本发明属于抗病毒感染药物领域，特别涉及一种奎宁酸衍生物及其制备方法与应用。
背景技术：
：众所周知，呼吸道病毒感染是严重危害人类健康的传染性疾病之一，其中流感病毒、副流感病毒和呼吸道合胞病毒(rsv)是呼吸道病毒感染的主要病原体。rsv是仅次于甲型流感病毒的第二大呼吸道感染病毒，易感人群主要为婴幼儿，可引起婴幼儿急性气管炎、支气管炎、肺炎等重症下呼吸道感染。据统计，约95％的儿童在2岁之前感染过rsv，而100％的儿童在成年以前均感染过rsv(piedimonte,g.,etal.pediatricsinreview2014,35:519-530)。全球每年因rsv感染而需住院治疗的患儿达三百万，并导致数十万人死亡。人体感染rsv后并不能获得终身免疫，故rsv也是造成老年人和免疫力低下人群呼吸道疾病的重要病原体。目前，临床上尚无安全性好的rsv疫苗及特异性治疗rsv感染的小分子药物。利巴韦林(ribavirin)是现在公认对rsv具一定疗效的小分子广谱抗病毒药物，其主要是通过抑制宿主细胞磷酸肌苷脱氢酶(impdehydrogenase)的活性达到抑制病毒复制的效果，故其对宿主细胞的毒性较高。因此，目前医学界对利巴韦林的临床疗效尚有争议，如美国儿科学会仅推荐其用于治疗住院的高危婴幼儿。除小分子药物，帕利珠单抗(palivizumab，rsv-f蛋白的中和抗体)临床可用于早产、支气管肺发育不良等rsv感染的高危患儿，但帕利珠单抗存在使用周期长、费用高等弊端，尚未能在临床上推广使用(vogel,a.m.,etal.journalofpaediatricsandchildhealth2002,38:550-554)。因此，开发高效、低毒的特异性抗rsv小分子药物具有重要的临床意义。地胆草(elephantopusscaber)为菊科地胆草属植物，主要分布在我国华南和西南地区，具有清热、凉血、利湿的功效。现代药理研究表明，地胆草具有抗病毒、抑菌、抗肿瘤和解热等作用。中国发明专利cn102219687b公开了从地胆草提取的3,4-o-二咖啡酰奎宁酸、3,5-o-二咖啡酰奎宁酸、4,5-o-二咖啡酰奎宁酸及其甲酯具有抗rsv病毒、副流感iii型和甲型流感病毒的作用。研究表明，这些二咖啡酰类化合物结构不稳定，在血液中容易被水解，半衰期短，直接影响这些天然产物在临床上的应用。依据药核相似性原理以及生物电子等排原理，对这些天然来源抗病毒化合物进行结构优化，是获得具临床前景先导物的快捷途径。技术实现要素：本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种奎宁酸衍生物。本发明的另一目的在于提供上述奎宁酸衍生物的制备方法。本发明的另一目的在于提供上述奎宁酸衍生物的应用。本发明的目的通过下述技术方案实现：一种奎宁酸衍生物，具有如通式i所示的结构：通式i中，r1、r2、r3为oh或acnh；其中，r1＝oh，r2＝r3＝acnh或者r2＝oh，r1＝r3＝acnh或者r3＝oh，r1＝r2＝acnh；*表示r构型或s构型。所述的ac表示咖啡酰基cac或者其衍生物咖啡磺酰基sac、咖啡(单甲酯)膦酰基pac，其结构如下所示：所述的奎宁酸衍生物优选为化合物cl-01～cl-24，化合物cl-01～cl-24的结构如下所示：上述奎宁酸衍生物的制备方法，包括如下步骤：(1a)苯骈[d][1,3]二氧戊烯(胡椒环)的合成：以邻苯二酚为起始原料，将其溶于n,n-二甲基甲酰胺，再加入试剂a和碳酸氢钠，反应，得到苯骈[d][1,3]二氧戊烯；(1b)3,4-二氧亚甲基苯甲醛(胡椒醛)的合成：将步骤(1a)中得到的苯骈[d][1,3]二氧戊烯加入溶有催化剂的异丙醇中，加入试剂b，反应，得到3,4-二氧亚甲基苯甲醛；(1c)(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸的合成：将步骤(1b)得到的3,4-二氧亚甲基苯甲醛和试剂c溶于碱，反应，得到(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸；(1c′)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸的合成：将步骤(1b)得到的3,4-二氧亚甲基苯甲醛和甲烷磺酸酐溶于干燥的四氢呋喃(thf)，加入氢化钠，反应，得到(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸；(1c″)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯基膦酸二甲酯的合成：将步骤(1b)得到的3,4-二氧亚甲基苯甲醛和甲基膦酸二甲酯溶于干燥的四氢呋喃，加入氢化钠，反应，得到(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯基膦酸二甲酯；(1d″)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸单甲酯的合成：将步骤(1c″)得到的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯基膦酸二甲酯溶于干燥的四氢呋喃，加入试剂d″，得到(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸单甲酯；(2a)奎宁酸甲酯的合成：以奎宁酸为原料，将其溶于甲醇，平衡后加入氯化亚砜，反应，得到奎宁酸甲酯；(2b)n-甲基奎宁酰胺的合成：将步骤(2a)得到的奎宁酸甲酯溶于甲醇，加入甲胺甲醇溶液，反应，得到n-甲基奎宁酰胺；(2c)n-甲基-3,4-丙酮叉二氧奎宁酰胺的合成：将步骤(2b)得到的n-甲基奎宁酰胺溶于保护试剂，加入对甲苯磺酸和除水剂，反应，除去除水剂，得到n-甲基-3,4-丙酮叉二氧奎宁酰胺；(2d)n-甲基-3,4-丙酮叉二氧-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2c)得到的n-甲基-3,4-丙酮叉二氧奎宁酰胺溶于重蒸四氢呋喃，加入四丁基溴化铵，平衡后加入氢化钠，反应，滴加溴化苄，反应，得到n-甲基-3,4-丙酮叉二氧-1,5-二苄氧基奎宁酰胺；(2e)n-甲基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2d)得到的n-甲基-3,4-丙酮叉二氧-1,5-二苄氧基奎宁酰胺溶于二氯甲烷，平衡后滴加三氟乙酸和水，反应，得到n-甲基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺；(2f)n-甲基-3,4-二甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2e)得到的n-甲基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺溶于重蒸二氯甲烷，加入4-(n,n-二甲基)氨基吡啶，加入三乙胺，平衡后再滴加试剂f，反应，得到n-甲基-3,4-二甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺；(2g)n-甲基-3,4-二叠氮基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2f)得到的n-甲基-3,4-二甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺溶于n,n-二甲基甲酰胺(dmf)和六甲基磷酰三胺(hmpa)的混合溶剂，加入叠氮化钠，反应，得到n-甲基-3-叠氮-4-甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺；将得到的n-甲基-3-叠氮-4-甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺溶于n,n-二甲基甲酰胺(dmf)和六甲基磷酰三胺(hmpa)的混合溶剂，加入叠氮化钠，反应，得到n-甲基-3,4-二叠氮基