专利名称：：植物提取物及其治疗用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种植物提取物及其治疗用途，即一种用于治疗增殖性和/或炎症性病症的包括春黄菊花的水提取物的组合物，所述组合物在制备治疗增殖性和/或炎症性病症的药物中的用途，和一种用于治疗增殖性和/或炎症性病症的方法，所述方法包括给药需要其的人类或动物患者有效量的所述组合物。本发明特别地涉及一种用于治疗增殖性和/或炎症性病症的、含有春黄菊花的水提取物的组合物，其中所述春黄菊花为Florestubiformis。本发明进一步涉及所述组合物的用途，特征在于所述病症为癌症，优选成胶质细胞瘤或肺癌或前列腺癌。本发明还涉及所述组合物在制备用于治疗炎症性病症，更优选MorbusChron,最优选多发性硬化症的药物中的用途。
背景技术：
：已知多种植物的治疗性质几千年。然而，即使在今天，对有效组分的属性及其性质了解很少，即使对于已经研究的那些植物，因为药物研究通常集中于小分子，认为其具有相对可预测的性质，并且其合成可以控制。Uteshev等人在Eksp.Klin.Fa腿kol.(1999年11月画12月)62(6):52-5中描述了在大气和浸泡冷却期间从德国春黄菊(Matricariachamomilla)获得的杂多糖的免疫调节活性。Laskova和Uteshev在Antibiot.Khimioter.(1992Jun)37(6):15-8中描述了从春黄菊花分离的杂多糖的免疫调节作用。所述水基提取物是口服或腹膜内注射给药。作者没有建议任何治疗应用，而是报道说刺激作用取决于剂量给药方案，并且主要取决于试-睑大鼠的冷却方式和程度。WO2005/070440涉及一种用于治疗变应性(allergic)哞喘或')"曼性支气管哮喘的草药处方，其包括特定量的干燥磨碎的春黄菊花、anisfrmts、黑籽等，作为茶水(teainfusion)给药。WO03/101479描述了包括几种组分的组合物的有4介值的治疗性质，5所述几种组分典型地通过肌肉注射一起给予。所使用的组合物包括春黄菊提取物，尽管没有认为它具有治疗活性；而是，其被描述为抗刺激剂，其的存在可以减轻注射本身使人不愉快的作用。WO2007/057651公开了一种从春黄菊中除去内毒素的方法。发明概述出人意外地，现在发现从花头获得的，优选地通过蒸汽蒸馏获得的春黄菊提取物具有有价值的治疗性质。已知这样的水提取物由春黄菊花头的挥发性组分组成，其描述在欧洲药典中(MatricariaeaetheroleumPhEur5,corrected.5.1)。特别地，已经发现所述提取物可以减少人类癌细胞中的DNA合成，并且抑制白细胞三烯和IL-6(白细胞介素6)的生成。更出人意外地，已经发现在黑枯茗(Nigellasativa)的种子油的存在下，挥发油的白细胞三烯合成的抑制作用协同地增强了。发现已知自身生成作为生长因子的白细胞介素6的癌细胞和已知自身生成白细胞三烯的癌细胞是特别敏感的。最近，可能推断单独的春黄菊的挥发油及其与黑枯茗籽油的组合具有意想不到的抗炎和抗癌性质，例如在治疗炎症、免疫性疾病和癌症中。'因此，本发明涉及(1)一种用于治疗增殖性和/或炎症性病症的组合物，其中含有春黄菊花的水提取物；(2)根据(l)的组合物，其中所述水提取物为挥发性油，其是通过包括优选地在减压下水蒸汽蒸馏春黄菊花的提取方法可获得的；(3)根据(1)或(2)的组合物，其中所述春黄菊花为Florestubiformis;(4)根据(2)或(3)的组合物，其中所述蒸汽蒸馏在氮气氛下进行，并且所述方法进一步包括步骤(i)用交联聚维酮接触所述组合物，与香豆素形成复合物；(ii)除去步骤(i)中形成的交联聚维酮和香豆素的复合物；(iii)通过用无水硫酸钠接触步骤(ii)得到的组合物以除去水残留物；和(iv)从步骤(iii)得到的组合物中分离硫酸钠；(5)根据(1)至(4)中任一项的组合物，其中所述组合物另外包括黑枯茗油；(6)根据(5)的组合物，其