本发明属于医药技术领域，具体涉及一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐及其合成方法。
背景技术：
吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐作为一种重要的生物碱，具有重要的生物活性以及一定的药用价值，吡啶并[2',1':2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐是一种新的生物碱，现有技术中还没有关于这种生物碱及其合成方法的报道。
中国专利CN102741251B公开了一种吡啶并环衍生物、其药学上可接受的盐、其立体异构体或其溶剂化合物：其中R1、R2、R3、Q、X和Y如说明书中所定义；本发明还涉及这些化合物的制备方法，含有这些化合物的药物组合物，以及这些化合物在制备治疗和/或预防非胰岛素依赖性糖尿病、高血糖、高血脂、胰岛素抗性的药物中的应用。中国专利105859725A公开了一种5，10-二氢吲哚并[3，2-b]吲哚类衍生物的合成方法，步骤为：(1)在2-碘苯胺衍生物(IV)与2-乙炔基苯胺衍生物(V)的三乙胺溶液中，氮气保护下加入碘化亚铜、二(三苯基膦)二氯化钯，然后在氮气保护条件下加热回流，生成2，2'-(乙炔-1，2-二基)二苯胺衍生物(III)；(2)将化合物(III)、吡啶和对甲苯磺酰氯，在室温条件下反应生成化合物(II)；(3)化合物(II)与醋酸铜在二甲基甲酰胺中反应得到5，10-二氢吲哚并[3，2-b]吲哚类衍生物(I)；该该发明具有操作简单，反应原料易得，反应条件温和并且能实现取代基类型多样性，底物适用范围广等优点。但是，上述专利步骤复杂，产率低。
技术实现要素：
为克服上述缺陷，本发明的目的在于提供一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐及其合成方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
其中，所述R1为氢、烷基、卤素、烷氧基和酯基中一种，R2为氢、烷基和卤素中一种，R3为氢、烷基、卤素和硝基中一种。
优选地，所述R1为氢、4-Me、5-Me、6-Me和5-Cl中一种，R2为氢、2-Me和3-Me中一种，R3为氢、3-Me、4-Me和4-Cl中一种。
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)惰性气体保护下，在反应管中依次加入N-吡啶基吲哚，二苯乙炔，钴催化剂，醋酸银AgOAc，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O，四氟硼酸银AgBF4和有机溶剂；
(2)将步骤(1)反应管置于130-140℃条件下搅拌反应15-36h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，洗涤，浓缩，纯化，即得到目标产物。
优选地，所述步骤(1)N-吡啶基吲哚、二苯乙炔、钴催化剂、醋酸银、一水醋酸铜、四氟硼酸银的物质的量比为：1:1-1.2:0.018-0.022：0.036-0.043:0.9-1.1:0.9-1.1，所述N-吡啶基吲哚与有机溶剂的用量比为1mmol：8-15mL。
优选地，所述步骤(1)钴催化剂为CoCp·(CO)I2。
优选地，所述步骤(1)有机溶剂为1，2-二氯乙烷。
优选地，所述步骤(3)洗涤用溶剂为甲醇或者二氯甲烷。
优选地，所述步骤(3)纯化为硅胶柱柱层析，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1。
本发明吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，其反应通式如下：
其中，所述R1为氢、烷基、卤素、烷氧基和酯基中一种，R2为氢、烷基和卤素中一种，R3为氢、烷基、卤素和硝基中一种。
本发明的积极有益效果：
1.本发明吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐为一种含氮杂环化合物，是一种重要的生物碱，具有高的生物活性和药用价值，而且本发明吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法步骤简单，收率71％以上，收率高，纯度99％上，纯度高。
具体实施方式
下面结合一些具体实施方式，对本发明进一步说明。
实施例1
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.22mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 2.0mol％，醋酸银AgOAc 4.0mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.20mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.20mmol和1，2-二氯乙烷DCE 2mL；
(2)将步骤(1)反应管置于135℃油浴条件下搅拌反应24h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用二氯甲烷洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体，重量78.3mg，收率86％，纯度99.5％，熔点177-179℃，表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(d,J＝8.7Hz,1H),8.80(d,J＝8.4Hz,1H),8.70(t,J＝7.7Hz,1H),8.45(d,J＝6.4Hz,1H),8.01(d,J＝7.6Hz,1H),7.86-7.68(m,2H),7.64(t,J＝7.2Hz,1H),7.50(s,5H),7.37(d,J＝12.2Hz,5H),6.78(s,1H).13C NMR (101MHz,DMSO-d6)δ145.81,143.72,137.80,133.26,133.06,133.04,132.95,131.98,131.42,130.91,129.86,129.76,129.63,129.33,129.08,128.53,126.06,126.02,123.11,120.67,116.40,116.04,104.11.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated for C27H19N2:371.1548,found 371.1548。
实施例2
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.24mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 2.0mol％，醋酸银AgOAc 4.0mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.20mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.20mmol和1，2-二氯乙烷3mL；
