Penicillactones C在制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用
【技术领域】
[0001 ] 本发明设及化合物化nicillactones C的新用途，尤其设及化nicillactones C在 制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 肝纤维化是慢性肝损伤向肝硬化发展的动态过程，过去的20年间，肝纤维化的研 究取得了长足进展，证实肝纤维化与一定程度的肝硬化都是可逆的。近年来陆续出现了一 些抗肝纤维化治疗方法，包括化学药、生物制剂、中药与基因疗法等，但是理想的临床治疗 手段仍然缺乏，目前防治肝纤维的关键是针对与肝星状细胞激活相关的环节，主要是:减轻 肝损伤;抑制星状细胞激活，减少细胞外基质产生；调节细胞因子素乱，促进活化肝星状细 胞调亡。
[0003] 本发明设及的化合物Penicillactones C是一个2013年发表（Yunbao Liu，et al.,Structures and Absolute Configurations of Penicillactones A C from an Endophytic Microorganism,Penicilliumdangeardii Pitt.ORGANIC LETTERS,2013，15 (20)5206-5209.)的新化合物，该化合物拥有全新的骨架类型（Yunbao Liu, et al.， Structures and Absolute Configurations of Penicillactones A C from an Endophytic Microorganism,Penicilliumdangeardii Pitt.ORGANIC LETTERS,2013，15 (20)5206-5209.)，本发明设及的化nicillactones C在制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物 中的用途属于首次公开。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于根据现有化nicillactones C研究中未发现其具有抑制肝脏成 纤维细胞增殖活性的报道的现状，提供了化nicillactones C在制备抑制肝脏成纤维细胞 增殖药物中的应用。
[000引所述化合物化nicillactones C结构如式（I)所示：
[0006]
[0007] 所述Pen i C i 11 ac tone S C在抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用， Penicillactones巧Φ制成纤维细胞NIH/3T3增殖。
[0008] -种抑制肝脏成纤维细胞增殖药物，由Penicillactones C为活性成分添加辅料 制备而成，制备方法为取5克化合物化nicillactones C，加入糊精195克，混匀，常规压片制 成1000片。
[0009] -种抑制肝脏成纤维细胞增殖药物，由Penicillactones C为活性成分添加辅料 制备而成，制备方法为取5克化合物化nicillactones C，加入淀粉195克，混匀，装胶囊制成 1000粒。
[0010] 本发明对化nicillactones巧Φ制肝脏成纤维细胞增殖作用进行了药理试验。活 化的肝星状细胞化SC)具有成纤维细胞特征，NIH/3T3细胞是研究药物抗肝纤维化活性常用 的细胞模型。本研究WNIH/3T3成纤维细胞为祀细胞，观察发明药物对其增殖的影响。用MTT 法检测的抑制细胞增殖的试验结果表明，本发明药物对NIH/3T3的细胞增殖有显著的抑制 活性。结果证明化nici 1 lactones C具有抗肝纤维化作用。
【具体实施方式】
[0011] 本发明所设及化合物Penicillactones C的制备方法参见文献（Yunbao Liu,et al.,Structures and Absolute Configurations of Penicillactones A C from an Endophytic Microorganism,Penicilliumdangeardii Pitt.ORGANIC LETTERS,2013，15 (20)5206-5209.)
