专利名称：肝癌特异性靶向肽a54与阿霉素的偶联物及其偶联方法和应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物医药技术领域中治疗肿瘤的偶联靶向药物及其制备方法和应用， 特别是涉及肝癌特异性靶向肽AM与阿霉素的化学偶联物及其制备方法和应用。
背景技术：
肝癌为我国常见恶性肿瘤之一，全国每年因肝癌死去的人数占世界肝癌死亡总人 数的45%。如何有效地诊断和治疗肝癌一直是全世界特别是中国科学工作者致力于研究和 探索的热点。其中肝癌靶向治疗是非常重要的发展方向。肿瘤靶向治疗就是借助于与肿瘤 高度特异性结合的药物载体，将细胞毒性物质即弹头(如放射性核素、化疗药物、毒素等) 选择性地运送到肿瘤部位，达到定向杀伤肿瘤细胞、同时不伤害正常细胞的治疗目的。靶向 药物的最显著特点，能将药物最大限度地运送到靶区，使药物在靶区浓集，直接作用于病变 组织、器官和细胞，延长药物与靶部位的作用时间，使到达需药部位的药量增加，从而减少 用药量、药物的毒副作用，达到高效低毒的治疗效果。近年来肿瘤靶向治疗在临床应用中还 存在许多有待解决的技术问题，如药物载体的选择以及载体与弹头的偶联方式，这就限制 了肝癌靶向治疗的发展。因此，寻找一种更为安全有效的载体是目前肿瘤靶向治疗的研究 ^^点ο如本发明人在其发明专利(专利号ZL200410017048. X ；发明名称为体内筛选的 肝癌组织特异性粘附肽及其用途)所揭示的，利用体内噬菌体展示肽库技术，筛选到在体 内具有特异性结合能力的肝癌肿瘤组织特异性靶向肽A54，用其取代传统靶向治疗领域中 单克隆抗体的作用，充分利用多肽靶向载体分子量低、免疫原性小的特点，弥补了单克隆抗 体的不足，建立一套切实有效的基于多肽的肝癌鉴定和靶向治疗系统。阿霉素(Doxorubicin)是一种经典的抗生素类广谱抗肿瘤药物，通过与肿瘤细胞 DNA交联，抑制DNA复制，并阻断RNA聚合酶的作用，抑制RNA的合成，从而到达抑制肿瘤生 长的目的，目前已经被广泛地应用于急性淋巴细胞白血病、前列腺癌、肝癌等多种不同肿瘤 的治疗，取得了非常好的治疗效果。但是阿霉素在临床应用中最大的问题就是阿霉素具有 较为明显的骨髓抑制、心肌毒性和神经毒性等毒副作用。在用药的初期往往会出现急性的 心肌毒性，可能很快减轻，但当阿霉素在人体中的累积用量达到500mg/m2的时候就会出现 比较明显的慢性心肌中毒症状，严重危害病人的身体健康，使阿霉素在临床应用时大大受 到限制。本发明公开的阿霉素与特异靶向载体A54的偶联物，不但可以将肿瘤组织局部的 药物浓度显著提高，增强药物对肿瘤的杀伤能力，还可以相应地减少用药量，并减少药物在 非肿瘤组织中的药物分布，明显减轻因阿霉素累积所引起的各种毒副作用，具有十分重要 的应用价值。
发明内容
本发明提供了一种肝癌特异性靶向肽am与阿霉素的偶联物，其结构式为以下结 构式⑴或式⑵
权利要求
1. 一种肝癌特异性靶向肽A54与阿霉素的偶联物，其中，所述偶联物的结构式为结构 式(1)或式(2)
2.如权利要求1所述肝癌特异性靶向肽AM与阿霉素的偶联物，其中，所述阿霉素仅化 学偶联结合在所述肝癌特异性靶向肽A54的中间位点羧基上。
3.如权利要求1所述肝癌特异性靶向肽AM与阿霉素的偶联物，其中，所述阿霉素同时 化学偶联结合在所述肝癌特异性靶向肽A54的末端羧基和中间位点羧基上。
4.制备如权利要求1所述偶联物的化学偶联方法，其中，所述肝癌特异性靶向肽AM与 阿霉素在液相条件进行偶联反应。
5.如权利要求4所述的化学偶联方法，其中，采用Fmoc保护所述肝癌特异性靶向肽 A54的序列末端羧基或中间谷氨酸E的羧基，暴露所述多肽序列中间谷氨酸E的羧基或序列 末端羧基，HoSu活化所述多肽，将其溶解于DMF中，使其序列中间谷氨酸E的羧基或序列末 端羧基与经DMSO溶解的经三乙胺(Et3N)中和的盐酸阿霉素的-NH2进行反应，再哌啶除去 Fmoc，通过制备型HPLC纯化分离，得到偶联产物。
6.如权利要求1所述肝癌特异性靶向肽AM与阿霉素的偶联物在制备治疗肝癌药物中 的应用。
全文摘要
本发明公开了一种肝癌特异性靶向肽A54与阿霉素的偶联物，其中，所述偶联物的结构式为结构式(1)或式(2)，所述肝癌特异性靶向肽A54的氨基酸序列为NH2-AGKGTPSLETTP-COOH；所述阿霉素化学偶联在所述肝癌特异性靶向肽A54的末端羧基和/或中间位点羧基上；所述中间位点羧基是肝癌特异性靶向肽A54序列中的谷氨酸(E)上的羧基。本发明还公开了一种制备该偶联物的化学偶联方法，及该偶联物在制备治疗肝癌药物中的应用。
文档编号A61K47/42GK102125694SQ20101002303
公开日2011年7月20日 申请日期2010年1月20日 优先权日2010年1月20日
发明者任华, 孟娇, 岳苗苗, 杜冰, 钱旻 申请人:华东师范大学