剂量给药。对于更高的总剂量(即大于400mg),将该总量分成多个剂量，例如，每日两次，每日三次等等，或在一天纟妄相等的时期展开。例如，两个剂量，例如，各500mg，可以相隔12小时给药，以实现每天1000mg的总剂量。在一个实施方案中，SAHA以200mg的总日剂量》会药于患者。在另一个实施方案中，SAHA以400mg的总日剂量给药于患者。在另一个实施方案中，SAHA以600mg的总日剂量给药于患者。在一个实施方案中，给药于患者的HDAC抑制剂的量低于引起患者难以处理的毒性的量。在某些实施方案中，给药于患者的HDAC抑制剂的量低于引起化合物在患者血浆中的浓度等于或超过该化合物毒性水平的量。在一个实施方案中，该HDAC抑制剂在患者血浆中的浓度维持在约10nM到约5000nM之间。在本发明的实施中给药于患者的HDAC抑制剂的最佳量将取决于所使用的特定化合物和所要治疗的癌症的类型。组蛋白脱乙酰基酶和组蛋白脱乙酰基酶抑制剂这里所使用的术语组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)是催化从核小体的核心组蛋白的氨基端尾部的赖氨酸残基脱除乙酰基的酶。照此，HDACs与组蛋白乙酰转移酶(HATs)—起调节组蛋白的乙酰化状态。组蛋白乙酰化影响基因表达和HDAC的抑制剂，例如异羟將酸型杂化极性化合物辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)体外诱导转化细胞的生长停滞、分化和/或凋亡和体内抑制肺瘤生长。HDACs根据结构同源性可以分为两种类型。I型HDACs(HDACs1、2、3和8)与酵母RPD3蛋白相似，位于核内并且在与转录的辅阻遏物有关的复合物中一皮发现。II性HDACs(HDACs4,5，6，7和9)与酵母HDA1蛋白质相似，并且具有核和胞浆的亚细胞局部化。I和II型HDACs被异羟肝酸型HDAC抑制剂如SAHA所抑制。HDACsIII型形成了与酵母SIR2蛋白质有关的一类结构上疏远的NAD依赖性酶，并且不一皮异羟肟酸型HDAC抑制剂所抑制。这里使用的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂或HDAC抑制剂是能够体内、体外或体内和体外抑制组蛋白的脱乙酰的化合物。照此，HDAC抑制剂抑制至少一种组蛋白脱乙酰基酶的活性。作为抑制至少一种组蛋白的脱乙酰的结果，乙酰化组蛋白产生增加，乙酰化组蛋白的积聚是用于评价HDAC抑制剂活性的适合的生物标志物。因此，可以分析乙酰化组蛋白的积聚的程序能够用来测定所研究的化合物的HDAC抑制活性。应该理解的是，能够抑制组蛋白脱乙酰基酶活性的化合物还可以与其它底物结合，照此可以抑制其它生物学活性分子例如酶。还应该理解的是，本发明的化合物能够抑制上述任何组蛋白脱乙酰基酶或任何其它组蛋白脱乙酰基酶。例如，在接受HDAC抑制剂的患者中，乙酰化组蛋白在外周单核细胞以及用HDAC抑制剂处理的组织中的积聚可以作为适合的对照进4t测定。一种特定化合物的HDAC抑制活性可以例如使用酶促试-验体外测定，该试-验显示至少一种组蛋白脱乙酰基酶浮皮抑制。此外，乙酰化组蛋白在用一种特定组合物处理的细胞中的积聚的测定可以决定着一种化合物的HDAC抑制活性。乙酰化组蛋白的积聚的试马全在文献中是众所周知的。例如参见Marks,P.A.等人,J.Natl.CancerInst,92:1210-1215,2000,Butler,L.M.等人，CancerRes.60:5165-5170(2000),Richon,V.M.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.,USA，95:3003-3007,1998以及Yoshida,M.等人，J.Biol.Chem.，265:17174-17179,1990。例如，用于测定组蛋白脱乙酰基酶抑制剂化合物的活性的酶促试验表位标记的(Flag)HDAC1的效应可以通过用指定量的抑制剂化合物在冰上在没有底物的存在下孵育酶制剂大约20分钟来测试。可以添加底物([3司乙酰基-标记的鼠红白血病细胞来源的组蛋白)，样本可以按30pL的总体积在37。C下孵育20分钟。然后可以停止该反应，可以提取所释放的乙酸盐，通过闪烁计数测定放射性释放量。用于测定组蛋白脱乙酰基酶抑制剂化合物的替代试验是可从BIOMOL⑧ResearchLaboratories,Inc.,PlymouthMeeting,PA购得的"HDAC焚光活性试-验；DrugDiscoveryKit隱AK陽500"。体内试验可以如下进行。动物如小鼠可以腹膜内注射HDAC抑制剂化合物。可以在给药后预定时间分离所选择的组织例如脑、脾、肝脏等。组蛋白可以基本上如由Yoshida等人,J.Biol.Chem.265:17174-17179,1990所述从组织中分离。等量的组蛋白(大约liag)可以在15。/。SDS-聚丙烯酰胺凝胶上电泳，并且可以转移到Hybond-P过滤膜(Hybond-Pfilters)(购自Amersham)上。过滤膜可以用3%牛乳封闭，并且可以用兔提纯多克隆抗乙酰化组蛋白H4抗体(Ac-H4)和抗乙酰化组蛋白H3抗体(Ac-H3)(UpstateBiotechnology,Inc.)探测。乙酰化组蛋白的水平可以使用辣才艮过氧化酶偶联的山羊抗兔抗体(l:SOOO)和SuperSignal化学发光底物(Pierce)来观察。作为组蛋白蛋白质的加载控制，可以跑平行凝胶，用考马斯蓝(CB)染色。另夕卜，已经表明，异羟肟酸型HDAC抑制剂上调p2lWAw的表达基因。的培养期内诱导。p21waf:基因:诱导与乙酰化组蛋白在该基因的染色质区中的积聚有关。p21WAF1的诱导因此可以被认为牵涉到由HDAC抑制剂在转化细胞中所引起的G1细胞周期停滞。典型地，HDAC抑制剂划分为5个大类l)异羟肟酸衍生物；2)短链脂肪酸(SCFAs);3)环状四肽；4)苯酰胺类；和5)亲电子的酮类。因此，本发明的范围包括用于抑制组蛋白脱乙酰基酶、诱导赘生性细胞的终末分化和/或诱导肿瘤中肺瘤细胞分化的、含有HDAC抑制剂的组合物，所述HDAC抑制剂是1)异羟將酸衍生物；2)短链脂肪酸(SCFAs);3)环状四肽；4)苯酰胺类；5)亲电子的酮类；和/或任何其它种类的能够抑制组蛋白脱乙酰基酶的化合物。这种HDAC抑制剂的实例包括，但不限于A.