本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种含有氮杂环螺旋结构的高效ido/tdo抑制剂及其制备方法。
背景技术：
吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,ido)是1967年hayaishi小组首次在细胞内发现的一种含有亚铁血红素的单体酶，cdna编码蛋白由403氨基酸组成，分子量为45kda，它是延着色氨酸-犬尿氨酸途径分解代谢的限速酶，并且在多种哺乳动物的组织中具有广泛的表达(hayaishio.etalscience,1969,164,389-396)。在肿瘤患者的细胞中，ido常作为诱导肿瘤微环境免疫耐受产生重要的生理作用，其介导的色氨酸(tryptophan,trp)-犬尿氨酸(kynurenine,kyn)代谢途径参与了肿瘤免疫逃逸，而ido作为诱导肿瘤微环境免疫耐受也产生重要的作用。
色氨酸为哺乳动物体内重要的必须氨基酸之一，需要从食物中大量摄取，维持细胞活化和增殖，以及蛋白质以及一些神经递质的合成。因此，它的缺乏会导致一些重要的细胞的功能失常。ido在体内能够催化色氨酸转化为n-甲酰犬尿氨酸，降低色氨酸的含量而造成色氨酸体内的不足，导致肿瘤的发生。而免疫组织学研究显示，犬尿氨酸途径能够导致兴奋毒素喹啉酸的增多，还会导致阿兹海默等神经系统疾病等多种严重的人类疾病(guilleming.j.etalneuropathol.andappl.neurobiol.2005,31,395–404)。
研究表明，ido在肿瘤微环境中可以通过以下几种方式来抑制局部t细胞免疫反应：色氨酸耗竭、毒性代谢和诱导调节性t细胞增殖。很多情况是在肿瘤中过度表达，从而消耗局部的色氨酸，产生大量的犬尿氨酸等代谢产物。事实上，在无色氨酸或犬尿氨酸的培养条件下，t细胞会发生增殖抑制、活性降低甚至凋亡。而t细胞中存在一个对色氨酸水平非常敏感的调节点，ido作用能够消耗色氨酸，从而导致t细胞停滞于g1期中期，从而抑制了t细胞的增殖，也抑制了t细胞的免疫应答。而t细胞一旦停止增殖，可能就不会再被刺激作用，这是ido在体内免疫作用机制(mellora.etalbiochem.biophys.res.commun.2005,338(1):20-24)(leronds.etalj.exp.med.2002,196(4):447-457)。
tdo是另外一种色氨酸代谢酶，它的作用机制与ido一样，只是它起初被认为是内源的，特别是在正常肝脏和脑细胞都有表达，特别是在肝脏中有高表达。现已验证了tdo在多种癌症病人组织中具有过度表达，而且tdo抑制剂在小鼠肿瘤模型中通过免疫排斥肿瘤细胞生长的功效得以验证(pilotte,l.etal.proc.natl.acad.sci.usa；publishedonline，jan.30,2012)。
因此ido、tdo抑制剂或ido/tdo双抑制剂是肿瘤免疫治疗的重要靶点，本领域尚需研发高活性的新型ido、tdo或ido/tdo抑制剂。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种新型的可作为高效的ido/tdo双抑制剂的含有氮杂环螺旋结构的化合物，及其制备方法，本发明的式(i)化合物，具有抗肿瘤、治疗神经退行疾病(阿尔茨海默病)、抗炎等多种药理活性。
本发明第一方面，提供一种式(i)化合物或其药学上可接受的盐、其立体异构体、或其互变异构体、或其前药：
式中，
a选自下组：s、o、-c(r1)2-或无；
b选自下组：-c(r1a)2-或无；
e和m分别独立地选自：n或cr1；
各r1独立地选自下组：h、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c3-c8环烷基、oh、取代或未取代的o-c1-c6烷基、取代或未取代的o-c3-c8环烷基；
各r1a独立地选自下组：h、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c3-c8环烷基；
所述r1、r1a中，所述取代是指具有选自a组的一个或多个(如1、2、3、4个)取代基：卤素、羟基、-nh2、硝基、-cn、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、o-c1-c4烷基、c3-c8环烷基、o-c3-c8环烷基、c2-c4链烯基、c2-c4炔基、苯基、苄基；
x选自下组：h、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基、oh、取代或未取代的oc1-c6烷基、取代或未取代的oc3-c8环烷基、nrarb或nrac(o)r3；
并且，当x选自：h、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基时，y选自下组：取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c1-c6烷氧基、取代或未取代的c1-c6烷硫基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基、-(cr12)nc(o)nr2r3、-c(cr12)nc(s)nr2r3、-o(cr12)nc(o)nr2r3、-s(cr12)nc(o)nr2r3、-nr2(cr12)nc(o)nr2r3、-nr2(cr12)nc(o)r3、-nr2c(o)(cr12)nc(o)r3、-nr2(cr12)nc(o)o(cr12)nr3、-nr2(cr12)nc(s)nr2r3、-nr2(cr12)nc(o)nr2r3、-nr2(cr12)nc(s)nr2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2nr2r3、-o(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-s(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-nr2(cr12)ns(o)2nr2r3、-nr2s(o)2nr2r3、-(cr12)ns(o)2nr2r3、-(cr12)nnr2s(o)2nr2r3、-(cr12)nnr2c(o)nr1s(o)2r3、-(cr12)ns(o)(＝nr2)r3、-(cr12)ns(o)(＝ncn)r3、-(cr12)ns(o)r3、-nr2s(o)2r3、-(cr12)ns(o)2r3、nr2c(＝n-cn)nr2r3；所述取代是指具有选自c组的一个或多个(如1、2、3、4个)取代基：卤素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c3-c10环烷基、取代或未取代的c3-c10杂环烷基、c6-c20芳基、c3-c14杂芳基羟基、oc6-c20芳基、oc3-c14杂芳基、羟基、oso2nh2、nhso2nh2、氨基、硝基、醛基、-cf3、-cn、-sf5、nrarb、羧基、-cora、-co2c1-c6烷基、-conrarb、-so2r3、-so2nrarb、-p(o)me2、-p(o)(ome)2；
当x选自：oh、oc1-c6烷基、o-c3-c8环烷基、nrarb或nrac(o)r3时，y选自下组：取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c3-c10杂环烷基、-(cr12)nc(o)nr2r3、-(cr12)nc(s)nr2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2nr2r3、-(cr12)ns(o)2nr2r3、-(cr12)nnr2s(o)2nr2r3、-(cr12)nnr2c(o)nr1s(o)2r3、-(cr12)ns(o)(＝nr2)r3、-(cr12)ns(o)(＝ncn)r3、-(cr12)ns(o)r3、-(cr12)ns(o)2r3；所述取代是指具有选自d组的一个或多个(如1、2、3、4个)取代基：卤素、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c3-c10环烷基、取代或未取代的c3-c10杂环烷基、取代或未取代的c6-c20芳基、c3-c14杂芳基羟基、oc6-c20芳基、oc3-c14杂芳基、羟基氨基、硝基、醛基、-cf3、-cn、-sf5、nrarb、羧基、-cora、-ch2-c6-c10芳基、-ch2-c6-c10芳基、-co2c1-c6烷基、-conrarb、-so2r3、-so2nrarb、-p(o)me2、-p(o)(ome)2、羟基、oso2nh2、nhso2nh2、c3-c6杂环基；
其中，各ra和各rb分别独立地选自下组：氢、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基、或ra和rb和与之相连的n原子共同形成取代或未取代的4-8元杂环，且所述的杂环具有至少一个n和0-2个选自s、o的杂原子，其中所述的含氮杂环中n为nh或nrg形式，其中rg独立地为c1-c10烷基、c3-c10环烷基、c6-c20芳基、或c3-c14杂芳基；其中，所述取代指具有选自e组的一个或多个(如1、2、3、4个)取代基：卤素、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c1-c6烷氧基、羟基、oso2nh2、nhso2nh2、氨基、-cf3、-cn、-sf5、nrarb、羧基、-cora、-co2c1-c6烷基、-conrarb、-so2rb、-so2nrarb；
各r2和各r3分别独立地选自下组：氢、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基、取代或未取代的c3-c10杂环基、取代或未取代的氨基；
在a组、b组、c组、d组、e组、f组、r2、r3的取代基中，所述取代指具有选自g组的一个或多个(如1、2、3、4个)取代基：卤素、c1-c6烷基、-o-c1-c6烷基、-cn、-cf3、-o-cf3、c3-c10环烷基、c2-c8酯基、c6-c10芳基；
z是碳原子或n；当z是n时，x不存在；
n为0至8的整数。
在另一优选例中，所述式(i)化合物如式(ii)所示：
式中，
其中，rc为一个或多个选自下组的基团：卤素、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c1-c6烷氧基、取代或未取代的c3-c10环烷氧基、羟基、氨基、硝基、取代或未取代的c1-c6醛基、-cf3、-cn、-sf5、nrarb、羧基、-cora、-co2c1-c6烷基、-conrarb、-so2r3、-so2nrarb；其中各ra和各rb如上所定义；
m是1至4的整数；
q是1、2或3；
r是1或2；
在另一优选例中，所述
在另一优选例中，
下组：
在另一优选例中，
在另一优选例中，
在另一优选例中，当x选自：h、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基时，y选自下组：取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基、-(cr12)nc(o)nr2r3、-c(cr12)nc(s)nr2r3、-o(cr12)nc(o)nr2r3、-s(cr12)nc(o)nr2r3、-nr2(cr12)nc(o)nr2r3、-nr2(cr12)nc(o)r3、-nr2c(o)(cr12)nc(o)r3、-nr2(cr12)nc(o)or3、-nr2(cr12)nc(s)nr2r3、-nr2(cr12)nc(o)nr2r3、-nr2(cr12)nc(s)nr2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2nr2r3、-nr2(cr12)nc(s)nr2r3、-nr2c(o)nr2r3、-nr2c(s)nr2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-o(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-s(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-nr2(cr12)ns(o)2nr2r3、-nr2s(o)2nr2r3、-(cr12)ns(o)2nr2r3、-(cr12)nnr2s(o)2nr2r3、-(cr12)nnr2c(o)nr1s(o)2r3、-(cr12)ns(o)(＝nr2)r3、-(cr12)ns(o)(＝ncn)r3、-(cr12)ns(o)r3、-(cr12)ns(o)2r3、nr2c(＝n-cn)nr2r3；所述取代是指具有选自c组的一个或多个(如1、2、3、4个)取代基。
在另一优选例中，当x选自下组：oh、oc1-c6烷基、oc3-c8环烷基、nrarb或nrac(o)r3时，y选自下组：取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基、-(cr12)nc(o)nr2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-(cr12)ns(o)2nr2r3、-(cr12)nnr2s(o)2nr2r3、-(cr12)nnr2c(o)nr1s(o)2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2nr2r3、-(cr12)ns(o)(＝nr2)r3、-(cr12)ns(o)(＝ncn)r3、-(cr12)ns(o)r3、-(cr12)ns(o)2r3；所述取代是指具有选自d组的一个或多个(如1、2、3、4个)取代基。
在另一优选例中，所述各r2和各r3分别独立地选自下组：氢、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基。
在另一优选例中，各ra和各rb和与之相连的n原子共同形成取代或未取代的4-8元杂环，且所述的杂环具有至少一个n和0-2个选自s、o的杂原子，其中所述的含氮杂环中n为nh或nrg形式，其中rg独立地为c1-c10烷基、c3-c10环烷基、c6-c20芳基、或c3-c14杂芳基。
在另一优选例中，所述式(i)化合物如式(iii)所示，
式中，x、y、z、rc如上所定义，m是1至4的整数。
在另一优选例中，所述a为无。
在另一优选例中，所述b为无。
在另一优选例中，所述r1为h。
在另一优选例中，所述e和m分别独立地为cr1。
在另一优选例中，所述r1独立地选自下组：h、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c3-c8环烷基，较佳地为h。
在另一优选例中，所述x选自下组：h、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10环烷基，较佳地，x为h。
在另一优选例中，当x为h时，y选自下组：取代或未取代的c1-c6烷氧基、取代或未取代的c1-c6烷硫基、取代或未取代的c3-c14杂芳基、-nr2(cr12)nc(o)nr2r3、-nr2(cr12)nc(o)r3、-nr2c(o)(cr12)nc(o)r3、-nr2(cr12)nc(o)o(cr12)nr3、-nr2(cr12)nc(s)nr2r3、-(cr12)nc(o)nr2s(o)2r3、-nr2(cr12)ns(o)2nr2r3、-(cr12)ns(o)r3、-(cr12)ns(o)2r3或nr2c(＝n-cn)nr2r3。
在另一优选例中，x为oh。
在另一优选例中，当x为oh时，所述y选自下组：取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c3-c10杂环烷基。
在另一优选例中，所述d组取代基选自下组：取代或未取代的c6-c20芳基、羟基、c3-c6杂环基、-ch2-c6-c10芳基。
在另一优选例中，所述式(i)化合物如式(iv)所示：
式中，
式中，rc为一个或多个选自下组的基团：卤素、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c1-c6烷氧基、取代或未取代的c3-c8环烷基、取代或未取代的c3-c8环烷氧基、羟基、-cf3、-cn、-sf5、nrarb、羧基、-cora、-conrarb、-so2r3、-so2nrarb；
其中各ra和各rb如上所定义；
m是1至4的整数；
x选自下组：oh、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c3-c6环烷基、烷基oc1-c6烷基、oc3-c8环烷基、nrarb或nrac(o)r3；
在另一优选例中，所述化合物如式(v)所示：
式中，
rc为一个或多个选自下组的基团：卤素、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c1-c6烷氧基、羟基、-cf3、-cn、-sf5、nrarb、羧基、-cora、-conrarb、-so2r3、-so2nrarb；其中各ra和各rb如上所定义；
m是1至4的整数；
rd选自下组：h、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c1-c6烷氧基、取代或未取代的c3-c8环烷基、取代或未取代的c3-c8环烷氧基、取代或未取代的c1-c6卤代烷基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的c3-c14杂芳基；所述取代指具有选自h组的一个或多个(如1、2、3、4个)取代基：卤素、c1-c6烷基、c3-c8环烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基、c3-c10环烷基、取代或未取代的c3-c10杂环烷基、c6-c20芳基、c3-c14杂芳基羟基、oc6-c20芳基、oc3-c14杂芳基、羟基氨基、硝基、醛基、oh、oso2nh2、nhso2nh2、-cf3、-cn、-sf5、nrarb、羧基、-cora、-co2c1-c6烷基、-conrarb、-so2r3、-so2nrarb、-p(o)me2、-p(o)(ome)2；
在另一优选例中，所述化合物如式(vi)所示，
式中，
rc为一个或多个选自下组的基团：卤素、取代或未取代的c1-c6烷基、取代或未取代的c1-c6烷氧基、取代或未取代的c3-c8环烷基、取代或未取代的c3-c8环烷氧基、羟基、-cf3、-cn、-sf5、nrarb、羧基、-cora、-conrarb、-so2r3、-so2nrarb；其中各ra和各rb如上所定义；
m是1至4的整数；
