一种包载抗癌药物和金纳米粒脂质纳米载体及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药科技领域，具体涉及共同包载抗癌药物和金纳米粒脂质纳米载体 及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 金纳米棒由于其独特的光学及物理化学的性质，在肿瘤热疗方面的应用已成为科 学研究关注的热点。随着金纳米棒长径比的变化，可从可见光区到近红外光区调控，而近红 外光区域波长范围是机体组织的透射窗口，为利用金纳米棒通过吸收近红外光而产生热量 来杀死肿瘤细胞提供了理论依据。金纳米棒在激光的照射下，可以吸收近红外低能辐射，使 其内部产生电子跃迀而形成不稳定电子-空穴对，等电子-空穴对重排恢复到稳定状态时 就能够产生大量的热。产生的热量能够使癌细胞温度升高，可有效杀死肿瘤细胞，达到治疗 肿瘤的目的。
[0003] 脂质纳米载体是近年来研究较多的一种新型药物载体，其具有磷脂双分子层，与 生物膜双分子层结构类似，能够包载脂溶性、水溶性药物和热疗剂等。脂溶性药物包载到脂 质体中后，能够增加药物的溶解度，延长药物的作用时间，而且还可以改变药物在体内的分 布，大大提高了肿瘤组织中的药物浓度。将特定靶向肿瘤细胞的受体配基或抗体修饰脂质 纳米载体，可将包载于其中的药物和热疗剂等靶向输送到肿瘤组织发挥药效。
[0004] 对比文件（CN103768600A)公开了一种磁性热敏脂质体纳米金复合物，所述复合 物是将热敏脂质体包裹Fe3O4磁性纳米粒子和化疗药物后，再负载金纳米粒制备而成；该 专利主要应用了物理靶向（磁性）递送药物和热敏材料，其生物相容性差，且靶向效率低，因 此治疗效果不明显和安全性低。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于克服肿瘤单一治疗的缺点，提供一种基于靶向肿瘤细胞共同包 载抗癌药物和热疗剂脂质纳米载体的构建方法，该脂质纳米载体可发挥肿瘤靶向化学治疗 和热疗联合或协同治疗肿瘤的作用，可降低抗癌药物的毒副作用，提高抗肿瘤效应。本发明 的制备工艺简单、脂质纳米载体稳定性好。
[0006] 本发明目的是通过以下技术方案实现的： 本发明的包载抗癌药物和金纳米粒脂质纳米载体，脂质纳米载体内包载有金纳米粒和 抗癌药物，所述的包载抗癌药物和金纳米粒脂质纳米载体表面修饰有功能性分子和(或）高 分子聚合物。
[0007] 所述金纳米粒的长径比为1:1~8:1，平均粒径为lnm~100nm，近红外光照射其溶液 温度可升高到25°C~80°C。
[0008] 所述的抗癌药物为紫杉醇、多西紫杉醇、阿霉素、表阿霉素、柔红霉素、伊达比星、 吡柔比星、戊柔比、米托蒽醌、喜树碱、羟基喜树碱中的一种或两种以上。
[0009] 所述的包载抗癌药物和金纳米粒脂质纳米载体，其中包载抗癌药物和金纳米粒脂 质纳米载体为脂质体和固体脂质纳米粒，平均粒径为20nm~500nm。
[0010] 所述的功能性分子包括能与肿瘤细胞表面表达的特异性抗体、配体结合的配 体、抗体和核酸适配体中的一种或多种，所述高分子聚合物聚乙二醇，平均分子量为 1000-5000〇
[0011] 所述的功能性分子为RLT多肽、叶酸、RGD多肽、TAT多肽、NGR多肽、SL2B核酸适 配体等中的一种。