(2)将步骤(1)反应管置于130℃油浴条件下搅拌反应24h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用甲醇洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体71.8mg，收率76％，纯度99.6％，熔点：179-181℃，表征数据为：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(d,J＝8.7Hz,1H),8.70(t,J＝7.7Hz,1H),8.64(d,J＝8.5Hz,1H),8.46(d,J＝6.5Hz,1H),7.77(t,J＝6.7Hz,1H),7.64(t,J＝7.8Hz,1H),7.50(s,6H),7.38(d,J＝12.0Hz,5H),6.74(s,1H),2.59(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ145.75,143.70,137.79,133.23,132.99,132.85,132.71,132.33,131.99,131.03,130.87,129.84,129.67,129.35,129.11,128.61,126.20,126.14,120.69,116.40,113.54,102.24,18.91.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated for C28H21N2:385.1705,found 385.1704。
实施例3
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.22mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 2.0mol％，醋酸银AgOAc 4.0mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.20mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.20mmol和1，2-二氯乙烷2mL；
(2)将步骤(1)反应管置于140℃油浴条件下搅拌反应15h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用二氯甲烷洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体77.4mg，收率82％，纯度99.6％，熔点：180-182℃，表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(d,J＝8.9Hz,1H),8.70(d,J＝8.5Hz,2H),8.42(d,J＝6.8Hz,1H),7.79(s,1H),7.74(s,1H),7.55(d,J＝8.7Hz,1H),7.50(s,5H),7.38(t,J＝6.8Hz,3H),7.33(d,J＝7.2Hz,2H),6.71(s,1H),2.54(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ145.64,143.55,137.68,135.70,133.30,133.15,132.93,131.98,131.76,131.23,130.88,129.84,129.62,129.31,129.08,128.44,127.54,122.56,120.44,116.25,115.73,103.72,21.49.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated for C28H21N2:385.1705,found 385.1704。
实施例4
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.22mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 2.0mol％，醋酸银AgOAc 4.0mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.20mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.20mmol和1，2-二氯乙烷2mL；
(2)将步骤(1)反应管置于135℃油浴条件下搅拌反应36h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用二氯甲烷洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体82.2mg，收率87％，纯度99.6％，熔点：183-185℃，表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.28(d,J＝8.7Hz,1H),8.68(t,J＝7.6Hz,1H),8.63(s,1H),8.42(d,J＝6.2Hz,1H),7.89(d,J＝7.9Hz,1H),7.75(t,J＝6.4Hz,1H),7.50(s,6H),7.35(d,J＝13.6Hz,5H),6.73(s,1H),2.68(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ145.64,143.72,137.71,136.24,133.37,133.32,132.53,132.02,130.85,129.84,129.61,129.28,129.25,129.05,128.62,127.69,122.65,120.55,116.44,115.78,104.05,22.31.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated for C28H21N2:385.1705,found 385.1704。
实施例5
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.22mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 2.0mol％，醋酸银AgOAc 4.0mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.20mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.20mmol和1，2-二氯乙烷2mL；
