专利名称：一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法
技术领域：
本发明属于化学物质或药品的制造方法，具体涉及以木犀科植物齐墩果(olea europaea 1.)的叶或女贞(ligustrum lucidum ait.)果实为原料，经提取分离后得到两种 齐墩果酸结构类似物，并以此结构类似物为原料半合成齐墩果酸的方法。
背景技术：
齐墩果酸是五环三萜类化合物，以游离体和配糖体的形式存在于多种植物中。齐 墩果酸是白色针晶；无臭，无味，可溶于甲醇、乙醇、苯、乙醚、丙酮和氯仿，几乎不溶于水，对 酸碱均不稳定。齐墩果酸主要具有护肝降酶、促进肝细胞再生、抗炎、强心、利尿、抗肿瘤等 作用，还具有降血糖、降血脂、镇静的作用，是开发治疗肝病和降血糖等药物有效成分。齐墩果酸为肝病辅助药，临床用于治疗传染性急性黄疸型肝炎，具有明显的降低 谷丙转氨酶及退黄效果，改善病毒性和慢性迁延性肝炎患者的症状，体征和肝功能；还可用 于银屑病，风湿性关节炎，肾炎水肿，肝硬化腹水，急慢性肝炎，胃痛淋浊，血崩，跌打损伤， 痈肿，腰膝酸软，胎动不安等症。目前，齐墩果酸主要来源于木犀科植物齐墩果(olea europaea 1.)的叶或女贞 (ligustrum lucidum ait.)果实，经提取分离纯化后得到。但是，由于齐墩果酸在植物中的 含量通常低于1 %，从而造成其分离纯化困难，且制备收率低下。目前，对于齐墩果酸的制备方法有王忠壮等于1999年在公开号CN1303850、名称 为“一种生产齐墩果酸的新方法”中采用原料经70%乙醇热提取、酸沉淀分离总皂甙、单 独酸水解总皂甙、精制纯化等步骤得到齐墩果酸；邹元生等于2004年在公开号CN1552722、名称为“一种提取分离齐墩果酸的新方 法”中采用以沙棘果、沙棘果皮渣、沙棘种籽或沙棘叶为原料，经超临界萃取，膜过滤，减压 干燥或喷雾干燥后得到齐墩果酸；该方法采用的超临界萃取步骤不易放大，且得到的产品 纯度较低；王有才于2006年在申请号200610116160、名称为“从皱皮木瓜中提取齐墩果酸的 方法”中采用将皱皮木瓜或其粉碎后的干燥粉末浸渍于乙醇水溶液中，然后渗漉，收集渗 漉液，过滤，滤液减压蒸馏，得浸膏，浸膏加入无水乙醇溶解，加活性炭，脱色，硅胶分离得到 齐墩果酸；该方法提取过程效率较低且耗时，且该技术运用活性炭脱色造成主要成分的部 分损失。胡昌强等于2009年在申请号200910273265、名称为“一种提取高纯度齐墩果酸的 方法”中采用以橡木皮为原料，酸解，碱解，乙醇浸泡，酸沉淀后得到成品；该技术大量使用 酸碱，对环境污染较严重，且效率较低。刘东锋等于2010年在申请号201010111779、名称为“一种齐墩果酸的制备方法” 中采用以女贞子药材为原料，过饱和石灰水提取，加酸酸化，抽滤得粗品，粗品用甲醇回流 提取，趁热过滤，纳滤浓缩，干燥得到产品；该过程同样大量使用酸碱，并且纳滤过程成本高，放大较难。目前，还有许多关于提取、纯化、制备齐墩果酸的方法，但这些方法基本上都受到 齐墩果酸在植物原料中含量较低的因素限制，因而效率不高，原料利用率较低。
发明内容
本发明提供一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法，解决现 有提取及制备齐墩果酸由于受到其在植物中含量限制，而导致效率低下的问题，通过分离 制备植物中含有的齐墩果酸结构类似物，并以此为原料半合成齐墩果酸，解决现有技术提 取收率低下的问题。本发明的一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法，以木犀科 植物齐墩果(olea europaea 1.)的叶或女贞(ligustrum lucidum ait.)