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺；(2h)n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2g)得到的n-甲基-3,4-二叠氮基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺溶于甲醇和水的混合溶剂，加入三苯基膦，反应，得到含有n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的残留物；(2c′)n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)奎宁酰胺的合成：将步骤(2b)得到的n-甲基奎宁酰胺溶于干燥的四氢呋喃，加入咪唑和采用干燥的n,n-二甲基甲酰胺(dmf)溶解的叔丁基二甲基氯硅烷(tbscl)溶液，反应，得到n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)奎宁酰胺；(2d′)n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2c′)得到的n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)奎宁酰胺按照步骤(2d)，采用相同的试剂/助剂/溶剂进行合成，得到n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)-1,4-二苄氧基奎宁酰胺；(2e′)n-甲基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2d′)得到的n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)-1,4-二苄氧基奎宁酰胺溶于二氯甲烷，平衡后滴加三氟乙酸，反应，得到n-甲基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺；(2f′)n-甲基-3,5-二甲磺酰氧基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2e′)得到的n-甲基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺按照步骤(2f)，采用相同的试剂/助剂/溶剂进行合成，得到n-甲基-3,5-二甲磺酰氧基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺；(2g′)n-甲基-3,5-二叠氮基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2f′)得到的n-甲基-3,5-二甲磺酰氧基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺按照步骤(2g)，采用相同的试剂/助剂/溶剂进行合成，得到n-甲基-3,5-二叠氮基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺；(2h′)n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的合成：将步骤(2g′)得到的n-甲基-3,5-二叠氮基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺按照步骤(2h)，采用相同的试剂/助剂/溶剂进行合成，得到含有n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的残留物；(3a)将步骤(1c)得到的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸溶于重蒸n,n-二甲基甲酰胺，加入缩合剂和1-羟基苯骈三唑(hobt)，反应，加入n,n-二异丙基乙胺(dipea)，将步骤(2h)得到的含有n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的残留物溶于n,n-二甲基甲酰胺后滴加进反应体系中，反应，得到含有n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺的残留物；(3b)将步骤(3a)得到的含有n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺的残留物溶于重蒸二氯甲烷，平衡后滴加脱保护剂，反应，室温下搅拌反应，得到n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺cl-01～cl-04。步骤(1a)中所述的试剂a为甲醛、ch2cl2、ch2br2和ch2i2中的一种；优选为ch2i2。步骤(1a)中所述的试剂a的用量按其与所述的邻苯二酚的摩尔比为1.0～1.5:1.0配比；优选为按其与所述的3,4-二氧亚甲基苯甲醛的摩尔比为1.2:1.0配比。步骤(1a)中所述的反应的温度为70～100℃；优选为80℃。步骤(1a)中所述的反应的时间为5～20h；优选为12h。步骤(1b)中所述的苯骈[d][1,3]二氧戊烯是在55℃条件下，滴加入溶有催化剂的异丙醇中，0.5小时滴加完。步骤(1b)中所述的催化剂为三氯氧磷、硝酸和乙酸酐中的一种；优选为乙酸酐。步骤(1b)中所述的试剂b为n,n-二甲基甲酰胺、乙醛酸和乌洛托品中的一种；优选为乌洛托品。步骤(1b)中所述的试剂b的用量按其与所述的苯骈[d][1,3]二氧戊烯的摩尔比为400～700:1.0配比；优选为按其与所述的苯骈[d][1,3]二氧戊烯的摩尔比为660:1.0配比。步骤(1b)中所述的反应的温度为80～120℃；优选为110℃。步骤(1b)中所述的反应的时间为0.5～3h；优选为1h。步骤(1c)中所述的试剂c为乙酸酐和丙二酸中的一种；优选为丙二酸。步骤(1c)中所述的碱为相应酸的钠盐或钾盐、哌啶/吡啶、氢化钠、二异丙基氨基锂(lda)和叔丁醇钾中的一种；优选为哌啶/吡啶。步骤(1c)中所述的试剂c的用量按其与所述的3,4-二氧亚甲基苯甲醛的摩尔比为1.0～6.0:1.0配比；优选为按其与所述的3,4-二氧亚甲基苯甲醛的摩尔比为2:1配比。步骤(1c′)中所述的3,4-二氧亚甲基苯甲醛、甲烷磺酸酐和氢化钠的用量按照摩尔比1.0:1.0～2.0:1.5～3.0配比计算；优选为按照摩尔比1.0:1.5:1.5配比计算。步骤(1c″)中所述的3,4-二氧亚甲基苯甲醛、甲基膦酸二甲酯和氢化钠的用量按照摩尔比1.0:1.0～2.0:1.5～3.0配比计算；优选为按照摩尔比1.0:1.5:1.5配比计算。步骤(1c)、(1c′)和(1c″)中所述的反应均为在油浴90～130℃下加热回流4～1h；优选为在油浴115℃下加热回流2h。步骤(1d″)中所述的试剂d″为氢氧化锂、碳酸锂和三丁基硼氢化锂中的一种；优选为三丁基硼氢化锂。步骤(1d″)中所述的加入试剂d″为氮气保护下进行滴加。步骤(2a)中所述的奎宁酸的用量按其与所述的氯化亚砜的摩尔比为1.0:1.0～2.0配比计算；优选为按其与氯化亚砜的摩尔比为1.0:1.35配比计算。步骤(2a)中所述的反应为-20～-10℃条件下反应15～40min，再移至室温继续反应8～20h；优选为-15℃条件下反应30min，再室温继续反应12h。步骤(2a)和(2b)中所述的甲醇为干燥甲醇。步骤(2b)中所述的甲胺甲醇溶液的用量为过量。步骤(2b)中所述的反应的时间为5～20h；优选为12h。步骤(2c)中所述的保护试剂为甲醛、丙酮、苯甲醛中的一种；优选为丙酮。步骤(2c)中所述的除水剂为分子筛和无水硫酸镁中的至少一种；优选为分子筛和无水硫酸镁。步骤(2c)中所述的n-甲基奎宁酰胺的用量按其与所述的对甲苯磺酸的摩尔比为5～10:1配比计算；优选为按其与对甲苯磺酸的摩尔比为8.5:1配比计算。步骤(2c)中所述的反应为45～70℃条件下回流反应5～20h；优选为58℃条件下回流反应12h。