中所述黑枯茗油为通过纯化方法可获得的纯的黑枯茗油，所述纯化方法包括步骤(i)用交联聚维酮接触黑枯茗油，与酚类化合物形成复合物；(ii)除去步骤(i)中形成的交联聚维酮和酚类化合物的复合物；(iii)通过用无水^L酸钠接触步骤(ii)得到的黑枯茗油以除去水残留物；和(iv)从步骤(iii)得到的黑枯茗油中分离硫酸钠；(7)根据(1)至(6)中任一项的组合物，特征在于所述病症为炎症性病症，优选地选自MorbusChron和多发性硬化症；(8)根据(1)至(6)中任一项的组合物，其中所述病症为癌症，优选地选自成力交质细胞瘤、肺癌和前列&i癌；(9)根据(1)至(7)中任一项的组合物，特征在于所述炎性病症是由自身免疫性疾病引起，优选地由白细胞介素6触发，更优选地由白细J包三烯触发，最优选地取决于白细l包介素6和/或白细月包三烯的存在；(10)根据(1)至(6)和(8)中任一项的组合物，特征在于所述病症是由增殖性疾病引起，优选地由白细胞介素6触发，更优选地由白细胞三烯触发，最优选地取决于白细胞介素6和/或白细胞三烯的存在；(11)如(1)至(6)的任一项中定义的组合物的用途，用于制备治疗增殖性和/或炎症性病症的药物；(12)根据(ll)的用途，其中所述病症如在(7)至(10)的任一项中定义的；(13)—种用于治疗增殖性和/或炎症性病症的方法，其包括给药需要其的人类或动物患者有效量的如(1)至(6)中任一项所定义的组合物；和(14)根据(13)的方法，其中所述病症如在C7)至(10)的任一项中定义的。
发明内容本发明是基于使用春黄菊花头的水提取物获得的数据，所述水提取物优选地为通过蒸汽蒸馏获得的。精确地，所述水提取物由母菊术人员称为Matricariaeaetheroleum,描述在PhEur5.1中。本发明进一7步是基于使用黑枯茗籽油和春黄菊花头的挥发油的组合获得的数据。所述提取物可以通过任何合适的方法获得，包括本领域普通技术人员已知的方法。所述提取物可以通过使用水性或有机介质获得，并且通过过滤、层析、超临界流体萃取等将其与其它组分分离。例如，在本发明中可以使用的物质来源于Asteraceae才直物母菊的干花头或其中的一种或多种物质，包括挥发油、母菊奧、没药醇及其它物质。一种优选的方法是通过用交聚维酮(交联聚维酮)和硫酸钠接触最初得到的挥发油而将其纯化。本领域技术人员已知交聚维酮能够复合酚类化合物和香豆素。已知硫酸钠能结合水残留物。分离纯化剂会生成不含或接近不含香豆素、苯酚和水残留物的提取物。春黄菊提取物的来源很重要。其应当来源于母菊(Florestubiformis)的花头，优选管状花。所述组合物除了包含春黄菊的挥发油之外，还可包含作为活性成分的黑枯茗的种子油和乙酰半胱氨酸及抗坏血酸棕榈酸酯。不需要存在其它试剂。所使用的组合物应当适于注射。为了该目的，期望除去内毒素、多如具有分子量超过i:o:或io,ooo的那些。、z可以通过本领域技术人员已知的方法制剂本发明所使用的组合物。应该使用药学可接受的组分。术语"药学可接受的，，指那些从药理学/毒理学观点来看患者可接受的，以及从物理学/化学的观点来看制备药物的化学家可接受的那些性质和/或物质，这考虑到因素比如制剂、稳定性、患者可接受性和生物利用率。优选地通过静月永内，或更优选地肌肉注射，仍最优选地通过呈气雾剂或微/纳米乳剂经由呼吸道的吸入器给药。包含所述活性成分的药物组合物可以为适合于口服使用的形式，例如，如片剂、药片、4t剂、含水或含油悬浮液、可分散的粉剂或颗粒剂、乳剂、硬胶嚢或软胶嚢、或糖浆剂或酏剂。这些组合物可以包含一种或多种选自甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的试剂，以提供药物上精制且美味的制剂。片剂包含活性成分与无毒的药学可接受的赋形剂的混合物，其中所述赋形剂为比如，例如惰性稀释剂，比如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钓或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或褐藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。