专利名称：有机二羧酸和其盐及其制备方法
技术领域：
本发明涉及有机二羧酸和其盐及其制备方法，以及所述盐中一些典型化合物的抗
眼晶状体氧化损伤的活性。
背景技术：
白内障是最常见的致盲眼病之一，由白内障引起的失明占全世界盲人的40%左右。随着人口老龄社会的到来，老年性白内障的发病率日渐增长，所以白内障已列入世界性常见病和多发病。虽然可以通过手术摘除已丧失视力的晶状体，换置成人工晶状体，但手术价格昂贵，且存在一定的风险。因此更多的患者在发病初期需要通过药物治疗来延缓晶状体浑浊的发展，避免视力的丧失，推迟手术时间或避免手术。已有药物苄达赖氨酸具有一定的抗白内障作用，且作为醛糖还原酶抑制剂对多糖性白内障也有一定的疗效，但该药对眼睛具有剌激性，并且相关疗效还有所欠缺，因此研发新一代的治疗白内障的药物十分必要。
发明内容
发明目的本发明提供有机二羧酸和其盐及其制备方法，该类化合物可作为治疗白内障的药物。 技术方案本发明设计和合成了 2-(l-苄基(或取代苄基)-lH-吲唑-3-氧基)丙二酸，其作为有机二酸与碱金属离子、铵离子或氨基酸作用，制备了一系列具有新型结构的有机丙二酸盐，目的在于使其满足抗白内障药物所需的低毒、低剌激性、水溶性好及有效抗眼晶状体氧化的活性，用于治疗人体白内障。本发明披露了一类具有新型结构的二羧酸及其盐，以2-(l-苄基(或取代苄基)-lH-吲唑-3-氧基)丙二酸为有机二羧酸，这类化合
物的结构用式(1)表示，
式(1) 其中R是氢原子、C卜3烷基、C卜3烷氧基或卤原子，由式(1)代表的化合物简略为H2L。 当式(1)所示有机二酸与阳离子M形成盐时，可由式(2)表示， M2L 式(2) 其中，M代表一价阳离子，如Na+、 K+、 NH4+等。
当式(1)所示有机二酸与氨基酸形成盐时，可由式(3)表示，
A2H2L 式(3) 其中，A代表氨基酸，如赖氨酸(包括L型赖氨酸、D型赖氨酸及由L型赖氨酸和D 型赖氨酸组成的外消旋体)、组氨酸(包括L型组氨酸、D型组氨酸及由L型组氨酸和D型 组氨酸组成的外消旋体)等。 本发明的另一个目的是提供式(1)所示的有机二羧酸的制备方法，通过式(4)表
示的反应得到，
OH
XCH(C02R')2
^~(C02R'>2
KOH
CH30(CH2)2OCH:
HCI
^^(COOH)2
S1
S2
H， 式(4) 其中，X代表Cl、Br或I原子，R同式(1)中对R的定义，R'为C卜4烷基。在此类 有机二酸的合成中，l-苄基(或取代苄基)-lH-吲唑-3-醇(略为S1)在碱的存在下同 a-卤代丙二酸二酯反应，得到2-(l-苄基(或取代苄基)-lH-吲唑-3-氧基)丙二酸二酯 (略为S2)，然后，该酯在碱性条件下水解，经酸化后得到相应的有机二酸(H2L)。
具体的合成工艺为1. 0摩尔份的Sl，在2. 5摩尔份碳酸钾的存在下，在乙二醇二 甲醚的溶剂中同1. 2摩尔份的XCH(C02R' )2回流反应得到S2，然后在氢氧化钾(或氢氧化 钠)溶液中回流水解，用稀盐酸酸化到PH约为2，得到H2L。 将式(1)所示的有机二酸(H2L)与相应的碱，如氢氧化钠、氢氧化钾、氨水等，反应 得到式(2)所示的盐(M2L);将式(1)所示的有机二酸与相应的氨基酸，如赖氨酸(包括L 型赖氨酸、D型赖氨酸及由L型赖氨酸和D型赖氨酸组成的外消旋体)、组氨酸(包括L型 组氨酸、D型组氨酸及由L型组氨酸和D型组氨酸组成的外消旋体)或其它氨基酸等，反应 得到式(3)所示的盐(A2H2L)。 本发明所制备的化合物的结构已被不同的分析方法诸如红外光谱、质子核磁共振 光谱、有机质谱或电喷雾质谱确证。 有益效果本发明提供了一种有机二羧酸和其盐及其制备方法，披露了一些典型 有机二羧酸盐化合物具有抗眼晶状体氧化损伤的活性，该类化合物对眼睛的剌激性小于现 有治疗药物，并且相关疗效较好。
具体实施例方式
本发明由下述实施例得到进一步的说明，但这些说明并不是限制本发明。
实施例1. 2-(l-苄基(或取代苄基)-lH-吲唑-3-氧基)丙二酸酯的制备 在250mL三颈瓶中加入12g(0. 090mol) 3_羟基-吲唑(百灵威公司)，3. 94g(0. 098mol)氢氧化钠，90mL水，40°C下搅拌10min，滴加0. 090mol节氯(或取代节 氯)，在7(TC反应2h，有固体析出，过滤，滤饼用水洗涤，得1-苄基(或取代苄基)-lH-吲 唑-3-醇。 在lOOmL的四颈瓶中，加入40mL乙二醇二甲醚溶剂，再加入1-苄基(或取代苄 基)-lH-喷唑-3-醇(10. 5mmo1)和3.6g(26. lmmol)的碳酸钾混合。所得混合液室温下搅 拌10min，滴加3.0g(12.6mmo1)的溴代丙二酸二乙酯(百灵威公司)，然后加热回流4h，反 应液由黄色变成红棕色，过滤。将滤液浓縮，柱层析(展开剂石油醚(60-90°C ):乙酸乙 酯=1 : l)，可分别得到产物如下 (1)2-(l-苄基-lH-吲唑-3-氧基)丙二酸二乙酯(S2-l)
