喹唑啉衍生物及其在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法

本发明涉及一类新型的喹唑啉衍生物及其盐和其溶剂化物；并涉及该类化合物的制备方法和它们在制备抗肿瘤药物方面的用途。

背景技术：

临床上常用的抗肿瘤药物主要是细胞毒类药物，具有难以避免的毒副作用。近来兴起的靶向肿瘤治疗给肿瘤患者带来福音。靶向肿瘤治疗药物进入体内能特异性地与致癌靶标相结合而发挥作用，使肿瘤细胞特异性死亡，而不会波及周围的正常细胞。表皮生长因子受体是一种受体酪氨酸激酶，研究表明表皮因子生长受体(egfr)是一个治疗癌症的重要靶点。随着人们对egfr信号转导通路的认知，现阶段已经开发出了一些靶向egfr的药物，包括单克隆抗体、小分子酪氨酸激酶抑制剂，反义寡核苷酸、抗霉素轭合物等。其中小分子酪氨酸激酶抑制剂是最具潜力且应用最为广泛的egfr抑制剂。

喹唑啉类化合物作为一种有效的egfr抑制剂(tki)，受到了普遍的重视。4-苯氨基喹唑啉是一类较早发现的表皮生长因子受体酪氨酸激酶的抑制剂。一系列的报道表明4-苯氨基喹唑啉化合物通过与egfr的atp结合位点结合，高度选择性地抑制egfr的磷酸化，进而达到抑制肿瘤细胞增殖的效果。目前egfr酪氨酸抑制剂已经发展到第三代。这些egfr抑制剂与egfr的作用方式可分为两种，即可逆型和不可逆型抑制剂。第一代为可逆型抑制剂以gefitinib、erlotinib、icotinib(liud,zhangl,wuy,etal.lungcancer,2015,89(3):262-267.)等为代表。这些第一代egfr抑制剂在肿瘤治疗的过程中，产生egfr的t790m突变会对第一代egfr抑制剂产生耐药性。t790m突变是由苏氨酸thr790变成体积更大的蛋氨酸met790，改变了egfr激酶域的构象，增强了atp与egfr激酶口袋的结合能力，大大降低了egfrtkis的结合能力(susumuk,boggontj,tajhald,etal.newenglandjournalofmedicine,2005,352(8):786-792.)。针对这种突变，药物化学家开发出了第二代不可逆型egfrtkis。作为不可逆型egfrtkis，这些药物包含了一个michael受体，与位于atp结合口袋入口处的半胱氨酸残基(cys797)发生共价键结合，产生不可逆抑制酪氨酸激酶的活性作用(changs,zhangl,xus,etal.journalofmedicinalchemistry,2012,55(6):2711-2723.)。第二代不可逆egfr抑制剂中以afatinib(dungort,keatinggm.drug,2013,73(13):1503-1515.)、dacomitinib、neratinib(hwei-rut,etal.journalofmedicinalchemistry,2005,48(4):1107-1131.)为代表，虽然它们在治疗t790m突变的非小细胞肺癌有较好的疗效，但其与剂量相关的副作用较为严重，如腹泻，皮疹等(wenjunz,daliae,liangc,etal.nature,2009,462(7276):1070-1074.)。基于以上原因，第三代egfrtkis便应运而生，如co-1686及azd9291等。尽管第三代egfrtkis的临床研究展现出高的活性，但接受azd9291治疗的患者有将近三分之一出现了一种新的突变egfr^c797s突变(第三次点突变)。这种新出现的egfr^c797s突变对第三代egfrtkis产生了新的耐药性(zopiap,etal.cancerdiscovery,2015,5(7):713-722.)，因此，开发新型高效的egfrtkis具有极其重要的意义。

技术实现要素：

本发明所要解决的技术问题在于提供一类具有抗肿瘤活性的喹唑啉衍生物，以及这些化合物在制备抗肿瘤药物中的用途。

解决上述技术问题所采用的技术方案是：该类具有抗肿瘤活性的喹唑啉衍生物为结构式如下的化合物：

式中r¹、r²各自独立地代表氢、卤素、乙炔基、丙烯-1-基、卤代的苄氧基中的任意一种；r³代表氟、哌嗪基、1-甲基哌嗪基、吗啉基、1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基、1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基、1-丙烯酰基哌嗪基中的任意一种。

本发明喹唑啉衍生物优选下列化合物1～28中的任意一种：

化合物1：6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物2：6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物3：6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物4：6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物5：6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物6：6-氟-7-哌嗪基-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物7：6-氟-7-哌嗪基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物8：6-氟-7-哌嗪基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物9：6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物10：6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物11：6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物12：6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物13：6-氟-7-吗啉基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物14：6-氟-7-吗啉基-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物15：6-氟-7-吗啉基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物16：6-氟-7-吗啉基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物17：6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物18：6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物19：6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物20：6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物21：6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物22：6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物23：6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物24：6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

化合物25：6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

化合物26：6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

化合物27：6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

化合物28：6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

上述具有抗肿瘤活性的喹唑啉衍生物中，r³代表氟时，其是以4,5-二氟-2-氨基苯甲酸为原料，通过与甲酰胺环化成酮后，与氯化亚砜发生亲电取代反应，再与取代芳胺反应制备而成，具体合成路线如下：

上述具有抗肿瘤活性的喹唑啉衍生物中，r³代表哌嗪基、1-甲基哌嗪基、吗啉基、1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基或1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基时，其是将式i化合物在缚酸剂二异丙基乙基胺(dipea)存在下，分别与哌嗪、1-甲基哌嗪、吗啉、1-(2-甲氧基乙基)哌嗪、1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪进行亲核取代反应制备而成，具体合成路线如下：

上述具有抗肿瘤活性的喹唑啉衍生物中，r³代表1-丙烯酰基哌嗪基时，其是将丙烯酰氯与6-氟-7-哌嗪基-4-芳氨基喹唑啉发生亲核取代反应制备而成，具体合成路线如下：

本发明喹唑啉衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途，其按常规药用制剂，与药学上可接受的载体按照各种制剂的常规制备工艺制成，可以是片剂、颗粒剂、胶囊剂。

本发明的喹唑啉衍生物对肿瘤细胞的增殖具有良好的抑制作用，其中一些化合物活性明显优于现临床使用的抗肿瘤药物吉非替尼和拉帕替尼，表明其可用于制备抗肿瘤药物。该类化合物既可以独自用药，也可与其它药物联合使用，也可以其盐或溶剂化物的形式用于抗肿瘤药物的制备。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明的保护范围不仅限于这些实施例。