所述片剂可以是未包衣的，或者它们可以是采用已知的技术包衣，以延迟在胃肠道中崩解和吸收，从而提供4交长时间的持续作用。例如，可以使用延时的物质比如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。它们也可以#皮包衣，以形成用于控制释》文的渗透性治疗片。用于口服使用的制剂也可以以明胶硬胶嚢的形式存在，其中将活性成分为与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或者以明胶软胶嚢的形式存在，其中将活性成分与水或油介质例如花生油、液体石虫普或橄榄油混合。含水混悬剂可以包含活性物质与合适的赋形剂的混合物。这些赋形剂为悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、曱基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍树胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂，例如天然存在的磷脂，比如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如十七乙烯氧基鯨蜡醇，或环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，比如聚氧乙烯与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。含水悬浮液也可以包含一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂比如蔗糖或糖精。含油混悬剂可通过将活性成分悬浮在植物油或矿物油中来制备，所述植物油例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油，所述矿物油比如液体石蜡。所述含油悬浮液可包含增稠剂，例如蜂蜡、固体石蜡或鲸蜡醇。可以加入甜味剂(比如上述列出的那些)，并且可以加入调p木剂以提供可口的口力良制剂。这些组合物可以通过加入抗氧剂比如抗坏血酸来防腐。用于通过加入水来制备含水混悬剂的合适的可分散粉剂和颗粒剂提供了活性成分和分散剂或润湿剂、悬浮剂和一种或多种防腐剂的混合物。合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂为上述示例的。也可以存在甜味剂、调;朱剂和着色剂。本发明所使用的药物组合物也可以为水包油型乳剂的形式。油相可以为植物油，例如橄榄油或花生油，或者矿物油，例如液体石蜡或这些物质的混合物。合适的的乳化剂可以是天然存在的树胶，例如阿拉伯树胶或黄蓍树胶，天然存在的磷脂，例如大豆、卵磷脂和衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如脱水山梨糖醇单油酸酯，以及所述偏酯与氧化乙烯的缩合产物，例如聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。所述乳剂也可以包含甜P木剂和调P未剂。糖浆或酏剂可以用甜"朱剂来配制，所述邻"朱剂例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖。这些制剂也可以包含緩和剂、防腐剂和调味剂及着色剂。该药物组合物可以为无菌可注射的含水或含油混悬液的形式。该悬浮液可以使用合适的分散剂或润湿剂和混悬剂来制备，所述分散剂或润湿剂和混悬剂的实例为上述提及的。无菌可注射的制剂也可以是在无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射的溶液剂或混悬剂，例如在1,3-丁二醇中的溶液。