步骤(2d)中所述的四丁基溴化铵、氢化钠、溴化苄与n-甲基-3,4-丙酮叉二氧奎宁酰胺按照摩尔比1:100～130:25～40:10～15配比计算；优选为按照摩尔比1:120:36:12配比计算。步骤(2d)中所述的氢化钠分三次加入。步骤(2d)中，加入氢化钠后的反应为-15～0℃条件下反应5～30min；优选为-5℃条件下反应10min；滴加溴化苄后的反应为-15～0℃条件下反应20～50min，再室温搅拌反应20～50min；优选为-5℃条件下反应30min，再室温搅拌反应30min。步骤(2e)中所述的三氟乙酸的用量按其与水的体积比为1：1计算。步骤(2e)中所述的反应为-10～10℃条件下反应2～5h；优选为0℃条件下反应3h。步骤(2f)中所述的加入三乙胺为冰浴条件下加入三乙胺。步骤(2f)中所述的试剂f为甲磺酰氯和对甲苯磺酰氯中的一种。步骤(2f)中所述的试剂f的用量按其与所述的n-甲基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的摩尔比为1～5:1配比计算；优选为按其与所述的n-甲基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的摩尔比为3:1配比计算。步骤(2f)中所述的反应为冰浴条件下反应20～50min，再室温搅拌反应5～20h；优选为冰浴条件下反应30min，再室温搅拌反应12h。步骤(2g)中所述的n,n-二甲基甲酰胺的用量按其与六甲基磷酰三胺的体积比为3:1计算。步骤(2g)中，第一次加入的叠氮化钠的用量按其与所述的n-甲基-3,4-二甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的摩尔比为1～5:1配比计算；优选为按其与所述的n-甲基-3,4-二甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的摩尔比为3:1配比计算；第二次加入的叠氮化钠的用量按其与所述的n-甲基-3-叠氮-4-甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的摩尔比为2～8:1配比计算；优选为按其与所述的n-甲基-3-叠氮-4-甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的摩尔比为5:1配比计算。步骤(2g)中，第一次反应为50～100℃油浴条件下反应5～20h；优选为70℃油浴条件下反应12h；第二次反应为100～150℃油浴条件下反应10～30h；优选为125℃油浴条件下反应24h。步骤(2h)中所述的甲醇的用量按其与水的体积比为5：1配比。步骤(2h)中所述的三苯基膦的用量按其与所述的n-甲基-3,4-二叠氮基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的摩尔比为0.5～2:1配比计算；优选为按其与所述的n-甲基-3,4-二叠氮基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的摩尔比为1.5:1配比计算。步骤(2h)中所述的反应为50～80℃油浴条件下回流反应3～10h；优选为68℃油浴条件下回流反应5h。步骤(2c′)中所述的叔丁基二甲基氯硅烷的用量按其与所述的n-甲基奎宁酰胺的摩尔比为1～4:1配比计算；优选为按其与所述的n-甲基奎宁酰胺的摩尔比为2.4:1配比计算。步骤(2c′)中所述的搅拌反应的时间为1～5h；优选为1.5h。步骤(2e′)中所述的三氟乙酸的用量优选按每1ml三氟乙酸配比1mmoln-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)-1,4-二苄氧基奎宁酰胺计算。步骤(2e′)中所述的搅拌反应为60～100℃条件下搅拌反应1～5h；优选为80℃条件下搅拌反应2h。步骤(2h)和(2h′)得到的产物可能有4个光学异构体，对产物进行分离或直接进入下一步骤的反应后再分离；优选直接进入下一步骤的反应后再分离。步骤(3a)中所述的缩合剂为n,n'-二异丙基碳二亚胺(dic)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(edci)和氯甲酸乙酯中的一种；优选为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐。步骤(3a)中所述的缩合剂的用量按其与所述的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸的摩尔比为0.5～2:1配比计算；优选为按其与所述的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸的摩尔比为1.2:1配比计算。步骤(3a)中，第一次反应的时间为20～50min，第二次反应的时间为5～20h；优选第一次反应的时间为30min，第二次反应的时间为12h。步骤(3b)中还包括将所述的cl-01～cl-04四种光学异构体采用柱层析、高效液相法和重结晶法中的一种或至少两种分离纯化的步骤。步骤(3b)中所述的脱保护试剂为bcl3和bbr3中的一种；优选为bcl3。步骤(3b)中所述的脱保护剂的用量按其与所述的含有n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺的残留物的摩尔比为1～5:1配比计算；优选为按其与所述的含有n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺的残留物的摩尔比为2.5:1配比计算。步骤(3b)中所述的反应为0～-20℃条件下反应15～45min，再室温下搅拌反应1～5h；优选为-10℃条件下反应30min，再室温下搅拌反应2h。n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-05～cl-08)的制备过程按步骤(3a)和(3b)进行，其中起始原料由步骤(2h)得到的n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺更换为步骤(2h′)得到的n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺，其他试剂、助剂和溶剂种类相同。n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-09～cl-12)的制备过程按步骤(3a)和(3b)进行，其中起始原料由步骤(1c)得到的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸更换为步骤(1c′)得到的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸，其他试剂、助剂和溶剂种类相同。n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-13～cl-16)的制备过程按步骤(3a)和(3b)进行，其中起始原料由步骤(1c)得到的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸更换为步骤(1c′)得到的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸，步骤(2h)得到的n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺更换为步骤(2h′)得到的n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺，其他试剂、助剂和溶剂种类相同。n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-17～cl-20)的制备过程按步骤(3a)和(3b)进行，其中起始原料由步骤(1c)得到的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸更换为步骤(1d″)得到的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸单甲酯，其他试剂、助剂和溶剂种类相同。