收率39% IR(KBr， cm—1) :2981 (m) ， 1768 (s) ， 1748 (s) ， 1619 (m) ， 1235 (s) ， 744 (m)
EI-MS :382[M+] 丄HNMR(500MHz，CDCl3) ， S (ppm) :1. 29 1. 33 (t， 6H， CH2CH3) ， 4. 29 4. 33 (dd， 4H， CH2CH3) ， 5. 34 (s ， 2H， CH2C6H5) ，5.77(s，lH，CH (C00H) 2) ， 7. 08 7. 83 (m， 9H， 2Ar)
(2)2-[1-(4_甲基-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸二乙酯(S2-2)
收率29% IR(KBr， cm—1) :2985 (w) ， 1764 (s) ， 1743 (s) ， 1617 (m) ， 1225 (s) ， 749 (m)
EI-MS :396 [M+] 丄匪R (500MHz ， CDC13) ， S (ppm) :1.28 1.31(t，6H， CH2CH3) ， 2. 40 (s， 3H， CH2C6H4CH3) ， 4. 29 4. 33(dd，4H， CH2CH3) ， 5. 36(s，2H， CH2C6H4CH3) ， 5. 79(s， 1H， CH(C00H)2)， 7. 02 7. 80(m，8H，2Ar) (3)2-[l-(3-氟-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸二乙酯(S2-3)
收率56% IR(KBr， cm—1) :2983 (w) ， 1767 (s) ， 1748 (s) ， 1618 (m) ， 1253 (s) ， 745 (m)
EI-MS :400 [M+] 丄HNMR (500MHz ， CDC13) ， S (ppm) :1. 28 1. 33 (t， 6H， CH2CH3) ， 4. 27 4. 34 (dd， 4H， CH2CH3) ， 5. 33 (s ， 2H， CH2C6H4F) ， 5. 76 (s ， 1H， CH (COOH) 2) ， 6. 80 7. 83 (m， 8H， 2Ar)
(4)2-[l-(3-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸二乙酯(S2-4)
收率51% IR(KBr，cm—0 :2984 (m) ， 1735 (s) ， 1619 (w) ， 1247 (s) ， 747 (m)
ESI-MS :439[M+Na] + 丄HNMR (500MHz ， CDC13) ， S (ppm) :1. 28 1. 33 (t， 6H， CH2CH3) ， 4. 31 4. 35 (dd， 4H， CH2CH3) ，5. 29(s，2H， CH2C6H4C1) ， 5. 76(s， 1H， CH(COOH)2) ， 7. 02 7. 83(m，8H，2Ar)
(5)2-[l-(4-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸二乙酯(S2-5)
收率18% IR(KBr， cm—1) :2982 (w) ， 1764 (s) ， 1740 (s) ， 1616 (w) ， 1222 (s) ， 746 (m)
ESI-MS :439 [M+Na] + 丄HNMR (500MHz ， CDC13) ， S (ppm) :1. 27 1. 34 (t， 6H， CH2CH3) ， 4. 28 4. 32 (dd， 4H， CH2CH3) ， 5. 29 (s， 2H， CH2C6H4C1) ， 5. 74 (s， 1H， CH(COOH) 2) ， 7. 04 7. 81 (m， 8H， 2Ar)
6
实施例2. 2-(l-苄基(或取代苄基)-lH-吲唑-3-氧基)丙二酸的制备
将实施例1所得酯(2. 7mmo1)分别加入到含0. 3g氢氧化钾(5. 4mmo1)的10mL水 溶液中，加热回流2h，然后用1M盐酸调节到pH二2，有白色固体析出，过滤，用少量水洗，干 燥得如下化合物 (1)2-(l-苄基-lH-吲唑-3-氧基)丙二酸(叫1) 收率93% mp :182-186。C (分解) IR(KBr， cm—1) :3033 (m) ， 2934 (m) ， 1741 (s) ， 1620 (m) ， 1257 (s) ， 746 (m) 、711 (m) ESI-MS :325[M-H]— 力画R(500MHz， D20) ， S (ppm) :5.30(s，2H， CH2C6H5) ， 5. 36 (s， 1H， CH(C00H)2)， 7. 00 7. 73(m，9H，2Ar); (2)2-[1-(4_甲基-节基)-lH-喷唑-3-氧基]丙二酸(H2L2)
