专利名称：药物转运控制用经肺给药脂质体的制作方法
技术领域：
本发明涉及 一 种药物或基因的转运控制性优异、适用于经肺给 药的脂质体。进而，本发明涉及一种在该脂质体中封入药物或基因 而形成的脂质体制剂。
背景技术：
脂质体是具有脂质双层结构的封闭小嚢。由于脂质体可以通过 双分子膜将药物或基因以与外界隔开的状态封入，所以能够保护被 封入的药物或基因免于分解或代谢。另外，由于通过控制脂质体膜 的组成可以使其附着于细胞膜或粘膜上，所以能够使被封入的药物 或基因向细胞内转运。脂质体因上述保护功能和转运功能而作为药 物或基因的搬运体(载体)备受关注。通常要求疾病治疗中使用的药物或基因到达靶作用部位，并在 该处发挥所希望的药理作用。为了提高药物及基因在靶作用部位的 转运性，人们尝试利用脂质体。目前为止公开了一种方法，所述方 法为了给脂质体赋予对靶作用部位的选择输送性能，控制构成脂质 的种类或组成比、表面电荷等。但是，现状是上述现有方法无法充 分地控制药物的转运性。特别是适用于肺组织的药物或基因根据其 作用机制的方式有时希望滞留在肺组织的表面(例如支气管肺泡的 表面等)、有时希望将其导入肺组织内部，要求高度控制药物或基 因的生物体内行为。但是，尚未确立控制肺组织内药物或基因的生 物体内4亍为的才支术。另一方面，目前为止报道了将脂质体的表面用聚合物等高分子进行修饰的技术(例如参见非专利文献1及2)。但是，至今仍不十 分清楚通过脂质体的表面修饰控制肺组织内的生物体内行为的技术。非专利文献1: Takeuchi H et al.,"Effectiveness of submicron-sized, chitosan-coated liposomes in oral administration of peptide drugs.", InU Pharm., 2005 Oct 13;303(1 - 2):160 - 170.非专利文献2: Takeuchi H et al./'Evaluation of circulation profiles of liposomes coated with hydrophilic polymers having different molecular weights in rats."， J Control Release., 2001 Jul 10;75(1 - 2):83 - 91.发明内容因此，本发明的目的在于解决上述现有技术中存在的问题。具 体而言，本发明的目的在于提供一种药物或基因的转运控制性优异、 适用于经肺给药的脂质体、及在该脂质体中封入药物或基因的经肺 给药用脂质体制剂。进而，本发明提供一种使用上述脂质体制剂治 疗肺组织疾病的方法。本发明人等为了解决上述课题，进行了深入地研究，发现通过 用末端疏水化聚乙烯醇及/或脱乙酰壳多糖修饰脂质体的表面，可以 适当地调节被封入脂质体内的药物或基因在肺组织表面的滞留性、 或向肺组织或肺表面细胞内的迁移性，从而控制其生物体内4亍为。 本发明是基于上述发现进一步反复改良而完成的。即，本发明提供下述方案的发明项1、 一种经肺给药用脂质体，其特征在于，脂质体的表面被选 自末端疏水化聚乙烯醇及脱乙酰壳多糖中的至少 一 种聚合物修饰。项2、如项1所述的经肺给药用脂质体，其中，含有磷脂作为脂 质体膜的构成脂质。项3、如项1所述的经肺给药用脂质体，其中，含有磷脂酰胆碱、 胆甾醇及磷酸二烷基酯作为脂质体膜的构成脂质。项4、如项1所述的经肺给药用脂质体，其中，所述脂质体是被 末端疏水化聚乙烯醇进行表面修饰而形成的，是以肺组织表面或肺组织表面细胞为耙作用部位的脂质体。