n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-21～cl-24)的制备按步骤(3a)和(3b)进行，其中起始原料由步骤(1c)得到的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸更换为步骤(1d″)得到的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸单甲酯，步骤(2h)得到的n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺更换为步骤(2h′)得到的n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺，其他试剂、助剂和溶剂种类相同。步骤(1c)中所述的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸、步骤(1c′)中所述的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸和步骤(1d″)中所述的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯基膦酸单甲酯的合成路线如途径1所示：步骤(2h)中所述的n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基环己烷-1-甲酰胺和步骤(2h′)中所述的n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基环己烷-1-甲酰胺的合成路线如途径2和途径3所示：步骤(1c)中所述的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸、步骤(1c′)中所述的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸和步骤(1d″)中所述的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯基膦酸单甲酯分别与步骤(2h)中所述的n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基-环己烷-1-甲酰胺、步骤(2h′)中所述的n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基环己烷-1-甲酰胺缩合后脱去苄基，得到奎宁酸衍生物的路线如途径4所示：上述奎宁酸衍生物在制备抗病毒药物中的应用。所述的病毒为流感病毒、副流感病毒或呼吸道合胞病毒(rsv)。一种抗病毒药物，包含上述奎宁酸衍生物。所述的抗病毒药物还可以含有一种或至少两种药学上可以接受的载体或辅料。所述的辅料优选为缓释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、吸附载体、表面活性剂或润滑剂等。所述的载体为微囊、微球、纳米粒和脂质体中的至少一种。所述的抗病毒药物可以进一步制成各种剂型，各种剂型的药物可以按照药学领域的常规方法制备得到。本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：(1)本发明是根据药核相似性原理和生物电子等排体原理，以天然来源的二咖啡酰奎宁酸及其甲酯为先导物，设计合成具有抗病毒作用的奎宁酸衍生物。利用空斑减数实验检测系列奎宁酸衍生物的体外抗病毒活性，并利用mmt法分别评估系列奎宁酸衍生物的细胞毒性。结果表明，本发明所设计合成的奎宁酸衍生物均具有强的抗呼吸道合胞病毒(rsv)和副流感3型病毒(piv3)活性，而且细胞毒性低，其抗rsv和piv3的选择性指数(si值，si＝cc50/ic50)高于阳性对照药利巴韦林、天然先导物3,4-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯和3,5-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯，其中，以cl-23抗rsv和piv3作用最好。此外，本发明还发现系列奎宁酸衍生物还具有一定的抗甲型流感病毒活性，其抗甲型流感病毒的si值与利巴韦林相当。(2)本发明的奎宁酸衍生物具有较高的稳定性，其在胎牛血清中的稳定性比3,4-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯和3,5-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯高。(3)本发明的奎宁酸衍生物的制备方法反应条件温和，容易实现自动化，操作简便安全，容易实现工业化生产。具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施方式和实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。实施例1n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-01～cl-04)的制备及分离纯化(1)(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸的制备(1a)苯骈[d][1,3]二氧戊烯(胡椒环)的制备称取邻苯二酚(110.1mg，1.0mmol)置于50ml圆底烧瓶中，加入n,n-二甲基甲酰胺15ml，搅拌使邻苯二酚溶解，再加入二碘甲烷(321.4mg，1.2mmol)和碳酸氢钠(210.0mg，2.5mmol)，80℃加热反应12h。反应完毕后，边搅拌边将产物缓慢倒入冰水中，乙酸乙酯萃取3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压旋蒸除去乙酸乙酯，硅胶柱层析(北京欣维尔玻璃仪器有限公司)分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1，v:v)，得到淡黄色固体75.8mg，收率为62.1％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:6.83-6.79(m,4h),5.90(s,2h)；13cnmr(300mhz,cdcl3)δ:147.5,121.7,108.7,100.7。(1b)3,4-二氧亚甲基苯甲醛(胡椒醛)的制备200ml三口瓶中加入75.0g催化剂乙酸酐，搅拌下加入异丙醇10ml，加热升温到55℃，缓慢滴加步骤(1a)得到的苯骈[d][1,3]二氧戊烯(5.0g，40.9mmol)，0.5小时滴完，加入乌洛托品(3.8g，27.0mmol)，加料完毕，升温到110℃，保温1小时，取样液相分析，降温到60～70℃，加入水700ml，搅拌3小时，加入乙酸乙酯两次萃取，合并有机相，加入饱和食盐水洗涤，分出有机相，加入无水硫酸钠5g进行干燥，过滤，滤液在40℃下浓缩乙酸乙酯，余液油泵减压蒸馏，即得胡椒醛3.58g，收率58.2％，纯度96％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:9.82(s,1h),7.43(d,1h),7.34(s,1h),6.95(d,1h),6.08(s,2h)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:190.3,153.1,148.7,130.9,128.7,108.3,106.9,102.1。(1c)(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸的制备于250ml圆底烧瓶中，将步骤(1b)得到的胡椒醛(12g，79.9mmol)、丙二酸(16.6g，159.9mmol)用7.2ml哌啶及140ml吡啶溶解后得到反应液，将反应液移至油浴115℃加热回流约2小时。