在可以使用的可接受的赋形剂和溶剂中有水、林才各溶液和等渗氯化钠溶液。而且，通常使用无菌、不挥发油作为溶剂或悬浮介质。为了该目的，可以使用任意温和的非挥发油，包括合成性单或甘油二酯。而且，脂肪酸比如油酸可用于可注射性制剂中。所述组合物也可以以用于直肠给药所述药物的栓剂形式给药。这才羊的组合物可以通过混合药物与合适的无刺激性赋形剂来制备，所述赋形剂在常温为固体，但是在直肠温度为液体，因此，将在直肠中溶化以释放所述药物。这样的物质为可可脂和聚乙二醇。对于局部应用，合适的组合物为例如乳膏剂、软膏剂、胶状物、溶液剂或混悬剂的形式。如上所述，本发明的组合物可以通过注射给予。尽管任何非肠道纟会药都是合适的，但是肌肉注射是优选的。还可以优选的是口力良给予所述组合物。在这种情况下，并且如果佳_用促渗剂，不应当将胰岛素包括在口服制剂中。对于兽医学，口服给药可以是特别优选的。也可以给予受试者其它的活性物质。尽管不相信其它物质为必需的，但是已经发现某些类固醇和维生素，典型地口服给予时，可以支持或增加所述药物的效果。合适的甾体激素可增加特定蛋白质的合成，其通过在主要代谢产物比如维生素和氨基酸的帮助下暴露某些顺反子来达到。合适的类固醇的实例为雌二醇、诺龙和雌三醇。也可以给予维生素比如A、D和/或E。维生素A的作用可能是保存上皮组织的完整性、在蛋白质合成中起作用以及稳定细胞膜和亚细胞膜。的精^剂量和频率取决于一些因素。'这些因素包括使用的特定组分、要治疗的特定病症、病症的严重性、特定患者的年龄、体重和一般身体状况、以及个体可能服用的其它药物，这是本领域技术人员熟知的。图1A显示了实施例1中母菊属(Matricaria)精油对IL-6抑制复制1(inhibitionreplication1)的结果VIP—Matr'07—78IC50=5pg/ml(图解确定)PRISMIC50=7.782|ng/ml(用GraphPadPrism计算)95%区间3.169至19.11图IB显示了实施例1中母菊属精油对IL-6抑制复制2的结果VIPMatr'0778IC50=8fig/ml(图解测定)PRISMIC50-8.78pg/ml(用GraphPadPrism计算)95%区间6.248至12.35pg/ml图1C显示了实施例1中Nigella精油对IL-6抑制复制1的结果VIP—Nig，07_8IC5(H不适用PRISMIC50-没有会聚点(GraphPadPrism)95%区间图1D显示了实施例1中Nigella精油对IL-6抑制复制2的结果VIP—Nig'07—8IC50:不适用PRISMIC50-没有会聚点(GraphPadPrism)95%区间图2显示了从实施例2的5-LOX抑制测定得到的结果，实施例2试验了NICHA对5-LOX活性的抑制(平均2至4个独立的测定(结果来自3个独立的对ViP—E—Nig，07—8的5-lox测定、4个独立的对VIP—Matr07—78的5-lox测定和2个独立的对混合物1:1的5-lox测定)。图2A:ViP_Matr，07—78(春黄菊油)，复制1图2B:ViP—Nig，07—8(Nigellasativa油)，复制1图2C:ViP—Matr'07—78(春黄菊油)，复制2图2D:ViP—Nig,07—8(Nigellasativa油)，复制2ii图2E:混合物1:1(VIP—Matr，07一78:ViP—E—Nig，07—8)图3显示了在实施例2中，在NICHA作用下，WST-l对HL-60细胞的生存力测定得到的结果。图3A:ViP一Matr，07—78(春黄菊油)图3B:ViP一Nig，07一8(Nigellasativa油)图4显示了在实施例3中，NICHA对前列腺癌细胞DU145中的DNA合成的作用得到的结果。