异羟肟酸书f生物，例如辛二酰苯胺异羟坊酸(SAHA)(Richon等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA95,3003-3007(1998));间羧基肉桂酸双羟基酰胺(bishydroxamide)(CBHA)(Richon等人，supra);N-羟基-N'隱3-吡啶基辛二酰胺(pyroxamide);曲古抑菌素类似物如曲古抑菌素A(TSA)和曲古抑菌素C(Koghe等人.1998.Biochem.Pharmacol.56:1359-1364);7K^/基异羟將酉交(salicylihydroxamicacid)(SBHA)(Andrews等人，InternationalJ.Parasitology30,761-768(2000));辛二酰双异羟將酸(SBHA)(U.S.PatentNo.5,608,108);壬二酰乂又异羟將酸(azelaicbishydroxamicacid)(ABHA)(Andrews等人，见上文)；壬二酰-l-异羟肟酸酉旨隱9-苯胺(azelaic隱l-hydroxamate-9-amlide)(AAHA)(Qm等人，Mol.Biol.Cell11,2069-2083(2000》;6-(3-氯苯基脲基)己二酰异羟肟酸(6-(3-chlorophenylureido)carpoichydroxamicacid)(3C1-UCHA);oxamflatin[(2E)-5-[3-[(苯基磺酰基)氨基]苯基]-戊-2-烯-4-炔基异羟肟酸](oxamflatin[(2E)-5-[3隱[(phenylsufonyl)aminolphenyl]-pent-2-en-4-ynohydroxamicacid])(Kim等人，Oncogene,18:24612470(1999》;A-161906,Scriptaid(Su等人2000CancerResearch,60:3137-3142);PXD-101(Prolifix);LAQ-824;CHAP;MW2796(Andrews等人，见上文);MW2996(Andrews等人，见上文)；或者在US专利号5,369,108,5,932，616:5,700，811,6,087,367和6,511,990中所乂>开的任4可异羟肟酸。B.环状四肽例如trapoxmA(TPX)-环状四肽(环(L-苯丙氨酰基-L-苯丙氨酰基-D-曱基哌啶基-L-2-氨基-8-氧代-9,10-环氧癸酰基))(Kijima等人,JBiol.Chem.268,22429-22435(1993》;FR901228(FK228,酯肽(depsip印tide))(Nakajima等人,Ex.CellRes.241,126-133(1998》;FR225497环状四肽(H.Mori等人，PCT申请WO00/08048(2000年2月17日))；apicidm环状四肽[环(N-O-曱基-L-色氨酰基L-异亮氨酰基-D陽甲基哌啶基-L-2-氨基-8-氧代癸酰基)](Darkm-Rattmy等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA93,1314313147(1996));apicidmIa，apicidmlb,apicidmIc,apicidmIIa和apicidmlib(P.Dulski等人，PCT申请WO97/11366);CHAP,HC-毒素环状四肽(Bosch等人，PlantCell7,1941-1950(1995));WF27082环状四肽(PCT申请WO98/48825);以及chlamydocm(Bosch等人，上文)。C.短链脂肪酸(SCFA)衍生物，例如:丁酸钠(Cousens等人，J.Biol.Chem.254,1716-1723(]979));异戊酸盐(McBam等人，Biochem.Pharm.53:1357-1368(1997));戊酸盐(McBam等人，见上文)；4-苯基丁酸盐(4-PBA)(Lea和Tulsyan,AnticancerResearch,15,879-873(1995》;苯基丁酸盐(PB)(Wang等人，CancerResearch,59,2766-2799(1999));丙酸盐(McBain等人，见上文)；丁酰胺(Lea和Tulsyan,见上文)；异丁酰胺(Lea和Tulsyan，见上文)；苯乙酸盐(Lea和Tulsyan，见上文)；3-溴丙酸盐(Lea和Tulsyan,见上文)；三丁酸甘油酯(Guan等人，CancerResearch,60,749-755(2000));丙戊酸和丙戊酸盐。D.苯曱酰胺书t生物,例如CI-994;MS-27-275[N-(2-氨基苯基)-4隱[N-(吡啶-3-基甲氧基羰基)氨基曱基]苯曱酰胺](Saito等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA96,4592-4597(1999));以及MS-27-275的3'-氨基衍生物(Saito等人，见上文)。E.亲电子性的酮书f生物，例如三氟甲基酮类(Frey等人，Bioorgamc&Med.Chem.Lett.(2002),12,3443-3447;U.S.6,511,990)和a-酮酰胺，例如N-曱基-oc-酮酰胺类。F.其它HDAC抑制剂,例如depudecm(Kwon等人，1998.PNAS95:3356-3361。在一个实施方案中，异羟肟酸型HDAC抑制剂是辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)，间-羧基肉桂酸双异羟肟酸酯(SAHA)和N-羟基-N'-3-吡啶基辛二酰胺。已经表明，SAHA在组蛋白脱乙酰基酶酶的催化嚢(catalyticpocket)中直接结合。SAHA诱导培养的转化细胞的细胞周期停滞、分化和/或凋亡并且抑制啮齿类动物的肿瘤生长。SAHA在实性肿瘤和血液癌症中均可有效诱导这些效应。已经表明，SAHA可有效抑制动物的肺瘤生长，对动物没有毒性。肺瘤生长的SAHA诱导的抑制与乙酰化组蛋白在该肿瘤中的积聚有关。SAHA可有效抑制大鼠的致癌原诱发的(N-曱基亚硝基脲)乳房肿瘤的发生和继续生长。在研究的130天期间，SAHA通过饮食给药于大鼠。因此，SAHA是无毒的、口服活性抗肿瘤药物，其作用机理牵涉组蛋白脱乙酰基酶活性的抑制。在其它实施方案中，HDAC抑制剂是在美国专利号5,369,108,5,932，616,5,700,811,6,087,367和6,511，990中公开的那些。联合治疗本发明的方法还可以包括首先将抗肿瘤药物给药于患者，以使得患者中的赘生性细胞耐抗肿瘤药，随后给药有效量的任何本发明组合物，以有效选一奪性诱导这些细胞的终末分化、细胞生长停滞和/或凋亡。该抗肺瘤药物可以是众多化疗剂之一，例如烷基化剂，抗代谢物，激素药，抗生素，-火水仙石成，长春花生物石成类(vmcaalkaloid)，左^走天冬酰胺酶，普鲁千肼，羟基脲，米托坦，亚硝基脲或咪唑曱酰胺。适合的药物是促进微管蛋白去极化的那些药物。在一个实施方案中，该抗肺瘤药物是秋水仙碱或长春花生物碱类；长春花碱或长春新碱。在抗肿瘤药是长春新44的实施方案中，优选处理所述细月包，使得它们耐约5mg/ml浓度的长春新碱。处理所述细胞以使得它们耐抗肺瘤药的方法可以通过让所述细胞与所述药物4妻触至少3-5天的时间来完成。所述细胞与以上任何化合物的接触如前所述进行。除以上化疗剂之外，还可以与放射疗法一起给药所述化合物。烷基化剂与亲核性残基(例如，在用于产生DNA的核苷酸前体上的化学实体)起反应。它们通过将这些核苷酸烷基化并且阻止它们组装为DNA来影响细胞分裂的过程。