反应过程用薄层色谱tlc监测至胡椒醛完全消失，表明反应完全。反应液冷却至室温后，于冰浴下将反应液缓慢倾入200ml盐酸溶液(2mol/l)中，有大量淡黄白色固体析出。经抽滤得到淡黄色固体滤饼，后将淡黄色固体滤饼用400ml水分散洗涤，再经抽滤得到淡黄白色固体滤饼，并重复以上操作至滤饼ph值为中性。用热水重结晶，收集淡黄白色固体滤饼至红外灯下干燥至恒重，得到淡黄白色固体11.9g，收率77.1％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:12.05(s,1h),7.45(d,1h),7.12(s,1h),7.06(d,1h),6.95(d,1h),6.27(d,1h),6.07(s,2h)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:171.5,151.1,148.6,144.9,127.6,122.7,116.5,108.3,106.9,102.1。(2)n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基环己烷-1-甲酰胺的制备(2a)奎宁酸甲酯的制备称取奎宁酸(1.92g，10mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的干燥甲醇溶解，烧瓶置于低温恒温搅拌反应浴中，保持-15℃条件平衡15min，然后量取氯化亚砜(0.98ml，13.5mmol)缓慢滴加到反应体系中，反应30min后，将反应液移至室温，继续反应12h。待反应完毕，冰浴条件下缓慢加入3ml水，并用乙酸乙酯etoac(4×100ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(100ml×2)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，tlc展开剂条件为chcl3:ch3oh＝3:1(v:v)，经硅胶柱层析分离(chcl3:ch3oh＝3:1,v:v)，收集rf值为0.39馏分，旋蒸除去溶剂，得到淡黄色油状液体1.88g，收率91.3％。1hnmr(300mhz,d2o)δ:3.96(m,1h,h-3),3.85(m,1h,h-5),3.56(s,3h,h-8),3.36(m,1h,h-4),1.69-1.96(m,4h,h-2,6)；13cnmr(75mhz,d2o)δ:175.6,75.4,74.2,69.4,66.2,48.8,39.7,36.4；esi-ms(m/z):207.2[m+h]+,229.3[m+na]+。(2b)n-甲基奎宁酰胺的制备称取步骤(2a)得到的奎宁酸甲酯(1.85g，9mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的干燥甲醇溶解，在室温条件下向反应体系中加入过量的甲胺甲醇溶液，并在室温条件下反应12h。待反应完毕，真空旋蒸除去溶剂，tlc展开剂条件为chcl3:ch3oh＝3:1(v:v)，经硅胶柱层析分离(chcl3:ch3oh＝3:1,v:v)，收集rf值为0.31馏分，旋蒸除去溶剂，得到白色固体1.82g，收率为98.7％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:7.62(s,1h),4.13(m,1h,h-3),3.99(m,1h,h-5),3.40(dd,j＝3.0,3.0hz,1h,h-4),2.75(s,3h,h-8),1.84-2.03(m,4h,h-2,6)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:178.1,78.1,77.1,72.3,68.3,42.6,39.0,26.4；esi-ms(m/z):206.2[m+h]+,228.3[m+na]+。(2c)n-甲基-3,4-丙酮叉二氧奎宁酰胺的制备称取步骤(2b)得到的n-甲基奎宁酰胺(1.74g，8.5mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的干燥丙酮溶解，并加入对甲苯磺酸(172mg，1.0mmol)，然后加入适量的分子筛和无水硫酸镁作为除水剂，于58℃的条件下回流12h。待反应完毕，过滤除去分子筛和无水硫酸镁，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，并用ch2cl2(4×100ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(100ml×2)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，tlc展开剂条件为chcl3:ch3oh＝15:1(v:v)，经硅胶柱层析分离，收集rf值为0.65的馏分，旋蒸除去溶剂，得黄色油状液体1.53g，收率为73.5％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:7.61(s,1h),4.50(m,1h,h-3),3.99(m,1h,h-5),3.88(dd,j＝6.0,6.0hz,1h,h-4),2.76(d,j＝6.0hz3h,h-8),1.90-2.33(m,4h,h-2,6),1.44(s,3h,h-4′),1.29(s,3h,h-5′)；esi-ms(m/z):246.1[m+h]+,268.3[m+na]+。(2d)n-甲基-3,4-丙酮叉二氧-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2c)得到的n-甲基-3,4-丙酮叉二氧奎宁酰胺(1.47g，6mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的重蒸四氢呋喃溶解，并加入四丁基溴化铵(161mg，0.5mmol)，然后将烧瓶中的反应液置于低温反应浴-5℃的条件下平衡5min。待平衡完毕，分3次向反应液中缓慢加入氢化钠(1.44g，60mmol)，保持-5℃的条件反应10min。接着量取溴化苄(2.13ml，18mmol)缓慢滴加到反应体系中，保持-5℃低温条件30min后，再移至室温，继续搅拌5h。待反应完毕，在冰浴条件下缓慢滴加5ml的甲醇淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用二氯甲烷(dcm，4×100ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，经硅胶柱层析分离(etoac:pe＝1:50,v:v),在tlc展开剂条件为etoac:pe＝1:25(v:v)，收集rf值为0.40馏分，旋蒸除去溶剂，得无色油状液体2.08g，收率为81.7％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.63(s,1h),7.25-7.36(m,10h,h-ph,ph′),4.61(m,4h,-ch2-ph,-ch2-ph′),4.16(m,2h,h-3,5),3.97(m,1h,h-4),3.17(s,3h,h-8),2.42-2.58(m,4h,h-2,6),1.48(s,3h,h-4′),1.40(s,3h,h-5′)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:172.0,138.7,137.8,137.4,128.8,128.5,128.4(2c),128.3,128.1(2c),127.8,127.7,108.9,81.5,80.0,75.1,73.8,72.1,66.6,35.6,35.4,32.7,28.3,25.9。