rf选自下组：h、so2nh2、c1-c6卤代烷基、取代或未取代的c1-c10烷基、取代或未取代的c3-c10环烷基、取代或未取代的c2-c10烯基、取代或未取代的c6-c20芳基、或取代或未取代的c3-c14杂芳基氨基；所述取代指具有选自i组的一个或多个(如1、2、3、4个)取代基：c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6环烷基、c1-c6卤代烷基、烷氧基、杂环基，芳基、杂芳基、-cf3、-cn、-sf5、nrarb、羧基、羟基、oso2nh2、nhso2nh2、氨基、-cora、-conrarb、-so2r3、-so2nrarb；其中，所述ra和rb和与之相连的n原子共同形成取代或未取代的4-8元杂环，且所述的杂环具有至少一个n和0-2个选自s、o的杂原子，其中所述的含氮杂环中n为nh或nrg形式，其中rg独立地为c1-c10烷基、c3-c10环烷基、c6-c20芳基、或c3-c14杂芳基。
在另一优选例中，所述式(i)化合物选自下组：
(顺/反)3-苯基螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-醇；
(順式)4-甲基-n-((1s，3s)-螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯磺酰胺；
(反式)4-甲基-n-((1s，3s)-螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯磺酰胺甲酰胺；
(反式)4-甲基-n-((1s，3s)-螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(顺/反)3-氟-n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(順式)4-氟-n-螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯磺酰胺；
(順式)n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)环己基磺酰胺；
(順式)3-氯-4-氟-n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(反式)3-溴-4-氟-n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(反式)n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)丙烷-2-磺酰胺；
(反式)n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)萘-2-磺酰胺；
(反式)n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)萘-1-磺酰胺；
(反式)2-氟-n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(反式)2,4-二氯-n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(反式)4-甲氧基-n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(反式)n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)-2-萘甲酰胺；
(反式)3-氯-n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(反式)3-溴-n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(反式)n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺；
(反式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基氨基甲酸苯酯；
(反式)氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)甲基磺酰胺；
(反式)3，4-二氯-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(反式)4-溴-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺；
(反式)n-(3-溴-4-氟苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺；
(反式)n-(3-氯苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺；
(反式)-n-(3-溴苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺；
(顺式)-n-(3-溴苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺；
(反式)n-(4-氟苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺；
(顺/反)3-(1-苄基-1h-1,2,3-三唑-4-基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-醇；
(反式)3-(-螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)磺酰脲；
(反式)1-苯基-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)硫脲；
(顺式)1-(3-氟苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑5,1-a]异吲哚l]-3-基)硫脲；
(顺式)1-(4-氯苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑5,1-a]异吲哚l]-3-基)硫脲；
(顺式)1-(4-三氟甲基苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑5,1-a]异吲哚l]-3-基)硫脲；
(顺式)1-(3-三氟甲基苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑5,1-a]异吲哚l]-3-基)硫脲；
(順式)1-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)脲；
(順式)1-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲；
(顺式)1-(3,5-二(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)硫脲；
(顺式)1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)硫脲；
(順式)1-(3,5-二(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)脲；
(順式)1-(3,4-二氯苯基)-3-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)脲；
(反式)1-(3-三氟甲基苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)硫脲；
(反式)1-(3-氟苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)硫脲；
(反式)1-(4-氯苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)硫脲；
(反式)1-(3-氟苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)磺酰脲；
(順式)1-甲基-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)磺酰脲；
(顺/反)1-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)硫脲；
(顺/反)1-(4-氯苯基)-3-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)硫脲；
(顺/反)1-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)硫脲；
(顺/反)1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)脲；
(顺/反)6’-氟-1-(3-氟-4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)苯基)螺[吖丁啶-3,5’-咪唑并[5,1-a]异吲哚]；或
(顺/反)6-氟-1’-(3-氟-4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)苯基)螺[咪唑[5,1-a]异吲哚-5,4’-哌啶]。
在另一优选例中，所述药学上可接受的盐选自下组：盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)、1-萘磺酸盐、2-萘磺酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、富马酸盐、马来酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、苯乙酸盐、扁桃酸盐。
在另一优选例中，所述的化合物是实施例中所制备的化合物1-117。
在另一优选例中，所述的化合物是顺反异构体。
在另一优选例中，所述的化合物是顺式异构体。
在另一优选例中，所述的化合物是反式异构体。
在另一优选例中，所述的化合物是外消旋体。
在另一优选例中，所述的化合物是对映异构体。
本发明第二方面，提供一种药物组合物，所述药物组合物包括：
(1)如本发明第一方面所述的式(i)化合物、或其药学上可接受的盐、其立体异构体或其互变异构体、或其前药；
(2)药学上可接受的载体和/或抗肿瘤药物。
在另一优选例中，所述抗肿瘤药物选自下组：检查点蛋白抗体，如pd-1抗体、pd-l1抗体或ctla4抗体。
在另一优选例中，所述抗肿瘤药物为癌症的免疫治疗药物。
在另一优选例中，所述癌症的免疫治疗药物选自下组：pd-1抗体、ctla-4抗体、pd-l1抗体、pd-l2抗体、化疗药物或靶向治疗药物。
在另一优选例中，所述靶向治疗药物选自下组：hdac抑制剂、激酶抑制剂、ep4拮抗剂、或其组合。
本发明第三方面，提供一种如本发明第一方面所述的式(i)化合物或其药学上可接受的盐、其立体异构体、或其互变异构体、或其前药的用途，用于：
(i)制备ido/tdo抑制剂；
(ii)制备预防和/或治疗ido和tdo介导的疾病的药物。
在另一优选例中，所述ido/tdo介导的疾病为ido/tdo介导的色氨酸代谢途径的病理学特征的疾病。
在另一优选例中，所述ido/tdo介导的疾病选自下组：癌症、神经退行疾病、眼疾、心里障碍、抑郁症、焦虑症、老年痴呆症、或自身免疫性疾病。
在另一优选例中，所述癌症包括但不限于：结肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、大肠癌、胰腺癌、卵巢癌、前列腺癌、肾癌、肝癌、脑癌、黑色素瘤、多发性骨髓瘤、慢性粒细胞性白血病、血液肿瘤、淋巴肿瘤，包括在其他远离肿瘤原发部位的组织或器官的转移病变。
本发明第四方面，提供一种预防和/或治疗ido/tdo介导的疾病的方法，包括对患者给予第一方面所述的式(i)化合物或第二方面所述的药物组合物的步骤。
在另一优选例中，所述ido/tdo介导的疾病为癌症，所述方法进一步包含对患者施用额外的抗癌剂(也称为抗肿瘤药物，所述抗肿瘤药物如上所述)的步骤。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一赘述。
具体实施方案
本发明人经过广泛而深入地研究，首次研发出一种新型的含有氮杂环螺旋结构的化合物，该化合物可作为高效的含有氮杂环螺旋结构抑制剂，用于预防和/或治疗ido/tdo介导的疾病，也可作为抗炎药物使用。在此基础上，完成了本发明。
定义
术语“烷基”是指一价饱和脂族烃基，具有1至10个碳原子，包括直链和支链烃基，如甲基(即ch3-)、乙基(即ch3ch2-)、正丙基(即ch3ch2ch2-)、异丙基(即(ch3)2ch-)、正丁基(即ch3ch2ch2ch2-)、异丁基(即(ch3)2chch2-)、仲丁基(即(ch3)(ch3ch2)ch-)、叔丁基(即(ch3)3c-)、正戊基(即ch3ch2ch2ch2ch2-)、新戊基(即(ch3)3cch2-)。在本发明中，该术语包括取代或未取代的烷基。
如本文所用，术语“取代或未取代的”指所述基团可以是未取代的，或者所述基团中的h被一个或多个(较佳地1-6个，更佳地1-3个)取代基所取代。
如本文所用，所述的“取代”或“取代的”指所述基团具有一个或多个(较佳地1-6个，更佳地1-3个)选自下组的取代基：卤素、羟基、-nh2、硝基、-cn、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4烷氧基、c3-c6环烷基、c2-c4链烯基、c2-c4炔基、苯基、苄基。
如本文所用，术语“环烷基”指取代或未取代的c3-c12环烷基。
如本文所用，术语“烷氧基”指-o-烷基，其中所述烷基可以是饱和或不饱和的、可以是支链、直链的、或环状的。优选地，烷氧基具有1-10个碳原子，较佳地1-6个碳原子。代表性的例子包括(但并不限于)：甲氧基、乙氧基、丙氧基。
如本文所用，术语“芳基”是指6至20个(较佳6-14个)碳原子的单价芳香族碳环基团，它具有单环(如苯基)或稠环(如萘基或蒽基)，如果连接点在芳香碳原上，稠环可能是非芳香性的(如2-苯并噁唑酮，2h-1,4-苯并噁嗪-3(4h)-酮-7-基等)。优选的芳基包括苯基和萘基。该术语包括取代或未取代的形式，其中取代基的定义如上。
如本文所用，术语“烯基”是指具有2至10(如2至6或2至4)个碳原子的烯基，且具有至少1(如1至2)个不饱和烯键(>c＝c<)。这类基团的例如有乙烯基、烯丙基、丁-3-烯基。如本文所用，术语“环烷基”是指具有3至10个碳原子的、具有单环或多环(包括稠合体系，桥环体系和螺环体系)的环状烷基。在稠环体系中，一个或多个环可以是环烷基、杂环的、芳基或杂芳基，只要连接位点是通过环烷基的环。合适的环烷基的例子包括：例如，金刚烷基、环丙基、环丁基、环戊基和环辛基。
如本文所用，术语“卤代”或“卤素”是指氟、氯、溴和碘。
如本文所用，术语“杂芳基”是指环内具有1至10个碳原子和1至4个选自氧、氮和硫的杂原子的芳香基团，这样的杂芳基可以是单环的(如吡啶基或呋喃基)或稠环(如吲嗪基(indolizinyl)或苯并噻吩基)，其中，所述稠环可以是非芳香性的和/或含有一个杂原子，只要连接点是通过芳香性杂芳基的原子。在一实施例中，杂芳基的环原子氮和/或硫任选地被氧化为n-氧化物(n-o)，亚磺酰基或磺酰基。优选地杂芳基包括吡啶基、吡咯基、吲哚基、苯并恶二唑、咪唑基、喹啉基、、恶唑基、异恶唑基、噻唑基、四氮唑基、1,2,3-三氮唑基、1,2,4-三氮唑基、1,3,4-噁二唑、1,2,4-噁二唑、1,2,5-噁二唑、噻吩基和呋喃基。该术语包括取代或未取代的杂芳基。
如本文所用，术语“取代的杂芳基”是指被1至5个、优选1至3个、更优选1至2个的取代基所取代的杂芳基，所述取代基选自与取代的芳基所定义的相同取代基。
如本文所用，术语“杂环”或“杂环的”或“杂环烷基”或“杂环基”是指饱和的、部分饱和的或不饱和的基团(但不是芳香性的)，具有单环或稠环(包括桥环体系和螺环体系，环内具有1至10个碳原子和1至4个选自氮、硫或氧的杂原子，在稠环体系中，一个或多个环可以是环烷基、芳基或杂芳基，只要连接点通过非芳香性环。在一实施例中，杂环基团的氮原子和/或硫原子任选地被氧化，以提供n-氧化物、亚磺酰基和磺酰基部分。
如本文所用，术语“取代的杂环的”或“取代的杂环烷基”或“取代的杂环基”是指被1到5(如1至3)个取代基所取代的杂环基团，所述取代基与取代的环烷基所定义的取代基相同。
如本文所用，术语“立体异构体”是指一个或多个立体中心的手性不同的化合物。立体异构体包括对映异构体和非对映异构体。
如本文所用，术语“互变异构体”是指质子位置不同的化合物的替代形式，如烯醇-酮和亚胺-烯胺互变异构体，或杂芳基的互变异构形式，所述杂芳基包含与环的-nh-部分和环的＝n-部分连接的环原子，如吡唑、咪唑、苯并咪唑、三唑和四唑。
“前药”是指实施例化合物的任何衍生物，当被施用于受试者时，其能够直接或间接地提供实施例的化合物或其活性代谢物或残余物。特别优选的衍生物和前药是那些，当被施用于受试者时，提高实施例化合物的生物利用度(如口服给药的化合物更容易被吸收进入血液)或相对于母体种类提高母体化合物到生物区室(如脑或淋巴系统)的运送的衍生物和前药。前药包括本发明化合物的酯类形式。
本发明化合物
如本文所用，术语“本发明化合物”指通式(i)化合物、其外消旋体、其立体异构体或其互变异构体、或其药学,上可以接受的盐。
本发明涉及：这些化合物的外消旋混合物，富集任一种对映体的混合物，以及任一种分离的对映体。对于本发明的范围，应当理解为，所述外消旋混合物指两种r和s对映体50％:50％的混合物。所述分离的对映体应理解为纯的对映体(即100％)或者高度富集某种对映体(纯度≥98％、≥95％、≥93％、≥90％、≥88％、≥85％、≥80％)的混合物。
在本发明所述的化合物有立体异构体存在的情况下，本发明包括化合物的所有立体异构体。
在本发明所述的化合物有互变异构体存在的情况下，本发明包括化合物的所有互变异构体。
本发明还包括所述化合物中的任何一个或多个氢原子被其稳定同位素氘取代而产生的氘代化合物。
制备方法
以下提供的制备方法仅作示例性说明，不作为对本发明化合物制备方法的进一步概括。并且，以下制备方法中提供了各新颖的中间体及其在制备本发明所述化合物中的应用。
本发明的式(i)化合物可由以下的制备方法获得：
(a)化合物a在上述条件下与表氯醇反应得到化合物b；(b)化合物b用过量的碱水解得到化合物c；(c)化合物c与(pho)2p(o)cl反应得到重排产物化合物d；(d)化合物d用碱水解得到化合物e；(e)化合物e在上述反应条件下得到咪唑化合物f；(f)化合物f在钯催化剂作用下关环生成化合物g；(g)化合物g与mscl反应生成化合物h；(h)化合物h与nan3进行取代反应得到化合物i；(i)化合物i在pd/c催化下氢化得到中间体化合物j。
顺式异构体n可用一下步骤合成：
(a)化合物b部分水解得到酰胺化合物k；(b)化合物k氧化重排产生化合物l；(c)化合物l通过上述生成化合物j的同样反应步骤得到中间体化合物m和化合物n。
本发明的式(i)化合物可由以下的制备方法获得：
本发明还提供另一式(i)化合物q的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物h与nacn反应得到化合物o；(b)化合物o用用碱水解得到化合物羧酸p；(c)化合物p与合适的胺在酰胺的合成条件下反应产生式(i)化合物q。
顺式异构体t可用一下步骤合成：
化合物m可以通过与合成化合物q相同的反应步骤得到式(i)化合物t。
本发明还提供另一式(i)化合物x的制备方法，包括以下步骤：
