一株贪铜菌及其在金合成中的应用的制作方法
【专利摘要】一株贪铜菌及其在金合成中的应用，属于微生物【技术领域】。该菌株分离于大连理工大学牛角山泥土样品，2014年6月4日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCCNo.9266。该菌株SHE为革兰氏阴性菌，菌体为短杆状，经16SrRNA基因序列测定，其与Cupriavidussp.具有最高的相似性，因此该菌分类命名为Cupriavidussp.SHE，菌株16SrRNA基因序列的GenBank登录号为KJ875863。该菌株具有合成金颗粒的能力，可催化氯金酸合成不同形态及尺寸的金颗粒，显示了其在金合成领域具有潜在的应用价值。
【专利说明】一株贪铜菌及其在金合成中的应用 【技术领域】
[〇〇〇1] 本发明涉及一株贪铜菌及其在金合成中的应用，属于微生物【技术领域】。 【背景技术】
[0002] 随着工业化进程的发展，传统矿石资源的需求持续增加，从而导致矿山的开采力 度随之增强。目前世界上矿产资源原矿品位下降严重，嵌布的粒度也越来越小。因此，对 于低品位、尾矿以及难处理矿产的进一步开发利用成为了目前冶金领域的一个重要研究方 向。相比于传统的物化冶金技术，微生物冶金不仅具有过程简单、环境友好无污染等优点， 在对低品位矿石中的金属回收、难开发矿石的预处理以及矿区的尾矿污染治理等方面具有 潜在的优势。在目前流行的生物氧化提金技术中，关键步骤是利用微生物还原吸附的络合 金粒子，实现变废为宝，该领域正成为国内外的研究热点。
[0003] 目前已有较多关于微生物或其代谢产物还原Au7Au3+络合物生成单质金的报道。 He等人利用可将氯金酸（HAuC14)中的Au3+还原为不同大 小和形貌的金纳米颗粒；Nangia等对细菌的Au3+还原 机理进行了考察，认为该还原过程是由依赖于辅酶NADPH的还原酶实现的；Xie等人发现 牛血清蛋白可在室温下对Au 3+进行还原从而生成纳米金颗粒。然而已有报道中，绝大多 数微生物所介导的Au7Au3+还原反应生成的金颗粒均为纳米级大小（直径小于200 nm)， 并不利于实际废水中金的回收，因此获取可直接合成大粒径金颗粒的菌株具有重要意义。 2006年Science上一篇报道指出CH34 (随后被重新鉴定为 Copriariofe 可以将HAuC14中的Au3+还原为肉眼可见的24 K纯金，首次 证明微生物能直接合成金颗粒，但相关研究屈指可数，特别是国内对该领域的相关研究十 分匮乏。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一株贪铜菌及其在金合成中的应用，该菌株可以催化 碰11(：1 4合成不同形态的金颗粒，在金合成领域中具有重要应用价值。
[0005] 本发明所涉及一株贪铜菌（拉丁文分类命名sp. SHE)，所述菌株 的登记入册编号为CGMCC No. 9266,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中 心，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日 期为2014年6月4日。所述贪铜菌是革兰氏阴性菌，菌体为短杆状，其16S rRNA基因序 列的Genbank登录号为KJ875863。
[0006] 所述菌株筛选自大连理工大学牛角山泥土样品，菌株的培养条件：LB培养基的组 成为NaCl 10 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L、pH 7.0;将100 mL培养基于121°C高温 高压灭菌20 min，在30°C，150 rpm条件下培养菌株至对数中后期。
[0007] 所述的一株贪铜菌株应用于金颗粒的合成。
[0008] 本发明的有益效果是：一株贪铜菌分离自大连理工大学牛角山泥土样品，其对金 颗粒具有较好的合成能力，该菌株SHE在HAuC14浓度为0. 1-5 mM条件下均能够合成金颗 粒，因此该菌株在金合成领域具有一定的应用潜力。
[0009] 【专利附图】
【附图说明】
[〇〇1〇] 图1贪铜菌株SHE扫描电镜图片。
[0011] 图2贪铜菌株SHE的系统发育树。
[0012] 图3贪铜菌株SHE的在LB培养基中的生长曲线。
[0013] 图4不同HAuC14浓度下SHE合成金颗粒紫外全波扫描图。
[0014] 图5贪铜菌株SHE合成金颗粒的透射电镜表征。
[0015] 图6不同HAuC14浓度下SHE合成金颗粒的质量。
[0016] 【具体实施方式】
[0017] 实施例1 :本发明菌株的获得 本发明有关一株贪铜菌SHE，2014年于大连理工大学牛角山上的泥土样品经过反复的 平板稀释涂布法，将样品涂布在无机盐（(NH4)2S04 2. 0 g/L、KH2P04 2. 0 g/L、Na2HP0412H20 3. 28 g/L、FeCl3 0. 00025 g/L、吲哚 100 mg/L)平板上，30 °C，150rpm 条件下培养获得菌 液。菌株SHE的细胞形态为短杆状，大小为0.5 μ m左右，扫描电镜照片如图1。
[0018] 实施例2 :菌株的16S rRNA分子鉴定 提取贪铜菌SHE的基因组DNA，通过PCR扩增16S rRNA基因序列，利用BLAST程序对序 列进行同源对比，得到与其最相近的菌种为贪铜菌，二者16S rRNA基因序列相似性为99%， 因此判定SHE为贪铜菌。图2为16S rRNA基因的系统发育树，SHE菌株的16Sr RNA基因 序列如下：
【权利要求】
1. 一株贪铜菌（Copriahote sp. SHE)，其特征是：所述菌株的登记入册编号为CGMCC No. 9266,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址为北京 市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏日期为2014年6月4日。
2. 根据权利要求1所述的一株贪铜菌，其特征在于：所述菌株的培养条件：LB培养基 的组成为NaCl 10 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母粉5 g/L、pH 7.0;将100 mL培养基于121°C 高温高压灭菌20 min，在30°C，150 rpm条件下培养菌株至对数中后期。
3. 权利要求1所述的一株贪铜菌应用于金颗粒的合成。
【文档编号】B22F9/24GK104109650SQ201410352091
【公开日】2014年10月22日 申请日期:2014年7月23日 优先权日:2014年7月23日
【发明者】曲媛媛, 沈娥, 马桥, 刘紫嫣, 周豪, 张照婧, 王经伟, 沈文丽, 李端行, 李会杰, 周集体 申请人:大连理工大学