果实为原料，经 提取分离后得到两种齐墩果酸结构类似物，并以此结构类似物为原料半合成齐墩果酸，包 括(1)原料前处理步骤；原料粉碎后，加入含有纤维素酶及果胶酶的水溶液进行破 壁反应，烘干后得到提取原料；(2)提取步骤；将步骤(1)得到的提取原料，50 80%乙醇提取，60 90°C下提 取，料液比1 5 1 10，提取三次，合并提取液后，加入壳聚糖沉淀，壳聚糖加入的质量 与提取液的体积比为1 3 100 (质量体积比)，过滤，滤液蒸干得提取物；(3)粗分离步骤；将步骤(2)得到的提取物，经过硅胶柱分离后得到粗分离产物；(4)精制步骤；对粗分离步骤得到的粗分离产物，采用Si^phadex LH-20柱精制，同 时得到齐墩果酸两种结构类似物12-0H-齐墩果酸及齐墩果酸甲酯；(5)半合成步骤；将步骤(4)中得到的12-0H-齐墩果酸在非离子弱碱性溶剂中， 以强路易斯酸为脱水剂，进行脱水反应后得到齐墩果酸；将步骤(4)中得到的齐墩果酸甲 酯，加入到一定量的水中溶解，加入酸解液，在一定温度下进行酸水解反应后得到齐墩果 酸。所述原料前处理步骤中，所述纤维素酶及果胶酶的水溶液为水溶液的体积与 原料的质量比为0.5 2 1(体积质量比)，纤维素酶的量与原料的质量比为0.5 3 1000(质量比)，果胶酶的质量与原料的质量比为0.5 2 1000(质量比)；所述破 壁反应为反应温度30 60°C，反应时间1 3小时。所述粗分离步骤中，所述硅胶柱为填装有硅胶基填料、高径比5 1 20 1的 装置，硅胶基填料由硅胶和硅藻土组成，硅藻土与硅胶的质量百分比为10% 20%;硅胶粒 径为30 μ m 80 μ m，硅胶活性为II III级；所述经过硅胶柱分离，其过程为将步骤(2) 得到的提取物上样到硅胶柱上，以甲醇正己烷=90 10 98 2(V/V)为洗脱液，流速 0. 5 2柱体积每小时，收集正组分，蒸干得到粗分离产物。所述精制步骤为将得到的粗分离产物，利用S印hadex LH-20柱精制，上样后，用 40 80%的甲醇水溶液(V/V)洗脱，流速为0. 5 2柱体积每小时，分段收集，浓缩蒸干后 分别得到12-0H-齐墩果酸及齐墩果酸甲酯。所述半合成步骤中，所述强路易斯酸为BF3, SOCl2, POCl3, C2O2Cl2其中的一种；所 述非离子弱碱性溶剂为吡啶、二甲基甲酰胺、三乙醇胺、N-二甲苯胺、六次甲基四胺其中的一种；所述脱水反应其过程为将步骤(4)中得到的12-0H-齐墩果酸溶解于非离子弱碱性 溶剂中，在氮气保护下，缓慢滴加到强路易斯酸中，4 30°C，反应6 12小时，反应结束后 加入冰水，氨水调节PH 9. 0 12. 0，乙醚或正己烷萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩 果酸；12-0H-齐墩果酸的质量与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 5 1 20(质量体积 比)，强路易斯酸与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 5 1 10 ；非离子弱碱性溶剂与冰 水的体积比为1 3 1 5。所述半合成步骤中，所述加入到一定量的水中溶解为所用水的体积与齐墩果酸 甲酯的质量比为5 20 1 (体积质量比)；所述酸解液为3 6mol/LHCl, SOCl2, C2Cl2O2 中的一种，其体积与所用水的体积之比为1 2 1 8(体积比)；所述一定温度下进行酸 水解反应，其过程为在60 95°C下，搅拌反应2 8小时，反应结束后氨水调节pH9. 0 12. 0，乙醚或正己烷萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸。本发明的优点在于，构想合理，方法简便，容易推广，能解决现有提取及制备齐墩 果酸效率低下的实际问题，实现了利用提取过程中的齐墩果酸结构类似物，通过半合成齐 墩果酸，从而解决现有齐墩果酸原料药提取收率低下的问题。本发明包括原料前处理步骤、 提取步骤、粗分离步骤、精制步骤、半合成步骤，保证了运用本发明制备的产成品的质量，节 省了生产成本，提高了生产效率。本发明以木犀科植物齐墩果(olea europaea 1.)的叶 或女贞(ligustrum lucidum ait.)果实为原料，经提取分离后得到两种齐墩果酸结构类似 物，并以此结构类似物为原料半合成齐墩果酸。本发明提供的工艺简便并易于放大到工业 化生产，同时能大大提高原料利用率。