烷基化剂的实例包括，但不限于，双氯乙胺类(氮芥类，例如，苯丁酸氮芥，环磷酰胺，异环磷酰胺，二氯曱二乙胺，苯丙氨酸氮芥，尿嘧啶氮芥)，氮杂环丙烷(例如，硫替派)，烷基酮磺酸盐(例如，白消安)，亚硝基脲(例如，亚硝脲氮芥，环己亚硝脲，链脲霉素)，非经典烷基化剂(六曱蜜胺，氮烯唑胺和普鲁千肼)，顧化合物(卡柏和顺铂。这些化合物与磷酸基、氨基、羟基、巯基、羧基和咪唑基起反应。在生理条件下，这些药物电离并产生阳离子，附着于易受影响的核酸和蛋白质，导致细胞周期停滞和/或细胞死亡。烷基化剂是细胞周期非特异性药物，因为它们与细胞周期的特定期无关地发挥它们的活性。氮芥类和烷基酮磺酸盐对Gl或M期的细胞最有效。亚硝基脲、氮芥类和氮杂环丙烷类阻碍从Gl和S期进展到M期。Chabner和Collmseds.(1990)"CancerChemotherapy:PrinciplesandPractice",Philadelphia:JBLippincott。烷基化剂对大多数的肿瘤病具有活性，其中在白血病和淋巴瘤以及实性肺瘤的治疗中具有显著的活性。临床上，该组药物通常用于治疗急性和慢性白血病；霍奇金病；非霍奇金淋巴瘤；多发性骨髓瘤；原发性脑肿瘤；乳房、卵巢、睾丸、肺、膀胱、宫颈、头和颈部癌症以及黑素肉瘤。所有烷基化剂共有的主要毒性是骨髓抑制。另外，通常发生不同严重程度的维持不利作用以及各种器官毒性与特定化合物有关。Black和Livingston(1990)Drugs39:489-501和39:652-673。戎(f起作用，并且在整个细胞周期都是有效的:抗生素药::实例包括蒽环霉素类(例如，亚德利亚霉素，道诺红菌素，表柔比星，伊达比星和蒽二酮)，丝裂霉素C,博来霉素，放线菌素，普卡托米星(plicatomycm)。常认为蒽环霉素类干涉转录活性DNA区中的DNA局部异构酶II的作用，这导致DNA链分裂。博来霉素通常被被认为螯合铁并形成活化络合物，该活化络合物然后与DNA的碱基结合，引起链分裂和细胞死亡。抗生素药物已经用作许多肿瘤病的治疗剂，包括乳房、肺、胃和甲状腺的癌症，淋巴瘤，粒细胞性白血病，骨髓瘤和肉瘤。在该组中的蒽环霉素类的主要的毒性是骨髓抑制，尤其粒性白细胞减少。粘膜炎常常伴随粒性白细胞减少，并且严重度与骨髓抑制的程度相关。还有与高剂量蒽环霉素类给药有关的显著的心脏毒性。我W絲抗代谢药是一组干涉癌细胞生理和增殖所不可缺少的的代谢过程的药物。活跃增殖的癌细胞需要连续合成大量核酸，蛋白质，类脂以及其它重要的细胞成分。许多抗代谢药抑制噤呤或嘧啶核苷的合成或抑制DNA复制的酶类。一些抗代谢药也干涉核糖核苷和RNA的合成和/或氨基酸代谢和蛋白质合成。通过干预重要细月包成分的合成，抗代/谢药可以延迟或阻止癌细胞生长。抗代谢药的实例包括，但不限于，氟尿嘧啶(5-FU),5-氟脱氧尿苷(5-FUdR),氨甲喋呤，甲酰四氢叶酸，羟基脲，6-硫鸟噤呤(6-TG)，巯基噪呤(6-MP),阿糖胞苷，喷司他丁，磷酸氟达拉滨，克拉屈滨(2-CDA)，天冬酰胺酶和吉西他滨。抗代谢药已经广泛用于治疗几种普通形式的癌症，包括结肠、直肠、乳房、肝脏、胃和胰腺的癌症，恶性黑色素瘤，急性和慢性白血病和毛细胞白血病。不抗代谢药治疗的许多有害效应产生于有丝分裂活性组织如骨髓或胃肠粘膜的细胞增殖的抑制。用这些药物治疗的患者通常存在骨髓抑制、口腔炎、腹泻和脱发。Chen和Grem(1992)Curr.Opm.Oncol.4:1089-1098。激素药是一组调节靶器官生长发育的药物。大多数激素药是性甾族化合物和它们的衍生物和同型物，例如雌性激素类，孕激素类，抗雌性激素药物，雄性激素，抗雄性激素药物和黄体酮。这些激素药物可以用作性类固醇的受体的拮抗剂，以下调受体表达和关键基因(vitalgenes)的转录。这种激素药的实例是合成雌激素(例如，已烯雌酚)，抗雌激素药(例如，三苯氧胺，托瑞米芬，氟甲睾酮(fluoxymesterol)和雷洛昔芬)，抗雄激素(比卡鲁胺，尼鲁米特，氟他胺)，芳香酶抑制剂(例如，氨鲁米特，阿那曲唑和四唑)，促黄体生成素释放激素(LHRH)类似物，酮康唑，醋酸戈舍瑞林，亮丙立德，曱地孕酮和米非司酮。激素药用来治疗乳腺癌、前列腺癌、黑色素瘤和脑膜瘤。因为激素的主要作用是通过类固醇受体来介导，60%受体阳性乳腺癌对一线激素治疗有反应；低于10%的受体阴性肿瘤有反应。与激素药相关的主要副作用是爆发。常见临床表现是骨骼疼痛突然加剧、皮肤损害周围红斑和诱发的高钙血症。具体地说，孕激素类用来治疗子宫内膜的癌症，因为这些癌症发生在暴露于不受孕激素类对抗的高水平雌激素的女性。抗雄激素药物主要用于治疗激素依赖性的前列腺癌症。它们用来降低睾酮水平，从而抑制肺瘤生长。乳腺癌的激素治疗包括降低胂瘤乳房细胞中雌激素受体的雌激素依赖性活化的水平。抗雌激素药物通过与雌激素受体结合来起作用并且阻止激活剂的募集，因此抑制雌激素信号。LHRH类似物用于治疗前列腺的癌症，以降^氐睾酮的水平和因此降低胂瘤的生长。芳香酶抑制剂通过抑制激素合成所需的酶来起作用。在绝经后女性中，雌激素的主要来源是通过芳香酶转化雄烯二酮。潜參^源的秀參植物来源的药物是一组来源于植物或者根据药物的分子结构改性的药物。它们通过阻止细胞分裂所必需的细胞成分的组装而抑制细胞复制。植物来源的药物的实例包括长春花生物碱类(例如，长春新碱，长春花碱，去乙酰长春酰胺，长春利定和长春瑞滨)，鬼臼霉素(例如，表鬼臼毒素吡喃葡糖苷(VP-16)和表鬼臼毒噻吩糖苷(VM-26)),紫杉烷类(例如，紫杉醇和多西他赛)。这些植物来源的药物通常用作与微管蛋白结合并且抑制有丝分裂的抗有丝分裂剂。鬼臼霉素比如表鬼臼毒素吡喃葡糖苷寻皮认为通过与局部异构酶II相互作用而干涉DNA合成，导致DNA《连分裂。植物来源的药物用于治疗许多形式的癌症。例如，长春新碱用于治疗白血病、霍奇金和非霍奇金淋巴瘤以及儿童期肿瘤神经母细胞瘤、横紋肌肉瘤和维耳姆斯瘤。长春花碱用于治疗淋巴瘤、睾丸癌症、肾细胞癌、蕈样肉芽肺病和卡波济氏肉瘤。多西他赛显示了有前景的抗晚期乳腺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)和卵巢癌的活性。表鬼臼毒素吡喃葡糖苷具有抗各种肿瘤的活性，其中小细胞肺癌、睾丸癌和NSCLC是反应性最高的。植物来源的药物对所治疗的病人产生显著的副作用。长春花生物碱类显示不同的临床毒性镨。长春花生物碱类的副作用包括神经毒性，改变血小板功能，骨髓抑制和白血球减少。紫杉醇引起剂量限制的中性粒细胞减少与其它造血细胞系的相对贫乏。表鬼臼毒素的主要毒性是血液毒性(中性粒细胞减少和血小板减少)。对其它副作用包括一过性肝脏酶异常、脱发、过敏性反应和周围神经病。生物制剂是一组在单独使用或者与化疗和/或放疗结合时引起癌症/肺瘤退化的生物分子。生物制剂的实例包括免疫调节蛋白质比如细胞因子，抗肿瘤抗原的单克隆抗体，肿瘤抑制基因和癌症疫苗。细胞因子具有深厚的免疫调节活性。一些细胞因子如白介素-2(IL-2阿地白介素)和干扰素-oc.