收率98%
mp:144-146。C IR(KBr， cm—1) :3023 (m) ， 2920 (m) ， 1755 (s) ， 1618 (m) ， 1255 (s) ， 744 (s) 、727 (m)
ESI-MS :379 [M+K] + 力NMR (500MHz ， D20) ， S (ppm) :2. 16 (s， 3H， CH2C6H4CH3) ， 5. 29 (s， 2H， CH2C6H4CH3)，
5. 46 (s ， 1H， CH (COOH) 2) ， 6. 97 7. 75 (m， 8H， 2Ar); (3)2-[l-(3-氟-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸(H2L3)
收率96%
mp:138-140。C IR(KBr， cm—1) :3065 (m) ， 2925 (w) ， 1732 (s) ， 1618 (m) ， 1254 (s) ， 743 (s)
ESI-MS :383[M+K]+、367[M+Na]+、345[M+H] + 'HNMR(500MHz， D20) ， S (ppm) :5.41(s，2H， CH2C6H4F) ， 5. 49 (s， 1H， CH(C00H)2)，
6. 82 7. 85(m，8H，2Ar); (4)2-[l-(3-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸(H2L4)
收率98%
mp:137-139。C IR(KBr， cm—1) :3063 (m) ， 2940 (m) ， 1749 (s) ， 1619 (m) ， 1247 (s) ， 745 (s) 、725 (m) ESI-MS :399[M+K]+、361[M+H] + 力NMR (500MHz ， D20) ， S (ppm) : 5. 40 (s ， 2H， CH2C6H4C1) ， 5. 51 (s ， 1H， CH (COOH) 2)，
7. 04 7. 85(m，8H，2Ar); (5)2-[l-(4-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸(H2L5) 收率88% mp : 114-116 °C ESI-MS :399[M+K]+、361[M+H] + IR(KBr， cm—1) :3064 (m) ， 2921 (m) ， 1747 (s) ， 1619 (m) ， 1251 (s) ， 740 (s) 'HNMR (500MHz, D20) ， S (ppm) :5.32(s，2H， CH2C6H4C1) ， 5. 46 (s， 1H， CH(C00H)2)，7. 01 7. 78(m，8H，2Ar)
实施例3. 2-(l-苄基(或取代苄基)-lH-吲唑-3-氧基)丙二酸盐的制备将实施例2所得酸2. Ommol分别加入到5mL水中，搅拌5min，滴加4. Ommol碱或
4. Ommol氨基酸的5mL水溶液，室温搅拌4h，减压浓縮除水，得到油状物，然后加入20mL无 水乙醇，析出固体，过滤，用2mL无水乙醇洗涤，真空干燥，所得产物如下所示 (1)2-(l-节基-lH-喷唑-3-氧基)丙二酸*二钠盐(Yl)
收率75% IR(KBr，cm—0 :2983 (w) ， 1643 (s) ， 1334 (m) ， 741 (m) ， 723 (m)'匪R(500MHz， D20) ， S (ppm) :5.21(s，lH， CH(C00—)2) ， 5. 33 (s， 2H， CH2C6H5)， 7. 03 7. 79(m，9H，2Ar) (2)2-(l-节基-lH-喷唑-3-氧基)丙二酸*二钾盐(Y2)
收率86% IR(KBr， cm—1) :2978 (w) ， 1639 (s) ， 1328 (m) ， 740 (m) ， 721 (m) 力画R(500MHz， D20) ， S (ppm) :5.23(s，lH， CH(C00—)2) ， 5. 35 (s， 2H， CH2C6H5)，
6. 97 7. 78(m，9H，2Ar) (3)2-(l-节基-lH-喷唑-3-氧基)丙二酸 二铵盐(Y3)
收率75% IR(KBr， cm—1) :3197 (s) ， 1593 (s) ， 1326 (s) ， 1105 (m) ， 771 (s) ， 746 (m) 力画R(500MHz， D20) ， S (ppm) :5.22(s，lH， CH (C00—) 2) ， 5. 34 (s， 2H， CH2C6H5)，
7. 03 7. 81(m，9H，2Ar) (4)2-(1-苄基-1H-吲唑_3-氧基)丙二酸 二组氨酸盐(Y4)