图1为齐墩果酸结构类似物半合成步骤示意图。
具体实施例方式图1为齐墩果酸结构类似物半合成步骤示意图；将步骤(4)中得到的12-0H-齐墩 果酸在非离子弱碱性溶剂中，以强路易斯酸为脱水剂，进行脱水反应后得到齐墩果酸；将步 骤(4)中得到的齐墩果酸甲酯，加入到一定量的水中溶解，加入酸解液，在一定温度下进行 酸水解反应后得到齐墩果酸。实施例1(1)原料前处理步骤取木犀科植物齐墩果(olea europaea 1.)叶为原料，烘干粉碎过筛后，准确称取 1000g，加入含有纤维素酶0. 50g、果胶酶0. 50g的水溶液500ml，其中水溶液的体积与原料 的质量比为0.5 1(体积质量比)，纤维素酶的量与原料的质量比为0.5 1000(质量 比)，果胶酶的质量与原料的质量比为0.5 1000(质量比)，加热到60°C，反应1小时后， 烘干，得到提取原料。(2)提取步骤将步骤(1)中所得的提取原料，80%乙醇提取，60°C下提取，料液比1 10，提取 三次，合并提取液共计30L，加入300g壳聚糖沉淀，壳聚糖加入的质量与提取液的体积比为 1 100 (质量体积比)，过滤，滤液蒸干得提取物56. 72g。
(3)粗分离步骤填装有硅胶基填料、高径比5 1的硅胶柱，硅胶基填料由硅胶和硅藻土组成，硅 藻土与硅胶的质量百分比为10% ；硅胶粒径为30 μ m，硅胶活性为II级。将步骤(2)得到 的提取物56. 72g上样到硅胶柱上，以甲醇正己烷=90 10 (V/V)为洗脱液，流速2柱体 积每小时，收集正组分，蒸干得到粗分离产物28. 90g。(4)精制步骤将得到的粗分离产物28. 90g,溶解于20. Oml甲醇中，上样到S印hadex LH-20， 用40%的甲醇水溶液(V/V)洗脱，流速为1柱体积每小时，分段收集，浓缩蒸干后分别得 12-0H-齐墩果酸7. 79g及齐墩果酸甲酯6. 35g。(5)半合成步骤将步骤(4)中得到的12-0H-齐墩果酸7. 79g溶解于155. 80ml 二甲基甲酰胺中， 在氮气保护下，缓慢滴加到15. 58ml SOCl2中，4°C下反应12小时，反应结束后加入冰水 779ml，氨水调节pH 12. 0，乙醚萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸7. 08g。其中， 12-0H-齐墩果酸的质量与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 20 (质量体积比)，强路易斯 酸与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 10，非离子弱碱性溶剂与冰水的体积比为1 5。将步骤(4)中得到的齐墩果酸甲酯6.35g溶解于127ml水中，所用水的体积与齐 墩果酸甲酯的质量比为20 1(体积质量比)，加入6mol/LHCl 63. 50ml，其体积与所用水 的体积之比为1 2(体积比)，在95°C下，搅拌反应2小时，反应结束后氨水调节pH 9.0， 正己烷萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸5. 88g。实施例2(1)原料前处理步骤取女贞(ligustrum lucidum ait.)果实原料，烘干粉碎过筛后，准确称取2000g， 加入含有纤维素酶6. 0g、果胶酶4. Og的水溶液4000ml，其中水溶液的体积与原料的质量比 为2 1(体积质量比)，纤维素酶的量与原料的质量比为3 1000 (质量比)，果胶酶的质 量与原料的质量比为2 1000(质量比)，加热到30°C，反应3小时后，烘干，得到提取原料。