[0012] 本发明的包载抗癌药物和金纳米粒脂质纳米载体的制备方法如下：将脂质类材料 和药物等超声溶解在有机溶剂中，减压旋转蒸发挥去有机溶剂，在圆底烧瓶内形成透明薄 膜，加入金纳米棒水溶液，继续旋转水化、超声，之后将其离心，弃去沉淀，再向其中加入功 能性分子，室温摇床振荡反应，得到载抗癌药物和金纳米粒脂质纳米载体。
[0013] 本发明所述的包载抗癌药物和金纳米粒脂质纳米载体具有肿瘤靶向化学治疗和 热疗联合或协同治疗肿瘤的作用。
[0014] 采用脂质纳米载体共同包载抗癌药物和金纳米粒，之后再用靶向肿瘤细胞的功能 性分子如与肿瘤细胞表面表达的特异性抗体、配体结合的配体、抗体和核酸适配体等修饰， 可将抗癌药物和金纳米粒靶向递送到肿瘤细胞，发挥肿瘤靶向化学治疗和热疗联合或协同 治疗肿瘤的作用。
[0015] 本发明的脂质纳米载体表面修饰有高效靶向和具有良好生物相容性的功能性分 子和(或）高分子聚合物，能显著增强肿瘤靶向效率，提高肿瘤热疗化疗联合治疗的效率，并 降低其对正常组织器官的毒副作用，安全性高。
[0016] 本发明的优点是：本发明利用了抗癌药物的化疗作用和金纳米粒的热疗特性，实 现了肿瘤靶向化学治疗和热疗联合或协同治疗肿瘤的作用。将抗癌药物和金纳米粒共同包 载于脂质纳米载体，提高了药物和金纳米粒的稳定性，靶向功能分子修饰后又增强了其肿 瘤靶向性和肿瘤细胞的摄取率。因此，克服了传统单一化疗特异性差，毒副作用大，选择性 低的缺点。本发明的制备工艺简单、脂质纳米载体稳定性好，有望成为一种新的治疗方法应 用于癌症的临床治疗。
【附图说明】
[0017] 图1为金纳米棒的透射电镜图； 图2为金纳米棒光谱图及其在激光照射下对应的温度变化趋势； 图3为AuNRs/DTXLNC-RLT的透射电镜图； 图4为AuNRs/DTXLNC-RLT的体外释放特征； 图5为AuNRs/DTXLNC-RLT的升温实验； 图6为AuNRs/DTXLNC-RLT对PC-3肿瘤细胞增殖的抑制作用。
【具体实施方式】
[0018] 将胆固醇、大豆磷脂、氢化磷脂、抗癌药物、DSPE-PEG(2000)-Mal超声溶解在氯仿 中，减压旋转蒸发挥去氯仿，在圆底烧瓶内形成透明薄膜，加入4ml金纳米棒水溶液，继续 旋转水化，水化完全后再超声溶解，在超声波细胞粉碎机中冰浴探超40次，将其在8000r/ min条件下离心lOmin，弃去沉淀，再向其中加入功能性分子水溶液，祸旋lmin，室温摇床振 荡反应12h，得到包载抗癌药物和金纳米粒脂质纳米载体，具体实例如下表，但不限于此。
[0019] 现以临床上常用的多西紫杉醇（DTX)和低密度脂蛋白肽（RLT)为例，阐述具体实 施方式。
[0020] 金纳米粒的制备 金纳米粒种子的制备：将浓度为0. 2mol/L的十六烷基三甲基溴化铵水溶液置于 25~26°C恒温水浴锅中，并向其中加入浓度为5XIO4moVL的氯金酸水溶液，搅拌混 合均匀后溶液变为棕黄色，再向上述溶液中加入浓度为0. 〇lmol/L的冰的硼氢化钠水溶 液，快速搅拌2min后静置于该温度下的水浴锅中，得到茶色的金纳米粒种子溶液。其中， 十六烷基三甲基溴化铵的水溶液、氯金酸的水溶液和硼氢化钠的水溶液混配的摩尔比为 1:0. 0025:0. 006。
[0021] 生长液的制备：在25~26°C恒温水浴锅中置入浓度为0. 2mol/L的十六烷基三甲 基溴化铵水溶液，加入浓度4X10 3mol/L的硝酸银水溶液，搅拌均匀后再向其中加入浓度 为IX10 3mol/L的氯金酸水溶液，搅拌均匀溶液由无色变为棕黄色，再向该混合溶液中加 入浓度为〇. 〇788mol/L的抗坏血酸水溶液，快速搅拌至该混合溶液变为无色，