收率92% IR(KBr， cm—1) :3128 (m) ， 3026 (m) ， 1618 (s) ， 1329 (m) ， 1259 (w) ， 744 (m) 丄HNMR(500MHz， D20) ， S (卯m) :3. 10 3. 24 (m， 4H， 2CH2 of Histidine) ， 3. 89
3. 94 (m， 2H， 2CHNH2C00H of Histidine) ， 5. 28 (s， 1H， CH(C00—) 2) ， 5. 34 (s， 2H， CH2C6H5)，
7.05 7. 80(m，11H，9H of 2Ar，and 2H of 2Imidazole)，8. 27(s，2H，2H of 2Imidazole) (5)2-(l-苄基-lH-吲唑-3-氧基)丙二酸《二赖氨酸盐(Y5) 收率86% IR(KBr，cm—0 :3031 (s) ， 2941 (s) ， 1615 (s) ， 1325 (m) ， 741 (m) 丄匪R(500MHz， D20) ， S (卯m) :1.30 1. 43 (m， 4H， 2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine), 1.60 1. 63(m，4H，2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine) ， 1. 78 1. 82 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4of Lysine) ，2. 90 2. 93 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4 of Lysine) ， 3. 65 (m， 2H， 2CH (NH2) COOH of Lysine) ， 5. 24 (s， 1H， CH(C00—) 2) ， 5. 36 (s， 2H， CH2C6H5) ， 7. 09 7. 81 (m， 9H， 2Ar)
(6)2-[l_(4-甲基-节基)-lH-喷唑-3-氧基]丙二酸 二钠盐(Y6)
收率76% IR(KBr，cm—0 :2983 (m) ， 1621 (s) ， 1336 (s) ， 1256 (m) ， 746 (m) 力画R(500MHz， D20) ， S (ppm) :2. 15(s，3H， C6H4CH3) ， 5. 22 (s， 1H， CH(C00—)2)，
5. 27 (s， 2H， CH2C6H4CH》，6. 97 7. 80 (m， 8H， 2Ar)
(7)2-[l-(4-甲基-节基)-lH-喷唑-3-氧基]丙二酸 二钾盐(Y7)
收率80% IR(KBr，cm—0 :2986 (m) ， 1625 (s) ， 1338 (m) ， 1255 (m) ， 744 (m) ^画R(500MHz， D20) ， S (ppm) :2. 17(s，3H， C6H4CH3) ， 5. 25 (s， 1H， CH(C00—)2)， 5. 30 (s， 2H， CH2C6H4CH3) ， 6. 99 7. 85 (m， 8H， 2Ar) (8)2-[1-(4_甲基-节基)-lH-喷唑-3-氧基]丙二酸 二铵盐(Y8)
收率70% IR(KBr，cm—0 :3330 (s) ， 2983 (m) ， 1600 (s) ， 1331 (m) ， 746 (m)"匪R(500MHz， D20) ， S (ppm) :2. 13(s，3H， C6H4CH3) ， 5. 21 (s， 1H， CH(C00—)2)，
5. 28 (s， 2H， CH2C6H4CH3) ， 6. 89 7. 80 (m， 8H， 2Ar) (9)2-[1-(4_甲基-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二赖氨酸盐(Y9)
收率88% IR(KBr，cm—0 :3432 (s) ， 2930 (s) ， 1619 (s) ， 1335 (m) ， 743 (m) 丄匪R(500MHz， D20) ， S (ppm) :1.30 1. 38 (m， 4H， 2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine), 1.54 1. 64(m，4H，2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine) ， 1. 74 1. 81 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4of Lysine) ，2. 12(s，3H， CH2C6H4CH3) ， 2. 86 2. 91 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4 ofLysine) ， 3. 61 3. 65(m，2H，2CH(NH2)C00H of Lysine) ， 5. 20 (s， 2H， CH2C6H5CH3) ， 5. 28 (s， 1H， CH(C00—)2)，