(2e)n-甲基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2d)得到的n-甲基-3,4-丙酮叉二氧-1,5-二苄氧基奎宁酰胺(1.91g，4.5mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用二氯甲烷(20ml)溶解，并将烧瓶置于低温反应浴0℃的条件下平衡5min，然后向反应体系缓慢滴入5ml三氟乙酸和水(tfa:h2o＝1:1，v:v)的混合溶剂，于0℃的条件下反应3h。待反应完毕，将反应液倒入饱和氯化铵溶液中，然后转移至分液漏斗，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(4×100ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，经硅胶柱层析分离(chcl3:ch3oh＝80:1,v:v)，在tlc展开剂条件为chcl3:ch3oh＝40:1(v:v)，收集rf值为0.50的馏分，旋蒸除去溶剂，得无色油状液体1.52g，收率为87.5％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.64(s,1h),7.24-7.30(m,10h,h-ph,ph′),4.51(m,4h,-ch2-ph,-ch2-ph′),4.08(m,1h,h-3),3.68(m,1h,h-5),3.55(m,1h,h-4),3.02(s,3h,h-8),1.88-2.66(m,4h,h-2,6)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:170.3,138.3,137.0,136.4,128.7,128.6,128.5(2c),128.2,128.0(2c),127.8,127.6,84.1,74.9,74.4,71.9,70.4,67.0,36.0,35.2,34.3。(2f)n-甲基-3,4-二甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2e)得到的n-甲基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺(1.35mg，3.5mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的重蒸二氯甲烷溶解，并加入4-(n,n-二甲基)氨基吡啶(37mg，0.3mmol)，然后将烧瓶置于冰浴条件下，加入缚酸剂三乙胺1.45ml(10.5mmol)，平衡5min。待平衡完毕，向反应液中缓慢滴加甲磺酰氯0.82ml(10.5mmol)，保持冰浴条件反应30min后，再移至室温，继续搅拌12h。待反应完毕，在冰浴条件缓慢滴加5ml纯净水淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(4×100ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(etoac:pe＝1:4，v:v)，在tlc展开剂条件为etoac:pe＝1:2(v:v)，收集rf值为0.32的馏分，旋蒸除去溶剂，得白色粉末1.47g，收率为77.6％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.63(s,1h),7.26-7.37(m,10h,h-ph,ph′),5.52(m,1h,h-4),4.99(m,1h,h-5),4.67(m,4h,-ch2-ph,-ch2-ph′),4.35(m,1h,h-3),3.22(s,3h,-so2ch3),3.20(s,3h,-so2ch3),2.80(s,3h,h-8),2.32-2.84(m,4h,h-2,6)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:172.8,139.0,138.8,138.7,129.4,129.2(2),129.1,128.8,128.7,128.6,128.4,128.2,81.9,79.5,77.9,74.2,72.6,66.7,38.5,38.2(2),35.5,35.0。(2g)n-甲基-3,4-二叠氮基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2f)得到的n-甲基-3,4-二甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺(812.4mg,1.5mmol)于干燥的50ml圆底烧瓶中，用适量n,n-二甲基甲酰胺(dmf)和六甲基磷酰三胺(hmpa)的混合溶剂(dmf:hmpa＝3:1，v:v)溶解，并加入叠氮化钠(293mg，4.5mmol)，于70℃的油浴条件下反应12h。待反应完毕，在冰浴条件下缓慢滴加5ml纯净水淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去低沸点溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(etoac:pe＝1:4，v:v)，在tlc展开剂条件为etoac:pe＝1:2(v:v)，收集rf值为0.29的馏分，旋蒸除去溶剂，得黄色油状物617.1mg，收率为84.2％。此为n-甲基-3-叠氮-4-甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺。称取n-甲基-3-叠氮-4-甲磺酰氧基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺(586.3mg，1.2mmol)于干燥的50ml圆底烧瓶中，用适量dmf和hmpa的混合溶剂(dmf:hmpa＝3:1，v:v)溶解，并加入叠氮化钠(390mg，6mmol)，于125℃的油浴条件下反应24h。待反应完毕，在冰浴条件缓慢滴加5ml纯净水淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去低沸点溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(etoac:pe＝1:4，v:v)，在tlc展开剂条件为etoac:pe＝1:2(v:v)，收集rf值为0.36的馏分，旋蒸除去溶剂，得深黄色油状物399.8mg，收率为76.5％。此为n-甲基-3,4-二叠氮基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.64(s,1h),7.28-7.33(m,10h,h-ph,ph′),5.46(m,1h,h-4),5.13(m,1h,h-5),4.68(m,4h,-ch2-ph,-ch2-ph′),4.35(m,1h,h-3),2.86(s,3h,h-8),2.32-1.91(m,4h,h-2,6)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:173.1,138.9,138.7,138.6,129.3,129.1(2),129.0,128.8,128.7,128.6,128.4,128.2,81.9,79.5,77.9,74.2,72.6,66.7,38.5,35.5,35.0。(2h)n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2g)得到的n-甲基-3,4-二叠氮基-1,5-二苄氧基奎宁酰胺(370.2mg，0.85mmol)于干燥的50ml圆底烧瓶中，用适量甲醇和水的混合溶剂(meoh:h2o＝5:1，v:v)溶解，并加入三苯基膦(336mg，1.28mmol)，于68℃的油浴条件下进行回流，反应5h。待反应完毕，加入适量的蒸馏水稀释反应液，然后用0.1m的盐酸溶液将反应液调至弱酸性，再用dcm(2×50ml)进行萃取，弃去有机相，保留水相。水相用0.1m的氢氧化钠溶液调至弱碱性，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，得到残留物。