(a)羧酸化合物s转化为甲酯；(b)甲酯化合物u氧化得到化合物v；(c)碱性条件下水解化合物v得到化合物w；(d)化合物w与合适的胺在酰胺的合成条件下反应产生化合物x。
本发明还提供另一式(i)化合物z的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物g氧化得到化合物y；(b)化合物y通过金属试剂亲核加成反应得到式(i)化合物z。
本发明还提供另一式(i)化合物z的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物y通过乙炔格氏试剂加成反应得到得到化合物aa；(b)化合物aa通过与与叠氮化合物的点击反应得到式(i)化合物bb。
本发明还提供另一式(i)化合物ff的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物h与nao2sch2ch2o2me反应得到化合物cc；(b)化合物cc在碱性条件下进行消除反应得到化合物dd；(c)化合物dd与h2noso3h反应得到化合物ee；(d)化合物ee与羧酸缩合得到式(i)化合物ff。
本发明还提供另一式(i)化合物hh的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物ee与clc(o)oet反应得到化合物gg；(b)化合物gg与相应的胺反应得到式(i)化合物hh。
本发明还提供另一式(i)化合物的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物o与ti(oi-pr)4和etmgbr反应得到化合物ii；(b)化合物ii与相应的试剂反应得到以上式(i)化合物。
本发明还提供另一式(i)化合物的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物jj通过2-溴氰苄与3-氯丙酸甲酯在碱性条件下反应得到化合物jj；(b)化合物jj脱羧得到化合物kk；(c)化合物kk在酸催化条件下与乙二醇反应得到化合物ll；(d)化合物ll用碱部分水解得到化合物mm；(e)化合物mm在氧化反应条件下重排得到化合物nn；(f)化合物nn在上述反应条件下得到咪唑化合物oo；(g)化合物oo在钯催化剂作用下关环生成化合物pp；(h)化合物pp酸水解生成化合物qq；(i)化合物qq还原胺化得到化合物rr；
与化合物j和化合物n类似，化合物rr与相应的试剂反应得到以上式(i)化合物。
本发明还提供另一式(i)化合物的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物jj通过2-溴氰苄与双(2-氯乙基)氨基甲酸叔丁酯在碱性相催化条件下反应得到化合物ss；(b)化合物ss用碱部分水解得到化合物tt；(c)化合物tt在氧化反应条件下重排得到化合物uu；(d)化合物uu在上述反应条件下得到咪唑化合物vv；(e)化合物vv在钯催化剂作用下关环生成化合物ww(i)化合物ww酸性条件下去保护得到化合物xx。
与化合物rr类似，化合物xx与相应的试剂反应得到以上式(i)化合物。
本发明还提供另一式(i)化合物的制备方法，包括以下步骤：
(a)化合物yy在碱性条件下与甲醛水溶液反应得到化合物zz；(b)化合物zz通过三氟甲磺酸基化和苄胺的取代关环得到化合物aaa；(c)化合物aaa水解后重排降解得到化合物bbb；(d)化合物bbb在上述反应条件下得到咪唑化合物ccc；(e)化合物ccc在钯催化剂作用下关环生成化合物ddd；(f)化合物ddd在钯催化氢化条件下脱苄基生成化合物eee。
与化合物xx类似，化合物eee与相应的试剂反应得到以上式(i)化合物。
药物组合物
本发明还提供了一种药物组合物，它包含安全有效量范围内的活性成分，以及药学上可接受的载体。
本发明所述的“活性成分”是指本发明所述的式(i)化合物或其药学上可接受的盐、其立体异构体或其互变异构体、或其前药。
本发明所述的“活性成分”和药物组合物可用作ido或tdo抑制剂。在另一优选例中，用于制备预防和/或治疗肿瘤的药物。在另一优选例中，用于制备预防和/或治疗ido或tdo介导的疾病的药物。
“安全有效量”指的是：活性成分的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有1-2000mg活性成分/剂，更佳地，含有10-200mg活性成分/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个药片。
“药学上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的活性成分以及它们之间相互掺和，而不明显降低活性成分的药效。
本发明优选实施例的化合物可以作为单独活性药剂给药，也可以与一个或多个其它用于治疗癌症的试剂组合使用。本发明优选实施例的化合物与已知的治疗剂和抗癌剂组合使用也是有效的，目前已知的化合物和其它抗癌剂或化疗剂的组合在优选实施例范围之内。这类药剂的例子可参见《癌症原理和实践肿瘤学》(cancerprinciplesandpracticeofoncology)，v.t.devita和s.hellman(编者)，第6版(2001年2月15日)，lippincottwilliams&wilkins出版社。基于药物的特殊性质和所涉及的癌症，本领域普通技术人员能够辨别有效的药剂组合。这种抗癌剂包括(但不限于)如下：雌激素受体调节剂、雄激素受体调节剂、视黄醇类受体调节剂、细胞毒性/细胞生长抑制剂、抗增殖剂、异戊烯基蛋白转移酶抑制剂、取乙酰酶(hdac)抑制剂、hmg-coa还原酶抑制剂和其他血管生成抑制剂、细胞增殖和生存信号抑制剂、凋亡诱导剂和干扰细胞周期检查点(cellcyclecheckpoint)的试剂、ctla4抗体、pd-1抗体、pd-l1抗体等。优选实施例的化合物与放射治疗同时施用时也有效。
优选实施例的目的，治疗有效剂量通常可以是对患者一次性施用或分次施用的每日总剂量，例如，每日约0.001至约1000毫克/公斤体重，优选地，每日约1.0至约30毫克/千克体重。单位剂量组合物(dosageunitcomposition)可包含其剂量因数以形成每日剂量。剂型的选择取决于各种因素，例如给药模式和药物物质的生物利用度。通常，优选实施例的化合物可作为药物组合物通过以下任意一种路线给药：口服、全身给药(如透皮、鼻内或通过栓剂)、或肠外给药(如肌内、静脉内或皮下)。优选的给药方式为口服，可根据苦的程度调节方便的日剂量。组合物可采取的形式为片剂、丸剂、胶囊、半固体、粉剂、缓释制剂、溶液、悬浮液、酏剂、气雾剂或任何其他适当的组合物。另一种优选的施用优选实施例化合物的方式为吸入。这是一种将治疗剂直接运送给呼吸道的有效方法(参见，如美国专利号5,607,915)。
合适的药学上可接受的载体或赋形剂包括：如处理剂和药物运送改性剂和促进剂，诸如磷酸钙、硬脂酸镁、滑石、单糖、二糖、淀粉、明胶、纤维素、甲基纤维素钠、羧甲基纤维素、葡萄糖、羟丙基-b-环糊精、聚乙烯吡咯烷酮、低熔点蜡、离子交换树脂等，及其任意两种或多种的组合。液体和半固体的赋形剂可以选自甘油、丙二醇、水、乙醇和各种油，包括石油、动物油、植物油或合成来源，如花生油、豆油、矿物油、芝麻油等。优选的液体载体，特别是用于可注射溶液的载体，包括水、盐水、葡萄糖水性溶液和乙二醇。其它适宜的药学上可接受的赋形剂在《雷明顿药物科学》(remington”spharmaceuticalsciences),mackpub.co.,新泽西(1991)有描述，通过引用纳入本文。
如本文所用，术语“药学上可接受的盐”是指通式i化合物的非毒性酸或碱土金属盐。这些盐可在最终分离和纯化通式i化合物时原位制得、或分别将合适的有机或无机酸或碱与碱性或酸性官能团反应制得。代表性的盐包括，但不限于：乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、柠檬酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、二葡糖酸盐、环戊烷丙酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、葡萄糖庚酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、富马酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、2-羟基乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、烟酸盐、2-萘基磺酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、果胶酸盐、硫氰酸盐、3-苯基丙酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐和十一烷酸盐。此外，含氮的碱性基团可被如下试剂季铵盐化：烷基卤化物，如甲基、乙基、丙基、丁基的氯化物、溴化物和碘化物；二烷基硫酸盐，如二甲基、二乙基、二丁基和二戊基硫酸酯；长链卤化物如癸基、月桂基、肉豆蔻基和硬脂基的氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物如苄基和苯乙基溴化物等。由此得到水溶性或油溶性或可分散产品。可被用于形成药学上可接受的酸加成盐的酸的例子包括如盐酸、硫酸、磷酸的无机酸，和如草酸、马来酸、甲磺酸、琥珀酸、柠檬酸的有机酸。碱加成盐可在最终分离和纯化通式i的化合物时原位制得、或使羧酸部分分别与合适的碱(如药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物，碳酸盐或碳酸氢盐)或氨、或有机伯、仲或叔胺反应制得。药学上可接受的盐包括，但不限于，基于碱金属和碱土金属的阳离子，如钠、锂、钾、钙、镁、铝的盐等，以及无毒的铵、季铵和胺阳离子，包括，但不限于：铵、四甲基铵、四乙基铵、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。其它代表性的用于形成碱加成盐的有机胺包括二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。
如本文所用，术语“药学上可接受的前药”是指那些优选实施例的化合物的前药，在体内迅速转化为上述通式所示的母体化合物的化合物，例如在血液中水解。在“t.higuchi和v.stella，作为新型运送系统的前药(pro-drugsasnoveldeliverysystems)，a.c.s.15symposiumseries的14卷”和“edwardb.roche编，药物设计中的生物可逆载体(bioreversiblecarriersindrugdesign)，美国药学协会和pergamon出版社，1987年”中提供了完整的讨论，这两者都引入本文作为参考。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如sambrook等人，分子克隆：实验室手册(newyork:coldspringharborlaboratorypress,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
本发明的有益之处在于：
(1)提供一种结构新颖的式(i)化合物；
(2)本发明的化合物可以作为高效的ido/tdo酶抑制剂；
(3)合成方法温和，操作简单易行，收率较高，易于衍生化，适合工业放大量生产；
(4)具有抗肿瘤、神经退行性疾病(阿尔茨海默病)、抗炎等多种药理活性。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
实施例1
(顺/反)3-苯基螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-醇的制备
第一步：(顺/反)1-(2-溴苯基)-3-羟基环丁烷腈
将化合物2-溴苄氰(10.2g,52.0mmol)加入反应瓶中，冷却到零下78度，滴加甲基锂(44ml,52.0mmol)，滴加完毕后，此温度下搅拌1小时，加入环氧氯丙烷(5.3g,57.2mmol)，此温度下搅拌3小时，tlc检测原料消失，然后滴加甲基溴化镁格式试剂(19ml,57.2mmol)，滴加完毕后，自然回到室温，然后缓慢升温到60度，搅拌过夜。tlc监测反应已完全。冰浴冷却下，滴加2n的盐酸溶液，反应体系ph调整到7左右。加入乙酸乙酯(150ml)和水(150ml)，萃取，水相再用乙酸乙酯(100mlx2)萃取，合并有机相，用硫酸钠固体干燥。过滤浓缩，柱层析纯化分离，得到黄色液体目标化合物11.5g(顺/反＝2:1.4),收率88％。
msesi:m/z＝253.1,[m+h]+。
第二步：(顺/反)1-(2-溴苯基)-3-羟基环丁烷甲酸
将第一步的产物(24.0g,197.0mmol)溶于230ml乙醇中，分别加入水230ml,氢氧化钾(53.3g,952.0mmol)，加热到105度，反应24小时，原料完全消失。冷却到冰浴，用6n盐酸调节ph到4-5，加入200ml乙酸乙酯，萃取，再用100ml乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，干燥，过滤，浓缩，得到白色固体目标化合物20.8g(顺/反＝2:1.4),收率81％。
msesi:m/z＝272.1,[m+h]+。
第三步：(顺式)5-(2-溴苯基)-2-氧代-4-氮杂双环[3.1.1]庚-3-酮
将第二步的产物(10.6g,39.1mmol)溶于100ml二氧六环，叠氮磷酸二苯酯(13.0g,46.9mmol)加入反应液中，再加入二异丙基乙胺(10.1g,78.2mmol),以及叔丁醇(50ml)，置换氩气数次，搅拌十分钟后，加热到80度，反应4小时。冷却到室温，反应体系中有白色固体析出，过滤得到目标化合物7.7g,收率73％。
1hnmr(500mhz,dmso-d6):δ8.22(s,1h),7.60(d,1h),7.40(t1h),7.26-7.32(m,2h),4.88(s,1h),2.51(d,2h),2.28(d,2h).
msesi:m/z＝267.1,[m+h]+。
第四步：(顺式)3-氨基-3-(2-溴苯基)环丁醇
将第三步的产物(7.7g,28.7mol)加入100ml水和100ml异丙醇，加入氢氧化钾(80.0g,1.4mol),回流反应24小时。冷却到室温，用二氯甲烷150ml萃取3次，合并有机层，干燥，旋干溶剂，干燥，得呈黄色油状物的目标化合物(7.5g,收率100％)。
1hnmr(500mhz,dmso-d6):δ8.22(s,1h),7.60(d,1h),7.40(t1h),7.26-7.32(m,2h),4.88(s,1h),2.51(d,2h),2.28(d,2h).
msesi:m/z＝243.1,[m+h]+。
第五步：(顺式)3-(2-溴苯基)-3-(1h-咪唑-1-基)环丁醇
将第四步的产物(5.0g,20.7mmol)溶于50ml甲醇中，分别加乙二醛(6.0g,41.3mmol)甲醛(3.4g,41.3mmol)，乙酸铵(3.2g,41.3mmol)。加毕，反应缓慢升温到70度，反应4小时，反应结束后，直接浓缩，拌样，柱层析分离，得黄色固体目标化合物(5.5g,收率91％)。
1hnmr(500mhz,甲醇-d4):δ7.88-7.86(m,1h),7.68-7.67(m,1h),7.59(s,1h),7.59-7.53(m,1h),7.34-7.30(m,1h),7.04(s,1h),6.94(s,1h),4.05-4.03(m,2h),3.50-3.46(m,2h),2.84-2.80(m,2h).
msesi:m/z＝294.1,[m+h]+。
第六步：(顺式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-醇
将第五步的产物(2.5g,8.5mmol)放入反应瓶中，加入二甲亚砜(50ml),置换氩气数次，加入二氯二茂铁氯化钯(624mg,0.853mmol)，加入碳酸铯(5.6g,17.1mmol)，再次置换氩气数次后，加热到120度，反应5小时。反应用lcms监测，原料消失后，冷却至室温，减压蒸馏出去二甲亚砜，然后加入乙酸乙酯(100ml)和水(50ml),萃取，水相再用乙酸乙酯(50ml)萃取，合并有机相。柱层析纯化分离，得到目标化合物(1.3g,收率70％)。
1hnmr(500mhz,甲醇-d4):δ8.11(s,1h),7.56-7.52(m,2h),7.35-7.33(m,2h),7.08(s,1h),4.80-4.77(m,1h),3.08-3.03(m,2h),2.4-2.69(m,2h),
msesi:m/z＝213.1,[m+h]+。
第七步：螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-酮
将第六步的产物(0.5g,2.4mmol)，放入瓶中，加入5ml二氯甲烷，冰浴下搅拌，加入碳酸氢钠(1.9g,23.4mmol),加入dess-martin氧化剂(1.5g,3.5mmol)，室温搅拌，知道原料消失。加入20ml二氯甲烷和10ml水萃取，得到有机相，干燥，过滤，浓缩，柱层析纯化。得到目标化合物(400mg,收率80％)。
1hnmr(500mhz,甲醇-d4):δ7.86(s,1h),7.59(d,1h),7.47-7.42(m,2h),7.37-7.35(m,1h),7.25(s,1h),3.872.82(m,4h),
msesi:m/z＝211.1,[m+h]+。
第八步：(顺/反)3-苯基螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-醇
在反应瓶中加入1ml无水四氢呋喃，加入无水氯化铈(450mg,1.5mmol)加入苯基溴化镁(1.5ml1.5mmol)，室温下搅拌1小时，冰浴下，将第七步的产物(100mg,0.5mmol)的四氢呋喃溶液滴加到上述反应液中，滴毕，室温反应2小时，tlc显示原料消失。滴加饱和氯化铵淬灭反应。加入乙酸乙酯20ml和水10ml，萃取，有机相干燥，过滤，浓缩，得到粗品，柱层析纯化分离，得到目标化合物(100mg,收率70％)。
1hnmr(500mhz,甲醇-d4):δ8.43(s,1h),7.62(d,2h),7.48-7.44(m,2h),7.37-7.33(m,2h),7.27(d,1h),7.14(s,1h),3.49(d,2h),2.92(d,2h).
msesi:m/z＝289.3,[m+h]+。
实施例2
(顺/反)(3-氟苯基)(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)甲醇
第一步：(顺式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基甲磺酸酯
(顺式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-醇(212mg,1.0mmol)溶于5ml二氯甲烷中，加入三乙胺(202mg,2.0mmol),滴加甲烷磺酰氯(216mg,1.5mmol)，滴毕，自然回到室温，共计反应1小时。加入饱和食盐水10ml，分别加入二氯甲烷2x20ml,进行萃取，合并有机相，得到目标化合物(300mg,收率100％)。
msesi:m/z＝291.0,[m+h]+.