项5、如项1所述的经肺给药用脂质体，其中，所述脂质体是被 末端疏水化聚乙烯醇进行表面修饰而形成的，是緩释性经肺给药用 脂质体。
项6、如项1所述的经肺给药用脂质体，其中，所述脂质体是被 脱乙酰壳多糖进行表面修饰而形成的，是以肺组织表面和内部作为 耙作用部位的脂质体。
项7、如项1所述的经肺给药用脂质体，其中，所述脂质体是被 脱乙酰壳多糖进行表面修饰而形成的，是速效性经肺给药用脂质体。
项8、如项1所述的经肺给药用脂质体，其中，脂质体的表面被 具有疏水性基团的末端疏水化聚乙烯醇修饰，所述疏水性基团由碳 原子教1 30的烷基、碳原子数1 ~30的烷氧基、碳原子数1~30 的羧基烷基、或碳原子数1 ~ 30的硫代烷基形成。
项9、 一种经肺给药用脂质体制剂，是在项1所述的经肺给药用 脂质体中封入药物或基因而形成的。
项10、如项9所述的经肺给药用脂质体制剂，其中，所述脂质 体是被末端疏水化聚乙烯醇进行表面修饰而形成的，所述制剂是以 肺组织表面或肺组织表面细胞作为靶作用部位的制剂。
项11、如项9所述的经肺给药用脂质体制剂，其中，所述脂质 体是被脱乙酰壳多糖对脂质体表面修饰而形成的，所述制剂是以肺 组织表面和内部作为靶作用部位的制剂。
项12、 一种经肺给药用脂质体制剂的制备方法，所述方法包括 以下步骤(i)及(ii):
(i) 混合药物或基因与脂质体膜的构成成分，得到药物或基因 被封入的脂质体的步骤；及
(ii) 混合所述步骤(i)中得到的药物或基因被封入的脂质体与 选自末端疏水化聚乙烯醇及脱乙酰壳多糖中的至少 一 种聚合物，将 所述脂质体的表面用所述聚合物进行修饰的步骤。
项13、选自末端疏水化聚乙烯醇及脱乙酰壳多糖中的至少一种聚合物在经肺给药用脂质体的制造中的应用。
项14、末端疏水化聚乙烯醇在緩释性经肺给药用脂质体的制造 中的应用。
项15、脱乙酰壳多糖在速效性经肺给药用脂质体的制造中的应用。
项16、 一种治疗肺组织疾病的方法，所述方法包括将项9所述 的经肺给药用脂质体制剂的治疗有效量给予患有肺组织疾病的患者 的肺的步骤。
由于本发明的经肺给药用脂质体可以通过调节末端疏水化聚乙 烯醇及/或脱乙酰壳多糖的量来控制被封入脂质体内的药物或基因在 肺组织表面的滞留性及向肺组织内的迁移性，所以可以对适用于肺 组织的药物或基因赋予所希望的生物体内行为。因此，通过本发明 的经肺给药用脂质体，可以在肺组织的靶作用部位有效地发挥由被 封入的药物或基因产生的药理作用。
另外，由于本发明的经肺给药用脂质体的表面修饰中使用的末 端疏水化聚乙烯醇及/或脱乙酰壳多糖具有生物适应性或生物体内分 解特性，所以认为本发明的经肺给药用脂质体安全性比较高。另外， 根据本发明的经肺给药用脂质体，通过对脂质体进行表面修饰的末 端疏水化聚乙烯醇及/或脱乙酰壳多糖，可以保护脂质体、抑制被封 入的药物或基因的分解。因此，本发明的经肺给药用脂质体还有被 封入的药物或基因的稳定性高的优点。
为表示在试验例1中实施例1-2的聚合物修饰脂质体及 比较例2的未修饰脂质体在大鼠肺内的行为的评价结果的图。
具体实施例方式
以下，详细地i兌明本发明。
本发明的经肺给药用脂质体只要是具有脂质双层膜结构的封闭小嚢即可，对脂质双层数没有特别限定，例如可以为小的单层膜脂
质体(small unilamellar, vesicles: SUV )、大的单层膜脂质体(large unilamellar vesicles: LUV)和多层月旨质体(multilamellar vesicles: MLV)中的任一种。
