专利名称：组织靶向的制作方法
组织靶向
优先权声明本申请要求于2010年4月16日提交的美国申请序列号61/325，146的优先权。在先申请的披露被视为本申请披露的部分(并且通过引用结合在此)。
背景技术：
很多抗肿瘤剂攻击癌细胞和相似的正常细胞。因此，选择性地靶向癌组织同时将针对正常组织的毒性效应最小化的治疗方式是一种重要的需求。
发明概述本发明至少部分地基于以下发现，即在此说明的一种低分子量肝素(例如，一种 缺少实质性抗凝血剂活性的LMWH(低分子量肝素)，例如M402)与一种异源剂相偶联，当给予一只实验动物时在原发肿瘤位点展示出选择性的累积。因此，本发明的特点尤其是将一种药剂(例如一种治疗剂或成像剂)递送并靶向至受试者的一个肿瘤位点的方法。还包括的是将一种药剂(例如一种治疗剂或成像剂)递送并靶向至受试者的一个炎症的、纤维化的或感染的部位的相关方法。如在此所用的“偶联物”是一种组合物，该组合物包括在此说明的与一种异源活性剂连接的LMWH，这样使得该连接在给药后在受试者的体内基本上保持完整，至少直到将该偶联物靶向至一个特定的位点(比如一个肿瘤位点)。该LMWH与异源剂可能直接相连(例如，共价连接)或经由一个连接物或隔离物连接。该连接在靶向至该肿瘤位点后可能是稳定的或可分裂的(例如，就像在药物前体中)。如在此说明的“连接物”或“隔离物”，可能是熟练的技术人员会识别并理解的任何一种分子。这些分子可以包括同型双功能或异型双功能的部分。通常，同型双功能部分包括相同的反应基团，而异型双功能部分包括并不相同的反应基团。这些反应基团可以选自任何普遍接受的功能基团，这些基团与连接或交联的生物相关分子相关联(例如，酰肼、N-羟基琥珀酰亚胺或辛二亚氨酸二甲酯)。用作连接物和/或隔离物的分子可包括很多类别或化合物，这些化合物包括聚合物(例如，一种PEG聚合物、聚丙烯酰胺以及其他生物相容性聚合物)、染料以及已知在连接和交联生物相关分子中有用的的其他化合物(例如，LMWH)。用在此时说明的一种偶联物将一种药剂“靶向”至一个组织位点是指，将该药剂以一定速率、和/或以一定量值、和/或持续一定时间递送至该位点，递送效果超过若该药剂未如在此所说明进行偶联而递送至该位点。如在此所使用，术语“受试者”旨在表示人类或非人类哺乳动物，包括但不限于伴侣动物以及实验动物，比如犬、猫、马、奶牛、猪、绵羊、山羊、兔子、豚鼠、灵长类动物、大鼠和小鼠。
图I展示了氟_M402(上组)与无染料(下组)在荷瘤小鼠体内的分布。图2是一幅图，展示了在注射了氟-M402或无染料的小鼠的原发肿瘤内荧光信号水平的时间过程。
图3是一幅图，展示了荷瘤小鼠在一个单一皮下剂量3H-M402后该肿瘤位点的经滴定的M402的累积。
图4展示了荷瘤小鼠与未荷瘤小鼠在连续6天接受每日单一皮下剂量氟-M402后24小时氟-M402的分布。图5表示一系列照片，这些照片展示了多个不同组织(例如，肿瘤、肝、脾脏)在连续7天每日注射氟-M402的最后之后24小时氟-M402的累积。图6表示一系列照片，这些照片展示了连续7日每日单一注射氟-M402处理的小鼠其原发肿瘤、唾液腺和肝中荧光信号水平的时间过程。
详细说明生物分布研究表明，M402在肿瘤位点累积并维持，展示M402能用于将一种异源剂靶向至一个肿瘤位点。这类靶向是有用的，例如用于以下各项中的一个或多个优先地将该药剂递送至一个靶肿瘤位点；用来与非靶向药剂相比，增加该药剂的半衰期；用来与非靶向药剂相比，提供该药剂更加缓慢地释放至血流中；用来与非靶向药剂相比，降低该药剂的有效剂量；用来与非靶向药剂相比，降低受试者对该药剂的抗性。
勒I向部分在此说明的LMWH可用于将一种异源剂(例如，一种治疗剂或成像剂)靶向至一个肿瘤位点。这种LMWH可以具有以下特点中的一种或多种抗-Xa活性小于50IU/mg、20IU/mg、10IU/mg、5IU/mg或更小；乙二醇裂解的糖醛酸残基(例如，小于50%、40%、30%、20%的乙二醇裂解的糖醛酸残基)；每条多糖链不大于3个乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue);大于40% U2sHns,6S 二糖残基；脱硫度小于40%;—条或多条多糖链，这些链具有一个4，5-未饱和的非还原端糖醛酸残基；一条或多条多糖链，这些链在还原端具有一个2，5-脱水甘露醇残基；重均分子量在3，500Da与8，OOODa之间，例如4，OOODa与8，OOODa之间;以及在此说明的分子量分布。在此说明的靶向剂的实例包括多糖制剂，这些制剂包括以下链，这些链包括以下