第二步：螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]是吲哚]-3-甲腈
第一步产物(300mg,1.0mmol)，溶于10mldmf中，加入氰化钠(150mg,3.0mmol)，加热到100度，反应10小时。原料消失。冷却到室温后，加入30ml乙酸乙酯，用10ml水洗5次，有机相用硫酸镁干燥，过滤，浓缩，柱层析，得到目标化合物粗品(220mg,收率100％)。
msesi:m/z＝222.1,[m+h]+。
第三步：螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]是吲哚]-3-羧酸
第二步产物(220mg,1.0mmol)加入乙醇中(10ml)，再加入水(10ml),加入氢氧化钾(1.1g,20.0mmol)，加热到100度，反应10小时。tlc显示原料已消失。冷却到室温，加入2n盐酸调节ph到6-7,旋干溶液，用10％的二氯甲烷甲醇溶液溶解产物，过滤掉里面的固体，收集滤液。合并，干燥，过滤，浓缩。得到目标化合物粗品(200mg,收率83％)。
msesi:m/z＝241.1,[m+h]+。
第四步:n-甲氧基-氮-甲基-螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
将第三步产物(48mg,0.2mmol)加入二氯甲烷中，加入三乙胺(44mg,0.4mmol),加入n，o-二甲基盐酸盐(20mg,0.2mmol),加入edci(76mg,0.4mmol),hobt(27mg,0.2mmol)室温反应过夜，原料消失。反应液旋干，直接柱层析纯化得到目标化合物(56mg,收率100％)。
msesi:m/z＝284.2,[m+h]+。
第五步：(反式)3-氟苯基)(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)甲酮
将第四步产物(60mg,0.2mmol)放入反应瓶中，加入四氢呋喃(2ml)，在冰浴下冷却，滴加3-氟苯基溴化镁(0.9ml,0.90mmol)，滴毕，直到原料消失，加入饱和氯化铵(2ml)淬灭反应，加入乙酸乙酯(2x10ml)萃取，和并有机相，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩得到粗品。柱层析纯化，得到50mg反式产物，将其(50mg,0.16mmol)溶于四氢呋喃(2ml)中，冰浴下，加入dbu(62mg,0.3mmol)，搅拌1小时。tlc显示有2个很近的点，lcms显示分子量一样，用饱和氯化铵(1ml)淬灭反应，乙酸乙酯萃取(2x5ml),和并有机相，硫酸钠干燥，过滤，弄得，得到顺反目标化合物50mg,收率100％。
第六步：(顺/反)(3-氟苯基)(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)甲酮
将第五步产物(50mg,0.2mmol)溶于四氢呋喃(2ml)中，冰浴下，加入dbu(62mg,0.3mmol)，搅拌1小时。tlc显示有2个很近的点，lcms显示分子量一样，用饱和氯化铵(1ml)淬灭反应，乙酸乙酯萃取(2x5ml),和并有机相，硫酸钠干燥，过滤，弄得，得到粗品50mg,收率100％。
第七步:(顺/反)-(3-氟苯基)(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)甲醇
将第六步产物(50mg,0.2mmol)加入反应瓶中，加入四氢呋喃(2ml)，冰浴下，加入硼氢化钠(12mg,0.3mmol),直到反应完全。直接拌样，旋干，柱层析，得到化合物2,白色固体21mg,收率63％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.89(s,1h),7.58-7.48(m,2h),7.35-7.31(m,3h),7.24-7.14(m,3h),7.03-6.96(m,1h),5.30(s,1h),4.95-4.90(m,1h),3.29-2.12(m,2h),2.99-2.95(m,2h).
msesi:m/z＝321.1,[m+h]+。
实施例3
(顺/反)3-(1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-醇
根据实施例1的第八步中的条件用1,4-二氧杂螺[4.5]癸-7-烯-8-锂代替苯基溴化镁作为原料，得到目标化合物，白色固体(10mg,收率29％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.35(s,1h),7.42-7.41(m,1h),7.37-7.35(m,1h),7.34-7.31(m,1h),7.27-7.25(m,1h),7.18(s,1h),5.75(s,1h),3.86(s,4h),3.15(d,2h),2.64(d,2h),2.40-2.36(m,4h),1.83-1.80(m,2h).
msesi:m/z＝351.2,[m+h]+。
实施例4
(顺式)4-甲基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯磺酰胺
第一步：(反式)-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-基苯甲酸酯
室温下将三苯基膦(393mg,1.5mmol)、苯甲酸(92mg,0.8mmol)和(順式)螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-醇(159mg,0.8mmol)加入到50ml两口瓶中，抽换ar2三次，注入4ml四氢呋喃。然后冰浴下将diad(273mg,1.4mmol)的thf(2ml)溶液滴加到上述体系中，升至室温反应4h,停止反应。反应液浓缩，经柱纯化(流动相dcm:meoh＝20：1)得到浅红色固体目标化合物187mg,收率79％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.01(s,1h),7.70-7.65(m,4h),7.57-7.53(m,3h),7.39(t,1h),7.34(t,1h),7.27(s,1h),5.79(quint,1h),3.16(m,4h).
msesi:m/z＝317.1,[m+h]+.
第二步：反-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-醇
室温下将lioh-h2o(243mg,5.8mmol)/h2o(2ml)水溶液滴加到第一步产物(610mg,1.9mmol)/meoh(15.0ml)溶液中。室温下反应10分钟后，将反应液浓缩并用3x5mlea萃取上述溶液，合并有机相用无水na2so4干燥。反应液浓缩，经柱纯化(流动相dcm:meoh＝20：1)得到浅褐色固体目标化合物316mg,收率77％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.76(s,1h),7.66(dd,1h),7.49(dd,1h),7.37-7.31(m,2h),7.16(s,1h),4.99(q,1h),2.90(m,4h).
msesi:m/z＝213.1,[m+h]+.
第三步：(反式)-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-基甲磺酸酯
冰浴下将mscl(339mg,3.0mmol)和et3n(599mg,5.9mmol)依次滴加到第二步产物(315mg,1.5mmol)/dcm(10ml)溶液中。0℃下反应10分钟后，往反应液中加入2ml饱和食盐水并用3x5mldcm萃取上述溶液，合并有机相并用无水na2so4干燥旋干得到浅褐色固体目标化合物412mg,收率96％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.79(s,1h),7.62(dd,1h),7.50(dd,1h),7.40-7.35(m,2h),7.18(s,1h),5.57(quint,1h),3.25-3.20(m,2h),3.14(s,3h),3.13-3.09(m,2h).
msesi:m/z＝291.0,[m+h]+.
第四步：(顺式)3-叠氮基-螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]
将第三步产物(300mg,1.0mmol)，溶于10mldmf中，加入叠氮化钠(200mg,3.0mmol)，加热到100度，反应3小时。冷却到室温后，加入30ml乙酸乙酯，用10ml水洗5次，有机相用硫酸镁干燥，过滤，浓缩，柱层析，得到目标化合物(220mg,收率92％)。
msesi:m/z＝238.1,[m+h]+.
第五步：(顺式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-胺
将第四步产物(220mg，0.9mmol)溶于乙醇中，加入pd/c(20mg,10％)，通入氢气，反应过夜。滤掉pd/c，浓缩滤液，得到目标化合物粗品(190mg,收率96％)。
目标化合物也可通过下面的条件得到：氩气氛围中，室温下将5％pd/c(20mg)加入到第四步产物顺-3-叠氮螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚](209mg,0.9mmol)的etoh(4ml)溶液中。1atmh2中室温反应24h后，加入硅藻土过滤，滤饼用5mletoh洗涤，合并有机相，旋干得到浅黄色固体目标化合物170mg,收率87％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.92(s,1h),7.49(t,2h),7.35(t,1h),7.28(t,1h),7.15(s,1h),3.95(q,1h),3.12-3.04(m,2h),2.52-2.47(m,2h).
msesi:m/z＝212.1,[m+h]+。
第六步：(顺式)4-甲基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯磺酰胺
将第五步产物(21mg，0.1mmol)置于烧瓶中,依次加入二氯甲烷(5ml)中，三乙胺(22mg,0.2mmol),对甲基苯磺酰氯(19mg,0.1mmol)。反应2小时后，反应液旋干，直接柱层析，纯化得到目标化合物(20mg,收率54％)。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.85(d,3h),7.55(d,1h),7.45(d,1h),7.35-7.32(m,3h),7.27-7.24(m,1h)7.16(s,1h),6.52(s,1h),4.35(s,1h),2.89-2.83(m,2h),2.76-2.73(m,2h),2.47(s,3h).
msesi:m/z＝366.1,[m+h]+。
实施例5
(反式)4-甲基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯磺酰胺
第一步：(反式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-胺
以实施例2第二步产物(順式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基甲磺酸酯为原料，根据实施例4第四步和第五步所描述的反应条件得到目标化合物。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.81(s,1h),7.59(d,1h),7.48(d,1h),7.31-7.36(dd,2h),7.16(s,1h),4.14-4.18(m,1h),2.84-2.89(m,2h),2.59-2.65(m,2h)。
msesi:m/z＝212.0,[m+h]+.
第二步(反式)4-甲基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯磺酰胺
以第一步产物为原料，根据实施例4第六步所描述的反应条件得到目标化合物。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.90(s,1h),7.83(d,2h),7.48(d,1h),7.44(d,1h),7.38-7.30(m,4h),7.14(s,1h),5.61(s,1h),4.24-4.23(m,1h),2.98-2.94(m,2h),2.67-2.70(m,2h),2.42(s,3h).
msesi:m/z＝366.1,[m+h]+。
实施例6
(顺式)4-甲基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.00(s,1h),7.76(d,2h),7.71(d,1h),7.63(d,1h),7.53-7.51(m,2h),7.39-7.35(m,3h),7.16(s,1h),7.09(d,1h),4.99-4.93(m,1h),3.23-3.18(m,2h),3.04-2.99(m,2h).
msesi:m/z＝330.2,[m+h]+。
实施例7
(反式)4-甲基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.98(s,1h),7.76(d,2h),7.65(d,1h),7.51(d,1h),7.39-7.36(m,1h),7.33-7.28(m,2h),6.75(s,1h),5.09-5.07(m,1h),3.20-3.14(m,2h),3.03-2.98(m,2h).
msesi:m/z＝330.2,[m+h]+。
实施例8
(顺/反)3-氟-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
msesi:m/z＝334.1,[m+h]+.
实施例9
(顺式)4-氟-氮-螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯磺酰胺
msesi:m/z＝370.1,[m+h]+.
实施例10
(反式)4-氟-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯磺酰胺
msesi:m/z＝370.1,[m+h]+.
实施例11
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)环己烷甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.94(s,1h),7.60(d,1h),7.49(d,1h),7.36-7.28(m,2h),7.18(s,1h),4.91-4.85(m,1h),3.05-3.00(m,2h),2.93-2.88(m,2h),2.18-1.13(m,1h),1.93-1.90(m,2h),1.84-1.81(m,2h),1.51-1.48(m,2h),1.48-1.43(m,2h),1.31-1.28(m,2h).
msesi:m/z＝322.2,[m+h]+。
实施例12
(顺式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)环己基磺酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.03(s,1h),7.67(d,1h),7.50(d,1h),7.44-7.37(m,3h),7.13(s,1h),5.05-5.01(m,1h),3.67-6.61(m,1h),3.53-3.47(m,2h),3.20-3.17(m,2h),2.24-2.27(m,2h),1.75-1.78(m,2h),1.58-1.55(m,2h),1.52-1.49(m,2h),1.25-1.30(m,2h).
msesi:m/z＝358.2,[m+h]+。
实施例13
(顺式)3-氯-4-氟-n-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.18(s,1h),8.16(d,1h),7.84(d,2h),7.64(d,1h),7.49(d,1h),7.38-7.35(m,1h),7.30-7.27(m,1h),7.22-7.15(m,2h),5.29(s,1h),3.29-3.23(m,2h),2.98-2.95(m,2h).
msesi:m/z＝368.8,[m+h]+。
实施例14
(反式)3-溴-4-氟-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.36(d,1h),8.15-8.12(m,2h),7.86-7.83(m,1h),7.67(d,1h),7.52(d,1h),7.41-7.31(m,3h),7.23-7.14(m,2h),5.08-5.02(m,1h),3.28-3.23(m,2h),2.99-2.96(m,2h).
msesi:m/z＝413.7,[m+h]+。
实施例15
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)环丙烷磺酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.75(s,1h),7.48(d,1h),7.37-7.34(m,1h),7.32-7.28(m,2h),7.10-7.07(m,1h),5.10-5.07(m,1h),3.77(s,1h),3.30-3.26(m,2h),2.88-2.85(m,2h),1.38-1.39(m,2h),1.02-1.00(m,2h).
msesi:m/z＝316.2,[m+h]+。
实施例16
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)环丙烷甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.93(s,1h),7.61(d,1h),7.49(d,1h),7.38-7.35(m,2h),7.19(s,1h),6.52(s,1h),4.95-4.89(m,1h),3.14-3.09(m,2h),2.94-2.89(m,2h),1.04-1.02(m,2h),0.83-0.78(m,2h).
msesi:m/z＝280.1,[m+h]+.