(2)提取步骤将步骤(1)中所得的提取原料，50%乙醇提取，90°C下提取，料液比1 5，提取三 次，合并提取液共计30L，加入900g壳聚糖沉淀，壳聚糖加入的质量与提取液的体积比为 3 100 (质量体积比)，过滤，滤液蒸干得提取物112. 50g。(3)粗分离步骤填装有硅胶基填料、高径比20 1的硅胶柱，硅胶基填料由硅胶和硅藻土组成，硅 藻土与硅胶的质量百分比为20%;硅胶粒径为80μπι，硅胶活性为III级。将步骤(2)得到 的提取物112. 50g上样到硅胶柱上，以甲醇正己烷=98 2(V/V)为洗脱液，流速0.5柱 体积每小时，收集正组分，蒸干得到粗分离产物56. 60g。(4)精制步骤将得到的粗分离产物56. 60g,溶解于30. Oml甲醇中，上样到S印hadex LH-20, 用80%的甲醇水溶液(V/V)洗脱，流速为0. 5柱体积每小时，分段收集，浓缩蒸干后分别得 12-0H-齐墩果酸15. 15g及齐墩果酸甲酯12. IOgo(5)半合成步骤
将步骤⑷中得到的12-0H-齐墩果酸15. 15g溶解于75. 75ml吡啶中，在氮气保 护下，缓慢滴加到15. 15ml POCl3中，30°C下反应6小时，反应结束后加入冰水227. 25ml，氨 水调节PH 9. 0，正己烷萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸13. 85g。其中，12-0H-齐 墩果酸的质量与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 5 (质量体积比)，强路易斯酸与非离子 弱碱性溶剂的体积比为1 5，非离子弱碱性溶剂与冰水的体积比为1 3。将步骤⑷中得到的齐墩果酸甲酯12. IOg溶解于60. 50ml水中，所用水的体积与 齐墩果酸甲酯的质量比为5 1(体积质量比)，加入3mol/L HCl 15. 13ml，其体积与所用水 的体积之比为1 4(体积比)，在60°C下，搅拌反应8小时，反应结束后氨水调节pH 12.0， 乙醚萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸11. 17g。实施例3(1)原料前处理步骤取石蒜原料，烘干粉碎过筛后，准确称取3000g，加入含有纤维素酶3. 0g、果胶酶 3. Og的水溶液3000ml，其中水溶液的体积与石蒜原料的质量比为1 1(体积质量比)，纤 维素酶的量与石蒜原料的质量比为1 1000(质量比)，果胶酶的质量与石蒜的质量比为
1 1000 (质量比)，加热到50°C，反应2小时后，烘干，得到超临界萃取原料。(2)提取步骤将步骤(1)中所得的提取原料，60%乙醇提取，80°C下提取，料液比1 8，提取三 次，合并提取液共计72L，加入1440g壳聚糖沉淀，壳聚糖加入的质量与提取液的体积比为
2 100 (质量体积比)，过滤，滤液蒸干得提取物171. 45g。(3)粗分离步骤填装有硅胶基填料、高径比10 1的硅胶柱，硅胶基填料由硅胶和硅藻土组成，硅 藻土与硅胶的质量百分比为15% ；硅胶粒径为50μπι，硅胶活性为II级。将步骤(2)得到 的提取物171. 45g上样到硅胶柱上，以甲醇正己烷=95 5(V/V)为洗脱液，流速1柱体 积每小时，收集正组分，蒸干得到粗分离产物87. 62g。(4)精制步骤将得到的粗分离产物87. 62g，溶解于40. Oml甲醇中，上样到S印hadex LH-20， 用60%的甲醇水溶液(V/V)洗脱，流速为2柱体积每小时，分段收集，浓缩蒸干后分别得 12-0H-齐墩果酸24. 35g及齐墩果酸甲酯19. 42g。(5)半合成步骤将步骤(4)中得到的12-0H-齐墩果酸24. 35g溶解于243. 5ml三乙醇胺中，在氮 气保护下，缓慢滴加到30. 44ml BF3中，15°C下反应8小时，反应结束后加入冰水974ml，氨 水调节PH 10.0，乙醚萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸20. 