(IFN-a)显示了抗肿瘤活性，并且已经被批准用于治疗转移性肾细胞癌和转移性恶性黑色素瘤的患者的治疗。IL-2是属于T细胞介导的免疫应答的中心的T细胞生长因子。IL-2对一些患者的选择性抗肺瘤效应据认为是在自我与非我之间区分的细胞介导免疫反应的结果。干扰素-a包括具有重叠活性的23个以上的相关亚型。IFN-oc显示了抗许多实性和血液恶性肺瘤的活性，其中血液恶性胂瘤似乎是特别每丈感的。干扰素的实例包括干扰素-a、干扰素-P(纤维母细胞干扰素)和干扰素-Y(纤维母细胞干扰素)。其它细胞因子的实例包括红细胞生成素(衣泊汀(epoietm)-a)、粒细胞-CSF(非格司亭)和粒细胞、巨噬细胞-CSF(沙格司亭)。除了细胞因子以外的其它免疫调节剂包括卡介苗、左旋四咪唑和奥曲肽，模拟天然存在的激素生长激素释放抑制激素效应的长效八肽。此外，抗癌治疗可以包括采用抗体和用于肺瘤疫苗接种方法的试剂的免疫疗法。用于该类治疗的主要药物是单独的抗体，或者将例如毒素或化疗药/细胞毒素运送至癌细胞的抗体。抗肺瘤抗原的单克隆抗体是针对由肿瘤表达的抗原，优选肺瘤特异抗原所产生的抗体。例如，产生针对在包括转移性乳腺癌在内的一些乳腺肺瘤中过表达的人表皮生长因子受体2(HER2)的单克隆抗体HERCEPTIN(曲妥单抗)。HER2的过量表达在临床上与疾病的4曼袭性更高和预后更差相关联。HERCEPTIN用作治疗患有肿瘤过量表达HER2蛋白的转移性乳腺癌的病人的单一药剂。抗肺瘤抗原的单克隆抗体的另一个实例是针对淋巴细胞上的CD20产生并且选择性4非除正常和恶性CD20+前B和成熟B细月包的RITUXAN(利妥昔单抗)。RITUXAN用作治疗患有复发或难控制的低级或滤泡性的CD20+B细胞非霍奇金淋巴瘤的病人的单一药剂。MYELOTARG(吉姆单抗奥佐米星)和CAMPATH(阿仑单抗)是可以-使用的抗肿瘤抗原的其它单克隆抗体实例。肿瘤抑制基因是具有抑制细胞生长和分裂周期的功能，因此防止肿瘤发生的基因。肿瘤抑制基因的突变使该细胞忽略抑制信号网络的一个或多个组分，克服细胞周期关卡和导致更高速率的细胞生长受控的癌症。肿瘤抑制基因的实例包括Duc-4,NF-1,NF-2,RB,p53,WT1,BRCAl和BRCA2。DPC4与胰腺癌有关，参与抑制细胞分裂的胞浆途径。NF-1编码抑制Ras的蛋白-一种胞浆抑制蛋白。NF-1与神经系统的纤维神经瘤和嗜铬细胞瘤和粒细胞性白血病有关。NF-2编码牵涉神经系统的脑膜瘤、神经鞘瘤和室管膜瘤的核内蛋白RB编码pRB蛋白-一种作为细胞周期的主要抑制剂的核内蛋白。RB涉及到视网膜母细胞瘤以及骨癌、膀胱癌、小细胞肺癌和乳腺癌。P53编码调节细l包分裂和可以诱导凋亡的p53蛋白。p53的突变和/或无作用在许多癌症中被发现。WTI涉及到肾的肾母细胞瘤。BRCAl涉及到乳房和卵巢癌症，BRCA2涉及到乳腺癌。肿瘤抑制基因可以转移到肿瘤细胞中，在那里发挥它的肿瘤抑制功能。癌症疫苗是一组诱导人体对肿瘤的特异性免疫应答的药剂。正在研究与开发和临床试验的大多数癌症疫苗是肿瘤相关的抗原(TAAs)。TAAs是存在于肿瘤细胞上并且在标准细胞上相对缺乏或者减少的结构(即蛋白质，酶或碳水化合物)。由于TAAs是肿瘤细胞所特有的，它为免疫系统提供了耙的，以识别和引起它们的破坏。TAAs的实例包括神经节糖苷(GM2)、前列腺特异性抗原(PSA)、a-胎儿球蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)(由结肠癌和其它腺癌如乳腺癌、肺癌、胃癌和胰腺癌所产生)、黑色素瘤相关抗原(MART-1，gaplOO,MAGE1,3酪氨酸酶)、乳头状瘤病毒E6和E7片段、自体肺瘤细胞和异源性肿瘤细胞的整个细胞或一部分/溶解产物。除了用于治疗癌症的传统的细胞毒和激素治疗以外，最新发展已经引入了治疗癌症的其它治疗手段。例如，许多形式的基因治疗正在进行临床前试—睑或临床试验。另外，以抑制肿瘤血管形成(血管生成)为基础的方法正在发展中。该原理的目的是切断由新建肺瘤血管系统所提供给肺瘤的营养和氧供应。另外，还尝试了通过诱导赘生性细胞的终末分化来治疗肿瘤。适合的分化剂包括在以下任何一篇或多篇参考文献中公开的化合物。a)极性化合物(Marks等人(1987);Friend,C.,Scher,W.,Holland,J.W.和Sato,T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68:378-382;Tanaka,M.,Levy,J.,Terada，M.,Breslow,R.,Rifkmd,R.A.和Marks,P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)72:1003-1006;Reuben,R.C.,Wife,R.L.,Breslow,R.,Rifkmd,R.A.和Marks,P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)73:862-866);b)维生素D和一见黄酸的书f生物(Abe,E.,Miyaura,C.,Sakagami,H.,Takeda,M.,Ko画，K.,Yamazaki,T.,Yoshika,S.和Suda,T.(1981)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)78:4990-4994;Schwartz,E.L.,Snoddy,J.R.，Kreutter,D.,Rasmussen,H.和Sartorelli,A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.CancerRes.24:18;Tanenaga,K.，Hoz腿i，M.和Sakagami,Y.(1980)CancerRes.40:914-919);c)甾体激素(Lotem,丄和Sachs,L.(1975)Int.J.Cancer15:731-740);d)生长因子(Sachs,L.(1978)Nature(Lond.)274:535,Metcalf,D.(1985)Science,229:16-22);e)蛋白酶类(Scher,W.,Scher,B.M.和Waxman,S.(1983)Exp.Hematol.11:490-498;Scher,W.,Scher，B.M.和Waxman,S.(1982)Biochem.&Biophys.Res.Comm.109:348-354);f)肺瘤促进剂(Huberman,E.和Callaham,M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76:1293-1297;Lottem,J.和Sachs,L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76:5158-5162);以及g)DNA或RNA合成的抑制剂(Schwartz,E.L.和Sartorelli,A.C.