实施例17
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)丙烷-2-磺酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.03(s,1h),7.64-7.62(m,1h),7.51-7.49(m,1h)),7.39-7.34(m,3h),7.11(s,1h),5.87(s,1h),4.59-4.54(m,1h),3.27-3.22(m,1h),3.09-2.98(m,4h),1.45-1.43(d,6h).
msesi:m/z＝318.2,[m+h]+。
实施例18
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)萘-2-磺酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.52(s,1h),7.94-7.92(m,3h),7.86-7.84(m,2h),7.62-7.52(m,3h),7.41-7.39(m,1h),7.29-7.26(m,1h),7.23-7.20(m,1h),7.16(s,1h),4.46-4.42(m,1h),2.91-2.86(m,2h),2.74-2.69(m,2h).
msesi:m/z＝402.2,[m+h]+。
实施例19
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)萘-1-磺酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.80(d,1h),8.36(d,1h),8.07(d,1h),7.95(d,1h),7.72-7.68(m,2h),7.61-7.55(m,2h),7.40(d,1h),7.35(d,1h),7.27(d,1h),7.16-7.12(m,1h),7.10(s,1h),6.74(s,1h),4.33(d,1h),2.77-2.72(m,2h),2.65-2.59(m,2h).msesi:m/z＝480.1,[m+h]+。
实施例20
(反式)4-氟-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.32(s,1h),8.12-8.09(m,2h),7.92-7.90(m,1h),7.91-7.89(m,1h),7.69-7.67(m,1h),4.48(d,1h),7.38-7.34(m,1h),7.36-7.32(m,1h),7.27-7.22(m,1h),7.10(s,1h),5.10-5.03(m,1h),3.34-3.24(m,2h),2.95-2.87(m,2h).
msesi:m/z＝334.1,[m+h]+。
实施例21
(反式)2-氟-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.22(s,1h),8.14-8.10(m,1h),7.73-7.71(m,1h),7.55-7.45(m,2h),7.39-7.28(m,4h),7.20-7.14(m,2h),5.10-5.04(m,1h),3.24-3.19(m,2h),3.07-3.01(m,2h).
msesi:m/z＝334.1,[m+h]+。
实施例22
(反式)2,4-二氯-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.16(s,1h),7.70-7.64(m,2h),7.55-7.51(m,1h),7.44-7.36(m,3h),7.34-7.26(m,2h),7.20(s,1h),5.08-5.02(m,1h),3.27-3.21(m,2h),3.05-2.98(m,2h).
msesi:m/z＝385.1,[m+h]+。
实施例23
(反式)4-甲氧基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.13(s,1h),8.08(d,1h),7.88(d,2h),7.72(d,1h),7.48(d,1h),7.37-7.33(m,2h),7.30-7.27(m,1h),6.92(d,2h),5.10-5.04(m,1h),3.83(s,3h),3.26-3.22(m,2h),2.96-2.90(m,2h).
msesi:m/z346.1,[m+h]+。
实施例24
(反式)氮(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)-2-萘甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.41(s,1h),8.03(s,1h),7.95-7.91(m,1h),7.87-7.77(m,4h),7.67(d,1h),7.55-7.45(m,3h),7.35-7.31(m,1h),7.26-7.22(m,1h),7.19(s,1h),5.15-5.06(m,1h),3.34-3.23(m,2h),2.95-2.90(m,2h).
msesi:m/z＝366.1,[m+h]+.
实施例25
(反式)3-氯-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.29(s,1h)，8.09(s,1h)，8.00(d,1h),7.88(s,1h),7.78-7.76(m,1h),7.72-7.66(m,2h),7.50-7.45(m,2h),7.37-7.31(m,3h),7.24-7.22(m,1h),5.03-4.98(m,1h),3.33-3.27(m,2h),2.97-2.91(m,2h)
msesi:m/z＝350.1,[m+h]+。
实施例26
(反式)4-氰基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ9.21(s,1h),8.30(s,1h),8.10-8.03(m,4h),8.87(d,1h),7.57(d,1h),7.41-7.40(m,2h),7.15(s,1h),5.19-5.14(m,1h),3.11-3.08(m,2h),2.90-2.85(m,2h).
msesi:m/z＝341.1,[m+h]+。
实施例27
(反式)3-溴-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.26(s,1h),8.21(s,1h),8.04(d,1h),7.84-7.70(m,1h),7.67(d,1h),7.62-7.60(m,1h),7.49(d,1h),7.38-7.35(m,1h),7.32-7.27(m,2h),7.21(s,1h),5.09-5.03(m,1h),3.32-3.26(m,2h),2.97-2.91(m,2h).
msesi:m/z＝395.1[m+h]+。
实施例28
(反式)2-甲氧基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.35(s,1h),8.24(d,1h),8.03(s,1h),7.70(d,1h),7.52-7.48(m,2h),7.40-7.32(m,2h),7.21(s,1h),7.15-7.13(m,1h),7.11-7.05(m,1h),5.04-4.99(m,1h),3.17-3.11(m,2h),3.07-3.01(m,2h).
msesi:m/z＝346.1,[m+h]+。
实施例29
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)-3-(三氟甲基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.38(s,1h),8.29(d,1h),8.18(s,1h),8.11(d,1h),1.96(d,1h),7.77-7.73(m,2h),7.57-7.49(m,2h),7.39-7.29(m,2h),5.14-5.08(m,1h),3.39-3.33(m,2h),2.99-2.93(m,2h).
msesi:m/z＝384.1,[m+h]+.。
实施例30
(反式)苄基螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基氨基甲酸叔丁酯
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.90(s,1h),7.58(s,1h),7.49(d,1h),7.39-7.31(m,7h),7.17(s,1h),5.51(s,1h)，5.17-5.10(m,2h),4.69-4.67(m,1h),3.06-3.02(m,2h),2.93-2.88(m,2h).
msesi:m/z＝346.1,[m+h]+。
实施例31
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)丙酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.96(s,1h),7.60(d,1h),7.49(d,1h),7.36-7.29(m,2h),7.18(s,1h),6.77(s,1h),4.95-4.89(m,1h),3.10-3.05(m,2h),2.93-2.89(m,2h),2.32-2.28(m,2h),1.26-1.20(m,3h).
msesi:m/z＝268.1,[m+h]+。
实施例32
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)异丁酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.97(s,1h),7.61(d,1h),7.49(d,1h),7.38-7.29(m,2h),7.19(s,1h),6.51(d,1h),4.93-4.88(m,1h),3.10-3.04(m,2h),2.93-2.88(m,2h),2.47-2.43(m,1h),1.23-1.21(m,6h).
msesi:m/z＝282.1,[m+h]+。
实施例33
(反式)(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基氨基甲酸苯酯
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.50(d,1h),8.28(s,1h),7.87(d,1h),7.56(s,1h),7.55-7.43(m,3h),7.38-8.13(m,5h),4.82-4.78(m,1h)，3.07-3.01(m,2h),2.86-2.81(m,2h)；
msesi:m/z＝332.1,[m+h]+。
实施例34
(反式)氮(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)丙烯酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.05(s,1h),7.65(d,1h),7.49(d,1h),7.32-7.36(m,2h),6.34-6.39(d,1h),6.12-6.19(m,2h),5.71(d,1h),4.92(s,2h)；
msesi:m/z＝266.1,[m+h]+。
实施例35
(反式)氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.85(d,2h),7.66(d,1h),7.44-7.55(m,5h),7.30-7.40(m,3h),6.85(s,1h),5.00-5.85(m,1h),3.15-3.23(m,2h),2.93-3.02(m,2h)；
msesi:m/z＝316.0,[m+h]+。
实施例36
(反式)氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)甲基磺酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.91(s,1h),7.53(d,1h),7.46(d,1h),7.35(t,1h),7.30(t,1h),7.18(s,1h),6.21(s,1h),4.55(s,1h),3.06(s,3h),2.97-3.01(m,4h).
msesi:m/z＝290.1,[m+h]+。
实施例37
(顺/反)3-甲氧基-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
(顺：反＝2:1)
msesi:m/z＝347.1,[m+h]+。
实施例38
(反式)3，4-二氯-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.39(s,1h),8.09(s,1h),7.81-7.91(m,2h),7.59-7.70(m,2h),7.36-7.40(m,2h),7,21(s,1h),5.17-5.21(m,1h),3.19-3.25(m,2h),2.95-3.01(m,2h)；
msesi:m/z＝386.1,[m+h]+。
实施例39
(顺/反)2-甲基-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺的制备
(顺：反＝2:1)
msesi:m/z＝330.1,[m+h]+。
实施例40
(反式)3-甲基-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺的制备
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.23(s,1h),7.85(d,1h),7.76-7.77(m,2h),7.57-7.59(d,1h),7.32-7.39(m,4h),7.15(s,1h),5.18-5.24(m,1h),3.24-3.29(t,2h)2.92-2.98(t,3h),2.38(s,3h).
msesi:m/z＝330.1,[m+h]+。
实施例41
(反式)2，4，6-三甲基-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.49(s,1h),7.89-7.90(d,1h),7.70-7.72(d,1h),7.30-7.58(m,6h),4.98-5.00(m,1h),3.39-3.44(m,2h)3.08-3.12(m,2h)；2.60-2.70(m,9h).
msesi:m/z＝358.2,[m+h]+。
实施例42
(反式)2-氯-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.34(s,1h),7.79-7.81(m,1h),7.53-7.57(m,2h),7.32-7.48(m,5h),7.16(s,1h),5.17-5.21(m,1h),3.16-3.22(m,2h)2.98-3.04(m,2h)；
msesi:m/z＝351.1,[m+h]+。
实施例43
(反式)3-氟-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.42(s,1h),8.40(s,1h),7.79-7.88(m,2h),7.68-7.71(d,1h),7.51-7.58(m,2h),7.25-7.40(m,2h),7.14(s,1h),5.18-5.24(m,1h),3.23-3.29(t,2h)；2.86-2.91(m,2h)；
msesi:m/z＝334.1,[m+h]+。
实施例44
(反式)3-三氟甲氧基-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.52(s,1h),8.24(s,1h),8.09(d,2h),7.86(d,1h),7.57(d,1h),7.25-7.45(m,3h),7.15(s,1h),5.20-5.26(m,1h),3.25-3.30(m,2h)；2.86-2.91(m,2h)；
msesi:m/z＝400.1,[m+h]+。
实施例45
(反式)4-溴-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.32(s,1h),7.81-7.87(m,3h),7.66(d,2h),7.58(d,1h),7.34-7.41(m,2h),7.17(s,1h),5.17-5.22(m,1h),3.19-3.24(m,2h),2.94-3.00(m,2h)；
msesi:m/z＝396.0,[m+h]+。
实施例46
(反式)4-氟-氮-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.12(s,1h),8.00-8.04(m,2h),7.72(d,1h),7.51(d,2h),7.28-7.37(m,4h),7.08(s,1h),4.57-4.64(m,1h),2.90-2.91(m,2h),2.74-2.79(m,2h)；
msesi:m/z＝370.1,[m+h]+。
实施例47
(反式)4-氧代-4-苯基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)丁酰胺
(反式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-胺(21mg,0.1mmol)和4-氧代-4-苯基丁酸(18mg,0.1mmol)加入反应瓶中，加入二氯甲烷(2ml)水浴搅拌。加入三乙胺(51mg,0.5mmol)和hobt(14mg,0.1mmol)，以及edci(38mg，0.2mmol)，搅拌中自然回到室温。tlc监测反应，完毕后，加入饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)用二氯甲烷10ml进行萃取，重复2次，合并有机相，用无水硫酸钠固体干燥。过滤，浓缩，得到粗品。柱层析分离纯化(石油醚/乙酸乙酯)，得呈固体的目标化合物(20mg,54％收率)。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.01(d,2h),7.93(s,1h),7.61-7.57(m,2h),7.49-7.46(m,2h),7.37-7.27(m,3h).7.17(s,1h),6.93(d,1h),4.92-4.86(m,1h),3.45-3.42(m,2h),3.04-2.98(m,2h),2.94-2.88(m,2h),2.73-2.70(m,2h).
msesi:m/z＝372.2,[m+h]+。
实施例48
(反式)2-([1,1’-联苯]-4-基)-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)乙酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.86(s,1h),7.66-7.61(m,4h),7.52-7.45(m,3h),7.41-7.38(m,2h),7.36-7.32(m,1h),7.28-7.24(m,3h),7.16(s,1h),4.83-4.77(m,1h),3.70(s,2h),3.00-2.98(m,2h),2.91-2.89(m,2h).
msesi:m/z＝406.2,[m+h]+。
实施例49
(反式)氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)环戊烷甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.98(s,1h),7.61(d,1h),7.49(d,1h),7.38-7.34(m,2h),7.19(s,1h),4.93-4.86(m,1h),3.09-3.03(m,2h),2.93-2.88(m,2h),2.61-2.58(m,1h),1.92-1.76(m,6h),1.62-1.59(m,2h).
msesi:m/z＝308.1,[m+h]+。
实施例50
(反式)3-环戊基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)丙酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.96(s,1h),7.62(d,1h),7.50(d,1h),7.37-7.34(m,2h),7.18(s,1h),6.02(d,1h),4.89-4.83(m,1h),3.08-3.03(m,2h),2.95-2.89(m,2h),2.29-2.25(m,2h),1.80-1.53(m,9h),1.15-1.13(m,3h).
msesi:m/z＝336.2,[m+h]+。
实施例51
(反式)2-环丙基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)乙酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.03(s,1h),7.65(d,1h),7.50(d,1h),7.37-7.32(m,2h),7.19(s,1h),6.64(d,1h),4.93-4.87(m,1h),3.14-3.08(m,2h),2.94-2.90(m,2h),2.24-2.23(m,2h),1.07-1.03(m,1h),0.68-0.66(m,2h),0.27-0.26(m,2h).
msesi:m/z＝294.1,[m+h]+。
实施例52
(反式)叔丁基-2-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基氨基甲酰基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.96(s,1h),7.94(s,1h),7.62(d,1h),7.49(d,1h),7.39-7.34(m,2h),7.18(s,1h),4.90-4.87(m,1h),4.35-4.34(m,1h),3.65-3.28(m,2h),3.05-2.93(m,2h),2.21(s,4h),1.93(s,2h),1.51(s,9h).
