1.一种产胆盐水解酶的重组毕赤酵母,其特征在于,以pPIC9K为载体,在毕赤酵母中表达SEQ ID NO.1所示胆盐水解酶基因。
2.根据权利要求1所述的重组毕赤酵母,其特征在于,宿主毕赤酵母包括pichia pastoris GS115、pichia pastoris KM71、pichia pastoris X-33、pichia pastoris SMD1168。
3.根据权利要求1所述的重组毕赤酵母,其特征在于,所述胆盐水解酶基因前还融合了SEQ ID NO.2所示信号肽。
4.一种产胆盐水解酶的重组毕赤酵母的构建方法,其特征在于,所述方法是以pPIC9K为载体,在毕赤酵母中表达SEQ ID NO.1所示基因。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法具体是:合成SEQ ID NO.1所示基因序列,合成SEQ ID NO.2所示信号肽序列,将上述序列融合并与载体pPIC9K连接形成重组质粒,再转化至毕赤酵母中得到重组毕赤酵母。
6.一种胆盐水解酶胞外分泌表达的方法,其特征在于,应用权利要求1-3任一所述的重组毕赤酵母进行发酵,表达胆盐水解酶。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,以1~5%体积比接种重组毕赤酵母至培养基中,20~28℃,200~220rpm下培养;所述培养基为BMMY培养基,配方为:蛋白胨20g/L,酵母粉10g/L,7-10%甲醇,YNB 13.4g/L,pH6.0的0.1mol/L的磷酸盐缓冲液。
8.权利要求1-3任一所述重组毕赤酵母在食品、医药、保健品领域制备含胆盐水解酶的产品中的应用。