(1982)CancerRes.42:2651-2655,Terada,M.,Epner,E.,Nudel,U.,Salmon,丄，Fibach,E.,Rifkind,R.A.和Marks,P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)75:2795-2799;Morm,M.J.和Sartorelli,A.C.(1984)CancerRes.44:2807-2812;Schwartz,E.L.,Brown,B.J.,N認nberg,M.,Marsh,J.C.和Sartorelli,A.C,(1983)CancerRes.43:2725-2730;Sugano,H.,Furusawa,M.,Kawaguchi,T.和Ikawa,Y.(1973)Bibl.Hematol.39:943-954;Ebert,P.S.,Wars,I.和Buell，D.N.(1976)CancerRes.36:1809-1813;Hayashi,M.,Okabe,J.和Hozumi,M.(1979)Gann70:235-238)。本发明的药物组合物和任何上述抗癌药物的组合以及它们的用途均在本发明的范围内。用以下实验细节部分的实施例来说明本发明。该部分用于帮助理解本发明，但意图不是、也不应当被认为限制由后面的权利要求来限定的本发明。实一睑细节部分实施例1I型SAHA的制备步骤1S-苯胺基-8-氧代辛酸；辛酰苯胺酸(化合物3)将辛二酸(化合物1,174.2g,l.Omol)、苯胺(化合物2，85.8-94.9g)和甲笨(O.l-0.21^)混合，加热至回流并且回流至少60小时。通过用10%氳氧化钠溶液调节pH至211将反应在回流下猝灭。分离水相。该有枳j层与甲苯(O.ll-0.13L)和水(0.3-0.4L)合并，并且分离水层。将萃取获得的水层与甲苯(O.ll-0.13L)合并，沉降，然后分离。含水层用甲苯(0.2-0.3L)在60-70。C下萃取两次。才艮据需要使用盐酸和10%氢氧化钠溶液，在20-3(TC下将含水层调至5.8-6.2的pH。将该批料过滤，用冷却水(0.2-0.3L)洗涤，然后用冷却异丙醇洗涤。将湿饼在真空下在最高65。C下干燥，获得辛酰苯胺酸。步骤28-苯胺基-8-氧代辛酸甲酯；辛酰苯胺酸曱酯(化合物4)将辛酰苯胺酸(化合物3,249.3g,1.0mol)和甲醇(0.4-0.5L)合并，加热至45-55。C。使用盐酸将pH调节至S2，并且将批料温度保持在45-55。C,直到反应完成。该反应用去离子水(0.1-0.2L)猝灭。将该批料冷却至25-3CTC,并且接种，以诱导结晶，然后冷却至0-l(TC。将该批料过滤，滤饼用50:50(v/v)曱醇/水溶液(0.28-0.34L)在0-10。C下洗涤，将湿饼在真空下在至多46。C下干燥，获得辛酰苯胺酸甲酯。步骤3,羟基-〃-苯基辛二酰胺；伏林司他〖化合物5)将辛酰苯胺酸甲酯(化合物4,2.3g,1.0mol)和2M羟胺游离碱溶液(0.8-1.0L)合并。在将批料保持在最高2(TC的同时，根据需要用溶于甲醇的甲醇钠将表观pH调节至210.5。在用溶于甲醇的甲醇钠将批料保持在最高20。C和表观pH210.5的同时，将该批料老化。在老化期间，添加羟胺游离碱溶液(0.5-0.6L),将该批料保持在最高20。C和表观pH210.5，直到反应完成为止。该反应通过将该批料加入到水(0.9-1.1L)中并且同时保持批料温度在20-35。C来猝灭，再将该批料的水含量调至35-45%。根据需要使用水醋酸和碳酸钠将pH调节至8.8-9.2。用5-10小时将该批料冷却至0-10。C。将该批料过滤，滤饼用55:45(v/v)甲醇/水(0.45-0.6L)在0-10。C下洗涤。湿饼真空调节，直到水含量^35%为止。将伏林司他粗产物(264.32g,1.0mole)湿饼与变性乙醇(1308-1599g)和水(167-204g)合并。将羟胺盐酸盐(〉9mEquiv)和溶于曱醇的甲醇钠(>9mEqmv)加入到该浆料中，并且将该批料加热至70-80°C。将该溶液过滤，然后通过i爰慢冷却至O-l(TC来结晶。将该批料过滤，滤饼用冷4:1(v/v)变性乙醇/水洗涤。将该湿饼在真空下在最高45"C下干燥。步骤4,羟基-V-苯基辛二酰胺-精细伏林司他(湿法研磨U化合物6)将伏林司他(化合物5,264.3g,1.0mol)在50:50(v/v)乙醇/水溶液(最少2.8L)中制成浆料。在保持批料温度在7-30。C的同时，将伏林司他浆料湿法研磨至25-45pm的平均粒度。将最终浆料过滤，湿饼用0—4(TC水(最少0.8L)洗涤。湿饼在真空下在最高55。C下干燥至0.2%(w/w)的最高水含量，获得精细伏林司他药物原料。步骤5W-羟基-A^-苯基辛二酰胺-粗粒伏林司他(化合物7)将伏林司他(化合物5,264.3g,1.0mol)在50:50(v/v)乙醇/水溶液(4.9-5.5L)中制成浆料。在最低15psig的压力下，将该浆料加热至65-70。C以溶解，然后冷却至60-64。C。在保持批料温度的同时，将种子浆料转移到批料中。将该批料在61-63。C下老化最低2小时。通过将夹套温度(l)以0.35-0.78。C/小时的速度控制至55°C,(2)以0.83-2.0(TC/小时的速度控制至45。C以及(3)以2.00-4.44。C/小时的速度控制至-5到25。C将该批料分三个步骤冷却。将最终浆料在-5到25。C下老化大约1小时，然后过滤。湿饼用水(最少0.8L)洗涤。将湿饼在真空下在最高55i:下干燥，获得粗粒伏林司他药物原料。通过将精细伏林司他干燥饼状物(97.8-116.3g,0.37-0.44mol)和50:50(v/v)乙醇/水溶液(1.0-1.2L)合并来制备种子浆料。在最低15psig的压力下，将种子浆料加热至62-66°C,老化大约0.5小时，然后冷却到60-64°C。实施例2SAHA晶体的4分末掺混粉末掺混将30%的精细伏林司他晶体与70%粗粒伏林司他晶体掺混。首先用30目筛子(600jum)筛分25.0Kg的掺混SAHA多形晶I晶体。然后将所得SAHA、11.1Kg的微晶纤维素(AvicelPH-101)和1.13Kg的交联羧甲基纤维素钠加入到141.6LV形搅拌器(V-blender)、113LTote搅拌器或其它类似尺寸和类型的搅拌器中。对于V形搅拌器，在大约25rpm下用大约8分钟将所得物料混合至均匀。对于Tote搅拌器，在大约12rpm下用大约17分钟将所得物料混合至均匀。粉末掺混物润滑用30目筛(600jum)筛分293.0g的硬脂酸镁(植物药用级)，与掺混的粉末混合物装入到V-搅拌器内。在大约25rpm下用大约8分钟将所得混合物混合至均匀。还用60目筛(250jum)筛分293.0g的硬脂酸镁(植物药用级)，与掺混的粉末混合物一起装入到tote搅拌器内。在大约12rpm下用大约17分钟将所得混合物混合至均匀。表1总结了胶嚢中原料的物理性能。表l:原料的物理和化学性能。