由于产物结构中存在两个游离氨基，稳定性较差，且不易于分离，故将残留物直接用于下一步反应。(3)n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-01～cl-04)的制备及分离纯化(3a)称取步骤(1c)得到的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸(384.3mg，2.0mmol)于干燥的50ml圆底烧瓶中，用适量的重蒸dmf溶解，并分别缓慢加入edci(460mg，2.4mmol)和1-羟基苯骈三唑(hobt，324mg，2.4mmol)，室温条件下反应30min。接着加入n,n-二异丙基乙胺(dipea，0.42ml，2.4mmol)，并将步骤(2h)反应所得残留物(约0.8mmol)用干燥的dmf溶解，然后缓慢滴加到反应体系中，在室温条件下继续反应12h。待反应完毕，在冰浴条件下缓慢滴加5ml纯净水淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，所得残留物直接进入下一步的反应。(3b)将步骤(3a)反应所得残留物(约0.6mmol)置于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的重蒸二氯甲烷(dcm)溶解，并将烧瓶置于-10℃的条件下，平衡5min。待平衡完毕，向反应液中缓慢滴加三氯化硼(1.5ml，1.5mmol)的浓度为1m的dcm溶液，保持-10℃的条件反应30min后，再移至室温，继续搅拌2h。待反应完毕，在冰浴条件下缓慢滴加3ml甲醇淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，残留物用rp-hplc分离纯化，rp-hplc纯化的洗脱剂条件为meoh:h2o:hco2h＝33:77:0.5(v:v:v)，rt＝26.2～22.3min，得浅绿色固体451.5mg，总收率85.6％。(1s,3s,4s,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-01)：收集保留时间rt＝26.2min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体270.9mg，收率51.4％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.52(s,4h),8.32(s,2h),7.51(d,j＝16.0hz,1h),7.48(s,1h),7.32(d,j＝16.0hz,1h),7.11(s,2h),6.89(d,j＝2.5hz,1h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),6.19(d,j＝16.0hz,1h),6.11(d,j＝16.0hz,1h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.11(m,2h),1.92-1.86(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.9,169.4,168.9,148.9(2c),146.8(2c),142.8,142.8,131.0(2c),128.5(2c),122.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,51.9,40.5,35.5,26.8。(1s,3s,4r,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-02)：收集保留时间rt＝24.4min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体67.7mg，收率12.8％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.51(s,4h),8.33(s,2h),7.50(d,j＝16.0hz,1h),7.49(s,1h),7.33(d,j＝16.0hz,1h),7.12(s,2h),6.90(d,j＝2.5hz,1h),6.88(d,j＝2.5hz,1h),6.64(d,j＝2.5hz,2h),6.79(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),6.18(d,j＝16.0hz,1h),6.12(d,j＝16.0hz,1h),5.36(br,1h),4.61(br,1h),4.22(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.17(m,2h),2.85(d,j＝3.2hz,3h),2.18-2.10(m,2h),1.93-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:174.0,169.5,169.0,148.8(2c),146.9(2c),142.7,142.5,131.1(2c),128.6(2c),122.5(2c),118.7(2c),118.6(2c),116.7(2c),115.4(2c),80.6,73.6,56.6,51.8,40.6,35.4,26.7。(1s,3r,4s,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-03)：收集保留时间rt＝23.6min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体90.3mg，收率17.1％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.53(s,4h),8.34(s,2h),7.52(d,j＝16.0hz,1h),7.47(s,1h),7.34(d,j＝16.0hz,1h),7.13(s,2h),6.91(d,j＝2.5hz,1h),6.89(d,j＝2.5hz,1h),6.65(d,j＝2.5hz,2h),6.81(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),6.19(d,j＝16.0hz,1h),6.13(d,j＝16.0hz,1h),5.38(br,1h),4.63(br,1h),4.23(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.18(m,2h),2.86(d,j＝3.2hz,3h),2.21-2.14(m,2h),1.95-1.86(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:175.2,169.6,169.3,148.7(2c),147.1(2c),142.6,142.4,131.2(2c),128.4(2c),122.3(2c),118.6(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.5(2c),80.7,73.8,56.7,51.9,40.7,35.6,26.8。