图4A:24小时培养，ViP—Matr，07_78(春黄菊油)图4B:24小时培养，ViP一Nig，07—8(Nigellasativa油)图4C:48小时培养，ViP一Matr，07—78(春黄菊油)图4D:48小时培养，ViP一Nig，07一8(Nigellasativa油)图5显示了在实施例3中，在48小时培养期间，NICHA对U-87MG细胞中的DNA合成的作用得到的结果。图5A:ViP—Matr，07一78(春黄菊油)图5B:ViP一Nig，07一8(Nigellasativa油)图5C:混合物1:1(VIP一Matr，07—78:ViP—E一Nig，07一8)实施例下述实施例进一步阐述本发明。实施例1-在THP1(巨嗟细胞)中，对白细胞介素6释放的抑制活性样品和参考物质试验样品种属供应商Art.No批号ViP编号Nigella油NigellaeoleumH纽selerAG26-4150-12006.08.0537ViP—Nig'07—8母菊属精油M3tric虹i3eAetheroleumPhEurH纽selerAG卜4925-22006.09.0181ViP—Matr'07—78参考物质顺序编号批号供应商测定NDGA74540422780/15400Fluka对不同的HL-60细胞的5-LOX抑制<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>*该测定是以两个独立的复制进4亍的。对THP-1细l包的IL-6抑制测定在37°C,用细胞(人类THP-1)预培养样品30分钟，所述细胞此前用PMA分化(0,125x106细胞/孔)。用LPS(lug/ml)开始该反应，并且在37。C进行所述培养超过24小时。在没有LPS-刺激下，用测定混合物进行阴性对照t(O)[参考l]。用购自CaymanNo:583361的酶免疫测定(EIA)试剂盒进行IL-6的定量。在波长=415nm测定光密度。使用至少5种不同浓度的标准曲线计算数量。每个样本点测定双份。将剂量相关抑制值表示为阳性对照值的百分凄丈。用牙呈序GraphPad陽Prism(Version4,GraphPadSoftwareInc.,SanDiego,CA,USA)测定IC50值(相当于抑制水平为50%时的样品浓度)。结果实施例1的结果显示在图1中。实施例2-在人类癌细胞系中，NICHA001对白细胞三烯释放的抑制活性研究了在不同浓度的NICHA时，两个人类细胞系(粒细胞)对白细胞三烯释放的反应。用Nigella油、春黄菊油和两种油的组合进行各个试验。样品试验样品描述供应商Art.No批号ViP编号Nigella油NigellaeoleumH纽selerAG26-4150-12006.08.0537ViP—Nig'07一8MatricariaMatricariasH纽selerAG1-4925-22006.09.0181ViP—Matr'07—78精油AetheroleumPhEur测定测定细胞系样品试验浓度5-L0X抑制粒细胞ViP—Nig'07—80,3/3/30ng/ml分化的HL60ViP—Matr'07—780.1/0.3/1/3/10/30ng/ml混合物0，3/3/30ng/mlWST-1测定HL-60细胞ViP—Nig'07—80,3/3/30ng/mlViPMatr'07785-LOX抑制测定将人类HL-60细胞(髓细胞性白血病，DSMZNoACC3)保存在37。C下的湿润大气中，所述湿润大气中含有5%的C02,并将其培养在完全RPMI1640培养基中，该培养基补充有10%的胎牛血清和1。/。(v/v)青霉素/链霉素溶液。用DMSO(1.2。/。的v/v)分化细胞6至8天。如Bennet等人描述的[参考2]进行5-LOX活性测定。简言之，收集分化的细胞，悬浮在包含Ca"(lmM)和葡萄糖(lmM)的PBS中，并将其分布在96-孔微量滴定板(lx106细胞/孔)中。在室温下，用样品或赋形剂预培养15分钟后，加入钙离子载体A23187(5uM)和花生四烯酸(10uM)开始反应。所有的值都是最终浓度。在没有钙离子载体刺激下进行阴性对照。