07g。其中，12-0H-齐 墩果酸的质量与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 10(质量体积比)，强路易斯酸与非离子 弱碱性溶剂的体积比为1 8，非离子弱碱性溶剂与冰水的体积比为1 4。将步骤(4)中得到的齐墩果酸甲酯19. 42g溶解于194. 20ml水中，所用水的体积 与齐墩果酸甲酯的质量比为10 1(体积质量比)，加入4mol/L HCl 97. 10ml，其体积与所 用水的体积之比为1 2(体积比)，在80°C下，搅拌反应6小时，反应结束后氨水调节pH 11. 0，正己烷萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸17. 82g。实施例4
(1)原料前处理步骤取石蒜原料，烘干粉碎过筛后，准确称取1500g，加入含有纤维素酶3. 0g、果胶酶 3. Og的水溶液750ml，其中水溶液的体积与石蒜原料的质量比为0.5 1(体积质量比)，纤 维素酶的量与石蒜原料的质量比为2 1000 (质量比)，果胶酶的质量与石蒜的质量比为 2 1000 (质量比)，加热到60°C，反应2小时后，烘干，得到超临界萃取原料。(2)提取步骤将步骤(1)中所得的提取原料，70%乙醇提取，70°C下提取，料液比1 6，提取三 次，合并提取液共计27L，加入270g壳聚糖沉淀，壳聚糖加入的质量与提取液的体积比为 1 100 (质量体积比)，过滤，滤液蒸干得提取物85. 57g。(3)粗分离步骤填装有硅胶基填料、高径比15 1的硅胶柱，硅胶基填料由硅胶和硅藻土组成，硅 藻土与硅胶的质量百分比为20%;硅胶粒径为80μπι，硅胶活性为III级。将步骤(2)得到 的提取物85. 57g上样到硅胶柱上，以甲醇正己烷=94 6(V/V)为洗脱液，流速2柱体 积每小时，收集正组分，蒸干得到粗分离产物43. 75g。(4)精制步骤将得到的粗分离产物43. 75g，溶解于30. Oml甲醇中，上样到S印hadex LH-20， 用70%的甲醇水溶液(V/V)洗脱，流速为1柱体积每小时，分段收集，浓缩蒸干后分别得 12-0H-齐墩果酸11. 83g及齐墩果酸甲酯9. 78g。(5)半合成步骤将步骤⑷中得到的12-0H-齐墩果酸11. 83g溶解于59. 15ml N- 二甲苯胺中， 在氮气保护下，缓慢滴加到5. 92ml C2O2Cl2中，20°C下反应12小时，反应结束后加入冰水 295. 75ml，氨水调节pH 11. 0，正己烷萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸11. 13g。 其中，12-0H-齐墩果酸的质量与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 5(质量体积比)，强 路易斯酸与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 10，非离子弱碱性溶剂与冰水的体积比为
1 5。将步骤(4)中得到的齐墩果酸甲酯9. 78g溶解于97. 80ml水中，所用水的体积与 齐墩果酸甲酯的质量比为10 1(体积质量比)，加入S0Cl212.23ml，其体积与所用水的体 积之比为1 8(体积比)，在95°C下，搅拌反应4小时，反应结束后氨水调节pH 9.0，乙醚 萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸8. 91g。实施例5(1)原料前处理步骤取石蒜原料，烘干粉碎过筛后，准确称取2500g，加入含有纤维素酶2. 5g、果胶酶 5. Og的水溶液2500ml，其中水溶液的体积与石蒜原料的质量比为1 1(体积质量比)，纤 维素酶的量与石蒜原料的质量比为1 1000(质量比)，果胶酶的质量与石蒜的质量比为