(2)将步骤(1)反应管置于135℃油浴条件下搅拌反应24h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用二氯甲烷洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体83.8mg，收率85％，纯度99.3％，熔点：186-188℃，表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(d,J＝8.7Hz,1H),8.84(d,J＝9.0Hz,1H),8.73(t,J＝7.7Hz,1H),8.49(d,J＝6.4Hz,1H),8.11(s,1H),7.81(t,J＝6.6Hz,1H),7.73(d,J＝8.7Hz,1H),7.51(s,5H),7.38(d,J＝16.3Hz,5H),6.77(s,1H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ146.07,143.46,137.97,134.37,133.80,133.05,132.82,131.89,131.47,131.00,130.54,129.89,129.61,129.58,129.42,129.14,128.33,125.63,122.19,121.07,117.68,116.44,103.39.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated for C27H18ClN2:405.1159,found 405.1158。
实施例6
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.22mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 2.0mol％，醋酸银AgOAc 4.0mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.18mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.18mmol和1，2-二氯乙烷2mL；
(2)将步骤(1)反应管置于135℃油浴条件下搅拌反应24h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用二氯甲烷洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体73.7mg，收率78％，纯度99.6％，熔点：181-183℃，表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.19(d,J＝9.0Hz,1H),8.78(d,J＝8.4Hz,1H),8.58(d,J＝8.8Hz,1H),8.15(s,1H),7.99(d,J＝7.5Hz,1H),7.70(t,J＝7.4Hz,1H),7.62(t,J＝7.2Hz,1H),7.50(s,5H),7.36(d,J＝14.8Hz,5H),6.75(s,1H),2.40(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ147.21,142.20,135.23,133.35,132.96,132.85,132.81,132.02,131.31,130.94,130.59,129.82,129.67,129.64,129.28,129.05,128.61,125.89,123.03,116.01,115.95,103.82,17.92.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated for C28H21N2:385.1705,found 385.1704。
实施例7
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.22mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 2.2mol％，醋酸银AgOAc 4.3mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.22mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.22mmol和1，2-二氯乙烷2mL；
(2)将步骤(1)反应管置于135℃油浴条件下搅拌反应24h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用二氯甲烷洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体78.4mg，收率83％，纯度99.7％，熔点：186-188℃，表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.97(s,1H),8.93(d,J＝8.6Hz,1H),8.32(d,J＝7.1Hz,1H),8.00(d,J＝7.8Hz,1H),7.72(t,J＝7.8Hz,1H),7.64(dd,J＝13.3,7.0Hz,2H),7.50(s,5H),7.38(t,J＝6.9Hz,3H),7.34(d,J＝7.6Hz,2H),6.76(s,1H),2.86(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ159.68,143.15,136.86,133.32,133.20,132.97,132.80,131.96,131.34,130.86,129.84,129.82,129.72,129.25,129.05,127.59,125.93,125.84,122.90,122.02,116.39,115.02,104.02,22.34.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated forC28H21N2:385.1705,found 385.1704。
实施例8
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.22mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 2.0mol％，醋酸银AgOAc 4.0mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.20mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.20mmol和1，2-二氯乙烷2mL；