下面实施例中所用试剂均为分析纯。化合物结构确定所用的核磁共振数据由brukeravance600超导核磁共振仪测定，tms作为内标；红外光谱数据采用brukertensor2733红外光谱仪测定；熔点采用x-6显微熔点测定仪(北京泰克仪器有限公司)测定(温度未进行校正)；质谱数据用brukeresquire3000plus质谱仪测定。

本发明中所用原料6,7-二氟-4-氯喹唑啉根据下述方法合成：

将4,5-二氟-2-氨基苯甲酸(2.0g，11.6mmol)、甲酰胺(18ml)和醋酸(2.5ml)的混合液在125℃下回流反应24h，冷却至室温，加入15ml蒸馏水，抽滤后用水洗涤，干燥，得到白色固体6,7-二氟喹唑啉-4(3h)酮(1.76g，9.7mmol)。将得到的6,7-二氟喹唑啉-4(3h)酮置于50ml圆底烧瓶中，加入氯化亚砜(28ml)和无水dmf(300μl)，80℃反应2h，反应由浑浊液变为淡黄色澄清液。用旋转蒸发仪蒸去溶剂，得到黄色固体6,7-二氟-4-氯喹唑啉(1.89g，9.4mmol)，以4,5-二氟-2-氨基苯甲酸计算，其产率为81.0％。

实施例1：合成6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

将6,7-二氟-4-氯喹唑啉(740mg，3.7mmol)、3-氯-4-氟苯胺(537mg，3.7mmol)加入异丙醇(16ml)中，90℃加热回流反应4h，反应液冷却后，抽滤，用异丙醇洗涤，干燥滤饼，得到淡黄色固体6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(977mg，3.16mmol)，其产率为85.3％。m.p.：233.6-234.4℃，hrms(c14h7clf3n3)m/z[m+h]⁺:310.0361(计算值:310.0353)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.80(s,1h),8.63(s,1h),8.58(dd,j＝11.6,8.6hz,1h),8.16(dd,j＝6.8,2.5hz,1h),7.82-7.77(m,2h),7.44(t,j＝9.1hz,1h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.92(d,j＝3.7hz),154.85,153.47(d,j＝243.7hz),153.28(dd,j＝254.9,15.2hz),148.28(dd,j＝248.2,14.9hz),147.87(d,j＝11.4hz),136.05,123.50,122.30(d,j＝6.9hz),118.85(d,j＝18.6hz),116.58(d,j＝21.7hz),114.72(d,j＝16.2hz),111.73(d,j＝6.2hz),110.32(d,j＝18.8hz)；νmax(kbr)cm^-1:3418,3044,2895,1628,1574,1506,1454,1379,1308,1215,1053,906,868,831。

实施例2：合成6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

将6,7-二氟-4-氯喹唑啉(800mg，4.0mmol)、3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯胺(1.0g，4.0mmol)加入异丙醇(16ml)中，90℃加热回流反应4h，反应液冷却后，抽滤，用异丙醇洗涤，干燥滤饼，得到黄色固体6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉(1.5g，3.6mmol)，其产率为90.2％。m.p.：207.2-208.9℃，hrms(c21h13clf3n3o)m/z[m+h]⁺:416.0768(计算值:416.0772)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.72(s,1h),8.61-8.57(m,2h),8.01(s,1h),7.79(dd,j＝11.0,8.1hz,1h),7.70(dd,j＝8.8,1.9hz,1h),7.48(dd,j＝14.2,7.5hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.27(d,j＝8.9hz,1h),7.20-7.17(m,1h),5.26(s,2h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.99,161.37,157.05(d,j＝3.8hz),155.08,153.20(dd,j＝254.3,15.2hz),149.83,148.20(dd,j＝247.4,14.7hz),147.83(d,j＝11.3hz),139.59(d,j＝7.4hz),132.76,130.51(d,j＝8.2hz),123.97,123.25(d,j＝2.5hz),122.13,121.08,114.65(d,j＝20.3hz),114.30,113.97(d,j＝22.0hz),111.74(d,j＝6.3hz),110.32(d,j＝19.6hz),69.38；νmax(kbr)cm^-1:3294,3109,2914,3044,1612,1585,1508,1431,1346,1283,1217,1061,883,794。

实施例3：合成6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

将6,7-二氟-4-氯喹唑啉(500mg，2.5mmol)、3-乙炔基苯胺(293mg，2.5mmol)加入异丙醇(10ml)中，90℃加热回流反应4h，反应液冷却后，抽滤，用异丙醇洗涤，干燥滤饼，得到黄色固体7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(572mg，2.0mmol)，其产率为81.3％。m.p.：233.7-234.8℃，hrms(c16h9f2n3)m/z[m+h]⁺:282.0834(计算值:282.0837)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.85(s,1h),8.70-8.67(m,1h),8.65(s,1h),8.05(s,1h),7.89(d,j＝8.1hz,1h),7.83-7.79(m,1h),7.43(t,j＝7.9hz,1h),7.27(d,j＝7.6hz,1h),4.22(s)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):158.97(d,j＝2.9hz),154.32(dd,j＝260.1,15.8hz),151.61,149.08(dd,j＝251.0,14.0hz),137.67(d,j＝9.5hz),136.85,129.61,129.11,127.02,125.02,122.00,113.69(d,j＝21.1hz),111.04(d,j＝7.1hz),108.49(d,j＝20.1hz),82.76,81.34；νmax(kbr)cm^-1:3296,3109,3038,1622,1580,1528,1431,1348,903,795,646。

实施例4：合成6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

将6,7-二氟-4-氯喹唑啉(700mg，3.5mmol)、4-(e)-丙烯基苯胺(466mg，3.5mmol)加入异丙醇(14ml)中，90℃加热回流反应4h，反应液冷却后，抽滤，用异丙醇洗涤，干燥滤饼，得到黄色固体6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(865mg，2.9mmol)，其产率为83.1％。m.p.：188.0-189.6℃，hrms(c17h13f2n3)m/z[m+h]⁺:298.1150(计算值:298.1150)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.15(s,1h),8.80(dd,j＝11.7,8.5hz,1h),8.65(s,1h),7.81(dd,j＝11.3,7.8hz,1h),7.78(d,j＝8.5hz,2h),7.41(d,j＝8.5hz,2h),6.41(d,j＝15.8,1h),6.27(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),1.86(d,j＝6.5hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):157.32(d,j＝2.9hz),154.43,153.37(dd,j＝255.4,15.0hz),148.34(dd,j＝248.4,14.7hz),145.92(d,j＝10.3hz),137.03,133.68,130.31,125.74,124.78,122.64,113.42(d,j＝16.8hz),111.75(d,j＝6.8hz),111.07(d,j＝19.8hz),18.22；νmax(kbr)cm^-1:3427,3049,2961,1626,1574,1512,1450,1377,1045,903,851,785。