<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>实施例3SAHA胶嚢的包嚢包嚢/重量分选使用H&K制胶嚢机(encapsulator)、抛光的填塞销或氮化铬涂层的填塞销和"3"号胶嚢，将添加润滑剂的粉末混合物包胶嚢，达到所需的胶嚢重量。填充的胶嚢使用胶嚢磨光机抛光，随后使用重量分选器进行重量分选，达到适当的重量限度范围。表2总结了包胶嚢机的参数。表2.制胶嚢机操作参数的总结<table>tableseeoriginaldocumentpage36</column></row><table>最终SAHA月交嚢组成在表3中示出。使用±10%目标月交嚢重量的胶嚢重量差异作为验收极限来对胶嚢进行重量分选。典型批料中的胶囊重量差异是目标胶嚢重量的±4%。表3:SAHA力交嚢组成<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>*市售胶嚢涂料制剂(capsulemkformulation)是ColorconS-l-17762。无TSE的明月交月交嚢。**总重量不包括硬明胶胶嚢壳。实施例4含SAHA的力交嚢的溶解速率的测定使用USP溶解装置II(VK7000,VarianInc.,Cary，NC)评价SAHA从硬明胶胶嚢中的溶解速率。将每一胶嚢放入到螺旋沉降片(helicalsmker)(QualityLabAccessoriesL.L.C.,Manville,NJ)中，并丰俞送到在37土0.5。C的温度下含有900mL的2.0%Tween(TCIAmerica,Portland,Oregon)的容器内。桨叶以100rpm旋转，经由装备35全流式滤清器(VarianInc.,Cary,NC)的自动取样器(VK8000,VananInc.,Cary，NC)按照规定的时间间隔抽出样品。随后，通过高效液相色i普法(Agilent1100series,AgilentTechnologiesInc.,Wilmington,DE)分析样品的SAHA。色语分析使用PhenomenexLunaC8(2)(100x4.6mm)5pm粒度柱、1:1曱醇/0.1%三氟乙酸(试剂级，Fisher)的流动相和242nm的才全测波长进4亍。实施例5SAHA的X射线粉末衍射分析对根据实施例1获得的I型SAHA和通过下表4所述方法制备的II-V型SAHA进行X射线粉末书f射分析。表4:用X射线粉末f;f射法分析的SAHA样品<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>X射线衍射分析用西门子D500自动粉末衍射仪(仪器IDNo.LD-301-4)分析样品，按照制造商的说明书的标准操作程序EQ-27,Rev.12操作。该衍射仪装备石墨单色仪和在50kV,40mA下操作的Cu(X=1.54A)X射线源。2-6校准使用NBS云母标准(SRM675)进行。使用下列仪器参数分析样品。测量范围4-4026步长0.05A每步的测定时间1.2秒根据制造商的说明书，使用O背景样品板(#1),按照标准操作程序MIC-7,Rev.2(部分3.1.2)进行样品制备。样品用轻型研钵和扦棒研磨。图3A-E示出了I-V型SAHA的X射线衍射图。X射线衍射图的相应数据在以下表5-9中提供表5:I型SAHA<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>表6:II型SAHA<table>tableseeoriginaldocumentpage40</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>还使用X，PERTProPhillipsX射线衍射仪用铜Kot射线(波长1.542A)采集I型SAHA的X射线粉末衍射图。显著的2e位置与d间距一起在表5A中总结。表5AI型SAHA<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>实施例6铁SAHA金属螯合物的制备化学反应路线推荐的结构实验在环境温度下，将SAHA(1.0g，3.78mmol)和乙醇(10.0mL)加入到爱伦美氏锥形烧瓶(erlenmyerflask)内，然后在搅拌下滴加N,N-二异丙基乙胺(0.66mL，3.78mmo1)。往所形成的淤浆中添加氯化铁在乙醇(0.205g,1.26mmol溶于10.0mL乙醇)中的溶液。在添加氯化4失溶液时，该混合物立即呈现深红色。使用乙醇(5.0mL)将剩余氯化铁溶液清洗于反应烧瓶内。在环境温度下搅拌5分钟后，反应混合物变成透明的暗红色溶液。将该反应混合物在环境温度下搅拌16小时。在此之后，观察到暗橙色沉淀。通过过滤收集橙色固体，用乙醇(3x3.0mL)清洗。该滤液是无色的。将该橙色固体干燥24小时(质量1.02g,96%产率)。分析以下在表10中提供了C、H、N和Fe含量的元素分析表10:元素分析<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>元素分析的结果与以上推荐的结构高度一致。实施例7铁SAHA螯合物的X射线粉末衍射分析用具有PW3040/60托架的PhilipsAnalyticalX，PertPROX射线衍射系统产生结晶铁SAHA螯合物的X射线粉末衍射图(图2)。使用PW3373/00陶瓷CuLEFX射线管K-oc射线作为射线源。结晶铁SAHA螯合物可以在8.8、14.5和21.8度(20)下表征。结晶铁SAHA螯合物进一步用在13.3、20.3和24.6度(2e)下的峰来表征。在18.5、25.8和33.3度(20)下观察到了归属于该螯合物的其它峰。实施例8患者研究患癌症的病人给药包括金属HDAC抑制剂螯合物的药物组合物，或者HDAC抑制剂和可螫合的金属化合物的药物组合物。记录病人的不良感受，并且与给药HDAC抑制剂的病人的不良感受比4支。患有皮肤T细胞淋巴瘤或外周T细胞淋巴瘤的病人每日一次连续给药该药物组合物，其中SAHA给药量是400mg。患有皮肤T细胞'淋巴瘤或外罩T细胞淋巴瘤的病人每日两次、每周3-5天给药该药物组合物，其中每次剂量的SAHA给药量是300mg。患有晚期白血病和骨髓增生异常综合症(myelodysplaticsyndrome)(MDS)的病人连续14天每天三次口服(po)给药该药物组合物，随后停歇一周，总共三周疗程，其牛每一剂量的SAHA给药量时100mg、150mg、200mg或250mg。患有癌症的病人共同给药HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物。记录病人的不良感受，并且与仅仅给药HDAC抑制剂的病人的不良感受比较。患有皮肤T细胞淋巴瘤或外周T细胞淋巴瘤的病人共同口服给药SAHA和铁或锌补充剂，其中SAHA400mg每日一次连续》合药或者300mg每日两次、每周3-5天给药，而铁或锌补充剂每日给药。