msesi:m/z＝409.2,[m+h]+。
实施例53
(反式)4-羟基-氮-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.49(s,1h),7.86-7.92(m,3h),7.72(d,1h),7.50(d,1h),7.42(d,1h),7.25-7.26(m,2h),6.92-6.93(m,1h),5.63(s,1h),5.20-5.25(m,1h),3.26-3.31(m,2h),2.98-3.03(m,2h)；
msesi:m/z＝332.1,[m+h]+。
实施例54
(顺/反)氮-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)-[1,1’-二苯基]-4-甲酰胺
(顺/反＝9:1)
msesi:m/z＝392.2,[m+h]+。
实施例55
(顺式)2-甲基-2-苯基-氮-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)丙酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.73(s,1h),7.48(d,1h),7.39-7.42(m,2h),7.34-7.36(m,3h),7.20-7.31(m,3h),7.01(s,1h),5.80(d,1h),4.53-4.59(m,1h),2.93-2.99(m,2h),2.61-2.66(m,2h)；1.55(s,6h)；
msesi:m/z＝358.1[m+h]+。
实施例56
(顺式)2-苯基-氮-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)丙酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3-d6):δ7.96(s,1h),7.46-7.52(m,2h),7.36-7.40(m,3h),7.23-7.36(m,4h),7.01(s,1h),6.67(d,1h),4.64-6.70(m,1h),3.61(q,1h),2.93-3.06(m,2h),2.67-2.80(m,2h)；1.54-1.57(m,3h)；
msesi:m/z＝344.1,[m+h]+。
实施例57
(反式)2-溴-5-甲氧基-氮-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.22(s,1h),8.13(s,1h),7.83(d,1h),7.51-7,57(m,2h),7.30-7.39(m,2h),7.13(s,1h),7.07(d,2h),6.94-6.98(dd,1h),5.14-5.20(m,1h),3.83(s,3h),3.21-3.27(m,2h),2.96-3.01(m,2h)；
msesi:m/z＝424.1,[m+h]+。
实施例58
(反式)2-溴-氮-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)烟酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.40-8.41(m,1h),7.88(d,1h),7.74(d,1h),7.56(d,1h),7.48-7.51(m,2h),7.33-7.39(m,2h),7.18(s,1h),5.10-5.1(m,1h),3.12-3,17(m,2h),2.98-3.03(m,2h)；
msesi:m/z＝397.0,[m+h]+。
实施例59
(顺/反)3-氟-氮-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)苯甲酰胺
(顺:反＝4:1)
msesi:m/z＝335.0,[m+h]+。
实施例60
(反式)氮-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)四氢呋喃-3-甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.28(s,1h),7.88(t,1h),7.57(d,1h),7.33-7.40(d,2h),7.16(s,1h),5.01-5.04(m,1h),4.28(t,1h),3.91-3.96(m,1h),3.79-3.85(m,1h),3.10-3.15(m,2h),2.82-2.87(m,2h),2.18-2.23(m,1h),1.97-2.00(m,1h),1.85-1.90(m,2h)；
msesi:m/z＝310.1,[m+h]+。
实施例61
(反式)氮-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)呋喃-3-甲酰胺
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.29(s,1h),8.14(s,1h),7.77(d,1h),7.56-7.62(m,2h),7.35-7.38(m,2h),7.16(s,1h),6.86(s,1h),5.11-5.15(m,1h),3.14-3,20(m,2h),2.90-2.95(m,2h)；
msesi:m/z＝307.1[m+h]+。
实施例62
(反式)氮-(萘乙酰胺-2-基)螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-甲酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.23(s,1h),8.20(s,1h),7.79-7.89(m,4h),7.36-7.54(m,6h),9.31-7.33(m,2h),7.17(s,1h),3.46-3.50(m,1h),3.25-3.31(m,2h),3.01-3.06(m,2h).
msesi:m/z＝366.1,[m+h]+。
实施例63
3-(苄氧基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]
(順/反)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-醇(22mg,0.1mmol)溶于thf中，冰浴下，加入氢化钠(4mg,60％,0.1mmol)，搅拌15分钟后，加入溴苄(20mg,1.2mmol)，搅拌直到原料消失。反应液加入水5ml,乙酸乙酯10ml萃取，有机相用硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱层析得到目标化合物(25mg,收率80％，顺/反＝2:1)
msesi:m/z＝303.1,[m+h]+。
实施例64
(顺/反)3-甲基螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]
(顺/反＝2:1)
msesi:m/z＝269.1,[m+h]+。
实施例65
(顺/反)3-乙基螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]
msesi:m/z＝240.1,[m+h]+。
实施例66
(顺/反)3-甲基螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]
(顺/反＝2:1)
msesi:m/z＝227.1,[m+h]+。
实施例67
(反式)1-苯基-2-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基氨基)乙醇
将实施例5中的第一步制备的中间体(21mg,0.1mmol)与2-溴-1-苯基乙酮(30mg,0.2mmol),三乙胺(20mg,0.2mmol)加入到反应瓶中，加入二氯甲烷(3ml)，反应加热到40度，反应2小时。tlc显示反应结束。反应液中加入二氯甲烷(10ml)和水(10ml),萃取，收集有机相，硫酸钠干燥。过滤，浓缩，柱层析分离纯化，得到20mg,收率60.0％。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.94(s,1h),7.51-7.46(m,2h),7.41-7.38(m,2h),7.35-7.32(m,4h),7.27-7.25(m,2h),4.81-4.76(m,1h),3.65(s,2h),3.03-3.00(m,2h),2.87-2.83(m,2h).
msesi:m/z＝330.2,[m+h]+。
实施例68
(反式)氮-(3-溴-4-氟苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
(反式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]是吲哚]-3-羧酸(24mg,0.1mmol),4-氟-3溴-苯胺(19mg,0.1mmol)加入反应瓶中，加入3ml二氯甲烷，加入hobt(14mg,0.1mmol)和三乙胺(50mg,0.5mmol),冷却到冰浴，加入edci(39mg,2mmol),自然回到室温，反应过夜。反应液浓缩后，直接柱层析分离纯化得到呈浅黄色固体的目标化合物(5mg,收率15％)。
hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.15(s,1h),7.94-7.93(m,1h),7.56-7.52(m,2h),7.50-7.46(m,1h),7.40-7.37(m,1h),7.33-7.29(m,1h),7.13-7.07(m,1h),3.40-3.37(m,1h),3.25-3.20(m,2h),3.04-2.99(m,2h).
msesi:m/z＝413.1,[m+h]+.
实施例69
(反式)氮-(对甲苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.13(s,1h),7.92-7.90(m,1h),7.54-7.50(m,2h),7.48-7.46(m,1h),7.40-7.37(m,1h),7.33-7.29(m,2h),7.13-7.07(m,1h),3.40-3.37(m,1h),3.25-3.20(m,2h),3.04-2.99(m,2h),2.48(s,3h).
msesi:m/z＝330.2,[m+h]+。
实施例70
(反式)氮-(3-氯-4-氟苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.25(s,1h),7.88(s,1h),7.70-7.68(m,1h),7.62-7.51(m,2h),7.48-7.45(m,1h),7.43-7.38(m,1h),7.31-7.29(m,1h),7.20(s,1h),7.15-7.12(m,1h),5.4-5.35(m,1h),3.50-3.45(m,1h),3.28-3.23(m,2h),3.10-3.02(m,2h).
msesi:m/z＝368.1,[m+h]+。
实施例71
(反式)氮-(3-氟苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ9.12(s,1h),8.63(s,1h),7.80-7.78(m,1h),7.73-7.68(m,1h),7.62-7.49(m,2h),7.45-7.30(m,6h),6.79-7.78(m,1h),4.18-4.15(m,1h),3.5-3.40(m,2h),2.80-7.70(m,2h).
msesi:m/z＝334.1,[m+h]+。
实施例72
(反式)氮-(3-氯苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.48(s,1h),8.20(s,1h),7.79(s,1h),7.54-7.49(m,3h),7.46-7.38(m,2h),7.27-7.24(m,1h),7.18-7.18(s,1h),7.16(d,1h),3.51-3.46(m,1h),3.26-2.21(m,2h),3.05-2.99(m,2h).
msesi:m/z＝350.1[m+h]+.
实施例73
(反式)-氮-(3-溴苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.23(s,2h),7.91(s,1h),7.55-7.51(m,3h),7.40-7.36(m,1h),7.31-7.26(m,1h),7.22-7.18(m,1h),3.49-3.45(m,1h),3.24-3.18(m,2h)，3.03-2.97(m,2h).
msesi:m/z＝395.1[m+h]+。
实施例74
(顺式)-氮-(3-溴苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.80(s,1h),8.27(s,1h),8.03(s,1h),7.80-7.78(m,1h),7.65-7.51(m,2h),7.43-7.41(m,2h),7.25-7.20(m,2h),3.88-3.86(m,1h),3.46-3.38(m,2h),2.33-2.25(m,2h).
msesi:m/z＝395.1[m+h]+。
实施例75
(反式)氮-(4-氟苯基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
(顺/反2:1.7).
msesi:m/z＝334.1,[m+h]+。
实施例76
(反式)氮-(萘-2-基磺酰基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
(反式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]是吲哚]-3-羧酸(24mg,0.1mmol)，加入反应瓶中，加入hatu(76mg,0.20mmol)，加入二氯甲烷(3ml),搅拌5分钟，加入dipea(64mg,0.5mmol,搅拌一小时，加入2-萘磺酰胺(47mg,0.3mmol)，和dmap(48mg,0.40mmol)，反应过夜，原料消失，反应液中加入二氯甲烷(10ml),加入水(10ml)，萃取，水相再用二氯甲烷(10ml)萃取，合并有机相，硫酸钠干燥。过滤，浓缩，拌样，柱层析得到呈浅黄色固体的目标化合物(10mg,)。
1hnmr(400mhz,meoh-d4):δ8.53(s,1h),8.46(s,1h),8.00-7.94(m,2h),7.92-7.91(m,2h),7.87(d,1h),7.67-7.65(m,1h),7.58-7.1(m,3h),7.35-7.33(m,2h),7.18(s,1h),3.37-3.33(m,1h),2.91-2.78(m,4h).
msesi:m/z＝430.1,[m+h]+。
实施例77
(反式)氮-((4-氟苯基)磺酰基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.21-8.20(m,2h),8.19-8.17(m,1h),7.74-7.73(m,1h),7.58-7.56(m,1h),7.49-7.30(m,4h),7.12(s,1h),3.68-3.67(m,1h),3.00-2.93(m,2h),2.90-2.83(m,2h).
msesi:m/z＝398.1,[m+h]+。
实施例78
(反式)氮-((3-氟苯基)磺酰基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.85-7.83(d,1h),7.75-7.73(d,1h),7.63-7.57(m,3h),7.48-7.39(m,4h)，7.18-7.13(m,1h),3.66-3.64(m,1h),3.50-3.48(m,1h),3.21-3.18(m,3h).
msesi:m/z＝398.1,[m+h]+。
实施例79
(反式)氮-((3-氯苯基)磺酰基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-甲酰胺
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.02(s,1h),7.88-7.85(d,1h),7.69-7.64(m,3h),7.60-7.48(m,5h),3.51-3.48(m,1h),3.45-3.40(m,4h).
msesi:m/z＝414.5,[m+h]+。
实施例80
(反式)3-(甲硫基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]
(顺式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基甲磺酸酯(290mg,1.0mmol)溶于5mldmf中,加入甲硫醇钠(105mg,1.5mmol),室温搅拌过夜。反应完毕后。加入乙酸乙酯20ml,加入水10ml，萃取，再用10ml的水洗，有机相干燥，过滤，浓缩。柱层析，得到目标化合物(240mg,收率99％)。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.88(s,1h),7.74(d,1h),7.48(d,1h),7.41-7.30(m,2h),7.16(s,1h),3.93-3.84(m,1h),3.09-2.97(m,2h),2.89-2.84(m,2h),2.20(s,3h).
msesi:m/z＝243.1,[m+h]+。
实施例81
(反式)3-(甲基磺酰基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]
实施例80(48mg,0.2mmol)加入5ml二氯甲烷中，冰浴下加入mmpp(98mg,0.2mmol),此温度下反应，直到原料消失，加入硫代硫酸钠溶液淬灭反应，二氯甲烷萃取(3x10ml)，合并有机相，干燥，过滤，浓缩，柱层析。得到目标化合物(20mg,收率37％)。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.91(s,1h),7.84(d,1h),7.49(d,1h),7.41-38(m,2h),7.18(s,1h),4.33-4.29(m,1h),3.55-3.49(m,2h),2.97-2.95(m,2h).
msesi:m/z＝275.1,[m+h]+。
实施例82
(反式)(甲基亚磺酰基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]
实施例80(48mg,0.2mmol)加入5ml二氯甲烷中，冰浴下加入mmpp(74mg,0.2mmol)，此温度下反应，直到原料消失，加入硫代硫酸钠溶液淬灭反应，二氯甲烷萃取(3x10ml),合并有机相，干燥，过滤，浓缩，柱层析得到目标化合物(20mg，收率39％)。
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ7.94(s,1h),7.81(d,1h),7.48(d,1h),7.38-7.32(m,2h),7.17(s,1h),3.85-3.80(m,1h),3.78-3.70(m,1h),3.39-3.34(m,1h),2.52(s,3h).
msesi:m/z＝259.1,[m+h]+。
实施例83
(顺/反)3-(1-苄基-1h-1,2,3-三唑-4-基)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-醇
第一步：(顺/反)4-乙炔基-螺[环己烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-4-醇
在反应瓶中加入5ml无水四氢呋喃，加入乙炔基溴化镁(1.7ml,0.8mmol)，冰浴搅拌，把螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-酮(20mg,0.08mmol)溶于四氢呋喃(1ml)滴入乙炔基溴化镁中，滴毕，自然回到室温反应1小时，tlc显示原料消失。滴加饱和氯化铵淬灭反应。加入乙酸乙酯20ml和水10ml，萃取，有机相干燥，过滤，浓缩，得到粗品，柱层析纯化分离，得到目标化合物(20mg，收率100％)。
msesi:m/z＝237.1,[m+h]+.
第二步：4-(1-苄基-1h-1,2,3-三唑-4-基)螺[环己烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-4-醇
将第一步产物(20mg，0.076mmol)、苄基叠氮(20mg,0.2mmol)、五水硫酸铜(14mg,0.08mmol)和抗坏血酸钠(15mg,0.08mmol)加入二氯甲烷，水，甲醇(2ml,1ml,1ml),室温搅拌24小时，tlc显示原料消失，反应液中加入二氯甲烷(10ml)，用硅藻土过滤，滤液浓缩，拌样，柱层析，得到目标化合物10mg，收率36％。
msesi:m/z＝370.1[m+h]+。
实施例84
(反式)3-(4-环己基-1氢-1,2,3三唑1-基)螺[c环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.63(s,1h),8.53(s,1h),7.98(d,2h),7.89(d,1h),7.72(s,1h),7.35-7.49(m,6h),6.20(s,1h),3.76-3.80(m,2h),3.48(s,2h).
msesi:m/z＝346.1,[m+h]+。
实施例85
(反式)3-(4-苯基-1氢-1,2,3三唑1-基)螺[c环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.00(s,1h),7.82(d,1h),7.50(d,1h),7.35-7.39(m,3h),5.46-5.48(m,1h),3.71-3.75(m,2h),3.14-3.22(m,2h)；2.80-2.81(m,1h),2.08-2.09(m,2h),1.75-1.83(m,2h),1.43-1.44(m,2h),1.22-1.23(m,2h).
msesi:m/z＝340.0,[m+h]+。
实施例86
(反式)3-(4-环丙基1氢-1,2,3三唑1-基)螺[c环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]
1hnmr(300mhz,cdcl3):δ7.77(s,1h),7.64(s,1h),7.33-7.41(m,3h),7.0(s,1h),5.54(s,1h),3.89-3.95(m,2h),3.70(s,1h),3.33-3.42(m,2h),1.96-1.99(m,1h),0.96-1.00(m,2h),0.84-0.90(m,2h)；
msesi:m/z＝304.1,[m+h]+。
实施例87
(反式)1-苯基-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)脲
将(順式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-胺(40mg,0.2mol)，三乙胺(27ul,0.2mmol)溶于5mldmf，加入羰基二咪唑(31mg,0.2mmol)室温搅拌1.5小时，加入苯胺(20mg,0.2mmol)搅拌过夜.加入饱和碳酸氢溶液20ml，二氯甲烷萃取(10ml*3),和并有机层，盐水水洗，无水硫酸钠干燥，过滤。溶剂浓缩，柱色谱层析(dcm:meoh＝100:5)得到目标化合物为呈黄色固体的(60mg,96％).