实施例5：合成6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

将6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(150mg，0.48mmol)、无水哌嗪(413mg，4.8mmol)、二异丙基乙基胺(69mg，0.53mmol)溶于正丁醇(4ml)中，130℃回流反应6h，向反应液中加入3mlh2o，振荡后分液，除去水层，将有机层蒸除溶剂，以甲醇与二氯甲烷体积比为1:6的混合液为展开剂进行柱色谱分离，得到白色固体6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(127mg，0.34mmol)，其产率为70.8％。m.p.：258.9-260.1℃，hrms(c18h16clf2n5)m/z[m+h]⁺:376.1137(计算值:376.1135)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.62(s,1h),8.55(s,1h),8.29(d,j＝14.4hz,1h),8.23(dd,j＝6.8,2.6hz,1h),7.84-7.80(m,1h),7.42(t,j＝9.0hz,1h),7.16(d,j＝8.4hz,1h),3.12(t,j＝4.6hz,4h),2.89(t,j＝4.6hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.48(d,j＝2.7hz),153.93,153.51(d,j＝248.5hz),153.07(d,j＝242.9hz),148.22,145.97(d,j＝10.4hz),136.70(d,j＝1.6hz),122.82,121.64(d,j＝6.8hz),118.72(d,j＝18.3hz),116.44(d,j＝21.7hz),114.61(d,j＝3.4hz),108.68(d,j＝8.9hz),108.12(d,j＝24.0hz),50.92,45.43；νmax(kbr)cm^-1:3254,3171,3082,3045,2947,2826,1624,1566,1502,1429,1232,874,804。

实施例6：合成6-氟-7-哌嗪基-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉替换实施例5中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例5相同，得到淡黄色固体-氟-7-哌嗪基-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉(185mg，0.38mmol)，其产率为80％。m.p.：240.2-241.3℃，hrms(c25h22clf2n5o)m/z[m+h]⁺:482.1547(计算值:482.1554)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.50(s,1h),8.51(s,1h),8.29(d,j＝14.4hz,1h),8.06(d,j＝2.6hz,1h),7.73(dd,j＝8.9,2.6hz,1h),7.47(dd,j＝14.4,7.2hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.25(d,j＝9.0hz,1h),7.20-7.15(m,2h),5.25(s,2h),3.12(t,j＝4.6hz,4h),2.89(t,j＝4.6hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.18(d,j＝243.9hz),156.67,154.17,153.45(d,j＝248.0hz),149.32,148.16,145.85(d,j＝10.6hz),139.65(d,j＝7.4hz),133.51,130.49(d,j＝8.3hz),123.39,123.25(d,j＝2.6hz),121.53,121.03,114.69(d,j＝2.4hz),114.61(d,j＝14.6hz),114.30,113.97(d,j＝21.9hz),108.71(d,j＝9.0hz),108.13(d,j＝24.1hz),69.37,50.90,45.38；νmax(kbr)cm^-1:3265,3175,3088,3040,2947,2822,1628,1564,1502,1427,1238,1024,874,779。

实施例7：合成6-氟-7-哌嗪基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替换实施例5中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例5相同，得到白色固体6-氟-7-哌嗪基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(105mg，0.30mmol)，其产率为62.6％。m.p.：230.0-231.1℃，hrms(c20h18fn5)m/z[m+h]⁺:348.1618(计算值:348.1619)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.58(s,1h),8.56(s,1h),8.37(d,j＝14.5hz,1h),8.10-8.09(m,1h),7.92(d,j＝8.1hz,1h),7.39(t,j＝7.9hz,1h),7.20(d,j＝7.6,1h),7.18(d,j＝8.6hz,1h),4.20(s,1h),3.13(t,j＝4.6hz,4h),2.89(t,j＝4.6hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.75(d,j＝3.4hz),154.09,153.52(d,j＝248.2hz),148.31,146.00(d,j＝10.6hz),139.74,128.84,126.33,124.41,122.20,121.70,114.61(d,j＝3.0hz),108.89(d,j＝8.8hz),108.38(d,j＝24.2hz),83.55,80.44,50.97,45.43；νmax(kbr)cm^-1:3420,3288,3042,2922,2841,2467,1626,1566,1502,1435,1242,897,789。

实施例8：合成6-氟-7-哌嗪基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替换实施例5中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例5相同，得到淡黄色固体6-氟-7-哌嗪基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(121mg，0.33mmol)，其产率为69.3％。m.p.：231.5-232.9℃，hrms(c21h22fn5)m/z[m+h]⁺:364.1931(计算值:364.1932)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.51(s,1h),8.52(s,1h),8.36(d,j＝14.5hz,1h),7.82(d,j＝8.3hz,2h),7.38(d,j＝8.3hz,2h),7.16(d,j＝8.5hz,1h),6.39(d,j＝15.7hz,1h),6.24(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),3.13(t,j＝4.6hz,4h),2.90(t,j＝4.6hz,4h),1.85(d,j＝6.5hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.69(d,j＝3.8hz),154.24,153.46(d,j＝247.8hz),148.26,145.82(d,j＝10.5hz),138.10,132.57,130.45,125.71,124.07,121.72,114.68(d,j＝3.1hz),108.93(d,j＝8.9hz),108.25(d,j＝23.9hz),50.86,45.37,18.23；νmax(kbr)cm^-1:3435,3260,3170,3024,2916,2827,1626,1566,1518,1427,1240,1123,885,787。