6. 92 7. 76(m，8H，2Ar) (10)2-[l-(3-氟-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二钠盐(Y10)
收率83% IR(KBr，cm—0 :2927 (w) ， 1619 (s) ， 1337 (m) ， 739 (m) 力NMR (500MHz, D20) ， S (ppm) :5.22(s，lH， CH (COOH) 2) ， 5. 34 (s， 2H， CH2C6H4F)， 6. 77 7. 80(m，8H，2Ar) (11)2-[l-(3-氟-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二钾盐(Yll)
收率80% IR(KBr，cm—0 :2929 (w) ， 1605 (s) ， 1331 (m) ， 741 (m) 力NMR (500MHz, D20) ， S (ppm) :5.22(s，lH， CH (COOH) 2) ， 5. 30 (s， 2H， CH2C6H4F)， 6. 75 7. 80(m，8H，2Ar) (12)2-[l-(3-氟-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二铵盐(Y12)
收率75% IR(KBr，cm—0 :3340 (s) ， 2931 (w) ， 1641 (s) ， 1336 (m) ， 743 (m) 'HNMR (500MHz ， D20) ， S (ppm) :5.35(s，lH， CH (COOH) 2) ， 5. 43 (s， 2H， CH2C6H4F)， 6. 77 7. 78(m，8H，2Ar) (13)2-[l-(3-氟-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二组氨酸盐(Y13)
收率84% IR(KBr， cm—1) :3154 (s) ， 3012 (m) ， 1600 (s) ， 1331 (m) ， 1226 (w) ， 741 (m)
丄HNMR(500MHz， D20) ， S (ppm) :3. 10 3. 13(d，4H，2CH2 of Histidine) ， 3. 83 3. 87 (m， 2H， 2CHNH2C00H of Histidine) ， 5. 22 (s， 1H， CH (COO—) 2) ， 5. 26 (s， 2H， CH2C6H4F)， 6. 71 7. 73(m， 10H，2Ar and 2H of 2 Imidazole of Histidine) ， 8. 33 (s， 2H， 2Imidazole苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二赖氨酸盐(Y14)
ofHistidine) 0138] (14)2-[1-(3-氟 0139] 收率85%
0140] IR(KBr，cm—0 :3435 (s) ， 2931 (s) ， 1622 (s) ， 1328 (m) ， 744 (m)
0141] 丄HNMR (500MHz ， D20) ， S (ppm) :1.32 1. 46 (m， 4H， 2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine),
.55 1. 66(m，4H，2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine) ， 1. 72 1. 79 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4of Lysine) ， 2. 89 2. 93 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4 of Lysine) ， 3. 55 3. 59 (m， 2H， 2CH(NH2) COOH of Lysine) ，5. 25 (s， 1H， CH(C00—)2) ， 5. 35(s，2H， CH2C6H4F) ，6. 80 7. 87(m，8H，2Ar)
0142] (15)2-[l-(3-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二钠盐(Y15)
0143] 收率80%
0144] IR(KBr，cm—0 :2937 (w) ， 1619 (s) ， 1336 (s) ， 744 (m)
0145] 力NMR(500MHz， D20) ， S (ppm) :5.22(s，lH， CH (C00H) 2) ， 5. 26 (s， 2H， CH2C6H4C1)， ' 94 7. 80(m，8H，2Ar)