[Uw-Hx,y, Jm [Ug-Hx,y, Jn
其中U表示一个糖醛酸残基，而H表示一个己糖胺残基，其中m和η是整数，这样使得m = 6-18,并且 η = 1-4 ；w = -20S 或-20H ；x = -NS 或-NAc ；y = -30S 或-30H ；z = -60S或-60H,
权利要求
1.将一种治疗剂或成像剂靶向至患者肿瘤组织的一种方法，该方法包括(a)识别带有一个肿瘤组织的患者，其中该患者需要给予一种治疗剂或成像剂以治疗该肿瘤或使其成像；(b)提供该治疗剂或成像剂以及在此说明的一种LMWH的一种偶联物；并且(c)将该偶联物给予该患者，由此将该药剂靶向至该肿瘤组织。
2.如权利要求I所述的方法，其中该药剂是选自一种放射剂、一种突光剂、一种细胞毒性剂、一种酪氨酸激酶抑制剂、一种蛋白酶体抑制剂、一种蛋白酶抑制剂、一种抗血管新生剂、一种抗转移剂、一种类固醇、一种生物免疫调节剂、一种单克隆抗体、一种抗体片段、一种适配子、一种siRNA、一种反义分子、一种融合蛋白、一种细胞因子、一种细胞因子受体、一种支气管扩张剂、一种他汀、一种抗炎剂、一种微管抑制剂、一种拓扑异构酶抑制剂、一种抗代谢剂、一种蛋白合成和分解抑制剂、一种有丝分裂抑制剂、一种烧化剂、一种钼化剂、一种核酸合成抑制剂、一种组蛋白去乙酰化酶以及DNA甲基转移酶抑制剂、一种氮芥、一种亚硝基脲、一种乙烯亚胺、一种烷基磺酸盐、一种三氮烯、一种叶酸盐类似物、一种核苷酸类似物、一种核糖核苷酸还原酶抑制剂、一种长春花碱、一种紫杉烧、一种埃博霉素、一种嵌入齐U、一种信号转导抑制剂、一种凋亡诱导剂、一种细胞因子、一种趋化因子、以及一种疫苗。
3.如以上任何一项权利要求所述的方法，其中该药剂选自下组，其构成为顺钼、环磷酰胺、达卡巴嗪、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、吉西他滨、卡培他滨、羟基脲、托泊替康、伊立替康、氮杂胞苷、伏立诺他、伊沙匹隆、硼替佐米、紫杉烷类(紫杉醇、多西他赛)、细胞松弛素B、短杆菌肽D、溴化乙锭、吐根碱、丝裂霉素、依托泊苷、替尼泊苷、长春新碱、长春碱、长春瑞宾、秋水仙碱(colchicin)、蒽环类(多柔比星以及表柔比星)柔红霉素、二羟基蒽二酮(dihydroxy anthracin dione)、米托蒽醌、光辉霉素、放线菌素D、阿霉素、I-双氢睾酮(Ι-dehydrotestosterone)、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔、嘌呤霉素、蓖麻毒素、以及美登木素类、吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、索拉菲尼、舒尼替尼、伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼、西罗莫司、依维莫司、雷帕霉素、曲妥珠单抗、西妥昔单抗、帕尼单抗、贝伐单抗、利妥昔单抗、以及托西莫单抗。
4.如以上任何一项权利要求所述的方法，其中该肿瘤是一种实体瘤，例如一种肉瘤或癌。
5.如以上任何一项权利要求所述的方法，其中该肿瘤是以下部位的癌或肉瘤头部、颈部、咽、甲状腺、肺、乳房、淋巴、血液、胃肠系统(例如，口、食管、胃、肝、胰、小肠、结肠和直肠、肛管)、生殖器以及生殖泌尿道(例如，肾、尿路上皮、膀胱、卵巢、子宫、子宫颈、子宫内膜、前列腺、睾丸)，CNS(中枢神经系统)(例如，神经细胞或神经胶质细胞，例如成神经细胞瘤或神经胶质瘤)、皮肤(例如，黑素瘤)。
6.如以上任何一项权利要求所述的方法，其中该肿瘤是一种原发癌症位点或一种转移位点。
7.如以上任何一项权利要求所述的方法，进一步包括下列步骤中的一个或多个对该肿瘤组织进行活组织检查、对该肿瘤组织进行成像、并且评价给药对该肿瘤组织的作用。
8.如以上任何一项权利要求所述的方法，其中该偶联物是通过静脉内、皮下、肌肉内、腹膜内、或口服给药的。