实施例9：合成6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

用等摩尔1-甲基哌嗪替换实施例5中的无水哌嗪，以甲醇与二氯甲烷体积比为1∶10的混合液为流动相进行柱色谱分离，其他步骤与实施例5相同，得到浅黄色固体6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(136mg，0.35mmol)，其产率为72.9％。m.p.：257.9-259.4℃，hrms(c19h18clf2n5)m/z[m+h]⁺:390.1290(计算值:390.1292)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.57(s,1h),8.55(s,1h),8.29(d,j＝14.5hz,1h),8.22(dd,j＝6.8,2.5hz,1h),7.84-7.81(m,1h),7.42(t,j＝9.1hz,1h),7.18(d,j＝8.7hz,1h),3.22(t,j＝4.5hz,4h),2.53(t,j＝4.5hz,4h),2.26(s,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.52(d,j＝3.9hz),153.99,153.44(d,j＝248.4hz),153.07(d,j＝243.2hz),148.22,145.35(d,j＝10.6hz),136.66(d,j＝2.8hz),122.87,121.70(d,j＝6.7hz),118.74(d,j＝18.3hz),116.48(d,j＝21.6hz),114.86,108.79(d,j＝8.9hz),108.15(d,j＝24.0hz),54.31,49.43,45.61；νmax(kbr)cm^-1:3250,3165,3040,2945,2847,2791,1626,1566,1502,1431,1342,1242,1140,876。

实施例10：合成6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩尔1-甲基哌嗪替换实施例6中的无水哌嗪，回流反应时间延长至8h，以甲醇与二氯甲烷体积比为1∶10的混合液为流动相进行柱色谱分离，其他步骤与实施例6相同，得到白色固体6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉(211mg，0.42mmol)，其产率为87.5％。m.p.：213.5-214.9℃，hrms(c26h24clf2n5o)m/z[m+h]⁺:496.1702(计算值:496.1710)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.45(s,1h),8.51(s,1h),8.28(d,j＝14.6hz,1h),8.05(d,j＝2.6hz,1h),7.73(dd,j＝9.0,2.6hz,1h),7.47(dd,j＝14.0,7.6hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.24(d,j＝9.0hz,1h),7.20-7.16(m,2h),5.24(s,2h),3.22(t,j＝6.,7hz,4h),2.52(t,j＝6.7hz,4h),2.26(s,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.17(d,j＝243.9hz),156.67,156.54,154.21,153.39(d,j＝249.1hz),148.13,145.26(d,j＝10.7hz),139.65(d,j＝7.4hz),133.40,130.51(d,j＝8.3hz),123.42,123.27(d,j＝2.6hz),121.57,121.02,114.87(d,j＝3.5hz),114.65(d,j＝20.9hz),114.32,113.98(d,j＝22.0hz),108.81(d,j＝8.8hz),108.16(d,j＝24.1hz),69.36,54.33,49.46,45.64；νmax(kbr)cm-¹:3300,3105,2934,2824,1622,1566,1502,1425,1286,1234,1142,930,814。

实施例11：合成6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

用等摩尔1-甲基哌嗪替换实施例7中的无水哌嗪，回流反应时间延长至8h，以甲醇与二氯甲烷体积比为1∶10的混合液为流动相进行柱色谱分离，其他步骤与实施例7相同，得到淡黄色固体6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(88mg，0.244mmol)，其产率为50.8％。m.p.：231.5-232.4℃，hrms(c21h20fn5)m/z[m+h]⁺:362.1774(计算值:362.1776)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.64(s,1h),8.57(s,1h),8.35(d,j＝14.5hz,1h),8.11-8.10(m,1h),7.93(dd,j＝8.2,1.2hz,1h),7.40(t,j＝7.9hz,1h),7.21(dt,j＝7.6,1.2hz,1h),7.19(d,j＝8.7hz,1h),4.20(s,1h),3.22(t,j＝4.6hz,4h),2.52(t,j＝4.6hz,4h),2.25(s,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.67(d,j＝3.9hz),154.25,153.42(d,j＝248.3hz),148.25,145.33(d,j＝10.7hz),139.65,128.87,126.36,124.35,122.12,121.73,114.85(d,j＝3.2hz),108.93(d,j＝8.9hz),108.24(d,j＝24.0hz),85.53,80.49,54.32,49.41,45.63；νmax(kbr)cm-¹:3293,3204,3044,2941,2814,1632,1562,1508,1431,1242,1144,893,787。

实施例12：合成6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩尔1-甲基哌嗪替换实施例8中的无水哌嗪，回流反应时间延长至10h，以甲醇与二氯甲烷体积比为1∶10的混合液为流动相进行柱色谱分离，其他其他步骤与实施例8相同，得到淡黄色固体6-氟-7-(1-甲基哌嗪基)-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(88mg，0.234mmol)，其产率为48.8％。m.p.：241.1-241.9℃，hrms(c22h24fn5)m/z[m+h]⁺:378.2088(计算值:378.2089)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.57(s,1h),8.51(s,1h),8.39(d,j＝14.5hz,1h),7.83(d,j＝8.4hz,2h),7.37(d,j＝8.4hz,2h),7.17(d,j＝8.7hz,1h),6.39(d,j＝15.7hz,1h),6.23(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),3.38(t,j＝4.5hz,4h),3.20(t,j＝4.5hz,4h),2.24(s,3h),1.85(d,j＝6.5hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.70(d,j＝4.5hz),154.26,153.39(d,j＝243.1hz),148.21,145.20(d,j＝10.6hz),138.13,132.55,130.46,125.69,124.05,121.74,114.84,109.06(d,j＝8.9hz),108.36(d,j＝24.1hz),54.36,49.49,45.68,18.24；νmax(kbr)cm^-1:3248,3163,3030,2930,2845,2791,1626,1564,1518,1429,1246,1142,895,785。

实施例13：合成6-氟-7-吗啉基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

将6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(155mg，0.50mmol)、吗啉(436mg，5.00mmol)、二异丙基乙基胺(71mg，0.55mmol)溶于正丁醇(5ml)中，130℃回流反应5h，向反应液中加入3mlh2o，振荡后分液，除去水层，将有机层蒸除溶剂，以乙酸乙酯与石油醚体积比为1:1的混合液为流动相进行柱色谱分离，得到淡黄色固体6-氟-7-吗啉基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(130mg，0.35mmol)，其产率为70.0％。m.p.：254.8-256.4℃，hrms(c18h15clf2n4o)m/z[m+h]⁺:377.0975(计算值:377.0975)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.61(s,1h),8.59(s,1h),8.32(d,j＝14.4hz,1h),8.24(dd,j＝6.8,2.6hz,1h),7.86-7.83(m,1h),7.45(t,j＝9.1hz,1h),7.22(d,j＝8.6hz,1h),3.83(t,j＝4.6hz,4h),3.23(t,j＝4.6hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.53(d,j＝4.0hz),154.04(d,j＝0.76hz),153.40(d,j＝248.4hz),153.09(d,j＝242.9hz),148.17,145.30(d,j＝10.5hz),136.60,122.90,121.73(d,j＝6.6hz),118.70(d,j＝18.4hz),116.50(d,j＝21.6hz),114.75,108.96(d,j＝8.9hz),108.23(d,j＝24.0hz),65.90(s),49.95；νmax(kbr)cm^-1:3260,3173,3042,2970,2845,1628,1566,1502,1427,1240,1119,935,812。