0146] (16)2-[l-(3-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二钾盐(Y16) 0147] 收率78%
0148] IR(KBr，cm—0 :2940 (w) ， 1605 (s) ， 1337 (s) ， 746 (m)
0149] 力NMR(500MHz， D20) ， S (ppm) :5.39(s，lH， CH (COOH) 2) ， 5. 43 (s， 2H， CH2C6H4C1)， ' 08 7. 95(m，8H，2Ar)
0150] (17) 2-[1-(3_氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二铵盐(Y17) 0151] 收率71%
0152] IR(KBr，cm—0 :3250 (s) ， 2942 (m) ， 1641 (s) ， 1322 (m) ， 746 (m)
0153] 力NMR(500MHz， D20) ， S (ppm) :5.23(s，lH， CH (COOH) 2) ， 5. 33 (s， 2H， CH2C6H4C1)， i. 76 7. 81(m，8H，2Ar)
0154] (18)2-[l-(3-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二组氨酸盐(Y18) 0155] 收率82%
0156] IR(KBr，cm—0 :3132 (s) ， 2932 (m) ， 1640 (s) ， 1326 (m) ， 742 (m)
0157] 'HNMR(300MHz， D20) ， S (ppm) :3. 10(m，4H，2CH2 of Histidine) ， 3. 81 3. 83 (m， 2H， 2CHNH2C00H of Histidine) ， 5. 16 (s， 1H， CH (COO—) 2) ， 5. 22 (s， 2H， CH2C6H4C1) ， 6. 86 7. 69(m，10H，8H of 2Ar and 2H of 2 Imidazole of Histidine)，8. 32(s，2H，2Imidazole of Histidine) (19)2-[l-(3-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二赖氨酸盐(Y19)
收率91% IR(KBr，cm—0 :2934 (m2) ， 1613 (s) ， ， 1320 (m) ， 1105 (m) ， 741 (m4) 丄HNMR (500MHz ， D20) ， S (ppm) :1.26 1. 34 (m， 4H， 2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine),
1.49 1. 56(m，4H，2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine) ， 1. 72 1. 74 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4of
Lysine) ， 2. 81 2. 86 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4 of Lysine) ， 3. 52 3. 62 (m， 2H， 2CH(NH2) C00H
of Lysine) ， 5. 13 (s， 2H， CH2C6H4C1) ， 5. 21 (s， 1H， CH(C00—) 2) ， 6. 88 7. 76 (m， 8H， 2Ar) (20)2-[l-(4-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二钠盐(Y20) 收率84%
10
IR(KBr，cm—0 :2980 (w) ， 1642 (s) ， 1336 (m) ， 739 (m) 力NMR (500MHz, D20) ， S (ppm) :5. 16(s，2H， CH2C6H4C1) ， 5. 22 (s， 1H， CH(C00H)2)， 6. 92 7. 76(m，8H，2Ar) (21)2-[l-(4-氯-节基)-lH-喷唑-3-氧基]丙二酸 二钾盐(Y21)
收率82% IR(KBr，cm—0 :2982 (w) ， 1636 (s) ， 1325 (m) ， 741 (m) 力NMR(500MHz， D20) ， S (ppm) :5. 18(s，lH， CH (COOH) 2) ， 5. 24 (s， 2H， CH2C6H4C1)，
6. 99 7. 83(m，8H，2Ar) (22)2-[l-(4-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二铵盐(Y22)
