本发明属于天然物提取的技术领域，特别涉及一种从罗汉果渣中提取黄酮的方法。
背景技术：
罗汉果，葫芦科多年生藤本植物的果实。别名拉汗果、假苦瓜、光果木鳖、金不换、罗汉表、裸龟巴，被人们誉为“神仙果”，其叶心形，雌雄异株，夏季开花，秋天结果。主要产于广西壮族自治区桂林市永福县龙江乡、龙胜和百寿等镇，永福县和龙胜县是罗汉果之乡种植历史比较悠久，其中永福种植罗汉果已经有300多年历史，龙胜县种植罗汉果已经有200多年历史，中国百分之九十罗汉果产于永福县和龙胜县，罗汉果是桂林名贵的土特产，也是国家首批批准的药食两用材料之一，其主要功效是能止咳化痰。果实营养价值很高，含丰富的维生素C(每100克鲜果中含400毫克～500毫克)以及糖甙、果糖、葡萄糖、蛋白质、脂类等。
罗汉果味甘性凉，归肺、大肠经，有润肺止咳、生津止渴的功效、适用于肺热或肺燥咳嗽、百日咳及暑热伤津口渴等，此外还有润肠通便的功效。罗汉果为卫生部首批公布的药食两用名贵中药材，其所含罗汉果甜甙比蔗糖甜300倍，不产生热量，是饮料、糖果行业的名贵原料，是蔗糖的最佳替代品。常饮罗汉果茶，可防多种疾病，现代医学证明，罗汉果对支气管炎、高血压等疾病有显著疗效，还是起到防治冠心病、血管硬化、肥胖症的作用。营养价值高，有清热解暑、化痰止咳、凉血舒骨、清肺润肠和生津止渴等功效；可治急慢性气管炎、咽喉炎、支气管哮喘、百日咳、胃热、便秘、急性扁桃体炎等症，糖尿病患者亦宜服用。
在研究初期，人们对罗汉果的价值利用基本局限于提取其甜甙，但足罗汉果中的黄酮类类化合物含量也很高，正在逐渐的被人们大量开始使用始。该类化合物是广泛的存在于自然界，其特点是具有很强的生物活性，在医药、食品等领域均有广泛的应用前景。它也是一种天然的抗氧化剂，因而也在一定程度上可以达到抗袞老、增强机体的免疫能力的效果。黄酮类化合物可以在一定程度上白虎由CCl4引起的肝损伤，对于肿瘤、骨质疏松等疾病的治疗也有一定的效果。黄酮类化合物在具备以上优良特性的同时，还具备以下几类生物活性以及药理作用，包括：保护心脑血管、抗炎症、抗菌、抗过敏、抗病毒等。还有不少黄酮化合物具有两种或两种以上的功效。所以我们在提高罗汉果黄酮提取率有很大的研究空间，也可以使罗汉果内的有效物质能够得到全面的开发和利用。而现有技术中，经过提取罗汉果非黄酮活性成分后得到的罗汉果残渣和煎药后剩下的罗汉果渣作为废物处理，浪费资源，而如何充分利用罗汉果渣资源，提升附加值非常重要。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供从罗汉果渣中提取黄酮的方法，该方法能够制备高纯度的黄酮，且能够充分利用资源。
为实现上述目的，本发明所要解决的技术方案为：
从罗汉果渣中提取黄酮的方法，包括以下制备步骤：取罗汉果渣，烘干，粉碎，加水，放入磁场中处理，超声波提取，离心分离，过滤，浓缩，干燥即可。
为了使罗汉果渣更好得到粉碎，本发明将罗汉果渣烘干至恒重。
本发明粉碎至100～150目。将罗汉果渣粉碎至这样的粒径范围，更有利于后续的制备，且最后得到的黄酮纯度和提取率更高。
本发明加入罗汉果渣重量18～28倍的水。通过后续的磁场中处理，本发明只需要以水作为溶剂，就能够制备高纯度和高提取率的黄酮，不浪费其它溶剂，也有效避免的了溶剂的污染，还大大降低了制备成本。加水量打有利于提高提取率，但是要控制量，水量太大，黄酮提取物浓度太低对后续的过滤和浓缩不利。
本发明加水后，在0.2～0.4T场强中处理2～6min。这样的磁场处理，有利于水作为溶剂提取黄酮，本发明也研究发现，在超声波提取前，将罗汉果渣放入磁场中处理，能够提高罗汉果渣黄酮的纯度和提取率，同时能够提高罗汉果渣黄酮抗氧化和抗癌的生物活性。而超声波提取后再放入磁场中处理时，罗汉果渣的黄酮生物活性受到抑制。
本发明在300～800W功率下超声波提取12～20min。超声波的提取功率与罗汉果渣黄酮密切相关，提高提取功率有利于黄酮物质的溶出，但是过高，不利于部分黄酮类物质的溶出，降低提取率，增大损失。一般情况下，超声波提取时间越长越有利于提高提取率，但是过长，大分子物质大量进入粗提取物中，影响黄酮的纯度。
本发明在35～45℃下进行超声波提取。一定范围内，温度越高，越有利于黄酮的溶出，提高提取率，但是温度过高会破坏有效成分，而在这样的温度范围内提取，条件温和，有效保护黄酮有效成分的同时，有利于加快提取速度。