9.如以上任何一项权利要求所述的方法，其中该LMWH选自下组，其构成为 (a)一种多LMWH，具有以下特征(i)重均链分子量在3，500Da与8，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ；以及 (iii)大于5%并且小于50%的乙二醇裂解的糖醛酸残基； (b)一种多LMWH，具有以下特征 ⑴重均链分子量在3，500Da与7，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ； (iii)一条多糖链，具有一个乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue);以及 (iv)多条多糖链，这些多糖链各自具有不大于3个乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue)； (c)一种LMWH，具有以下特征 ⑴重均链分子量在3，500Da与7，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ；以及 (iii)多条多糖链，这些多糖链中每条多糖链具有平均在O. 2个与3个之间的乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue)； (d)一种LMWH，具有以下特征 ⑴重均链分子量在3，500Da与7，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ；以及 (iii)多条多糖链，这些多糖链具有大于40%的U2sHns,6S 二糖残基； (e)一种LMWH，具有以下特征 一种缺少实质性抗凝血剂活性的多糖制剂，其中该制剂基本上由多个多糖组成，这些多糖包括式I : [Uw-Hx,y, Jm [Ug-Hx,y, Jn 其中U表示一个糖醛酸残基，并且H表示一个己糖胺残基； 其中m和η是整数，以使 m = 4至16,并且 η = I 至 4 ; w = -20S 或-20Η ；X = -NS 或-NAc ；y = -30S 或-30H ；z = -60S 或-60H ；
10.一种治疗受试者的方法，该方法包括 (a)识别带有一个肿瘤组织的患者，并且 (b)向该受试者给予一个治疗有效量的一种药物组合物，该组合物包括一种抗肿瘤剂与在此说明的一种LMWH的一种偶联物。
11.如权利要求10所述的方法,其中该抗肿瘤剂选自一种放射剂、一种突光剂、一种细胞毒性剂、一种酪氨酸激酶抑制剂、一种蛋白激酶抑制剂、一种抗血管新生剂、一种抗转移剂、一种类固醇、一种生物免疫调节剂、一种单克隆抗体、一种抗体片段、一种适配子、一种SiRNA、一种反义分子、一种融合蛋白、一种细胞因子、一种细胞因子受体、一种支气管扩张剂、一种他汀、一种抗炎剂、一种微管抑制剂、一种拓扑异构酶抑制剂、一种抗代谢剂、一种蛋白合成和分解抑制剂、一种有丝分裂抑制剂、一种烷化剂、一种钼化剂、一种核酸合成抑制剂、一种组蛋白去乙酰化酶以及DNA甲基转移酶抑制剂、一种氮芥、一种亚硝基脲、一种乙烯亚胺、一种烷基磺酸盐、一种三氮烯、一种叶酸盐类似物、一种核苷酸类似物、一种核糖核苷酸还原酶抑制剂、一种长春花碱、一种紫杉烧、一种埃博霉素、一种嵌入剂、一种信号转导抑制剂、一种凋亡诱导剂、一种细胞因子、一种趋化因子、以及一种疫苗。
12.如权利要求10所述的方法，其中该抗肿瘤剂选自下组，其构成为顺钼、环磷酰胺、达卡巴嗪、甲氨蝶呤、氟尿嘧啶、吉西他滨、卡培他滨、羟基脲、托泊替康、伊立替康、氮杂胞苷、伏立诺他、伊沙匹隆、硼替佐米、紫杉烷类(紫杉醇、多西他赛)、细胞松弛素B、短杆菌肽D、溴化乙锭、吐根碱、丝裂霉素、依托泊苷、替尼泊苷、长春新碱、长春碱、长春瑞宾、秋水仙碱(colchicin)、蒽环类(多柔比星以及表柔比星)柔红霉素、二羟基蒽二酮(dihydroxy anthracin dione)、米托蒽醌、光辉霉素、放线菌素D、阿霉素、I-双氢睾酮(Ι-dehydrotestosterone)、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔、嘌呤霉素、蓖麻毒素、以及美登木素类、吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、索拉菲尼、舒尼替尼、伊马替尼、达沙替尼、尼洛替尼、西罗莫司、依维莫司、雷帕霉素、曲妥珠单抗、西妥昔单抗、帕尼单抗、贝伐单抗、利妥昔单抗、以及托西莫单抗。