在本发明的经肺给药用脂质体中，对构成脂质双层的成分没有 特别限定，只要是作为脂质体膜的构成成分通常使用的成分即可。 具体而言，作为脂质体膜的构成成分，可以举出脂质、膜稳定剂、 带电物质、抗氧化剂、膜蛋白质等。
作为脂质体膜的构成成分的脂质是脂质体膜的必须成分，作为 其具体例，可以举出磷脂、糖脂质、甾醇、饱和或不饱和脂肪酸等。
作为磷脂的具体例，可以举出二月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻
酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬酯酰磷脂酰胆碱、二油 酰磷脂酰胆碱、二亚油酰磷脂酰胆碱、肉豆蔻酰棕榈酰磷脂酰胆碱、 肉豆蔻酰硬酯酰磷脂酰胆碱、棕榈酰硬酯酰磷脂酰胆碱等磷脂酰胆 碱；二月桂酰磷脂酰甘油、二肉豆蔻酰磷脂酰甘油、二棕榈酰磷脂 酰甘油、二硬酯酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰甘油、二亚油酰磷脂 酰甘油、肉豆蔻酰棕榈酰磷脂酰甘油、肉豆蔻酰硬酯酰磷脂酰甘油、 棕榈酰硬酯酰磷脂酰甘油等磷脂酰甘油；二月桂酰磷脂酰乙醇胺、 二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二硬酯酰磷脂 酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺、二亚油酰磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻 酰椋榈酰磷脂酰乙醇胺、肉豆蔻酰硬酯酰磷脂酰乙醇胺、棕榈酰硬 酯酰磷脂酰乙醇胺等磷脂酰乙醇胺；磷脂酰丝氨酸；磷脂酸；磷脂 酰肌醇；鞘磷脂；心磷脂；蛋黄卵磷脂；大豆卵磷脂；及它们的氢 化物等。
作为糖脂质的具体例，可以举出二糖基二甘油酯 (diglycosyldiglyceride ) 、 二半乳糖基二甘油酯、半乳糖基二甘油酯、 糖基甘油酯等甘油糖脂质；半乳糖脑苷脂、神经节苷脂等鞘糖脂； 硬脂基葡糖苷(stearylglucoside)、酯化硬脂基葡糖普等。
作为甾醇的具体例，可以举出胆甾醇、胆甾醇半琥珀酸酯、羊
8毛甾醇、二氢羊毛甾醇、链甾醇、二氢胆甾醇、植物甾醇、豆甾醇、 酵母甾醇、麦角甾醇、谷甾醇、菜油甾醇、菜子甾醇等。特别是该 甾醇有使脂质体膜稳定、调节脂质体膜的流动性的作用，故优选含 有该甾醇作为脂质体膜的构成脂质。
作为饱和或不饱和脂肪酸的具体例，可以举出癸酸、肉豆蔻酸、
棕榈酸、硬酯酸、花生四烯酸、油酸、山嵛酸等碳原子数为10~22 的饱和或不饱和脂肪酸。
上述脂质体膜的构成脂质可以单独使用一种，也可以组合两种 以上使用。在上述脂质体膜的构成脂质中，优选举出磷脂与甾醇的 组合，更优选举出磷脂酰胆碱与胆甾醇的组合。组合磷脂与甾醇的 情况下，对二者的比率没有特别限定，例如可以举出下述比率，即 相对于100摩尔磷脂，甾醇为1 ~ 100摩尔、优选为5~50摩尔、更 优选为10~30摩尔。
作为上述脂质体膜的构成脂质的含量，没有特别限定，例如可 以举出下述含量，即相对于脂质体膜的构成成分的总量，以摩尔比 计为1 ~ 100%、优选为60~95%、更优选为70~90%。
另外，带电物质是为了调节脂质体膜的电荷而含有的物质，根 据需要作为脂质体膜的构成成分进行使用。需要说明的是，此处所 谓带电物质是指除上述磷脂、糖脂质及甾醇之外的具有电荷的膜构 成成分。即，可以通过采用胆甾醇半琥珀酸酯、磷脂酰丝氨酸、磷 脂酰肌醇、磷脂酸等离子性磷脂作为成为脂质体膜的构成成分的脂 质来调节脂质体膜的电荷，也可以通过含有带电物质代替该离子性 磷脂或并用带电物质和该离子性磷脂来进行调节。作为赋予正电荷 的带电物质，具体而言可以举出月桂胺、肉豆蔻胺、棕榈胺、硬酯 胺、油胺等脂肪族伯胺等。另外，作为赋予负电荷的带电物质，可 以举出磷酸二鲸蜡酯等磷酸二烷基(C14~ 18)酯。在上述带电物质 中，磷酸二烷基酯、特别是磷酸二鲸蜡酯可以形成负电荷脂质体， 由此可以有效地实施脂质体的表面修饰，因此适用于本发明的经肺 给药用脂质体。