2 1000 (质量比)，加热到50°C，反应2小时后，烘干，得到超临界萃取原料。(2)提取步骤将步骤(1)中所得的提取原料，50%乙醇提取，80°C下提取，料液比1 10，提取三 次，合并提取液共计75L，加入1500g壳聚糖沉淀，壳聚糖加入的质量与提取液的体积比为 2 100 (质量体积比)，过滤，滤液蒸干得提取物140. 56g。
(3)粗分离步骤填装有硅胶基填料、高径比5 1的硅胶柱，硅胶基填料由硅胶和硅藻土组成，硅 藻土与硅胶的质量百分比为20% ；硅胶粒径为30 μ m，硅胶活性为II级。将步骤(2)得到 的提取物140. 56g上样到硅胶柱上，以甲醇正己烷=92 8(V/V)为洗脱液，流速1柱体 积每小时，收集正组分，蒸干得到粗分离产物73. 48g。(4)精制步骤将得到的粗分离产物73. 48g，溶解于40. Oml甲醇中，上样到S印hadex LH-20， 用80%的甲醇水溶液(V/V)洗脱，流速为0. 5柱体积每小时，分段收集，浓缩蒸干后分别得 12-0H-齐墩果酸19. 95g及齐墩果酸甲酯16. 15g。(5)半合成步骤将步骤⑷中得到的12-0H-齐墩果酸19. 95g溶解于399. OOml六次甲基四胺 中，在氮气保护下，缓慢滴加到39.90ml SOCl2中，4°C下反应6小时，反应结束后加入冰水 1197. 00ml，氨水调节pH 12. 0，乙醚萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸17. 15g。其 中，12-0H-齐墩果酸的质量与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 20(质量体积比)，强路易 斯酸与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 10，非离子弱碱性溶剂与冰水的体积比为1 3。将步骤(4)中得到的齐墩果酸甲酯16. 15g溶解于161. 50ml水中，所用水的体积 与齐墩果酸甲酯的质量比为10 1(体积质量比)JnAC2Cl2O2 26. 92ml，其体积与所用水 的体积之比为1 6(体积比)，在75°C下，搅拌反应6小时，反应结束后氨水调节pH 10.0， 正己烷萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸14. 80go
权利要求
一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法，以木犀科植物齐墩果(olea europaea l.)的叶或女贞(ligustrum lucidum ait.)果实为原料，经提取分离后得到两种齐墩果酸结构类似物，并以此结构类似物为原料半合成齐墩果酸，包括(1)原料前处理步骤；原料粉碎后，加入含有纤维素酶及果胶酶的水溶液进行破壁反应，烘干后得到提取原料；(2)提取步骤；将步骤(1)得到的提取原料，50～80％乙醇提取，60～90℃下提取，料液比1∶5～1∶10，提取三次，合并提取液后，加入壳聚糖沉淀，壳聚糖加入的质量与提取液的体积比为1～3∶100(质量体积比)，过滤，滤液蒸干得提取物；(3)粗分离步骤；将步骤(2)得到的提取物，经过硅胶柱分离后得到粗分离产物；(4)精制步骤；对粗分离步骤得到的粗分离产物，采用Sephadex LH 20柱精制，同时得到齐墩果酸两种结构类似物12 OH 齐墩果酸及齐墩果酸甲酯；(5)半合成步骤；将步骤(4)中得到的12 OH 齐墩果酸在非离子弱碱性溶剂中，以强路易斯酸为脱水剂，进行脱水反应后得到齐墩果酸；将步骤(4)中得到的齐墩果酸甲酯，加入到一定量的水中溶解，加入酸解液，在一定温度下进行酸水解反应后得到齐墩果酸。
2.如权利要求1所述的一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法， 其特征在于所述原料前处理步骤中，所述纤维素酶及果胶酶的水溶液为水溶液的体积 与原料的质量比为0.5 2 1(体积质量比)，纤维素酶的量与原料的质量比为0.5 3 1000(质量比)，果胶酶的质量与原料的质量比为0.5 2 1000(质量比)；所述破 壁反应为反应温度30 60°C，反应时间1 3小时。