13.如权利要求10、11或12所述的方法，其中该肿瘤是一种实体瘤，例如一种肉瘤或癌(例如，腺癌、鳞状细胞癌、间变性或未分化癌(包括SCLC (小细胞肺癌))、以及转移性癌)。
14.如权利要求10、11、12或13所述的方法，其中该肿瘤是以下部位的癌头部、颈部、咽、甲状腺、肺、乳房、淋巴、胃肠系统(例如，口、食管、胃、肝、胰、小肠、结肠和直肠、肛管)、生殖器以及生殖泌尿道(例如，肾、尿路上皮、膀胱、卵巢、子宫、子宫颈、子宫内膜、前列腺、睾丸)，CNS (例如，神经细胞或神经胶质细胞，例如成神经细胞瘤或神经胶质瘤)、皮肤(例如，黑素瘤)。
15.如权利要求10、11、12、13或14所述的方法，进一步包括以下步骤中的一个或多个对该肿瘤组织进行活组织检查、对该肿瘤组织进行成像、并且评价给药对该肿瘤组织的作用。
16.如权利要求10、11、12、13、14或15所述的方法，其中该偶联物是静脉内给药的。
17.如权利要求10、11、12、13、14、15或16所述的方法，其中该LMWH选自下组，其构成为 (a)一种LMWH，具有以下特征 ⑴重均链分子量在3，500Da与8，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ；以及 (iii)超过5%并且小于50%的乙二醇裂解的糖醛酸残基。
(b)一种LMWH，具有以下特征 ⑴重均链分子量在3，500Da与7，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ； (iii) 一条多糖链，该多糖链具有一个乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue);以及 (d)多条多糖链，这些多糖链各自具有不大于3个乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue)； (c)一种LMWH，具有以下特征 (a)重均链分子量在3，500Da与7，OOODa之间； (b)抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg；以及 (c)多条多糖链，这些多糖链具有每条多糖链平均在O.2个与3个之间的乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue)； (d)一种LMWH，具有以下特征 (a)重均链分子量在3，500Da与7，OOODa之间； (b)抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg；以及 (c)多条多糖链，这些多糖链具有超过40%的U2sHns,6S二糖残基；(e)一种LMWH，具有以下特征 一种缺少实质性抗凝血剂活性的多糖制剂，其中该制剂基本上由多个多糖组成，这些多糖包括式I : [Uw-Hx,y, Jm [Ug-Hx,y, Jn 其中U表示一个糖醛酸残基，并且H表示一个己糖胺残基； 其中m和η是整数，以使 m = 4-16,并且 η = 1-4 ； w = -20S 或-20Η ；X = -NS 或-NAc ；y = -30S 或-30H ；z = -60S 或-60H 并且
18.—种药物组合物，包括一种治疗剂或成像剂与在此说明的一种LMWH的一种偶联物。
19.将一种治疗剂或成像剂靶向患者的纤维化组织或炎性损伤的一种方法，该方法包括(a)识别患有纤维化组织或炎性损伤的患者，其中该患者需要给予一种治疗剂或成像剂以治疗该纤维化组织或炎性损伤或对其进行成像；(b)提供该治疗剂或成像剂与在此说明的一种LMWH的一种偶联物，并且(c)将该偶联物给予该患者，由此将该药剂靶向该纤维化组织或炎性损伤。
20.如权利要求19所述的方法,其中该药剂选自以下各项一种放射剂、一种突光剂、一种抗炎剂(CD4+细胞抑制剂,例如一种抗CD4抗体(优选一种阻断或非消耗性抗体)、一种抗CD8抗体、一种TNF拮抗剂例如一种抗TNF抗体或TNF抑制剂例如可溶性TNF受体、或药剂例如NSAID)，以及一种抗纤维化剂(例如，细胞因子例如干扰素以及肝细胞生长因子；抗TGF- β、以及抗TGF- β 2以及抗PDGF抗体)。