9对脂质体膜中含有的上述带电物质的比例没有特别限定，例如 可以举出下述比例，即相对于脂质体膜的构成成分的总量，以摩尔
比计为0~50%、优选为5~40%、更优选为10~25%。
另外，为了防止脂质体膜的氡化，可以含有抗氧化剂，根据需 要作为脂质体膜的构成成分进行使用。作为脂质体膜的构成成分使 用的抗氧化剂，例如可以举出2, 6-二^又丁基对曱酚、没食子酸丙 酯、生育酚、生育酚乙酸酯、生育酚浓缩混合物(tocopherol-enriched mixture)、维生素E、抗坏血酸、L-抗坏血酸硬脂酸酯、抗坏血酸 棕榈酸酯、亚石克酸氢钠、亚錄u酸钠、乙二胺四乙酸钠、异抗坏血酸、 柠檬酸等。
对脂质体膜中含有的上述抗氧化剂的比例没有特别限定，例如 可以举出下述比例，即相对于脂质体膜的构成成分的总量，以摩尔 比计为0~40%、优选为5~20%、更优选为2.5~10%。
另外，为了给脂质体膜附加功能或稳定脂质体膜的结构，可以 含有膜蛋白质，根据需要作为脂质体膜的构成成分进行使用。作为 膜蛋白质，例如可以举出膜表面蛋白、膜整合蛋白、白蛋白、重组 白蛋白等。
对脂质体膜中含有的上述膜蛋白质的比例没有特别限定，例如 可以举出下述比例，即相对于脂质体膜的构成成分的总量，以摩尔 比计为0~20%、优选为2.5~10%、更优选为5~8%。
从有效且牢固地实施脱乙酰壳多糖修饰的观点出发，优选在脂 质体膜的构成成分中含有具有负电荷的成分。优选举出作为膜的构 成成分含有磷脂、甾醇及赋予负电荷的带电物质的脂质体，更优选 含有磷脂酰胆碱、胆甾醇及磷酸二烷基酯的脂质体。通过含有上述 膜的构成成分的脂质体可以有效且牢固地进行脂质体的表面修饰， 并且可以更有效地控制在肺组织表面的滞留性及向肺组织内的迁移 性。
另外，本发明的经肺给药用脂质体中使用的脂质体本身的粒径 (即未经表面修饰状态下的脂质体的粒径)可以根据使用的脂质的种类、表面修饰中使用的聚合物的种类等适当地设定，例如可以举
出20~ 1000nm、优选为50~ 500nm、更优选为100 200nm左右。
脂质体的粒径由动态光散射法测定得到。
脂质体可以采用例如薄膜水合法、超声波处理法、乙醇注入法、醚注入法、逆向蒸发法、表面活性剂法、冷冻.融化法、薄膜水合-超声波法等公知的方法进行制备。另外，脂质体的粒径可以通过挤出法、弗氏压碎器(French press )法、均化法等公知的方法来调节。
本发明的经肺给药用脂质体的脂质体表面被选自末端疏水化聚乙烯醇及脱乙酰壳多糖中的至少一种聚合物(以下，有时称为表面修饰聚合物)修饰。在本发明的经肺给药用脂质体中，上述表面修饰聚合物通过疏水键、氢键或静电键结合在脂质体表面，由此脂质体的表面被上述聚合物修饰。
此处，末端疏水化聚乙烯醇是指疏水性基团键合在聚乙烯醇的末端而形成的聚合物。作为末端疏水化聚乙烯醇，具体而言可以举出选自烷基、烷氧基、羧基烷基及硫代烷基的疏水性基团与聚乙烯醇的末端键合形成的聚合物。其中，优选疏水性基团为硫代烷基。此处，作为构成疏水性基团的烷基、烷氧基、羧基烷基及硫代烷基，使用碳原子数为1-30左右、优选为5 25左右、更优选为10~20左右的基团。另外，构成疏水性基团的烷基、烷氧基、羧基烷基及硫代烷基可以为直链状或支链状中的任一种，优选直链状。作为本发明中使用的末端疏水化聚乙烯醇的疏水基团，优选举出碳原子数为1~30的硫代烷基、更优选举出碳原子数为5~25的直链硫代烷基、特别优选举出碳原子数为10~20的直链硫代烷基。本发明中使用的末端疏水化聚乙烯醇只要在聚乙烯醇的末端碳原子上键合有疏水基团即可，例如疏水基团为硫代烷基时，只要该硫代烷基的硫原子与聚乙烯醇的末端碳原子共价键合即可。