收率78% IR(KBr，cm—0 :3232 (s) ， 2985 (w) ， 1612 (s) ， 1323 (m) ， 743 (m) 力NMR(500MHz， D20) ， S (ppm) :5.24(s，lH， CH (COOH) 2) ， 5. 31 (s， 2H， CH2C6H4C1)，
7. 08 7. 96(m，8H，2Ar) (23)2-[l-(4-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二组氨酸盐(Y23)
收率94% IR(KBr，cm—0 :3162 (m) ， 2978 (m) ， 1638 (s) ， 1315 (m) ， 746 (m) ^NMR(500MHz， D20) ， S (卯m) :3. 00 3. 14 (m， 4H， 2CH2 of Histidine) ， 3. 81 3. 85 (m， 2H， 2CHNH2C00H of Histidine) ， 5. 19 (s， 1H， CH (C00—) 2) ， 5. 25 (s， 2H， CH2C6H4C1)， 6.93 7. 71 (m， 10H，8H of 2Ar and 2H of 2 Imidazole of Histidine) ， 812 (s， 2H， 2Imidazole of Histidine) (24)2-[l-(4-氯-苄基)-lH-吲唑-3-氧基]丙二酸 二赖氨酸盐(Y24)
收率93% IR(KBr，cm—0 :2930 (m) ， 1619 (s) ， 1316 (m) ， 1108 (m) ， 740 (s) 丄匪R(500MHz， D20) ， S (ppm) :1.24 1. 32 (m， 4H， 2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine), 1.48 1. 58(m，4H，2H2NC2H4CH2CH2 of Lysine) ， 1. 65 1. 67 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4of Lysine) ， 2. 80 2. 85 (m， 4H， 2H2NCH2CH2C2H4 of Lysine) ， 3. 45 3. 53 (m， 2H， 2CH(NH2) C00H of Lysine) ， 5. 19 (s， 1H， CH(C00—) 2) ， 5. 21 (s， 2H， CH2C6H4C1) ， 6. 95 7. 75 (m， 8H， 2Ar)
典型化合物的活性 选择一些典型化合物进行了体外抗H202致眼晶状体氧化损伤能力的研究。
具体实验如下
1.眼睛晶状体培养 将大鼠、家兔处死，取出眼球用含500u/mL青霉素生理盐水漂洗后，仔细从后路剖 开眼球除去球壁盒和玻璃体，剥离悬韧带，取出晶状体，用含500u/mL青霉素、0. 5mg/mL链 霉素PBS液漂洗5min后，实验前行解剖镜检查，确定晶状体无混浊及其他异常后。置于已 装有2mL DMEM/high glucose (北京赛默飞司尔生物化学制品有限公司商品)灭菌培养液 (含青霉素100u/mL、链霉素0. lmg/mL)的消毒12孔板中，分别加入不同待筛选化合物在温 度37°C ，湿度95 % ， 5 % C02培养箱中预培养lh后，再在各孔中加入2mL含H202及FeCl3 (每 孔总浓度家兔的H202为2% ，大鼠的H202为0. 5% ， FeCl3均为0. 02% )的DEME培养液，每 孔共含4mL培养液，在同等条件下培养24h。试验分为下述几组，分批试验，每批设阴性对照
11组和模型组。 A.阴性对照组不含H202的DMEM培养液。B.模型组(氧化损伤组)含H202、 FeCl3的DMEM培养液。 C.维生素C组除模型组各成分外，另加维生素C(最终浓度为lmmol/L)。 D.苄达赖氨酸(BDL)组(BDL由浙江莎普爱思药业股份有限公司提供，纯度
> 98. 5% ):除模型组各成分外，另加BDL(最终浓度0. 5mmol/L)。E.样品组除模型组各成分外，另加入样品(最终浓度0. 5mmol/L)。 2.形态学观察 培养24h后，观察眼睛晶状体混浊情况，在12孔板下衬以白色底画有不同粗细的 黑色+状背景拍照并计分，分为3个级别
-为正常透明晶体； +为轻度混浊(，1号+字略有模糊，但是可见，2号+字清晰可见)；I度
++为中度混浊(2号+字略有模糊但是可见，3号+字清晰可见)；11度
+++为整个晶体混浊，3号+字不能清晰可见)；III度
3.结果 样品化合物抗H202致体外家兔眼晶状体氧化损伤能力的研究结果见表1 ;样品化 合物抗H202致体外大鼠眼晶状体氧化损伤能力的研究结果见表2。 根据表1 ，对H202致体外家兔眼晶状体氧化损伤有抑制作用的化合物为Y4和YIO，