在37°C,培养所述测定混合物15分钟，通过加入lOOjil的包含HC1(1M,3%v/v)的甲醇和将孩吏量滴定板放置在水上终止反应。在用50nl的PBS中和和离心(340xg)10分钟后，测定上清液中的LTB4浓度。通过测定在测定条件下生成的白细月包三烯B4的量来测量样品和参考化合物[参考3]对5-LOX活性的作用。用购自CaymanNo520111(LTB4)的酶免疫测定(EIA)试剂盒进行白细胞三烯B4的定量。在波长14二415nm测定光密度。使用至少5种不同浓度的标准曲线计算数量。每个样本点测定双份。将剂量相关抑制值表示为阳性对照值的百分数。如果可适用的，用程序GraphPad-Prism(第4版，GraphPadSoftwareInc.,SanDiego,CA,USA)测定IC50值(相当于抑制水平为50%时的样品浓度)。WST-1对HL60的生存力测定细i包功能/线粒体用TetrazoliumsaltWST-1试剂盒(Biovision,K301-500,CAUSA)试验对人类肝细胞(HepG2)、人类粒细胞(分化的HL60)、人类单核细胞(THP-1)和人类巨噬细胞(分化的THP-l)的代谢活动的减少[参考4]。用提取物预培养所述细胞24小时。通过活细;9包将四唑盐WST-1还原为甲腊(formazan)的能力测量细胞的代谢活性。通过用板读数器(BioRad，USA)测定波长入=450nm的光密度(OD)来直接测量曱鹏的量。进行该光学测量三次，计算标准偏差。对于每个试验浓度，从含有细胞的OD测量结果的平均值减去空白(样品的测定混合物，但不含细胞)的OD值。将OD450-值转化成具有100%的生存力读数(相当于不含样品的对照测量结果)的百分数值。结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>实施例3-NICHA001对人类癌细胞系增殖的影响研究不同浓度的NICHA下，成月交质细胞瘤细胞和前列腺癌细胞的增殖反应。用Nigella油、春黄菊油和两种油的组合进行各个试验。样'试验样品描述_供应商Art.No批号_ViP编号NigellaoilNigellaeoieumH纽selerAG26-4150-12006.08.0537ViP—Nig，07一8母菊属精油MatricariaeH纽selerAG1-4925-22006.09.0181ViP—Matr'07—78AetheroleumPhEur测定测定_细胞系_^_试验浓度DNA合成前列腺癌细胞ViP—Nig，07—80,3/3/30吗/mlDU145ViP—Matr'07—780,3/3/30/60ng/ml成胶质细胞瘤细胞ViP—Nig'07_80,3/3/30ng/mlU-87MGViP一Matr'07—78混合物DNA合成3H-胸苷结合通过胰蛋白酶消化收集DU145和U-87MG细胞，并且以IO，OOO细胞/孔接种在96孔板中。在37。C和5%的C02下，用所需浓度的样品培养所述细胞24小时和/或48小时。将细胞用3H-胸苷(ljuci/ml)(PerkmElmer)脉冲24小时。之后，用PBS洗涤它们，并用甲醇固定两次，每次5分钟。用0.3NTCA沉淀蛋白质。在洗涤步骤之后，加入150jul的0,3NNaOH,用15分钟，以溶解细胞。用不含有细月包的样品测量背景对照。为了检测用于DNA合成的加入的311-胸苷，将样品转移到含有闪烁混合物的闪烁管中。在Tn-Carb1900TR液体闪烁计数器(Packard,USA)中进行定量。在测定条件下，通过测定放射性标i己(dpm)的量来测量几种浓度样16品的作用。将剂量相关值表示为阳性对照值的百分数。样本点测量四卞分，将i吴差表示为标准偏差。前列腺癌细胞DU145得到的结果NICHA对前列腺癌细胞(DU145)中的DNA合成作用的结果显示在图4A-4D中。参考化合物对DNA合成的IC5o值如下24h培养48h培养参照ic5095%置信水平ic5095%置信水平(nM)(nM)(nM)(nM)喜树碱152115.9至199.47，55.1至11,0成胶质细胞瘤细胞U87MG得到的结果NICHA对U-87MG纟田胞(48小时培养)中的DNA合成的影响的结果显示在图5A-5C中。