另外，作为末端疏水化聚乙烯醇的聚乙烯醇部分的皂化度，例如可以举出70 - 95摩尔％、优选为80~95摩尔％、更优选为82 ~93摩尔％。进而，作为末端疏水化聚乙烯醇的聚乙烯醇部分的聚合
ii度，可以举出100 ~ 1000、优选为200~ 800、更优选为300 ~ 600。
在本发明中，末端疏水化聚乙烯醇可以单独使用一种结构，另外也可以组合两种以上进行使用。
末端疏水化聚乙烯醇是公知的化合物，可以购买市售品或通过公知的制备方法而得到。
另外，脱乙酰壳多糖是氨基葡糖残基通过pi -4键结合的多糖。作为脂质体的表面修饰中使用的脱乙酰壳多糖的聚合度，可以举出2~ 1000、优选为50~ 900、更优选为100~ 800(以分子量计约2万~15万)。另外，对该脱乙酰壳多糖的脱乙酰化度也没有特别限定，例如可以举出60%以上、 <尤选为70~100%、更优选为80~100%。
在脂质体的表面存在越多的末端疏水化聚乙烯醇，可以使脂质体在肺组织表面(例如支气管肺泡表面)滞留越长时间，另一方面，在脂质体的表面存在越多的脱乙酰壳多糖，可以使脂质体越快地迁移到肺组织内。即，在脂质体的表面末端疏水化聚乙烯醇的量越多，可以^吏封入脂质体的物质越有效率地作用于肺组织表面或表面细胞。另外，在脂质体的表面脱乙酰壳多糖的量越多，越可以提高封入脂质体的物质向肺组织内的迁移性。因此，被末端疏水化聚乙烯醇表面修饰而形成的脂质体作为緩释性经肺给药用脂质体、或以肺组织表面或肺组织表面细胞为靶的经肺给药用脂质体是有用的。另外，被脱乙酰壳多糖表面修饰而形成的脂质体作为速效性经肺给药用脂质体、或以肺组织表面和内部为靶的经肺给药用脂质体、特别是以肺组织内部为靶的经肺给药用脂质体是有用的。
也可以考虑上述向肺组织内的迁移性和在肺组织表面的滞留性，基于目标肺内行为，适当设定本发明的经肺给药用脂质体中的上述表面修饰聚合物的种类。本发明可以仅被末端疏水化聚乙烯醇或脱乙酰壳多糖中的任一聚合物进行表面修饰，另外也可以组合双方聚合物进行表面修饰。
也可以考虑向上述向肺组织内的迁移性和在肺组织表面的滞留性，基于目标生物体内行为，适当设定本发明的经肺给药用脂质体中的上述表面修饰聚合物的量。例如可以以下述比率使用，即相对
于100重量份脂质体膜的构成成分的总量，表面修饰聚合物为1~300重量份、优选为5 250重量份、更优选为10~ 200重量份。
通过在蒸馏水或緩沖液中充分混合表面修饰聚合物与脂质体，用表面修饰聚合物对脂质体进行表面修饰。具体而言，通过等量混合含有0.1 ~ 10重量°/。左右表面修饰聚合物的水溶液与含有1~10重量％左右脂质体的水溶液，于4~ 10。C下搅拌0.5~ 1小时，生成被表面修饰聚合物表面修饰的脂质体。另外，可以使被表面修饰聚合物表面修饰的脂质体在固液分离后再次分散于蒸馏水或緩冲剂中。
本发明的经肺给药用脂质体封入要求在肺组织内发挥药理作用的药物、或用于肺组织中的基因治疗的基因，作为用于经肺给药的载体进行使用。需要说明的是，在本发明中，基因包括siRNA、mRNA、rRNA、 miRNA(微RNA)、核酶、反义寡核苷酸、诱斜寡核苷酸(decoyoligonucleotides )、质粒DNA、肽核酸、三链形成性寡核苷酸(TriplexForming Oligonucleotide, TFO )、适体、离冲斤的DNA (isolated DNA )等核酸。被封入脂质体内的药物或基因的量基于药物或基因的种类和给药量等适当设定。
