溶液，每个稀释溶剂平行制备3份，观察所得溶液的性状，测定结果见表3。
[0067]表3稀释溶剂中乙醇浓度的选择测定结果（η= 3)
[0068]
[0069] 由表3可知，当稀释溶剂中乙醇的浓度小于15%时，葡萄糖基化丙泊酚不能完全 溶解，溶液浑浊；当稀释溶剂中乙醇的浓度为15%或15%以上时，葡萄糖基化丙泊酚能完 全溶解，溶液澄清，略有乳光。因此，将稀释溶剂中乙醇的浓度优选为15%。
[0070] (4)称取1，2-丙二醇、聚乙二醇400适量，加水溶解并稀释制成分别含1，2-丙二 醇与聚乙二醇400浓度各为2. 5%、浓度各为5%、浓度各为7. 5%、浓度各为10%、浓度各 为12. 5%、浓度各为15%、浓度各为17. 5%、浓度各为20%和浓度各为22. 5%的溶液，作为 稀释溶剂。
[0071] 精密称取葡萄糖基化丙泊酚适量，加稀释溶剂溶解并稀释制成浓度为25mg/mL的 溶液，每个稀释溶剂平行制备3份，观察所得溶液的性状，测定结果见表4。
[0072]表4稀释溶剂中混合溶剂（1，2-丙二醇与聚乙二醇400的混合溶剂）浓度的选择 测定结果（η= 3)
[0073]
[0074]由表4可知，当稀释溶剂中1，2-丙二醇与聚乙二醇400的浓度均小于15%时，葡 萄糖基化丙泊酚不能完全溶解，溶液浑浊；当稀释溶剂中1，2-丙二醇与聚乙二醇400的浓 度各为15%或15%以上时，葡萄糖基化丙泊酚能完全溶解，溶液澄清。因此，将稀释溶剂中 1，2-丙二醇与聚乙二醇400的浓度均优选为15%。
[0075] 实施例2、葡萄糖基化丙泊酚注射剂的制备
[0076] (1)葡萄糖基化丙泊酚注射剂A
[0077] 葡萄糖基化丙泊酚 25. 0g
[0078] 1，2-丙二醇 300g
[0079] 灭菌注射用水 1000mL
[0080] 制备：称取1，2-丙二醇300g，加灭菌注射用水1000mL，搅拌混匀，制得稀释溶剂。 称取葡萄糖基化丙泊酚25. 0g，加入稀释溶剂，超声溶解，所得溶液经0. 22μm的微孔滤膜 过滤，滤液灌封于安瓿中，每支10mL，即得葡萄糖基化丙泊酚注射剂A，规格为10mL:250mg。
[0081] (2)葡萄糖基化丙泊酚注射剂B
[0082] 葡萄糖基化丙泊酚 25. 0g
[0083]吐温 80 20. 0g
[0084] 灭菌注射用水 1000mL
[0085] 制备：称取吐温8020. 0g，加灭菌注射用水1000mL，搅拌混匀，制得稀释溶剂。称 取葡萄糖基化丙泊酚25. 0g，加入稀释溶剂，搅拌过夜使溶解，所得溶液经0. 22μm的 微孔滤膜过滤，滤液灌封于安瓿中，每支10mL，即得葡萄糖基化丙泊酚注射剂B，规格为 10mL:250mg〇
[0086] (3)葡萄糖基化丙泊酚注射剂C
[0087] 葡萄糖基化丙泊酚 25. 0g
[0088]乙醇 150g
[0089] 灭菌注射用水 - 1000mL
[0090] 制备：称取乙醇150g，加灭菌注射用水1000mL，搅拌混匀，制得稀释溶剂。称取葡 萄糖基化丙泊酚25.Og，加入稀释溶剂，超声溶解，所得溶液经0. 22μm的微孔滤膜过滤，滤 液灌封于安瓿中，每支10mL，即得葡萄糖基化丙泊酚注射剂C，规格为10mL:250mg。
[0091] (4)葡萄糖基化丙泊酚注射剂D
[0092]
[0093] 制备：称取1，2-丙二醇150g、聚乙二醇400150g，加灭菌注射用水1000mL，搅拌混 匀，制得稀释溶剂。称取葡萄糖基化丙泊酚25. 0g，加入稀释溶剂，搅拌过夜溶解，所得溶液 经0. 22μm的微孔滤膜过滤，滤液灌封于安瓿中，每支10mL，即得葡萄糖基化丙泊酚注射剂 D，规格为 10mL:250mg。
[0094] 实施例3、葡萄糖基化丙泊酚注射剂的药动学研究
[0095] 参照相关指导原则，将建立一种新的液相色谱-高分辨质谱联用方法，用以测定 大鼠血浆中丙泊酚的血药浓度，并进行方法学验证，验证内容包括基质效应、专属性、最低 检测浓度、标准曲线与定量范围、定量下限、精密度、回收率、稳定性等。之后通过对大鼠尾 静脉给药，分别给予丙泊酚脂肪乳剂型注射剂和两种葡萄糖基化丙泊酚溶液型注射剂，用 建立的方法测定大鼠体内的丙泊酚血药浓度，获得药-时曲线，并计算药物动力学参数，t匕 较葡萄糖基化丙泊酚溶液型注射剂与丙泊酚脂肪乳剂型注射剂在药动学上的差异。
[0096] 本实施例中所用的实验制剂：