参考化合物对U-87MG细胞的DNA合成的IC50值如下48h培养参照ic5095%置信水平(nM)(nM)喜树碱3,322.5至4.4根据实施例结果的结论研究了春黄菊(Matricariarecutita:VIP—Matr07—78)的精油和黑枯茗(Nigellasativa:VIP一Nig07—8)的种子油抑制分化的人类粒细胞细胞系HL60(人类急性髓细胞样白血病)中白细胞三烯合成的可能性。Nigellasativa种子油显示了对5-Lox活性给人深刻印象的抑制，IC50值为3.02ug/ml(实施例2,图2d)。令人惊奇地，我们发现所述两种化合物的混合物抑制HL60粒细胞细胞系中白细胞三烯的合成强于添加剂。与预期的IC50值为0.76ug/ml不同，得到的IC50为0.53ug/ml(实施例2,图2e)。因此，我们得到结论所述两种化合物的组合增强了单组分的活性。VIP—Matr07_78显示出对于白细月包三烯合成的抑制甚至更加高得多的抑制活性，显示出的IC50值为0.38ug/ml(实施例2,图2c)。因此，母菊属精油看来是一种非常有效的5-LOX抑制剂。为了评价观察的抑制活性是否仅仅是细胞毒素作用的结果，我们用选择的浓度培养细胞，用于5-LOX试验，并测定线粒体活性(WST)。如在图3a和3b中所示，用选择浓度的VIP—Nig07—8或VIP_Matr07—78没有出现任何细胞毒性(实施例2,图3a和3b)。因此，我们得到结论观察到的抑制白细胞三烯合成的活性是与5-脂氧合酶特异性相互作用的结果。也获得了关于人类巨噬细胞细胞系THP1释放白细胞介素6的进一步的结果。虽然Nigellasativa没有显示出任何活性(实施例1,图lc和ld),但是母菊以剂量依赖性方式抑制THP1细胞释放白细胞介素6,并且IC50值为5ug/ml(实施例1,图la和lb)。重复试'验(复制2)显示出复制1的结果(实施例l)有可重现性。我们的结果表明母菊属的精油显示出对人类急,性髓细胞样白血病细胞HL60中白细胞三烯合成的强的抑制活性(实施例2,图2c)。进一步地，该结果还显示出在人类巨噬细胞细胞系THP1中白细胞介素6的释放可能受到抑制(实施例，图la和lb)。由于获得抑制作用所需的浓度相当地低，我们推测治疗有效量在人类终将容易地达到，特别地由于精油是高亲脂性的和应当容易被吸收。结合精油能够以纳摩尔范围的浓度有效地抑制人类粒细胞细胞系HL60中类花生酸类物质(白细胞三烯)形成的特征，该母菊的精油似乎是用于研究治疗炎症/自身免疫性疾病和某些类型癌症的药物的很有价值的候选物。在第三类试-验(实施例4)中，我们研究了Nigellasativa的种子油或母菊属的挥发油是否在体外抑制前列腺癌细胞系DU145和成胶质细胞瘤细胞系U87MG中DNA的合成。在48小时后，母菊(VIP—Matr07—78)以剂量依赖性方式同时抑制这两种细胞系的DNA合成(实施例4,图4c)，然而，Nigellasativa(VIP—Nig07—8)没有显示出对这两种癌细胞系的抑制作用(实施例4，图4d)。由于已知DU145生成作为生长因子的白细I包介素6，那么似乎DNA合成的抑制是(至少部分是)由于母菊的挥发油对白细胞介素6释》文的抑制活性引起的。明显地，成月交质细胞瘤细胞系U87MG的DNA合成的抑制是母菊的挥发油对白细胞三烯合成的强抑制的作用。权利要求1.一种用于治疗增殖性和/或炎症性病症的组合物，包括春黄菊花的水提取物。2.根据权利要求1的组合物，其中所述春黄菊花为Florestubiformis。3.根据权利要求1的组合物，其中所述该水提取物是通过包括水蒸汽蒸馏春黄菊花的提取方法可获得的挥发油，优选在减压下进行。4.