另外，在被表面修饰聚合物修饰的脂质体内封入药物或基因的方法也可以采用公知的、本领域通常使用的方法。具体而言，通过使用含有药物或基因的溶液与脂质体膜的构成成分，形成脂质体，将药物或基因封入脂质体内。更具体而言，在本发明的经肺给药用脂质体中封入了药物或基因的经肺给药用脂质体制剂可以按以下步骤(i)及(ii)进行制备
(i) 混合药物或基因与脂质体膜的构成成分，得到药物或基因被封入的脂质体的步骤；及
(ii) 混合如此得到的药物或基因被封入的脂质体与表面修饰聚合物，将该脂质体的表面用表面修饰聚合物进行修饰的步骤。
进而，药物或基因被封入本发明的经肺给药用脂质体中的经肺给药用脂质体制剂也可以通过混合药物或基因、脂质体膜的构成成 分及表面修饰聚合物进行制备。
药物或基因被封入本发明的经肺给药用脂质体中的经肺给药用 脂质体制剂用经支气管给药、滴鼻给药等给药方法给予肺内进行使 用。具体而言，通过将含有对肺组织疾病的治疗有效的药物或基因 的该脂质体制剂的治疗有效量给予患有肺组织疾病的患者的肺，能 够治疗该肺组织疾病。
实施例
以下，基于实施例等详细地说明本发明，但本发明并不限定于此。
实施例1末端疏水化聚乙烯醇修饰脂质体的制备
通过薄膜水合-超声波法制备脂质体，所述脂质体的脂质组成
为二硬酯酰磷脂酰胆碱胆甾醇磷酸二鲸蜡酯=8: 1: 2(摩尔比)， 且含有9-蒽曱酸胆甾醇酯(CA)作为荧光标记物质。具体而言， 使二硬酯酰磷脂酰胆碱(103.2 mg)、胆甾醇(6.3 mg)、磷酸二鲸 蜡酯(17.9 mg)及CA ( 1 mg)溶解于氯仿中，在40。C的条件下， 用蒸发仪蒸发2小时，得到脂质薄膜。之后，使之减压干燥一夜后， 通过用6.4mL的100mM的乙酸緩沖液将其水合来制备脂质体。
对如此得到的脂质体用末端疏水化聚乙烯醇(皂化度88%、 聚合度480、疏水性基团C16H33S -)进行表面修饰。具体而言， 通过等量混合以20g/L含有末端疏水化聚乙烯醇的100mM的乙酸緩 沖液与以20.1g/L含有上述所得脂质体的lOOmM的乙酸緩冲液，于 l(TC培养1小时来制备末端疏水化聚乙烯醇修饰脂质体。
实施例2脱乙酰壳多糖修饰脂质体的制备
使用脱乙酰壳多糖(分子量15万、脱乙酰化度85%)代替末 端疏水化聚乙烯醇，用与上述实施例1同样的方法进行脂质体的形 成及脂质体的表面修饰，制备脱乙酰壳多糖修饰脂质体。但是，因 为确认使溶解了脱乙酰壳多糖的緩沖液与脂质体悬浮液等量混合时粒径增大，因此艰合后实施超声波处理。 试验例1大鼠中的肺内行为评价
对Wistar系雄性大鼠(7周龄)经支气管给予(15.63 pg CA/大 鼠)实施例1或2的聚合物修饰脂质体。用荧光光度计(HITACHI F3010)测定给予5小时后在肺组织内、支气管肺泡清洗后的回收液 中的细胞(BALF )、及支气管肺泡清洗后的回收液中的细胞(BALC ) 中的CA浓度，求得相对于给药量的残留率(Dose %)。另外，作 为对照，使用聚合物未修饰脂质体(膜组成、CA含量与实施例1相 同)代替聚合物修饰脂质体，与上述同样地进行试验(比较例1)。 结果示于图1。
图1表明实施例1的聚合物修饰脂质体与比较例1相比，在支 气管肺泡清洗液中才全测出较多来自CA的焚光。即，确定由于实施 例1的聚合物修饰脂质体可以在肺组织表面长时间滞留，所以在肺 组织表面或表面细胞中发挥药理作用的情况下有用。