3.如权利要求1所述的一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法， 其特征在于所述粗分离步骤中，所述硅胶柱为填装有硅胶基填料、高径比5 1 20 1 的装置，硅胶基填料由硅胶和硅藻土组成，硅藻土与硅胶的质量百分比为10% 20%;硅胶 粒径为30μπι 80μπι，硅胶活性为II III级；所述经过硅胶柱分离，其过程为将步骤 (2)得到的提取物上样到硅胶柱上，以甲醇正己烷=90 10 98 2(V/V)为洗脱液， 流速0. 5 2柱体积每小时，收集正组分，蒸干得到粗分离产物。
4.如权利要求1所述的一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法， 其特征在于所述精制步骤为将得到的粗分离产物，利用S^hadex LH-20柱精制，上样 后，用40 80%的甲醇水溶液(V/V)洗脱，流速为0. 5 2柱体积每小时，分段收集，浓缩 蒸干后分别得到12-0H-齐墩果酸及齐墩果酸甲酯。
5.如权利要求1所述的一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法， 其特征在于所述半合成步骤中，所述强路易斯酸为BF3, SOCl2, POCl3, C2O2Cl2其中的一种； 所述非离子弱碱性溶剂为吡啶、二甲基甲酰胺、三乙醇胺、N-二甲苯胺、六次甲基四胺其中 的一种；所述脱水反应其过程为将步骤(4)中得到的12-0H-齐墩果酸溶解于非离子弱碱 性溶剂中，在氮气保护下，缓慢滴加到强路易斯酸中，4 30°C，反应6 12小时，反应结束 后加入冰水，氨水调节PH 9. 0 12. 0，乙醚或正己烷萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐 墩果酸；12-0H-齐墩果酸的质量与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 5 1 20(质量体 积比)，强路易斯酸与非离子弱碱性溶剂的体积比为1 5 1 10;非离子弱碱性溶剂与 冰水的体积比为1 3 1 5。
6.如权利要求1所述的一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法，其特征在于所述半合成步骤中，所述加入到一定量的水中溶解为所用水的体积与齐墩 果酸甲酯的质量比为5 20 1(体积质量比)；所述酸解液为3 6mol/L HCl, SOCl2, C2Cl2O2中的一种，其体积与所用水的体积之比为1 2 1 8(体积比)；所述一定温度 下进行酸水解反应，其过程为在60 95°C下，搅拌反应2 8小时，反应结束后氨水调节 pH 9. 0 12. 0，乙醚或正己烷萃取三次，合并萃取液蒸干后得到齐墩果酸。
全文摘要
一种齐墩果酸结构类似物的制备及其半合成齐墩果酸的方法，属于化学物质或药品的制造方法，解决现有提取及制备齐墩果酸由于受到其在植物中含量限制，而导致效率低下的问题，通过分离制备植物中含有的齐墩果酸结构类似物，并以此为原料半合成齐墩果酸，解决现有技术提取收率低下的问题。本发明以木犀科植物齐墩果(olea europaea l.)的叶或女贞(ligustrum lucidum ait.)果实为原料，经提取分离后得到两种齐墩果酸结构类似物，并以此结构类似物为原料半合成齐墩果酸，包括原料前处理步骤、提取步骤、粗分离步骤、精制步骤、半合成步骤，保证了运用本发明制备的产成品的质量，节省了生产成本，提高了生产效率。
文档编号C07J63/00GK101974059SQ20101027812
公开日2011年2月16日 申请日期2010年9月10日 优先权日2010年9月10日
发明者杨俊 , 林承成, 林秀忠 申请人:武汉巨惠绿色产业发展有限公司