实施例14：合成6-氟-7-吗啉基-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉替换实施例13中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，回流反应时间延长至7h，以乙酸乙酯与石油醚体积比为2:1的混合液为流动相进行柱色谱分离，其他步骤与实施例13相同，得到淡黄色固体6-氟-7-吗啉基-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉(187mg，0.39mmol)，其产率为78.0％。m.p.:239.9-240.8℃，hrms(c25h21clf2n4o2)m/z[m+h]⁺:483.1384(计算值:483.1394)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.54(s,1h),8.56(s,1h),8.34(d,j＝14.5hz,1h),8.10(d,j＝2.5hz,1h),7.76(dd,j＝8.9,2.5hz,1h),7.51(dd,j＝14.0,7.8hz,1h),7.33-7.30(m,2h),7.23(d,j＝8.9hz,1h),7.19-7.15(m,2h),5.28(s,2h),3.79(t,j＝4.4hz,4h),3.18(t,j＝4.4hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.17(d,j＝243.9hz),156.61(d,j＝3.8hz),154.20(d,j＝9.7hz),152.35(d,j＝239.5hz),149.32,148.06,145.07(d,j＝10.7hz),139.63(d,j＝7.5hz),133.40,130.47(d,j＝8.3hz),123.38,123.22,121.50,121.02,114.87(d,j＝3.4hz),114.62(d,j＝21.0hz),114.21,113.94(d,j＝21.9hz),109.00(d,j＝8.9hz),108.21(d,j＝23.9hz),69.34,65.90,49.94；νmax(kbr)cm^-1:3254,3165,3040,2961,2851,1624,1506,1429,1238,1122,1022,878,798。

实施例15：合成4-(3-乙炔基苯氨基)-6-氟-7-吗啉基喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替换实施例14中的6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉，回流反应时间延长至10h，其他步骤与实施例14相同，得到淡黄色固体6-氟-7-吗啉基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(164mg，0.47mmol)，其产率为94.7％。m.p.:254.3-256.1℃，hrms(c20h17fn4o)m/z[m+h]⁺:349.1459(计算值:349.1459)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.58(s,1h),8.58(s,1h),8.37(d,j＝14.5hz,1h),8.13-8.12(m,1h),7.94(d,j＝8.0hz,1h),7.42(t,j＝8.0hz,1h),7.24(d,j＝7.6hz,1h),7.21(d,j＝8.6hz,1h),4.24(s),3.82(t,j＝4.4hz,4h),3.22(t,j＝4.4hz,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.70,154.12,153.39(d,j＝248.3hz),148.17,145.22(d,j＝10.6hz),139.59,128.88,126.62,124.39,122.16,121.73,114.70(d,j＝3.4hz),109.10(d,j＝9.0hz),108.34(d,j＝24.0hz),83.51,80.50,65.90,49.92；νmax(kbr)cm^-1:3398,3288,3036,2972,2851,1627,1564,1433,1228,1101,897,788。

实施例16：合成6-氟-7-吗啉基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替换实施例14中的6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉，回流反应时间缩短至5h，其他步骤与实施例14相同，得到淡黄色固体6-氟-7-吗啉基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(108mg，0.30mmol)，其产率为59.3％。m.p.：244.3-245.2℃，hrms(c21h21fn4o)m/z[m+h]⁺:365.1772(计算值:365.1772)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.55(s,1h),8.56(s,1h),8.41(d,j＝14.4hz,1h),7.85(d,j＝8.1hz,2h),7.42(d,j＝8.1hz,2h),7.24(d,j＝8.4hz,1h),6.44(d,j＝15.7hz,1h),6.29(dq,j＝15.7,6.2hz,1h),3.84(t,j＝4.5hz,4h),3.25(t,j＝4.5hz,4h),1.89(d,j＝6.2hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.71(d,j＝4.4hz),154.32,153.35(d,j＝248.5hz),148.15,145.13(d,j＝11.1hz),137.93,132.64,130.41,125.72,124.17,121.78,114.77,109.18(d,j＝7.6hz),108.37(d,j＝24.5hz),65.91,49.98,18.25；νmax(kbr)cm^-1:3250,3163,3030,2963,2849,1626,1564,1518,1427,1244,1119,932,789。

实施例17：合成6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

将6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(155mg，0.50mmol)、1-(2-甲氧基乙基)哌嗪(79mg，0.55mmol)、二异丙基乙基胺(71mg，0.55mmol)溶于正丁醇(5ml)中，130℃回流反应24h，将反应液蒸除溶剂，以甲醇与二氯甲烷体积比为1:10的混合液为展开剂进行柱色谱分离，得到白色固体6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(125mg，0..29mmol)，其产率为57.5％。m.p.：235.5-236.7℃，hrms(c21h22clf2n5o)m/z[m+h]⁺:434.1553(计算值:434.1554)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.57(s,1h),8.55(s,1h),8.27(d,j＝14.4hz,1h),8.21(dd,j＝6.7,2.5hz,1h),7.82-7.80(m,1h),7.41(t,j＝9.1hz,1h),7.16(d,j＝8.6hz,1h),3.48(t,j＝5.6hz,2h),3.26(s,1h),3.20(t,j＝4.8hz,4h),2.64(t,j＝4.8hz,4h),2.57(t,j＝5.6hz,2h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.48(d,j＝3.6hz),153.96,153.42(d,j＝248.4hz),153.05(d,j＝243.1hz),148.17,145.29(d,j＝10.9hz),136.64(d,j＝2.7hz),122.82,121.65(d,j＝6.8hz),118.73(d,j＝18.4hz),116.46(d,j＝21.6hz),114.78(d,j＝3.3hz),108.77(d,j＝8.7hz),108.11(d,j＝24.2hz),69.74,57.98,56.87,52.75,49.44；νmax(kbr)cm^-1:3302,3044,2914,2827,1626,1566,1502,1425,1240,1113,872,814。