患有晚期白血病和骨髓增生异常综合症(MDS)的病人连续14天、每天三次(tid)口服(po)给药lOOmg、150mg、200mg或250mgSAHA，随后停歇一周，并且每日给药铁或锌补充剂，总共三周疗程。患有包括血液系统癌症和实性胂瘤在内的晚期癌症的病人每天一次每日口月1》合药400或500mgSAHA,或者每天两次每日口服给药200或300mgSAHA，或者每天两次、一周三天断续口服给药300或400mgSAHA,或者每天三次口服给药100mgSAHA(2周)，并且每日给药《失或锌补充剂。患有弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)或间皮瘤的病人口服给药SAHA(每天两次，一周三天)和铁或锌补充剂(每日给药)。锌或铁的给药量预计在各个患者之间不同，并且应该是减轻HDAC抑制剂诱发的毒性而不引起金属超负载介导的毒性的量。实施例9补充锌对伏林司他引起的副作用的效应为了测试伏林司他在小鼠中的最大耐受量(MTD)是否可以随着补充锌而增加，小鼠(CD1nu/nu雌性，6-8周龄，CharlesRiverLaboratories)给药载体、150mg/kg(MTD)或者300mg/kg在载体中的伏林司他(表11)。还给予小鼠0.5、1或5摩尔当量(相对于伏林司他)的氯化锌。对于150mg/kg伏林司他组，这对应于38.5、77和385mg/kg的ZnCl2剂量。无肿瘤小鼠的初步研究用于建立伏林司他/Zn组合的MTD。如果记录到MTD的变动，使用后续小鼠实验来建立HCT116结肠癌皮下(s.q.)异种移植来评价改变的MTD对肺瘤生长的作用(功效)。表ll.伏林司他MTD和补充锌全部小鼠每日(qd)给药(腹膜内)指定量的化合物14天。<table>tableseeoriginaldocumentpage45</column></row><table>伏林司他(以10ul/g腹腔内给药(doseIP))的载体含有10%v/vDMSO(Sigma,cat#:D8418)、45%v/vPEG-400和45%水。通过称量该化合物(在化合物配制之前将每一载体组分预加温至37°C),添加1/10最终体积的100%DMSO，超声处理，直到形成透明溶液，添加50%PEG-400(溶于水中)至最终所需体积，超声处理并且一直保持在37°C,制备溶于载体中的伏林司他(以10ul/g腹腔内给药)。将ZnCl2溶于无菌磷酸盐緩沖盐水(PBS)。作为毒性指标监视体重和存活率。导致组平均体重减轻超过20%平均值的剂量被认为是不能耐受。同样地，导致每组超过2只小鼠产生治疗相关性死亡的剂量将被认为是不能耐受。对于肿瘤动物，通过每周2-3次用卡规测量来测定对治疗起反应的肿瘤尺寸。表12研究血清采集时间表的结果(EndofStudySerumHarvestSchedule)每一组的前2只小鼠每一组中的最后3只小鼠RO0.5hrPD,CP4hrPDRO2hrPD,CP24hrPD=给药后；RO=眼球后采血；CP=心脏穿刺术(末端)眼球后采血通过在异氟烷麻醉下眼球后采血来采集0.2mL血液。处理血液而获得血清(不添加抗凝血剂)。心脏穿刺术通过在C02麻醉下末端心脏穿刺采集全部量的血液。处理血液而获得血清(不添加抗凝血剂)。全血细胞计数(CBC)伏林司他治疗已经造成包括血小板和淋巴细胞在内的某些血液成分的数目减少。在治疗前(基线)、治疗期间(第7天)和治疗后(第14天)监测小鼠的CBC。通过RO放血子设备获取少量(〈50(il)血液，通过Advia120仪器(SeimensMedical)计数。尸体解剖和组织采集对于肿瘤动物，切除异种移植肿瘤，称重，部分快速冷冻或在缓冲福尔马林中固定。固定的肺瘤材料加工为石蜡包埋的玻片，进行免疫组织化学分析。这些分析包括包括增殖试验(Ki-67,BrdU),凋亡试-险(半胱天冬酶-3)和各种组蛋白(H2，H3，H4)乙酰化试验。使用来自冷冻材料的组蛋白，通过ELISA(酶联免疫吸附试验)来分析组蛋白乙酰化变化。小鼠也进行全面尸体解剖。虽然参考实施方案具体地描述了本发明，但本领域技术人员能够理解，在不偏离所述本发明的情况下可以做出各种形式和细节上的改变。因此，本发明的范围通过权利要求来确定。参考文献1.Sporn,M.B.,Roberts,A.B.和Driscoll,J.S.(1985)mCancer:PrinciplesandPracticeofOncology,eds.Hellman,S.,Rosenberg,S.A.和DeVita,V.T.,Jr.,Ed.2,(丄B.Lippmcott,Philadelphia),第49页。2.Breitman，T.R.,Selomck,S.E.和Collms,S.J.(1980)Proc.Natl.Acad.Sci.USA77:2936-2940。3.Olsson,I.L.和Breitman,T.R.(1982)CancerRes.42:3924-3927。4.Schwartz,E.L.和Sartorelli，A.C.(1982)CancerRes.42:2651-2655。5.Marks,P.A.,Sheffery,M.和Rifkind，R.A.(1987)CancerRes.47:659。6.Sachs,L.(1978)自然(Nature)(Lond.)274:535。7.Friend,C.,Scher,W.,Holland,J.W.和Sato,T.(1971)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)68:378-382。8.Tanaka,M.,Levy,J.,Temda,M.,Breslow,R.,Rifkind,R.A.和Marks,P.A.(1975)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)72:1003-1006。9.Reuben,R.C.,Wife,R.L.,Breslow，R.,Rifkmd,R.A.和Marks,P.A.(1976)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)73:862-866。10.Abe,E.,Miyaura,C.，Sakagami,H.，Takeda，M.,Konno,K.,Yamazaki,T.,Yoshika,S.和Suda,T.(1981)Proc.Natl,Acad,Sci.(USA)78:4990-4994。11.Schwartz,E.L.，Snoddy,J.R.,Kreutter，D.,Rasmussen,H.和Sartorelli,A.C.(1983)Proc.Am.Assoc.CancerRes.24:18。12.Tanenaga,K.,Hozumi,M.和Sakagami,Y.(1980)癌症研究(CancerRes.)40:914-919。13.Lotem,J.和Sachs,L.(1975)Int.J.Cancer15:731-740。14.Metcalf,D.