根据权利要求3的组合物，其中所述蒸汽蒸馏在氮气氛下进行，并且所述方法进一步包括下述步骤(i)用交联聚维酮接触所述组合物，交联聚维酮与香豆素形成复合物，(ii)除去步骤(i)中得到的复合物；和(iii)通过用无水硫酸钠接触步骤(ii)得到的组合物以除去水；和(iv)从步骤(iii)得到的组合物中分离硫酸钠。5.根据权利要求4的组合物，其基本上不含水，优选地包含少于0.1%w/w的水，最优选地包含少于0.01。/。w/w的水。6.根据权利要求5的组合物，其基本上不含香豆素，以7-羟基香豆素来计算，优选地包含少于0.1%w/w,最优选i也包含少于0.005%w/w的香豆素。7.根据权利要求5或权利要求6的组合物，其包含含量为5-15%w/w,更优选15-25%w/w,最优选20-30%w/w的母菊萸。8.根据权利要求1-7任一项的组合物，其中还包含黑枯茗油。9.根据权利要求8的组合物，其中所述黑枯茗油为通过纯化方法可获得的纯的黑枯玄油，所述纯化方法包括下述步骤(i)用交联聚维酮接触黑枯茗油，交联聚维酮与酚类化合物形成复合物；(ii)除去步骤(i)中得到的复合物；和(iii)通过用无水硫酸钠接触步骤(ii)得到的黑枯茗油以除去水；和(iv)从步骤(iii)得到的黑枯茗油中分离硫酸钠。10.根据权利要求1至9中任一项的组合物，其中所述组合物是可通过超滤获得的，优选地4吏用具有孔径为0.001至0.02pm,更优选地0.001至O.Olpm的过滤器。11.根据权利要求1至10中任一项的组合物，其不含或基本上不含内毒素，优选地包含含量为100EU/ml(按照Ph.Eur的内毒素单位/ml)或更少，更优选50EU/ml或更少，仍更优选10EU/ml或更少的内毒素。12.根据权利要求1至11中任一项的组合物，其不包含具有分子量超过IO，OOO的物质，更优选地不包含具有分子量超过1,000的物质。13.根据权利要求1至12中任一项的组合物，其不含或基本上不含选自下述的化合物香豆素、类黄酮、春黄菊和/或黑枯茗的典型杂质的其它酚类化合物和残留水。14.根据权利要求1至13中任一项的组合物，其另外包括抗坏血酸椋榈酸酯和/或乙酰半胱氨酸。15.根据权利要求1至14中任一项的组合物，其另外包括至少一种药物助剂，优选地选自药用试剂和药用赋形剂。16.根据权利要求1至15中任一项的组合物，其中通过注射或吸入所述组合物进4亍治疗。17.根据权利要求1至16中任一项的组合物，其中所述病症为炎症性病症，优选地选自MorbusChron和多发性硬化症。18.4艮据4又利要求1至16的组合物，其中所述病症为癌症，优选地选自成胶质细胞瘤、肺癌和前列腺癌。19.根据权利要求1至17中任一项的组合物，其中炎症性病症是由自身免疫性疾病引起，优选地由白细胞介素6触发，更优选地由白细胞三烯触发，最优选地取决于白细月包介素6和/或白细月包三烯的存在。20.^f艮据权利要求1至16和18中任一项的组合物，其中所述病症是由增殖性疾病引起，优选地由白细胞介素6触发，更优选地由白细胞三烯触发，最优选地取决于白细胞介素6和/或白细胞三烯的存在。21.如权利要求1至15中任一项定义的组合物的用途，用于制备治疗增殖性和/或炎症性病症的药物。22.根据权利要求21的用途，其中所述治疗为如权利要求16所定义的。23.根据权利要求21或22的用途，其中所述病症为如权利要求17至20中任一项所定义的。24.—种用于治疗增殖性和/或炎症性病症的方法，其包括给药需要其的人类或动物患者有效量的如权利要求1至15中任一项所定义的组合物。25.根据权利要求24的方法，其中通过注射和/或吸入所述组合物进行给药。26.根据权利要求25的方法，其中所述组合物为可注射的组合物。27.根据权利要求24至26中任一项的方法，其中所述病症为如外又利要求17至20中4壬一项所定义的。全文摘要一种包括春黄菊花的水提取物的组合物，用于治疗增殖性和/或炎症性病症。文档编号A61K36/185GK101687001SQ200880018227公开日2010年3月31日申请日期2008年6月2日优先权日2007年6月1日发明者M·H·克鲁特申请人:因塞尼昂控股有限公司