1hnmr(500mhz,丙酮-d6):δ8.11(s,1h),7.80(d,1h),7.63(s,2h),7.33-7.37(m,1h),7.21-7.25(m,1h),7.11(s,1h),6.93(s,1h),6.50(d,1h),4.87-4.93(m,1h),3.09-3.15(m,2h),2.86-2.91(m,2h)；
msesi:m/z＝331.1,[m+h]+。
实施例88
(反式)3-(-螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)磺酰脲
冰浴下将氯磺酰异氰酸酯(37mg,0.2mmol)溶于1mlof二氯甲烷，加入25ul叔丁醇，室温下搅拌十分钟，加入化合物(反式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-胺(25mg,0.2mmol)和三乙胺(68ul)，反应继续搅拌十分钟，然后用水20ml淬灭，二氯甲烷萃取(10ml*3),合并有机层，饱和氯化钠洗，无水硫酸钠干燥，过滤，柱层析(二氯甲烷：甲醇＝20:1)，得到黄色固体(45mg,50％).将得到的化合物溶于1ml二氯甲烷和1ml三氟乙酸，室温搅拌2小时，旋干溶剂，柱层析(二氯甲烷：甲醇＝20:1)，，得到目标化合物为黄色固体(14mg,52％).
1hnmr(500mhz,甲醇-d4):δ8.22(s,1h),7.73-7.75(m,1h),7.74-7.56(m,1h),7.38-7,41(m,2h),7.15(s,1h),4.53-4,58(m,1h),2.88-3.01(m,4h)；
msesi:m/z＝291.1[m+h]+。
实施例89
(反式)1-苯基-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)硫脲
冰浴下，将(順式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-胺(30mg,0.1mmol)和三乙胺(40ul,0.3mmol)溶于5ml二氯甲烷，加入苯基异硫氰酸酯(17ul,0.1mmol)。室温搅拌十分钟，然后水淬灭反应(20ml),二氯甲烷萃取(10ml*3),合并有机层，饱和氯化钠洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱色谱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)，干燥，得到目标化合物为呈黄色固体(40mg,81％).
1hnmr(500mhz,cdcl3):δ8.10(s,1h),7.86(s,1h),7.31-7.40(m,3h),7.14-7.27(m,2h),7.02-7.06(m,2h),6.96(d,1h),6.82(s,1h),5.30-5.32(m,1h),2.92-2.95(m,2h),2.79-2.81(m,2h)；
msesi:m/z＝347.1,[m+h]+。
实施例90
(顺式)1-(3-氟苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑5,1-a]异吲哚l]-3-基)硫脲
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.05(s,1h),7.83(s,1h),7.55(d,1h),7.44(d,1h),7.27-7.37(m,3h),7.04-7.11(m,2h),6.95-6.98(m,1h),5.13-5.15(m,1h),3.07-3.24(m,2h),2.63-2.67(m,2h).
msesi:m/z＝365.1,[m+h]+。
实施例91
(顺式)1-(4-氯苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑5,1-a]异吲哚l]-3-基)硫脲
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.82-7.86(m,2h),7.62(d,1h),7.46-7.52(m,3h),7.35-7.39(m,2h),7.15(s,1h),6.42(s,1h),5.19-5.21(m,1h),3.24-3.27(m,2h),2.68-2.71(m,2h).
msesi:m/z＝381.0,[m+h]+。
实施例92
(顺式)1-(4-三氟甲基苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑5,1-a]异吲哚l]-3-基)硫脲
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.35(s,1h),7.86(s,1h),7.49-7.60(m,6h),7.29-7.33(m,2h),7.09(s,1h),6.89(s,1h),5.10(s,1h),3.23-3.25(m,2h),2.64-2.66(m,2h)；
msesi:m/z＝415.1,[m+h]+。
实施例93
(顺式)1-(3-三氟甲基苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑5,1-a]异吲哚l]-3-基)硫脲
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ9.14(s,1h),8.00(s,1h),7.66(s,1h),7.44(s,2h),7.31(s,2h),7.19(s,2h),7.09(s,1h),5.09(s,1h),3.23-3.25(m,2h),2.64-2.66(m,2h)；
msesi:m/z＝415.1,[m+h]+。
实施例94
(顺式)1-(3-氯-4-(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.18(s,1h),7.99(s,1h),7.74-7.76(m,1h),7.58-7.64(m,2h),7.48-7.50(m,1h),7.40-7.42(s,2h),7.13(s,1h),4.66-4.70(m,1h),3.09-3.12(m,2h),2.97-3.02(m,2h)；
msesi:m/z＝432.9,[m+h]+。
实施例95
(顺式)1-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.18(s,1h),7.89(s,1h),7.75-7.77(m,1h),7.57-7.61(m,2h),7.40-7.48(m,2h),7.27-7.29(m,1h),7.14(s,1h),4.65-4.71(m,1h),3.10-3.13(m,2h),2.97-3.02(m,2h)；
msesi:m/z＝398.9,[m+h]+。
实施例96
(顺式)1-(3,5-二(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)硫脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.22(s,1h),8.09(s,1h),7.73-7.75(m,1h),7.67(s,1h),7.58-7.60(m,1h),7.40-7.44(m,2h),7.13(s,1h),5.16-5.20(m,1h),3.17-3.22(m,2h),2.89-2.94(m,2h)；
msesi:m/z＝483.1,[m+h]+。
实施例97
(顺式)1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)硫脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.01(s,1h),7.93(s,1h),7.60-7.65(m,2h),7.46-7.50(m,2h),7.31-7.34(m,2h),7.03(s,1h),5.12(s,1h),3..04-3.09(m,2h),2.79-2.85(m,2h)；
msesi:m/z＝449.0,[m+h]+。
实施例98
(顺式)1-(3,5-二(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.08(s,1h),7.98(s,1h),7.64-7.66(m,1h),7.47-7.50(m,1h),7.42(s,1h),7.30-7.42(m,2h),7.03(s,1h),4.57-4.61(m,1h),2.97-3.03(m,2h),2.88-2.94(m,2h)；
msesi:m/z＝467.1,[m+h]+。
实施例99
(顺式)1-(3,4-二氯苯基)-3-(螺[环丁基-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.06(s,1h),7.62-7.67(m,1h),7.62-7.65(m,1h),7.47-7.49(m,1h),7.27-7.33(m,3h),7.17-7.20(dd,2h),7.02(s,1h),4.52-4.60(m,1h),2.95-3.00(m,2h),2.85-2.90(m,2h)；
msesi:m/z＝401.0[m+h]+。
实施例100
(顺式)1-苄基-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.01(s,1h),7.60-7.62(m,1h),7.46-7.48(m,1h),7.27-7.30(m,2h),7.19-7.22(m,4h),7.01(s,1h),2.92-2.97(m,2h),2.75-2.80(m,2h)；
msesi:m/z＝345.2[m+h]+。
实施例101
(顺式)1-苯乙基-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ7.99(s,1h),7.59-7.61(m,1h),7.46-7.48(m,1h),7.25-7.31(m,2h),7.07-7.20(m,7h),7.01(s,1h),4.43-4.52(m,1h)，3.29-3.31(t,2h),2.89-2.94(m,2h),2.69-2.75(m,4h)；
msesi:m/z＝359.2[m+h]+。
实施例102
(反式)1-(3-三氟甲基苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)硫脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.08(s,1h),7.79(s,1h),7.57-7.62(m,2h),7.41-7.45(m,2h),7.26-7.36(m,3h),7.03(s,1h),5.25(s,1h)，2.87-2.89(d,4h)；
msesi:m/z＝415.0[m+h]+。
实施例103
(反式)1-(3-氟苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)硫脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.09(s,1h),7.58(d,1h),7.45(d,1h),7.26-7.31(m,4h),7.04-7.11(m,2h),5.28(m,1h)，2.87(d,4h)；
msesi:m/z＝365.1[m+h]+。
实施例104
(反式)1-(4-氯苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)硫脲
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.09(s,1h),7.58(d,1h),7.45(d,1h),7.22-7.34(m,6h),7.04(m,1h),5.29(s,1h)，2.87(d,4h)；
msesi:m/z＝381.0[m+h]+。
实施例105
(反式)4-氯-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基氨基甲酰基)苯磺酰胺
1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.15(s,1h),7.88(d,2h),7.82(d,1h),7.61(d,2h),7.53(d,1h),7.36-7.40(m,2h),7.12(s,1h),4.67-4.73(m,1h)，3.06-3.12(m,2h),2.86(t,2h)，2.66-2.67(m,2h)；
msesi:m/z＝429.0[m+h]+。
实施例106
(反式)4-甲基-氮-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基氨基甲酰基)苯磺酰胺
1hnmr(400mhz,dmso-d6):δ8.11(s,1h),7.79-7.81(m,3h),7.54-7.55(m1h),7.37-7.39(m,3h),7.20(s,1h),7.13(d,1h),4.70-4.72(m,1h)，2.86-2.91(m,2h),2.67(s,2h)，2.39(s,3h)；
msesi:m/z＝409.0[m+h]+。
实施例107
(反式)1-(3-氟苯基)-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)磺酰脲
氮气保护冰浴下，将氯磺酰异氰酸酯(9ul，0.1mmol)溶于2ml二氯甲烷，将2-溴乙醇(7ul，0.1mmol)溶于1ml二氯甲烷地加入反应液，搅拌10分钟，化合物(反式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-胺(20mg,0.1mmol)和三乙胺(35ul)溶于1ml二氯甲烷，室温反应，lc-ms检测反应完全，将粗产物旋干，加入3ml乙腈，三乙胺(35ul)，3-氟苯胺(20ul),回流反应10h,然后水淬灭反应(20ml),二氯甲烷萃取(10ml*3),合并有机层，饱和氯化钠洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱色谱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)，干燥，得到呈黄色固体的目标化合物(10mg,28％).
1hnmr(400mhz,甲醇-d4):δ8.11(s,1h),7.52-7.57(m,1h),7.28-7.31(m,3h),7.12(s,1h),7.03-7.07(m,1h),6.95-6.98(m,1h),6.75-6.79(m,1h),4.58-4.52(m,1h)，2.78(d,4h)；
msesi:m/z＝385.0[m+h]+。
实施例108
(顺式)1-甲基-3-(螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-基)磺酰脲
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.02(s,1h),7.58-7.60(m,1h),7.47-7.49(m,1h),7.28-7.33(m,2h),7.03(s,1h),4.11-4.16(m,1h),2.98-3.06(m,2h),2.77-2.82(m,2h)；
msesi:m/z＝305.1,[m+h]+。
实施例109
(顺式)2-氰基-1-甲基-3-(螺[环丁烷-1,5’-咪唑[5,1-a]异吲哚]-3-基)胍
将(順式)螺[环丁烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-3-胺(25mg,0.1mmol)溶于2ml四氢呋喃，加入n-氰基碳亚胺二苯基酯(41mg，0.2mmol),三乙胺(66ul)，室温搅拌2小时后，加入甲胺溶液0.6ml，继续搅拌两小时，滴加入1n氢氧化钠水溶液2ml，室温搅拌1小时，然后水淬灭反应(20ml),二氯甲烷萃取(10mlx3),合并有机层，饱和氯化钠洗，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，柱色谱层析(二氯甲烷:甲醇＝20:1)，干燥，得到黄色固体(40mg,81％).
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.03(s,1h),7.63(d,1h),7.47(d,1h),7.29-7.32(m,2h),7.02(s,1h),4.57-4.61(m,1h),2.97-3.02(m,2h),2.80-2.91(m,2h)；2.74(s,3h)；
msesi:m/z＝293.1,[m+h]+。
实施例110
(顺/反)1-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)硫脲
第一步：5-(2-溴苯基)-5-氰基-2-氧代环己烷-1-羧酸甲酯
室温下将2-溴苯乙腈(10.0g,51mmol)及3-氯丙酸甲酯(13.4g,107mmol)加入到kotbu(28.6g,255mmol)/thf(100ml)乳浊液中。室温下反应6h后，将反应液浓缩并用2mhcl酸化至ph＝6～7。用3*50mldcm萃取上述溶液，合并有机相用无水na2so4干燥，浓缩。经柱纯化(流动相pe:ea＝4：1)得到浅黄色固体目标化合物9.8g,收率57％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ12.24(s,1h),7.70(dd,1h),7.43(dd,1h),7.36(t,1h),7.23(t,1h),3.81(s,3h),3.39(d,1h),2.85–2.78(m,2h),2.56–2.49(m,2h),2.44–2.38(m,1h).
msesi:m/z＝336.0,338.0,[m+h]+。
第二步：1-(2-溴苯基)-4-氧代环己烷-1-腈的制备
室温下将氯化钠(1.9g,31.9mmol)及第一步产物5-(2-溴苯基)-5-氰基-2-氧代环己烷-1-羧酸甲酯(9.76g,29.03mmol)加入到50ml两口瓶中，抽换氩气三次，注入12ml二甲基亚砜。150℃下反应6h后，冷至室温。将反应液用200ml饱和食盐水稀释并用3x100mldcm萃取上述溶液，合并有机相用无水na2so4干燥，浓缩。经柱纯化(流动相pe:dcm＝1：1)得到白色固体目标化合物4.6g,收率57％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.72(dd,1h),7.44(dd,1h),7.39(t,1h),7.25(t,1h),3.01–2.88(m,4h),2.63–2.58(m,2h),2.34-2.27(t,2h).
msesi:m/z＝278.0,280.0,[m+h]+。
第三步：8-(2-溴苯基)-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-腈
室温下将乙二醇(1.1g,18.0mmol)及一水合对甲苯磺酸(1.6g,8.2mmol)加入到第二步产物1-(2-溴苯基)-4-氧代环己烷-1-腈(4.6g,16.4mmol)/toluene(100ml)溶液中。120℃下反应6h后，冷至室温。将反应液用300ml饱和食盐水稀释并用3*50mlea萃取上述溶液。合并有机相,依次使用饱和nahco3,饱和食盐水洗涤，并用无水na2so4干燥，旋干得浅黄色固体目标化合物5.2g,收率98％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.68(dd,1h),7.45(dd,1h),7.34(t,1h),7.20(t,1h),4.02(t,2h),3.95(t,2h),2.60–2.58(m,2h),2.24–2.13(m,4h),1.91–1.89(m,2h).
msesi:m/z＝322.0,324.0,[m+h]+.
第四步：8-(2-溴苯基)-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-羧酰胺
室温下将koh(18.0g,322mmol)加入到第三步产物8-(2-溴苯基)-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-腈(5.2g,16.1mmol)/tbuoh(50ml)溶液中。100℃下反应6h后，冷至室温。往体系中加入20m水并用3*50mldcm萃取上述溶液，合并有机相,经饱和食盐水洗涤后用无水na2so4干燥，旋干得浅黄色固体目标化合物4.5g,收率82％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.63(dd,1h),7.59(dd,1h),7.35(t,1h),7.16(t,1h),5.18-5.04(br,2h),3.97(t,2h),3.92(t,2h),2.58–2.52(m,2h),2.36–2.29(m,2h),2.10–2.04(m,2h),1.69–1.62(m,2h).
msesi:m/z＝340.1,342.1,[m+h]+.
第五步：8-(2-溴苯基)-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-胺
室温下将5.2％naclo水溶液(48.7ml,33.2mmol)缓慢滴加入到第四步产物8-(2-溴苯基)-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-羧酰胺(4.5g,13.3mmol)/1,4-二氧六环(100ml)溶液中。室温下反应过夜后，往反应液中加入20ml水并用3x50mldcm萃取上述溶液。合并有机相,经饱和食盐水洗涤后用无水na2so4干燥，旋干得浅黄色固体目标化合物3.8g,收率90％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.59(dd,1h),7.52(dd,1h),7.26(t,1h),7.06(td,1h),3.98(t,2h),3.94(t,2h),2.22–2.12(m,6h),1.67–1.64(m,2h).
msesi:m/z＝312.0,314.0,[m+h]+.