对H202致体外家兔眼晶状体损伤抑制作用不明显为Yl、 Y2、 Y5和Y19。 根据表2，对^(^致体外大鼠眼晶状体氧化损伤有抑制作用的化合物为Y1、Y4、Y5、
Y14和Y19，对H202致体外大鼠眼晶状体氧化损伤抑制作用不明显为Y2和YIO。 表1 :样品化合物抗H202致体外家兔眼晶状体氧化损伤能力
观察结果各度百分率％评价
—++++++总数一+ (I )度>++ (n即度
A (阴WIS)6161100
B (模型组)263122793367
C (VC组)13162314258
D (BDL组)9127525V
Yl4■75743
Y2232■72971
Y414了216733V
Y52263367
YIO418020
Y1933100 评价标准根据模型组大量试验，将各组产生晶状体混浊各度的百分率和模型组 产生晶状体混浊各度的百分率比作为定义。其中，轻度好转(V ) :++(即11111度)的百 分率％应<67%， + (1度)的百分率％应> 33%;中度好转(V V ) :++(11111度)的百分
12率％进一步降低；并出现0(-)的百分率％;明显好转(V V V ) :++(11111度)及+(I度) 的百分率％消失，晶状体基本透明。
表2 :样品化合物抗H202致体外大鼠眼晶状体氧化损伤能力
观察结果百分率％评价
-+++++总数—(I)度>++ (IIIII)度
849121311871821
B (模型组)15184736116131572
C (VC组)了8183961
D (BDL组)3022555446V
Yl418020V
Y26100
Y4183218614
Y514161783
Y104728786040
Y14108185644V
Y1918104325644V 评价标准根据模型组大量试验，将各组产生晶状体混浊各度的百分率和模型组 产生晶状体混浊各度的百分率比作为定义。其中，轻度好转(V ) :++(即11111度)的百 分率％应<72%， + (1度)的百分率％应> 20%;中度好转(V V ) :++(11111度)的百分 率％进一步降低；并出现0(-)的百分率％;明显好转(V V V ) :++(11111度)及+(I度) 的百分率％消失，晶状体基本透明。
1权利要求
一类含有有机二羧酸基团的化合物，该化合物简略为H2L，其结构通式如下表示其中R为氢原子、C1-3烷基、C1-3烷氧基或卤原子。F2009102126925C0000011.tif
2. 根据权利要求1所定义的含有有机二羧酸基团化合物的二羧酸盐，其特征是结构式 中的二羧酸基团与一价阳离子M形成盐时，该化合物简略为M工，其中，M代表Na+、K+或NH/。
3. 根据权利要求1所定义的含有有机二羧酸基团化合物的二羧酸盐，其特征是结构式 中的二羧酸与氨基酸形成盐时，该化合物简略为4H工，其中，A代表氨基酸，所述氨基酸为 赖氨酸或组氨酸，所述赖氨酸为L型赖氨酸、D型赖氨酸或由L型赖氨酸和D型赖氨酸组成 的外消旋体，所述组氨酸为L型组氨酸、D型组氨酸或由L型组氨酸和D型组氨酸组成的外 消旋体。
4. 根据权利要求1所述含有有机二羧酸基团的化合物的制备方法，其特征在于在碱性条件下同XCH(C02R' )2反应得到<formula>formula see original document page 2</formula>然后在碱性条件下水解，经酸化后得到X代表Cl、 Br或I原子，R为氢原子、(V3烷基、C卜3烷氧基或卤原子，R'为4烷基。
5.根据权利要求4所述含有有机二羧酸基团的化合物的制备方法，其特征在于:<formula>formula see original document page 2</formula>1. 0摩尔份的'在2. 5摩尔份碳酸钾的存在下，在乙二醇二甲醚的溶剂中同1.2摩尔份的XCH(C(^R 回流反应得到z /<formula>formula see original document page 2</formula>然后在氢氧化钾<formula>formula see original document page 3</formula>(或氢氧化钠)溶液中回流水解，用稀盐酸酸化到PH约为2，得到 N'X代表Cl、 Br或I原子，R为氢原子、C卜3烷基、(V3烷氧基或卤原子，R'为C卜4烷基c
全文摘要
本发明提供了一种有机二羧酸和其盐及其制备方法，披露了一些典型有机二羧酸盐化合物具有抗眼晶状体氧化损伤的活性，该类化合物对眼睛的刺激性小于现有治疗药物，并且相关疗效较好。上述有机二羧酸的结构式为。
文档编号A61K31/416GK101704785SQ20091021269
公开日2010年5月12日 申请日期2009年11月16日 优先权日2009年11月16日
发明者冯鲁中, 吴建伟, 张银娣, 朱延勤, 沈宏, 沈建平, 苟少华, 陈德康 申请人:东南大学;南京医科大学;浙江莎普爱思药业股份有限公司