另一方面，实施例2的聚合物修饰脂质体与比较例1相比，观 察到较多肺组织的来自CA的荧光，表明其大量迁移到肺组织内。 即，表明由于实施例2的聚合物修饰脂质体可以在短时间内有效率 地向肺组织内迁移，所以例如可以将难以向肺组织内迁移的药物等 有效率地转运到肺组织内。
1权利要求
1、一种经肺给药用脂质体，其特征在于，脂质体的表面被选自末端疏水化聚乙烯醇及脱乙酰壳多糖中的至少一种聚合物修饰。
2、 如权利要求1所述的经肺给药用脂质体，其中，含有磷脂作 为脂质体膜的构成脂质。
3、 如权利要求1所述的经肺给药用脂质体，其中，含有磷脂酰 胆碱、胆甾醇及磷酸二烷基酯作为脂质体膜的构成脂质。
4、 如权利要求1所述的经肺给药用脂质体，其中，所述脂质体 是被末端疏水化聚乙烯醇进行表面修饰而形成的，是以肺组织表面 或肺组织表面细胞为靶作用部位的脂质体。
5、 如权利要求1所述的经肺给药用脂质体，其中，所述脂质体 是被末端疏水化聚乙烯醇进行表面修饰而形成的，是緩释性经肺给 药用脂质体。
6、 如权利要求1所述的经肺给药用脂质体，其中，所述脂质体 是被脱乙酰壳多糖进行表面修饰而形成的，是以肺组织表面和内部 作为靶作用部位的脂质体。
7、 如权利要求1所述的经肺给药用脂质体，其中，所述脂质体 是被脱乙酰壳多糖进行表面修饰而形成的，是速效性经肺给药用脂 质体。
8、 如权利要求1所述的经肺给药用脂质体，其中，脂质体的表 面被具有疏水性基团的末端疏水化聚乙烯醇修饰，所述疏水性基团 由碳原子数1 ~ 30的烷基、碳原子数1 ~ 30的烷氧基、碳原子数1 ~ 30的羧基烷基、或碳原子数1 ~ 30的硫代烷基形成。
9、 一种经肺给药用脂质体制剂，是在权利要求1所述的经肺给 药用脂质体中封入药物或基因而形成的。
10、 如权利要求9所述的经肺给药用脂质体制剂，其中，所述 脂质体是被末端疏水化聚乙烯醇进行表面修饰而形成的，所述制剂 是以肺组织表面或肺组织表面细胞作为耙作用部位的制剂。
11、 如权利要求9所述的经肺给药用脂质体制剂，其中，所述 脂质体是被脱乙酰壳多糖对脂质体表面修饰而形成的，所述制剂是 以肺组织表面和内部作为靶作用部位的制剂。
12、 一种经肺给药用脂质体制剂的制备方法，所述方法包括以 下步骤(i)及(ii):(i) 混合药物或基因与脂质体膜的构成成分，得到药物或基因 被封入的脂质体的步骤；及(ii) 混合所述步骤(i)中得到的药物或基因被封入的脂质体与 选自末端疏水化聚乙烯醇及脱乙酰壳多糖中的至少一种聚合物，将 所述脂质体的表面用所述聚合物进行修饰的步骤。
13、 选自末端疏水化聚乙烯醇及脱乙酰壳多糖中的至少一种聚 合物在经肺给药用脂质体的制造中的应用。
14、 末端疏水化聚乙烯醇在緩释性经肺给药用脂质体的制造中 的应用。
15、 脱乙酰壳多糖在速效性经肺给药用脂质体的制造中的应用。
16、 一种治疗肺组织疾病的方法，所述方法包括将权利要求9 所述的经肺给药用脂质体制剂的治疗有效量给予患有肺组织疾病的 患者的肺的步骤。
全文摘要
本发明的目的在于提供一种药物或基因的肺内转运控制性优异、适用于经肺给药的脂质体。通过用末端疏水化聚乙烯醇及/或脱乙酰壳多糖修饰脂质体的表面，能适当调节被封入脂质体内的药物或基因在肺组织表面的滞留性和向肺组织内的迁移性，可以控制其生物体内行为。
文档编号A61K47/32GK101646462SQ200880010670
公开日2010年2月10日 申请日期2008年3月28日 优先权日2007年3月30日
发明者中野浩士, 丰福秀一, 竹内洋文 申请人:大塚制药株式会社;竹内洋文