实施例18：合成6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉替换实施例17中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例17相同，得到淡黄色固体6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉(169mg，0.29mmol)，其产率为58.3％。m.p.：201.8-203.2℃，hrms(c28h28clf2n5o2)m/z[m+h]⁺:540.1963(计算值:540.1972)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.52(s,1h),8.52(s,1h),8.30(d,j＝14.5hz,1h),8.07(d,j＝2.5hz,1h),7.74(dd,j＝9.0,2.5hz,1h),7.47(dd,j＝14.0,7.9hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.25(d,j＝9.0hz,1h),7.20-7.16(m,2h),5.24(s,2h),3.49(t,j＝5.7hz,2h),3.26(s,3h),3.21(t,j＝4.8hz,4h),2.65(t,j＝4.8hz,4h),2.59(t,j＝5.7hz,2h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.17(d,j＝243.9hz),156.62(d,j＝3.6hz),154.17,153.35(d,j＝247.9hz),149.31,148.09,145.16(d,j＝10.9hz),139.64(d,j＝7.5hz),133.43,130.48(d,j＝8.3hz),123.38,123.22(d,j＝2.6hz),121.51,121.01,114.79(d,j＝3.1hz),114.62(d,j＝20.9hz),114.24,113.94(d,j＝21.9hz),108.83(d,j＝8.9hz),108.16(d,j＝24.1hz),69.72,69.35,57.98,56.84,52.75,49.47；νmax(kbr)cm^-1:3252,3165,3084,3042,2924,2812,1626,1566,1502,1429,1236,1113,876,791。

实施例19：合成6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替换实施例17中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例17相同，得到淡黄色固体6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(94mg，0.23mmol)，其产率为46.5％。m.p.：198.6-199.8℃，hrms(c23h24fn5o)m/z[m+h]⁺:406.2040(计算值:406.2038)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.58(s,1h),8.57(s,1h),8.37(d,j＝14.5hz,1h),8.12-8.11(m,1h),7.94(d,j＝9.1hz,1h),7.40(t,j＝7.9hz,1h),7.22(d,j＝7.6hz,1h),7.19(d,j＝8.7hz,1h),4.22(s,1h),3.50(t,j＝5.5hz,2h),3.27(s,3h),3.23(t,j＝4.5hz,4h),2.67(t,j＝4.5hz,4h),2.60(t,j＝5.5hz,2h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.70(d,j＝3.8hz),154.10,153.41(d,j＝248.2hz),148.24,145.23(d,j＝10.7hz),139.66,128.84,126.36,124.38,122.14,121.73,114.81(d,j＝3.1hz),108.98(d,j＝8.9hz),108.29(d,j＝24.1hz),83.51,80.43,69.63,57.99,56.81,52.71,49.39；νmax(kbr)cm^-1:3275,3049,2924,2814,1626,1562,1502,1435,1240,1113,885,789。

实施例20：合成6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替换实施例17中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例17相同，得到黄色固体6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(70mg，0.17mmol)，其产率为33.2％。m.p.：218.2-219.5℃，hrms(c24h28fn5o)m/z[m+h]⁺:422.2350(计算值:422.2351)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.51(s,1h),8.52(s,1h),8.36(d,j＝14.5hz,1h),7.82(d,j＝8.5hz,2h),7.38(d,j＝8.5hz,2h),7.18(d,j＝8.7hz,1h),6.39(d,j＝15.7hz,1h),6.24(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),3.48(t,j＝5.7hz),3.26(s,3h),3.21(t,j＝4.5hz,4h),2.63(t,j＝4.5hz,4h),2.56(t,j＝5.7hz,2h),1.85(d,j＝6.5hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.67(d,j＝3.1hz),154.26,153.38(d,j＝247.9hz),148.21,145.22(d,j＝10.8hz),138.06,132.56,130.44,125.71,124.08,121.71,114.82,109.01(d,j＝8.7hz),108.25(d,j＝24.0hz),69.87,57.99,56.93,52.84,49.58,18.26；νmax(kbr)cm^-1:3342,3190,3022,2885,2824,1626,1564,1514,1423,1238,1113,957,843,783。

实施例21：合成6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

将无水哌嗪(300mg，3.48mmol)、二乙氨基氯乙烷盐酸盐(599mg，3.48mmol)溶于无水乙醇(6ml)中，60℃下加热反应1h。蒸除溶剂后加入6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(155mg，0.50mmol)、二异丙基乙基胺(129mg，1.00mmol)、正丁醇(6ml)，130℃下回流反应24h。将反应液蒸除溶剂，以甲醇与二氯甲烷体积比为1:4的混合液为流动相进行柱色谱分离，得到淡黄色固体6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(110mg，0.23mmol)，其产率为46.3％。m.p.：226.3-227.8℃，hrms(c24h29clf2n6)m/z[m+h]⁺:475.2189(计算值:475.2183)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.62(s,1h),8.55(s,1h),8.31(d,j＝14.5hz,1h),8.23(dd,j＝6.8,2.5hz,1h),7.84-7.81(m,1h),7.43(t,j＝9.1hz,1h),7.18(d,j＝8.7hz,1h),3.20(t,j＝4.6hz,4h),2.60(t,j＝4.6hz,4h),2.56(t,j＝7.0hz,2h),2.49(q,j＝7.1hz,4h),2.44(t,j＝7.0hz,2h),0.97(t,j＝7.1hz,6h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.55(d,j＝4.0hz),154.02,153.45(d,j＝248.6hz),153.08(d,j＝243.1hz),148.23,145.40(d,j＝10.7hz),136.66(d,j＝2.7hz),122.90,121.75(d,j＝6.8hz),118.74(d,j＝18.3hz),116.52(d,j＝21.5hz),114.79(d,j＝3.4hz),108.77(d,j＝8.8hz),108.18(d,j＝24.1hz),55.81,52.86,49.87,49.59,46.74,11.65；νmax(kbr)cm^-1:3300,3123,3038,2963,2816,1624,1566,1502,1425,1238,1136,900,818。

实施例22：合成6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉替换实施例21中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例21相同，得到黄色固体6-氟-7-[1-(2-甲氧基乙基)哌嗪基]-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉(151mg，0.26mmol)，其产率为51.9％。m.p.：216.8-218.4℃，hrms(c31h35clf2n6o)m/z[m+h]⁺:581.2596(计算值:581.2602)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.91(s,1h),8.59(d,j＝14.5hz,1h),8.50(s,1h),8.14(s,1h),7.82(d,j＝9.0hz,1h),7.47(dd,j＝14.1,7.5hz,1h),7.34-7.31(m,2h),7.25(d,j＝9.0hz,1h),7.20-7.15(m,2h),5.25(s,2h),3.19(t,j＝4.5hz,4h),2.60(t,j＝4.5hz,4h),2.54(t,j＝6.9hz,2h),2.47(q,j＝7.0hz,4h),2.43(t,j＝6.9hz,2h),0.95(t,j＝7.0hz,6h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):162.16(d,j＝243.9hz),156.79(d,j＝4.1hz),154.20,153.32(d,j＝248.2hz),149.25,148.15,145.26(d,j＝10.6hz),139.70(d,j＝7.5hz),133.58,130.52(d,j＝8.2hz),123.49,123.28(d,j＝2.6hz),121.72,120.88,114.69(d,j＝4.1hz),114.61(d,j＝13.7hz),114.26,113.96(d,j＝18.3hz),108.93(d,j＝9.7hz),108.80(d,j＝24.0hz),69.36,55.96,52.90,49.97,49.63,46.73,11.82；νmax(kbr)cm^-1:3303,3045,2964,2824,1624,1568,1504,1429,1235,1138,872,787。