[0012] W下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加 W限定。
[0013] 实施例1:本发明所设及化合物化nicillactones C片剂的制备：
[0014] 取5克化合物化nicillactones C，加入糊精195克，混匀，常规压片制成1000片。 [001引实施例2:本发明所设及化合物化nicillactones C胶囊剂的制备：
[0016] 取5克化合物化nicillactones C，加入淀粉195克，混匀，装胶囊制成1000粒。
[0017] 下面通过药效学实验来进一步说明其药物活性。
[0018] 实验例一:采用MTT法评价化合物化nicillactones C对肝纤维化的抑制作用
[0019] 1、方法：NIH/3T3细胞株购自引自ATCC(American Type CulUire Collection)的 中科院上海细胞所细胞库。将对数生长期的亚融合的NIH/3T3细胞用0.25%膜酶消化，洗 涂，离屯、后，用DMEM培养液(含10%FCS)制成lXl〇4cell/ml的细胞悬液，台吩蓝染色鉴定存 活率大于95%，按每孔lOOul加入96孔板中，在37°C、5%C〇2培养2地同步处理后，弃上清，加 入含有不同稀释浓度药物的培养液(含10%FCS)200ul，培养4她，每孔加入MTT溶液解 育4h。弃去培养液，加入150U1DMS0，振荡10分钟，使结晶溶解，酶标仪490nm处读取0D值，结 果W 0〇49日表不。
[0020] 2.结果：
[0021] 2.1形态学观察
[0022] NIH/3T3在用药前伸展良好，折光性较弱，有方向性，呈放射状，细胞增殖的速度 快;而加药物24h后，成纤维细胞数目减少，形状变得不规则，突起变短，细胞排列混乱，细胞 内代谢产物增多。
[0023] 表1 :MTT法检测本发明药物对NIH/3T3增殖的抑制作用
[0024]
[002引注：与细胞阴性对照比较冲<0.05 ;*冲<0.01
[0026] 结果:本发明药物在10ug/ml-40ug/ml的浓度范围内对成纤维细胞NIH/3T3在10% 小牛血清的刺激下的细胞增殖有显著的抑制作用。表明本发明药物体外对纤维细胞的增殖 有显著抑制作用。
[0027] 实验例2:本发明药物对转化生长因子-&(TGF-i3i)诱导的成纤维细胞增殖的抑制 作用
[002引 TGF-βι是促进细胞增殖和胶原生成的强活性因子，在细胞中加入TGF-MOng/ml刺 激细胞增殖，在检测药物对TGF-m诱导的细胞增殖的抑制作用，W分析判断本发明药物的 作用机理。
[0029] 表2 :MTT法检测本发明药物对TGF诱导NIH/3T3增殖的抑制作用
[0030]
[0031 ] 注:*，与细胞+TGF对照P<0.05; **，与细胞+TGF对照P<0.01
[0032] 结果:本发明药物在10-40ug/ml两个浓度区间内对成纤维细胞NIH/3T3在TGF-m 的诱导下的细胞增殖有显著的抑制作用。表明本发明药物体外对纤维细胞增殖的抑制作用 可能是通过干预TGF信号通路实现的。
[0033] 由上述实施例表明，本发明对成纤维细胞NIH/3T3在10%小牛血清的刺激下的细 胞增殖有显著的抑制作用;Penicillactones C对成纤维细胞NIH/3T3在TGF-βΙ的诱导下的 细胞增殖有显著的抑制作用。由此证明，Penicillactones C可W明显抑制肝纤维化的发生 和发展，可用于制备抗肝纤维化、防治肝硬化的药物。
【主权项】
1. Penicil lactones C在抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用，所述化合物 Penicillactones C结构如式（I)所示：2. 如权利要求1所述Penicillactones C在抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用，其 特征在于Penicillactones C抑制成纤维细胞NIH/3T3增殖。3. -种抑制肝脏成纤维细胞增殖药物，其特征在于由权利要求1所述Penicillactones C为活性成分添加辅料制备而成，制备方法为取5克化合物Penicillactones C,加入糊精 195克，混匀，常规压片制成1000片。4. 一种抑制肝脏成纤维细胞增殖药物，其特征在于由权利要求1所述Penicillactones C为活性成分添加辅料制备而成，制备方法为取5克化合物Penicillactones C，加入淀粉 195克，混匀，装胶囊制成1000粒。
【专利摘要】本发明公开了Penicillactones？C在制备治疗肝纤维化药物的用途。药理试验证明，Penicillactones？C可以明显抑制肝纤维化的发生和发展，可用于制备抗肝纤维化、防治肝硬化的药物，Penicillactones？C属于全新的骨架类型，而且其对于肝脏成纤维细胞增殖抑制活性强，具备突出的实质性特点，同时用于抗肝脏成纤维细胞增殖显然具有显著的进步。
【IPC分类】A61P1/16, A61K31/365
【公开号】CN105456254
【申请号】CN201510962308
【发明人】田丽华
【申请人】淄博齐鼎立专利信息咨询有限公司
【公开日】2016年4月6日
【申请日】2015年12月18日