(1985)科学(Science),229:16-22。15.Scher,W.,Scher,B.M.和Waxman,S.(1983)Exp.Hematol.11:490-498。16.Scher,W.,Scher,B.M.和Waxman,S.(1982)Biochem.&Biophys.Res.Comm.109:348-354。17.Huberman，E.和Callaham,M.F.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76:1293-1297。18.Lottem,J.和Sachs,L.(1979)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)76:5158-5162。19.Terada,M.,Epner,E.,Nudel,U.，Salmon,J.,Fibach,E.,Rifkmd,R.A.和Marks,P.A.(1978)Proc.Natl.Acad.Sci.(USA)75:2795-2799。20.Morm,M.J.和Sartorelli,A.C.(1984)CancerRes.44:2807-2812。21.Schwartz,E.L.,Brown,B.J.,Nierenberg,M.,Marsh,J.C.和Sartorelli,A.C.(1983)CancerRes.43:2725-2730。22.Sugano,H.,Furusawa,M.,Kawaguchi,T.和Ikawa,Y.(1973)Bibl.Hematol.39:943-954。23.Ebert,P.S.,Wars，I.和Buell,D.N.(1976)CancerRes.36:1809-1813。24.Hayashi,M.,Okabe,J.和Hozumi,M.(1979)Gann70:235-238。25.Richon,V.M.,Webb,Y.,Merger,R.等人，(1996)PNAS93:5705-8。26.Cohen，L.A.,Amin,S.,Marks,P.A.,Rifkind,R.A.,Desai,D.和Richon,V.M.(1999)抗癌研究(AnticancerResearch)19:4999-5006。27.Grunstein,M.(1997)Nature389:349-52。28.Fmnm,M.S.,Domgian,J.R:,Cohen,A.等人，(1999)Nature401:188-193。29.VanLint,C.,Emiliani,S.,Verdm,E.(1996)Gene.Expression5:245-53。30.Archer,S.Shufen,M.Shei,A.,Hodm,R.(1998)PNAS95:6791-96。31.Dressel,U.,Renkawitz,R.,Baniahmad,A.(2000)AnticancerResearch20(2A):1017-22。32.Parker,Vigoroux,Reed,AIChEJ.(2000)第1290-99页。33.Nunez,Espiell,Chem.Eng.Sci.(1986)第2075-83页。34.O.Levenspiel:化学反应工程(ChemicalReactionEngineering),第2版，第373页。35.M.Vanm:J.ofColloidandInterfaceSci.(2000)第143-160页。36.P.J.Hill和K.M.Ng,AIChEJ.(1995)第1204-1216页。权利要求1.一种药物组合物，其包含治疗有效量的组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)抑制剂和可螯合的金属化合物以及药学上可接受的载体。2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中该可螯合的金属化合物包含铁或锌。3.根据权利要求2所述的药物组合物，其中该HDAC抑制剂是辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)或其药学上可接受的盐或水合物或溶剂化物。4.一种治疗癌症并减轻HDAC抑制剂的副作用的方法，该方法包括将权利要求1的药物组合物给药于患者的步骤。5.—种治疗癌症并减轻HDAC抑制剂的副作用的方法，该方法包括将治疗有效量的HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物共同给药于患者的步骤。6.根据权利要求5所述的方法，其中该可螯合的金属化合物包含铁或锌。7.根据权利要求6所述的方法，其中该HDAC抑制剂是辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)或其药学上可接受的盐或水合物或溶剂化物。8.—种药物组合物，包括治疗有效量的铁SAHA螯合物或其水合物或溶剂化物和药学上可接受的载体。9.根据权利要求8所述的药物组合物，其中铁与SAHA的化学计量比是1:3。10.根据权利要求9所述的药物组合物，其中铁SAHA螯合物是结晶的，并且是用铜Kcx辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在8.8,14.5和21.8度26的特征峰。11.根据权利要求9所述的药物组合物，其中铁螯合物是结晶的，并且是用铜Koc辐射通过X射线粉末衍射图表征，包括在8.8,13.3，14.5，20.3，21.8和24.6度26的特征山奪。12.根据权利要求9所述的药物组合物，其中铁螯合物是结晶的，并且是用铜Koc辐射通过X射线衍射图表征，包括在8.8,13.3,14.5,18.5,20.3，21.8,24.6,25.8和33.3度26的特征峰。13.—种药物组合物，包括治疗有效量的锌SAHA螯合物或其水合物或溶剂化物和药学上可接受的载体。14.一种治疗癌症的方法，该方法包括将治疗有效量的金属HDAC抑制剂螯合物或其水合物或溶剂化物给药于患者的步骤。15.—种获得晶体金属HDAC抑制剂螯合物的方法，该方法包括让螯合物在有机溶剂或有机溶剂与水的混合物中结晶的步骤。16.—种获得金属HDAC抑制剂螯合物的方法，该方法包括在反应介质中添加可螯合的金属化合物和碱以及HDAC抑制剂的步骤。全文摘要本发明提供了HDAC抑制剂和可螯合的金属化合物的药物组合物。在一个实施方案中，本发明提供了通过给药该药物组合物来治疗癌症和减轻HDAC抑制剂的副作用的方法。在另一个实施方案中，本发明还提供了金属HDAC抑制剂螯合物的药物组合物。在另一个实施方案中，本发明提供了通过给药该药物组合物来治疗癌症的方法。本发明提供了金属HDAC抑制剂螯合物的结晶组合物及其制备方法。文档编号A61K31/16GK101528212SQ200780036181公开日2009年9月9日申请日期2007年9月24日优先权日2006年9月28日发明者A·E·麦克奥恩,T·A·米勒申请人:默克公司