第六步：1-(8-(2-溴苯基)-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-基)-1h-咪唑
室温下将40％乙二醛水溶液(4.4g,30.0mmol)、37％甲醛水溶液(2.4g,30.0mmol)及乙酸铵(2.3g,30.0mmol)缓慢滴加入到第五步产物8-(2-溴苯基)-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-胺(3.75g,12.01mmol)/meoh(60ml)溶液中。70℃反应6h后，冷至室温。将反应液浓缩，经柱纯化(流动相dcm:meoh＝30：1)得到浅黄色固体目标化合物3.4g,收率77％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.83(s,1h),7.51(dd,1h),7.27(t,1h),7.15(dd,1h),7.13(s,1h),6.95(d,1h),6.89(s,1h),3.98(t,4h),3.22–3.17(m,2h),2.53–2.46(m,2h),1.76(t,4h).
msesi:m/z＝363.0,365.0,[m+h]+.
第七步：二螺[咪唑并[5，1-α]异吲哚-5，1′-环己烷-4′，2″-[1，3]二氧杂环戊烷]
室温下将cs2co3(2.1g,6.4mmol)、pd(dppf)cl2(471mg,0.6mmol)及第六步产物1-(8-(2-溴苯基)-1，4-二氧杂螺[4，5]癸烷-8-基)-1h-咪唑(1.2g,3.2mmol)加入到50ml两口瓶中，抽换氩气三次，注入10ml二甲基亚砜。120℃下反应4h后，冷至室温。将反应液用200ml饱和食盐水稀释并用3x50mlea萃取上述溶液。合并有机相用无水na2so4干燥，浓缩。经柱纯化(流动相pe:ea＝1：2)得到浅褐色固体目标化合物476mg,收率52％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.88(s,1h),7.54(d,1h),7.39(d,1h),7.35(dd,1h),7.26(t,1h),7.21(s,1h),4.07(t,4h),2.36(t,2h),2.11(t,2h),1.99(t,1h),1.96(t,1h),1.87-1.82(m,2h).
msesi:m/z＝283.1,[m+h]+.
第八步：螺[环己烷-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-酮
室温下将2nhcl水溶液(0.5ml)滴加到第七步产物二螺[咪唑并[5，1-α]异吲哚-5，1′-环己烷-4′，2″-[1，3]二氧杂环戊烷](28mg,0.1mmol)/thf(1ml)溶液中。50℃下反应1.5h后，冷至室温。将反应液浓缩并用5nnaoh调至ph＝10。用3x5mldcm萃取上述溶液，合并有机相用无水na2so4干燥，旋干得浅褐色固体化合物23mg,收率97％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.90(s,1h),7.60(d,1h),7.42(t,1h),7.34(dd,1h),7.32(dd,1h),7.28(s,1h),2.93-2.86(m,2h),2.73(t,1h),2.69(t,1h),2.53(t,2h),2.22-2.16(m,2h).
msesi:m/z＝239.1,[m+h]+.
第九步：(顺/反)螺[环己烷-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-胺
室温下将甲酸铵(127mg,2.0mmol)、水(0.1ml)及10％pd/c(20mg)及第八步产物螺[环己烷-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-酮(24mg,0.1mmol)加入到50ml两口瓶中，抽换ar三次，注入1ml甲醇.室温反应24h和48h后分别补加甲酸铵(39mg,0.6mmol).室温反应60h后，补加5ml甲醇，然后过滤出去pd/c。将滤液用40％naoh水溶液调至ph＝12并用3*5mldcm萃取上述溶液，合并有机相用无水na2so4干燥，浓缩。经柱纯化(流动相dcm:meoh＝15：1,0.5％nh3-h2o)得到淡黄色固体目标化合物16mg,收率67％(顺:反＝1:1)。
msesi:m/z＝240.1,[m+h]+.
第十步1-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)-3-(3-(三氟甲基)苯基)硫脲
(顺：反＝1:1)
在0℃将3-(三氟甲基)苯基异硫氰酸酯(20mg,0.1mmol)加入到第九步产物(顺/反)螺[环己烷-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-胺(20mg,0.1mmol)及et3n(17mg,0.2mmol)的1ml二氯甲烷混合溶液中。升至室温，反应10分钟后，用0.5ml淬灭反应，浓缩。经柱纯化(流动相dcm:meoh＝15：1)得到淡黄色固体化合物24mg,收率63％(顺:反＝1:1)。
msesi:m/z＝442.8,[m+h]+。
实施例111
(顺/反)1-苯基-3-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)硫脲
(顺：反＝1:1)
msesi:m/z＝375.0,[m+h]+。
实施例112
(顺/反)1-(4-氯苯基)-3-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)硫脲
(顺：反＝1:1)
msesi:m/z＝409.0,[m+h]+。
实施例113
(顺/反)1-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)-3-(4-(三氟甲基)苯基)硫脲
(顺：反＝1:1)
msesi:m/z＝443.0,[m+h]+。
实施例114
(顺/反)1-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-3-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)脲
(顺：反＝1:1)
msesi:m/z＝461.0,[m+h]+。
实施例115
(顺/反)氮-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)萘基-2-磺酰胺
(顺：反＝1:1)
依据实例例2的方法，用2-萘磺酰氯替代3-(三氟甲基)苯基异硫氰酸酯作为原料，得到白色固体化合物17mg,收率47％。
msesi:m/z＝430.0,[m+h]+。
实施例116
(顺/反)3-溴-氮-(螺[环己基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-基)苯甲酰胺
(顺：反＝1:1)
msesi:m/z＝422.0,424.0[m+h]+。
实施例117
(顺/反)4-(1-苄基-1h-1,2,3-三唑-4-基)螺[环己烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-4-醇
第一步：(顺/反)4-乙炔基-螺[环己烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-4-醇的制备
在反应瓶中加入5ml无水四氢呋喃，加入乙炔基溴化镁(1.7ml,0.8mmol)，冰浴搅拌，把原料螺[环己烷-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-4-酮(20mg,0.1mmol)溶于四氢呋喃(1ml)滴入乙炔基溴化镁中，滴毕，自然回到室温反应1小时，tlc显示原料消失。滴加饱和氯化铵淬灭反应。加入乙酸乙酯20ml和水10ml，萃取，有机相干燥，过滤，浓缩，得到粗品，柱层析纯化分离，得到目标化合物(20mg,收率90％)。
msesi:m/z＝265.1,[m+h]+.
第二步：4-(1-苄基-1h-1,2,3-三唑-4-基)螺[环己烷1,5’-咪唑并[5,1-α]异吲哚]-4-醇
(顺：反＝2:1)
将第一步产物(20mg，0.076mmol),和苄基叠氮(20mg,0.2mmol)五水硫酸铜(14mg,0.1mmol)和抗坏血酸钠(15.00mg,0.1mmol),加入二氯甲烷，水，甲醇(2ml,1ml,1ml),室温搅拌24小时，tlc显示原料消失，反应液中加入二氯甲烷(10ml)，用硅藻土过滤，滤液浓缩，拌样，柱层析，得到目标化合物10mg,收率33％
msesi:m/z＝398.1[m+h]+。
实施例118
(顺式)螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-胺
第一步：顺-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-醇
室温下将cs2co3(7.9g,24.3mmol)、pd(dppf)cl2(1.8g,2.4mmol)及顺式3-(2-溴苯基)-3-(1h-咪唑-1-基)环丁基-1-醇(3.6g,12.1mmol)加入到50ml两口瓶中，抽换ar三次，注入8ml二甲基亚砜。120℃下反应8h后，冷至室温。浓缩溶剂，将残余液用200ml饱和食盐水稀释并用3x50mlea及3x50mldcm萃取上述溶液，合并有机相用无水na2so4干燥，浓缩。经柱纯化(流动相dcm:meoh＝25：1)得到红褐色固体目标化合物1.8g,收率70％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.95(s,1h),7.50(d,1h),7.40(d,1h),7.35(t,1h),7.30(t,1h),7.14(s,1h),4.79(quint,1h),3.17-3.09(m,2h),2.81-2.76(m,2h).
msesi:m/z＝213.1,[m+h]+.
第二步：反-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-基苯甲酸酯
室温下将三苯基膦(393mg,1.5mmol)、苯甲酸(92mg,0.8mmol)及第一步产物顺-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-醇(159mg,0.8mmol)加入到50ml两口瓶中，抽换ar三次，注入4ml四氢呋喃。然后冰浴下将diad(273mg,1.4mmol)的thf/2ml溶液滴加到上述体系中，升至室温反应4h,停止反应。反应液浓缩，经柱纯化(流动相dcm:meoh＝20：1)得到浅红色固目标体化合物187mg,收率79％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ8.01(s,1h),7.70-7.65(m,4h),7.57-7.53(m,3h),7.39(t,1h),7.34(t,1h),7.27(s,1h),5.79(quint,1h),3.16(m,4h).
msesi:m/z＝317.1,[m+h]+.
第三步：反-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-醇
室温下将lioh-h2o(243mg,5.8mmol)/h2o(2ml)水溶液滴加到第二步产物反-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-基苯甲酸酯(610mg,1.9mmol)/meoh(15ml)溶液中。室温下反应10分钟后，将反应液浓缩并用3x5mlea萃取上述溶液，合并有机相用无水na2so4干燥。反应液浓缩，经柱纯化(流动相dcm:meoh＝20：1)得到浅褐色固目标体化合物316mg,收率77％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.76(s,1h),7.66(dd,1h),7.49(dd,1h),7.37-7.31(m,2h),7.16(s,1h),4.99(quint,1h),2.90(m,4h).
msesi:m/z＝213.1,[m+h]+.
第四步：反-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-基甲磺酸酯
冰浴下将mscl(339mg,2.96mmol)和et3n(599mg,5.9mmol)依次滴加到第三步产物反-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-醇(315mg,1.5mmol)/dcm(10ml)溶液中。0℃下反应10分钟后，往反应液中加入2ml饱和食盐水并用3x5mldcm萃取上述溶液，合并有机相并用无水na2so4干燥旋干得到浅褐色固体目标化合物412mg,收率96％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.79(s,1h),7.62(dd,1h),7.50(dd,1h),7.40-7.35(m,2h),7.18(s,1h),5.57(quint,1h),3.25-3.20(m,2h),3.14(s,3h),3.13-3.09(m,2h).
msesi:m/z＝291.0,[m+h]+.
第五步：顺-3-叠氮螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]
冰浴下将nan3(277mg,4.3mmol)加入到第四步产物反-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-基甲磺酸酯(412mg,1.4mmol)/dmf(6ml)溶液中。75℃下反应5h后，往反应液中加入50ml饱和食盐水并用3x15mlea萃取上述溶液，合并有机相并用无水na2so4干燥。反应液浓缩，经柱纯化(流动相dcm:meoh＝25：1)得到浅褐色油状化合物209mg,收率67％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.90(s,1h),7.51(d,1h),7.44(d,1h),7.38(t,1h),7.31(t,1h),7.17(s,1h),4.41(quint,1h),3.18-3.12(m,2h),2.88-2.81(m,2h).
msesi:m/z＝238.1,[m+h]+.
第六步：顺-螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚]-3-胺的制备
氩气氛围中，室温下将5％pd/c(20mg)加入到第五步产物顺-3-叠氮螺[环丁烷基-1，5’-咪唑并[5，1-α]异吲哚](209mg,0.9mmol)/etoh(4ml)溶液中。1atmh2中室温反应24h后，加入硅藻土过滤，滤饼用5mletoh洗涤，合并有机相，旋干得到浅黄色固体化合物170mg,收率87％。
1hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.92(s,1h),7.49(t,2h),7.35(t,1h),7.28(t,1h),7.15(s,1h),3.95(quint,1h),3.12-3.04(m,2h),2.52-2.47(m,2h).
msesi:m/z＝212.1,[m+h]+。
上述实施例制备的化合物如下表1。
表1.本发明化合物列表
实施例119
活性测试
(1)ido或tdo蛋白的诱导表达及纯化方法
首先pcr扩增ido基因，扩增的pcr产物回收，然后将pet28a质粒(购自上海宝曼生物科技有限公司)和ido胶回收产物用ecori和xhoi两种限制性内切酶进行酶切(37℃，酶切2h)，跑胶，回收，t4连接酶链接过夜连接产物加入到dh5α感受态，冰上放置30min，42℃热击90s，摇菌涂板，挑取单克隆，pcr鉴定，测序鉴定，全部正确，即pet28a-ido质粒构建成功。
将构建好的含有pet28a-ido质粒的bl21，37℃大摇至od600为0.6-0.8，加入至终浓度为7μm的氯高铁血红素和1mm的iptg(异丙基-β-d-硫代半乳糖苷)，28℃诱导4h；诱导后，4℃，6000rpm离心收集菌体，收集的菌体用20mmpbs(ph6.5)清洗一次，再离心收集菌体。
将收集的菌体用裂解液(20mmpbsph6.5)重新悬起，超声裂解(功率40％裂解20min，冰上放置)，将裂解后的细菌，13000rpm离心15min，弃去沉淀，保留上清；将镍柱用裂解液(20mmpbsph6.5)平衡3个柱体积，然后将裂解上清上样到镍柱上，上样之后，用漂洗液(20mmpbsph6.5，20mm咪唑)清洗4个柱体积，最后用洗脱液(20mmpbsph6.5，250mm咪唑)洗脱蛋白；将洗脱的蛋白溶液进行透析4h，透析溶液为20mmpbsph6.5，透析之后蛋白样品浓缩，分装，液氮速冻，放入-80℃保存备用。
tdo用上述同样方法表达和纯化。
(2)ido酶抑制活性测试方法
首先将化合物进行3倍梯度稀释，各个浓度取1μl加入到96孔板中；加入50μl配好的ido酶溶液(终浓度600ng/100μl)：加入25μl底物1混合溶液，加入25μl的底物2混合溶液起始反应。最后od321nm读数60min。
(3)细胞活性测试方法
hela细胞(100μl)接种在96孔板上，接种量为每个孔5×103，生长过夜。第二天，化合物稀释后，取1μl加入到96孔板中，然后将含有人的干扰素γ(终浓度50ng/ml)的培养基100μl加入到96孔板中，使最终体积为200μl。48小时孵化后，每个孔取140μl上清液转移到一个新的96孔板上。10μl6.1n三氯乙酸加入每个孔混合，50℃孵化30分钟，ido催化n甲酰犬尿素为犬尿素。反应混合物2500转离心10分钟去掉沉淀物。每个孔100μl上清液转移到一个新的96孔板与100μl2％二甲氨基苯甲醛乙酸溶液混合。犬尿素分离后，用spectramaxi3reader在480nm测定数值。
各化合物的ido酶抑制活性和细胞抑制活性的测试结果如表2所示。
表2.ido酶、ido细胞和tdo酶抑制活性测试结果(ic50,um)
上述结果表明，本发明化合物(包括所有异构体)均具有针对ido酶和tdo酶的抑制活性。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。