实施例23：合成6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替换实施例21中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例21相同，得到黄色固体6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(109mg，0.245mmol)，其产率为49.0％。m.p.：205.8-207.6℃，hrms(c26h31fn6)m/z[m+h]⁺:447.2671(计算值:447.2667)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.92(s,1h),8.63(d,j＝14.6hz,1h),8.54(s,1h),8.16-8.15(m,1h),8.00(d,j＝8.0hz,1h),7.37(t,j＝8.0hz,1h),7.18(d,j＝7.5hz,2h),4.16(s,1h),3.21(t,j＝4.5hz,4h),2.61(t,j＝4.5hz,4h),2.54(t,j＝7.0hz,2h),2.48(q,j＝7.1hz,4h),2.44(t,j＝7.0hz,2h),0.96(t,j＝7.1hz,6h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.85(d,j＝4.6hz),154.11,153.38(d,j＝248.1hz),148.30,145.36(d,j＝10.9hz),139.80,128.74,126.29,124.51,122.35,121.61,114.66(d,j＝3.1hz),109.06(d,j＝8.9hz),108.89(d,j＝24.4hz),83.58,80.45,56.02,52.90,49.98,49.63,46.74,11.82；νmax(kbr)cm^-1:3310,3269,3049,2963,2806,1626,1560,1502,1433,1242,1134,885,785。

实施例24：合成6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6,7-二氟-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替换实施例21中的6,7-二氟-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例21相同，得到黄色固体6-氟-7-[1-(2-二乙氨基乙基)哌嗪基]-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(127mg，0.274mmol)，其产率为54.8％。m.p.：243.0-244.4℃，hrms(c27h35fn6)m/z[m+h]⁺:463.2980(计算值:463.2980)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.69(s,1h),8.50(s,1h),8.49(d,j＝14.5hz,1h),7.85(d,j＝8.5hz,2h),7.37(d,j＝8.5hz,2h),7.17(d,j＝8.7hz,1h),6.40(d,j＝15.6hz,1h),6.24(dq,j＝15.7,6.5hz,1h),3.20(t,j＝4.5hz,4h),2.61(t,j＝4.5hz,4h),2.54(t,j＝7.0hz,2h),2.48(t,j＝7.1hz,4h),2.43(t,j＝7.0hz,2h),1.85(d,j＝6.5hz,3h),0.96(t,j＝7.1hz,6h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):156.76(d,j＝3.6hz),154.26,153.35(d,j＝248.1hz),148.20,145.24(d,j＝10.8hz),138.12,132.55,130.46,125.66,124.08,121.83,114.67(d,j＝4.9hz),109.05(d,j＝8.9hz),108.57(d,j＝24.4hz),56.00,52.91,49.96,49.63,46.74,18.24,11.80；νmax(kbr)cm^-1:3306,3030,2926,2818,1624,1566,1516,1425,1238,1113,962,851,785。

实施例25：合成6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉

将6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(150mg，0.40mmol)、三乙胺(49mg，0.48mmol)溶于二氯甲烷(9ml)中，在冰浴下滴加丙烯酰氯(36mg，0.40mmol)，滴加完后搅拌30min。将反应液蒸除溶剂，以甲醇与二氯甲烷体积比为1:15的混合液为流动相进行柱色谱分离，得到淡黄色固体6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉(102mg，0.24mmol)，其产率为59.4％。m.p.：252.3-253.5℃，hrms(c21h18clf2n5o)m/z[m+h]⁺:430.1245(计算值:430.1241)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.62(s,1h),8.57(s,1h),8.34(d,j＝14.3hz,1h),8.22(dd,j＝6.8,2.6hz,1h),7.84-7.81(m,1h),7.44(t,j＝9.1hz,1h),7.23(d,j＝8.6hz,1h),6.87(dd,j＝16.7,10.5hz,1h),6.17(dd,j＝16.7,2.3hz,1h),5.74(dd,j＝10.5,2.3hz,1h),3.79(s,2h),3.75(s,2h),3.24(s,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):164.32,156.60(d,j＝3.9hz),154.11,153.37(d,j＝248.4hz),153.14(d,j＝243.0hz),148.17,145.02(d,j＝10.7hz),136.61,128.06,127.59,122.95,121.83(d,j＝6.8hz),118.78(d,j＝18.4hz),116.56(d,j＝21.7hz),115.26(d,j＝2.7hz),109.09(d,j＝9.0hz),108.29(d,j＝24.2hz),49.97,49.44,44.78,41.16；νmax(kbr)cm^-1:3439,3319,3042,2926,1636,1574,1504,1431,1234,868,800,546。

实施例26：合成6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6-氟-7-哌嗪基-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉替换实施例25中的6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例25相同，得到白色固体6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-[3-氯-4-(3-氟苄氧基)苯氨基]喹唑啉(116mg，0.22mmol)，其产率为53.9％。m.p.：246.8-247.7℃，hrms(c28h24clf2n5o2)m/z[m+h]⁺:536.1662(计算值:536.1659)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.51(s,1h),8.52(s,1h),8.31(d,j＝13.9hz,1h),,8.05(s,1h),7.72(d,j＝7.7hz,1h),7.47(dd,j＝14.1,7.5hz,1h),7.33-7.30(m,2h),7.25(d,j＝8.3hz,1h),7.21-7.16(m,2h),6.85(dd,j＝16.4,10.2hz,1h),6.17(d,j＝16.4hz,1h),5.73(d,j＝10.2hz,1h),5.24(s,2h),3.77(s,2h),3.75(s,2h),3.23(s,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):164.35,162.18(d,j＝243.9hz),156.69(d,j＝2.0hz),154.27,153.29(d,j＝247.9hz),149.42,148.07,144.85(d,j＝10.6hz),139.64(d,j＝7.4hz),133.38,130.50(d,j＝8.6hz),128.04,127.56,123.47,123.25(d,j＝1.9hz),121.62,121.08,115.24,114.63(d,j＝21.1hz),114.38,113.96(d,j＝22.3hz),109.11(d,j＝9.1hz),108.25(d,j＝23.6hz),69.56,49.99,49.45,44.81,41.17；νmax(kbr)cm^-1:3447,3337,3044,2920,1636,1576,1502,1429,1229,1015,937,868,789。