(2)将步骤(1)反应管置于135℃油浴条件下搅拌反应24h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用二氯甲烷洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体64.7mg，收率81％，纯度99.6％，熔点：184-186℃，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(d,J＝8.9Hz,1H),8.79(d,J＝8.5Hz,1H),8.68(t,J＝7.8Hz,1H),8.42(d,J＝6.6Hz,1H),8.00(d,J＝7.6Hz,1H),7.36(dd,J＝23.2,7.5Hz,4H),7.23(s,4H),6.78(s,1H),2.34(s,3H),2.31(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ145.67,143.72,140.51,138.74,137.72,133.25,133.04,132.93,131.82,131.43,130.54,130.46,129.70,129.54,128.48,126.94,126.01,125.93,123.08,120.60,116.37,116.04,104.07,21.48,21.31.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated for C29H23N2:399.1861,found 399.1864。
实施例9
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.22mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 2.0mol％，醋酸银AgOAc 4.0mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.20mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.20mmol和1，2-二氯乙烷2mL；
(2)将步骤(1)反应管置于135℃油浴条件下搅拌反应24h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用二氯甲烷洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体61.5mg，收率77％，纯度99.7％，熔点：181-183℃，表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(d,J＝8.9Hz,1H),8.80(d,J＝8.6Hz,1H),8.69(t,J＝8.0Hz,1H),8.44(d,J＝6.8Hz,1H),8.02(d,J＝7.8Hz,1H),7.84-7.68(m,2H),7.64(t,J＝7.4Hz,1H),7.40(t,J＝7.4Hz,1H),7.30(dd,J＝17.7,10.0Hz,4H),7.19(d,J＝8.1Hz,2H),7.14(d,J＝7.5Hz,1H),6.79(s,1H),2.30(s,3H),2.27(s,3H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ145.71,143.70,139.15,138.22,137.81,133.20,133.08,133.00,132.93,132.23,131.55,131.42,130.06,129.98,129.73,129.71,129.06,128.94,128.43,126.77,126.03,125.96,123.09,120.66,116.39,116.05,104.12,21.41,21.40.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated for C29H23N2:399.1861,found 399.1864。
实施例10
一种吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，其化学结构通式为：
上述吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐的合成方法，包括以下步骤：
(1)氮气保护下，在schlenk管中依次加入N-吡啶基吲哚0.20mmol，二苯乙炔0.2mmol，钴催化剂CoCp·(CO)I2 1.8mol％，醋酸银AgOAc 3.6mol％，一水醋酸铜Cu(OAc)2·H2O 0.20mmol，四氟硼酸银AgBF4 0.20mmol和1，2-二氯乙烷1.6mL；
(2)将步骤(1)反应管置于135℃油浴条件下搅拌反应24h；
(3)反应完毕后，反应管冷却至室温，将反应混合物除盐，用二氯甲烷洗涤，浓缩，硅胶柱柱层析纯化，柱层析条件为：200-300目硅胶，洗脱剂为二氯甲烷和甲醇混合溶液，两者体积比为20：1，即得到目标产物红色固体74.9mg，收率71％，纯度99.5％，熔点：201-203℃，表征数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.29(d,J＝8.9Hz,1H),8.82(d,J＝8.5Hz,1H),8.72(t,J＝7.8Hz,1H),8.53(d,J＝6.5Hz,1H),8.03(d,J＝7.7Hz,1H),7.75(t,J＝7.1Hz,2H),7.69-7.59(m,3H),7.56-7.46(m,4H),7.37(d,J＝8.2Hz,2H),6.87(s,1H).13C NMR(101MHz,DMSO-d6)δ146.14,143.66,138.26,135.96,134.30,133.90,132.98,132.63,132.13,131.94,131.59,131.41,130.19,129.44,128.50,127.77,126.24,123.21,120.78,116.34,116.04,104.38.HRMS m/z(ESI)[M-BF4]calculated for C27H17Cl2N2:439.0763,found 439.0766。
生物活性实验
1.实验材料：DPPH自由基，维生素C，紫外分光光度计。
2.实验步骤：a.分别准确称量2.0mg本发明实施例1-10吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐，用无水乙醇溶剂定容至l0mL，分别配制成浓度为0.20mg/mL的样品待测液，将上述待测液按2倍、4倍、8倍、16倍、32倍、64倍、128倍稀释成系列浓度备用；再准确称量2.0mg维生素C，同样用无水乙醇溶剂定容至l0mL，配制成0.20mg/mL的阳性对照样品待测液；设无水乙醇为空白对照。
b.准确称量8.5mg DPPH，用无水乙醇配制成浓度为0.085mg/mL溶液备用，同时，准确称量各样品待测液2mL，分别加入2mL的DPPH溶液(0.085mg/mL)，摇匀后静置30min，在517nm处测定吸光度，计算各化合物对DPPH自由基的清除率，实验结果见表1。
DPPH自由基清除率计算公式：清除率(％)＝[1-(A1-A2)/A3]×100％，
其中，A1-2mL样品待测液+2mLDPPH溶液，A2-2mL样品待测液+2mL无水乙醇，A3-2mL DPPH溶液+2mL无水乙醇。
表1本发明实施例1-10吲哚盐对DPPH自由基的清除率(n＝6)
注：*代表P＜0.01。
由表1可知，本发明实施例1-10吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐对DPPH自由基具有明显的清除作用，明显强于阳性对照药维生素C，因此，本发明实施例1-10具有吡啶并[2’,1’:2,3]哌啶[1,6-a]吲哚盐具有很强的生物活性。