本发明在6000～8000r/min转速下离心分离3～6min。离心分离有利于罗汉果渣黄酮的纯化，提高提取率。
本发明浓缩至25℃下相对密度为1.2～1.3的浸膏。在这个相对密度范围内，有利于后续的干燥。
本发明真空冷冻干燥。本发明采用真空冷冻干燥，有利于加速干燥，缩短干燥时间，且不会有效保护黄酮的生物活性。
通过本发明方法从罗汉果渣中提取黄酮可以变废为宝，充分利用资源，有利于罗汉果的全面开发和利用，制备得到的黄酮具有高纯度和高提取率，且得到的黄酮的具有较高的抗氧化和抗癌活性，经试验，本发明方法制备得到的黄酮，DPPH抑制率达到75.6～82.8％，ABTS+抑制率62.5～88.4％；用于治疗已经注射小鼠肉瘤S180腹水型瘤株的小鼠，平均存活天数相比不使用药物治疗的已经注射小鼠肉瘤S180腹水型瘤株的小鼠多56～68天。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
实施例1
从罗汉果渣中提取黄酮的方法，包括以下制备步骤：取罗汉果渣，烘干至恒重，粉碎至100目，加入罗汉果渣重量28倍的水，在0.2T场强中处理6min，在300W功率和35℃温度下超声波提取12min，在8000r/min转速下离心分离3min，过滤，浓缩至25℃下相对密度为1.3的浸膏，真空冷冻干燥即可，经HPLC检测，黄酮的纯度为98.8％，经计算，提取率为89.9％。
实施例2
从罗汉果渣中提取黄酮的方法，包括以下制备步骤：取罗汉果渣，烘干至恒重，粉碎至110目，加入罗汉果渣重量25倍的水，在0.3T场强中处理5min，在400W功率和45℃温度下超声波提取14min，在7500r/min转速下离心分离4min，过滤，浓缩至25℃下相对密度为1.28的浸膏，真空冷冻干燥即可，经HPLC检测，黄酮的纯度为96.9％，经计算，提取率为90.3％。
实施例3
从罗汉果渣中提取黄酮的方法，包括以下制备步骤：取罗汉果渣，烘干至恒重，粉碎至120目，加入罗汉果渣重量23倍的水，在0.4T场强中处理4min，在500W功率和40℃温度下超声波提取16min，在7000r/min转速下离心分离5min，过滤，浓缩至25℃下相对密度为1.25的浸膏，真空冷冻干燥即可，经HPLC检测，黄酮的纯度为97.9％，经计算，提取率为89.6％。
实施例4
从罗汉果渣中提取黄酮的方法，包括以下制备步骤：取罗汉果渣，烘干至恒重，粉碎至130目，加入罗汉果渣重量20倍的水，在0.2T场强中处理3min，在700W功率和40℃温度下超声波提取18min，在6500r/min转速下离心分离6min，过滤，浓缩至25℃下相对密度为1.22的浸膏，真空冷冻干燥即可，经HPLC检测，黄酮的纯度为98.7％，经计算，提取率为88.7％。
实施例5
从罗汉果渣中提取黄酮的方法，包括以下制备步骤：取罗汉果渣，烘干至恒重，粉碎至150目，加入罗汉果渣重量18倍的水，在0.4T场强中处理2min，在800W功率和35℃温度下超声波提取20min，在6000r/min转速下离心分离3min，过滤，浓缩至25℃下相对密度为1.2的浸膏，真空冷冻干燥即可，经HPLC检测，黄酮的纯度为96.5％，经计算，提取率为91.3％。
实施例6
在0.3T场强中处理，其它步骤参数同实施例3，经HPLC检测，黄酮的纯度为98.8％，经计算，提取率为90.1％。
实施例7
在0.2T场强中处理，其它步骤参数同实施例3，经HPLC检测，黄酮的纯度为97.8％，经计算，提取率为89.8％。
对比例1
从罗汉果渣中提取黄酮的方法，包括以下制备步骤：取罗汉果渣，烘干至恒重，粉碎至120目，加入罗汉果渣重量23倍的水，在500W功率和40℃温度下超声波提取16min，在0.4T场强中处理4min，在7000r/min转速下离心分离5min，过滤，浓缩至25℃下相对密度为1.25的浸膏，真空冷冻干燥即可，经HPLC检测，黄酮的纯度为65.5％，经计算，提取率为53.7％。
对比例2
从罗汉果渣中提取黄酮的方法，包括以下制备步骤：取罗汉果渣，烘干至恒重，粉碎至120目，加入罗汉果渣重量23倍的水，在500W功率和40℃温度下超声波提取16min，在0.3T场强中处理4min，在7000r/min转速下离心分离5min，过滤，浓缩至25℃下相对密度为1.25的浸膏，真空冷冻干燥即可，经HPLC检测，黄酮的纯度为66.7％，经计算，提取率为55.2％。