实施例27：合成6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(27)

用等摩尔6-氟-7-哌嗪基-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉替换实施例25中的6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例25相同，得到白色固体6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-(3-乙炔基苯氨基)喹唑啉(53mg，0.13mmol)，其产率为32.9％。m.p.：229.5-230.9℃，hrms(c23h20fn5o)m/z[m+h]⁺:402.1724(计算值:402.1725)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.56(s,1h),8.58(s,1h),8.38(d,j＝14.3hz,1h),,8.10-8.09(m,1h),7.92(d,j＝8.0hz,1h),7.40(t,j＝7.9hz,1h),7.23(d,j＝8.0hz,1h),7.22(d,j＝6.8hz,1h),6.87(dd,j＝16.6,10.5hz,1h),6.18(dd,j＝16.6,1.6hz,1h),5.74(dd,j＝10.5,1.6hz,1h),4.21(s,1h),3.79(s,2h),3.76(s,2h),3.24(s,4h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):164.31,156.72(d,j＝3.9hz),154.19,153.36(d,j＝250.4hz),148.20,144.96(d,j＝10.9hz),139.60,128.89,128.05,127.59,126.43,124.40,122.17,121.75,115.26(d,j＝3.0hz),109.24(d,j＝8.8hz),108.35(d,j＝24.2hz),83.50,80.50,49.97,49.44,44.79,41.17；νmax(kbr)cm^-1:3339,3252,3032,2924,2812,1632,1593,1566,1502,1431,1238,1018,883,785,648.。

实施例28：合成6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉

用等摩尔6-氟-7-哌嗪基-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉替换实施例25中的6-氟-7-哌嗪基-4-(3-氯-4-氟苯氨基)喹唑啉，其他步骤与实施例25相同，得到淡黄色固体6-氟-7-(1-丙烯酰基哌嗪基)-4-[4-(e)-丙烯基苯氨基]喹唑啉(68mg，0.16mmol)，其产率为40.6％。m.p.：256.8-257.9℃，hrms(c24h24fn5o)m/z[m+h]⁺:418.2038(计算值:418.2038)；¹hnmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.52(s,1h),8.52(s,1h),8.38(d,j＝14.3hz,1h),7.82(d,j＝8.1hz,2h),7.38(d,j＝8.1hz,2h),7.21(d,j＝8.4hz,1h),6.86(dd,j＝16.5,10.5hz,1h),6.39(d,j＝15.6hz,1h),6.24(dq,j＝15.6,6.0hz,1h),6.17(d,j＝16.5hz,1h),5.74(d,j＝10.5,1h),3.78(s,2h),3.75(s,2h),3.23(s,4h),1.85(d,j＝6.0hz,3h)；¹³cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):164.32,156.72(d,j＝3.3hz),154.34,153.30(d,j＝247.9hz),148.16,144.83(d,j＝11.0hz),137.99,132.66,130.44,128.05,127.59,125.73,124.15,121.77,115.27(d,j＝3.5hz),109.32(d,j＝9.1hz),108.37(d,j＝23.5hz),49.99,49.47,44.81,40.97,18.27；νmax(kbr)cm^-1:3360,3032,2905,2843,1632,1595,1514,1420,1385,1232,1015,962,859,783,517。

实施例29：化合物1～28对肿瘤细胞的生长抑制实验

1、细胞株

人皮肤鳞状细胞癌细胞株a431、人非小细胞肺癌细胞株a549、人结肠癌细胞株sw480，人肺癌细胞株nci-h1975(egfrt790m/l858r双突变)均购自中国科学院上海细胞库。

2、试剂和材料

mtt(mpbio)、96孔细胞培养板(costar)、胎牛血清(gibco)、培养基(gibco)、酶标仪(perkinelmerenspire)。

3、实验步骤

化合物1～28对肿瘤细胞的生长抑制活性利用mtt法进行测定。分别取对数生长期的人肿瘤细胞sw480、a549、a431、nci-h1975，用0.25％的胰蛋白酶消化液消化、离心、重悬后计数，制备细胞悬液，调整细胞悬液浓度为2×10⁴～5×10⁴个/ml。取细胞悬液接种于96孔细胞培养板中(100μl/孔)，置饱和湿度、37℃和5％co2培养箱中培养24h。用培养基稀释受试化合物至所需浓度，加入已接种人肿瘤细胞的96孔细胞培养板中(100μl/孔)，dmso终浓度为0.5％，置于培养箱中培养72h。将mtt加入96孔板中(20μl/孔)，培养箱中反应4h。吸弃孔内液体，加入dmso(150μl/孔)，摇床上震荡10min，使甲臜完全溶解。然后用酶标仪测定570nm波长处的吸光度(od570)，630nm波长处的吸光度(od630)作为参比，以相应溶剂作为对照，计算细胞生长抑制率。

受试化合物对肿瘤细胞生长抑制率的计算方式如下：

肿瘤细胞生长抑制率％＝[1-(ods-odnc)/(odpc-odnc)]×100％

其中：ods表示样品孔的吸光度值(细胞+待测化合物+mtt)；odpc表示对照孔的吸光度值(细胞+dmso+mtt)；odnc表示调零孔的吸光度值(培养基+dmso+mtt)；ods＝od570s-od630s；odpc＝od570pc-od630pc；odnc＝od570nc-od630nc。

受试化合物对肿瘤细胞生长抑制曲线的拟合及ic50的计算：

采用graphpadprism5拟合受试化合物对肿瘤细胞生长的抑制曲线，并得出ic50值。每组设置3个复孔，实验至少重复3次。

4、实验结果

以临床使用的抗肿瘤药物吉非替尼(gefitinib)和拉帕替尼(lapatinib)为阳性对照，实验结果如表1所示。

表1受试化合物抑制肿瘤细胞增殖的ic50(μmol/l)

由表1中实验数据可见，大部分受试化合物对5种肿瘤细胞株的增殖都具有很好的抑制作用，其中一些化合物的效果明显优于临床抗肿瘤药物gefitinib和lapatinib。