21.如权利要求19或20所述的方法，其中该患者患有关节炎、红斑狼疮、桥本甲状腺炎、多发性硬化、糖尿病、葡萄膜炎、皮炎、银屑病、荨麻疹、肾病综合征、肾小球性肾炎、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、干燥综合征、过敏、更具体而言哮喘、过敏性或内源性哮喘、急性哮喘发作、鼻炎、湿疹、GVH(移植物抗宿主病)、COPD (慢性阻塞性肺病)、胰岛炎、支气管炎(特别是慢性支气管炎)或糖尿病(特别是I型糖尿病)、或一种纤维病。
22.如权利要求19或20或21所述的方法，进一步包括以下各步骤中的一个或多个对该纤维化组织或炎性损伤进行活组织检查、对该纤维化组织或炎性损伤进行成像、并且评价给药对该纤维化组织或炎性损伤的作用。
23.如权利要求19或20或21或22所述的方法，其中该偶联物是经静脉内、皮下、肌肉内、腹膜内、或口服给药的。
24.如权利要求19或20或21或22或23所述的方法，其中该LMWH选自下组，其构成为 (a)一种LMWH，具有以下特征 ⑴重均链分子量在3，500Da与8，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ；以及 (iii)超过5%并且小于50%的乙二醇裂解的糖醛酸残基； (b)一种LMWH，具有以下特征 ⑴重均链分子量在3，500Da与7，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ；(iii)一条多糖链，该多糖链具有一个乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue);以及 (iv)多条多糖链，这些多糖链各自具有不大于3个乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue)； (c)一种LMWH，具有以下特征 ⑴重均链分子量在3，500Da与7，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ；以及 (iii)多条多糖链，这些多糖链每条多糖链具有平均在O. 2个与3个之间的乙二醇裂解的糖醛酸残基(Ue)； (d)一种LMWH，具有以下特征 ⑴重均链分子量在3，500Da与7，OOODa之间； ( )抗Xa活性以及抗IIa活性，各自小于50IU/mg ；以及 (iii)多条多糖链，这些多糖链具有超过40%的U2sHns,6S 二糖残基； (e)一种LMWH，具有以下特征 一种缺少实质性抗凝血剂活性的多糖制剂，其中该制剂基本上由多个多糖组成，这些多糖包括式I : [Uw-Hx,y, Jm [Ug-Hx,y, Jn 其中U表示一个糖醛酸残基，并且H表示一个己糖胺残基； 其中m和η是整数，以使 m = 4至16,并且 η = I 至 4 ; w = -20S 或-20Η ；X = -NS 或-NAc ；y = -30S 或-30H ；z = -60S 或-60H ； COO'J-O 并且 Y 广。
Uq — HOOH ; 其中符号 表示m和η标记的单元是沿着该多糖链分布的，并且并非必须按照顺序，其中W、X、y、以及z在每个m标记的单元上各自是相同或不同的，并且其中X、y、以及z在每个η标记的单元上各自是相同的或不同的； (f) 一种LMWH，具有以下特征 缺少实质性抗凝血剂活性，具有抗转移活性并且基本上由多个多糖组成，这些多糖包括式II [Uw Ηχ，y，z] m [Uq Hx，y，z]n [Uw Ηχ，y，z] 0^ p 其中U表示一个糖醛酸残基，并且H表示一个己糖胺残基； 其中!!!至!·是整数，以使m = 0-10 ；η = 0-3 ；ο = 0-10 ；P = 0-3 ;q = 0-10 ；w = -20S 或-20H ；X = -NS 或-NAc ；y = -30S 或-30H ；z = -60S 或-60H ； 并且
全文摘要
在此说明了涉及将药剂靶向至肿瘤组织的方法和组合物。
文档编号C08B37/10GK102985443SQ201180019382
公开日2013年3月20日 申请日期2011年4月15日 优先权日2010年4月16日
发明者H.周, E.科克兰, T.K.基希莫托 申请人:动量制药公司