[0097] 实施例2中制备的葡萄糖基化丙泊酚溶液型注射剂A(按丙泊酚计，规格为10mg/ mL，含 30% 1,2-丙二醇，批号 20131201-1);
[0098] 实施例2中制备的葡萄糖基化丙泊酚溶液型注射剂B(按丙泊酚计，规格10mg/mL， 含2%吐温80,批号20131201-2);
[0099] 参比制剂：丙泊酚脂肪乳剂型注射剂（商品名得普利麻，批号KA409,规格10mg/ mL)来自阿斯利康公司；丙泊酸对照品（propofol，批号100806-200801)、内标物麝香草酉分 对照品（thymol，批号100508-200902)均来自中国食品药品检定研究院；甲醇、乙腈均为色 谱级；1，2-丙二醇、吐温80为分析纯；水为纯净水。
[0100] 本实施例中所用的主要仪器：
[0101] 美国Thermo公司高效液相色谱-串联四极杆-轨道阱质谱联用仪，高效液相色谱 仪为DI0NEXUltiMate3000系统（配有输液泵、自动进样器、柱温箱），质谱仪为Q-Exactive 四极杆-轨道阱高分辨质谱仪（配有大气压化学离子源）；德国sartorius公司CP22f5D型 电子天平；德国IKA公司MSIMinishaker型涡旋震荡器；美国Thermo公司S0RVALLLEGEND MICR017型微量台式离心机。
[0102] 本实施例中所用的实验动物：
[0103] 成年健康SD大鼠24只，雌雄各半，体重270 ±20g，购于北京维通利华实验动物技 术有限公司，动物合格证号：SCXK(京）2012-0001。
[0104] 1、丙泊酚血药浓度测定方法的建立
[0105] 色谱条件
[0106] 色谱柱：ShisheidoCapcellPakC18MG(150mmX2. 0mm，5μm);预柱：Shisheido CapcellC18MG(10mmX2.0mm，5ym);流动相：水-甲醇（20:80，v/v);柱温：30°C;流速： 0. 2mL/min;进样量 5μL。
[0107] 质谱条件
[0108]Q-Exactive四极杆-轨道阱高分辨质谱仪，大气压化学离子源（APCI源），放电电 流4. 0μA，源温400°C，鞘气流速40arb，辅助气流速20arb，毛细管温度350°C，S-lens55V， 负离子检测，扫描方式采用选择离子监测（S頂）方式，m/z= 177. 1274(丙泊酚），m/z= 149. 0961 (麝香草酚，内标）。
[0109] 丙泊酚对照品溶液的制备
[0110]精密称取丙泊酚对照品25mg，置100mL量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇 匀，作为丙泊酚储备液（含丙泊酚250μg/mL)，取丙泊酚储备液适量，用乙腈稀释制成 浓度分别为 〇· 1yg/mL、0. 5μg/mL、5. 0μg/mL、10. 0μg/mL、20. 0μg/mL、50. 0μg/mL和 100. 0μg/mL的溶液，作为丙泊酚对照品溶液。
[0111] 内标溶液的制备
[0112] 精密称取麝香草酚对照品10mg，置100mL量瓶中，加乙腈溶解并稀释至刻度，摇 匀，精密量取10mL，置100mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，精密量取10mL，置200mL量 瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液（含麝香草酚0. 5μg/mL)。
[0113] 血浆样品的处理
[0114] 精密量取血浆样品200μL，置1. 5mLEP试管中，加入内标溶液800μL，涡旋混合 30s，以12000rpm离心15min，取上清液500μL，加乙腈-水（1:1) 500μL，混匀，即得。
[0115]2、丙泊酚血药浓度测定方法验证
[0116] ⑴基质效应
[0117]取 1. 5mLΕΡ试管数支，分别加入浓度为 1. 0μg/mL、20. 0μg/mL和 100. 0μg/ mL的丙泊酚对照品溶液各20μL，每个浓度各做6份，再分别加入6只大鼠的空白血浆各 200μL，按上述血浆样品处理方法操作，所得溶液按上述色谱条件和质谱条件进行HPLC-MS 分析，记录色谱图，分别测定丙泊酚峰面积（记为Asl)和内标麝香草酚峰面积（记为Ail)， 计算比值fl=Asl/Ail。
[0118] 另取1. 5mLEP试管数支，分别加入浓度为1. 0μg/mL、20. 0μg