(1s,3r,4r,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-04)：收集保留时间rt＝22.3min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体22.6mg，收率4.3％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.52(s,4h),8.33(s,2h),7.53(d,j＝16.0hz,1h),7.48(s,1h),7.35(d,j＝16.0hz,1h),7.14(s,2h),6.92(d,j＝2.5hz,1h),6.90(d,j＝2.5hz,1h),6.64(d,j＝2.5hz,2h),6.82(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),6.18(d,j＝16.0hz,1h),6.14(d,j＝16.0hz,1h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.24(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.19(m,2h),2.87(d,j＝3.2hz,3h),2.20-2.13(m,2h),1.94-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:175.3,169.5,169.4,148.6(2c),147.2(2c),142.5,142.3,131.4(2c),128.5(2c),122.5(2c),118.7(2c),118.5(2c),116.7(2c),115.6(2c),80.6,73.6,56.6,51.8,40.6,35.7,26.9。实施例2n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-05～cl-08)的制备及分离纯化(1)(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸的制备，按照实施例1中的步骤(1)进行。(2)n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基环己烷-1-甲酰胺的制备(2a)奎宁酸甲酯的制备，按照实施例1步骤(2)中的(2a)进行。(2b)n-甲基奎宁酰胺的制备，按照实施例1步骤(2)中的(2b)进行。(2c′)n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)奎宁酰胺的制备称取步骤(2b)得到的n-甲基奎宁酰胺(1.74g，8.5mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的干燥thf溶解，然后向反应瓶中加入咪唑(3.50mg，51.0mmol)，最后滴加溶解在15ml干燥dmf中的叔丁基二甲基氯硅烷(tbscl)(2.33g，20.5mmol)溶液，室温下搅拌1.5小时。待反应结束，加入150ml二氯甲烷，并用水(3×100ml)洗涤3次，除dmf，最后收集有机相，无水硫酸镁干燥除水，过滤，真空旋蒸除去溶剂，经硅胶柱层析分离，在tlc展开剂条件为chcl3:ch3oh＝15:1(v:v)，收集rf值为0.69的馏分，旋蒸除去溶剂，得黄色油状液体3.27g，收率为88.6％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:7.52(s,1h),5.91(br,1h),4.62(br,1h),4.50(m,1h),3.99(m,1h),3.88(dd,j＝6.0,6.0hz,1h),2.76(d,j＝6.0hz,3h),2.12(m,2h),1.93(m,2h),0.97(s,18h),0.23(s,12h)；esi-ms(m/z):434.5[m+h]+,457.2[m+na]+。(2d′)n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2c′)得到的n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)奎宁酰胺(2.6g，6.0mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的重蒸四氢呋喃溶解，并加入四丁基溴化铵(161mg，0.5mmol)，然后将烧瓶置于低温反应浴-5℃的条件下平衡5min。待平衡完毕，分3次向反应液中缓慢加入氢化钠(1.44g，60mmol)，保持-5℃的条件反应10min。接着量取溴化苄(2.13ml，18mmol)缓慢滴加到反应体系中，保持-5℃低温条件30min后，再移至室温，继续搅拌5h。待反应完毕，在冰浴条件下缓慢滴加5ml的甲醇淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(4×100ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，经硅胶柱层析分离(etoac:pe＝1:50，v:v),在tlc展开剂条件为etoac:pe＝1:25(v:v)，收集rf值为0.40馏分，旋蒸除去溶剂，得无色油状液体2.08g，收率为81.7％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.61(s,1h),7.35-7.24(m,10h,h-ph,ph′),4.63(br,1h),4.58(m,4h,-ch2-ph,-ch2-ph′),4.17(m,2h),3.96(m,1h),2.77(d,j＝6.0hz,3h),2.12(m,2h),1.91(m,2h),0.98(s,18h),0.24(s,12h)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:173.7,138.5,137.9,128.8,128.6,128.4(2),128.3,128.1(2),127.8,127.7(2),96.7,75.2,74.1(2),68.8,68.6,38.6,38.4,30.9(2),28.3,25.9(6),-2.0(4)。(2e′)n-甲基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2d′)得到的n-甲基-3,5-二(叔丁基二甲基硅氧基)-1,4-二苄氧基奎宁酰胺(1.91g，4.5mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用二氯甲烷(20ml)溶解，并将烧瓶置于低温反应浴0℃的条件下平衡5min，然后向反应体系缓慢滴入4.5ml三氟乙酸，升温至80℃，搅拌反应2小时。待反应完毕，向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液除去三氟乙酸，并用二氯甲烷萃取3次(3×50ml)，合并有机相，加入无水硫酸镁干燥除水，过滤，减压蒸馏。残留物经硅胶柱层析分离(chcl3:ch3oh＝80:1，v:v)，在tlc展开剂条件为chcl3:ch3oh＝40:1(v:v)，收集rf值为0.46的馏分，旋蒸除去溶剂，得无色油状液体1.26g，收率为72.6％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.63(s,1h),7.31-7.23(m,10h,h-ph,ph′),4.52(m,4h,-ch2-ph,-ch2-ph′),4.07(m,1h),3.69(m,1h),3.56(m,1h),2.82(d,j＝6.0hz,3h),2.12(m,2h),1.91(m,2h)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:170.3,138.3,137.0,136.4,128.7,128.6,128.5(2c),128.2,128.0(2c),127.8,127.6,84.1,74.9,74.4,71.9,70.4,67.0,36.0,35.2,34.3。(2f′)n-甲基-3,5-二甲磺酰氧基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2e′)得到的n-甲基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺(1.35mg,3.5mmol)于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的重蒸二氯甲烷溶解，并加入4-(n,n-二甲基)氨基吡啶(37mg，0.3mmol)，然后将烧瓶置于冰浴条件下，加入缚酸剂三乙胺1.45ml(10.5mmol)，平衡5min。待平衡毕，向反应液中缓慢滴加甲磺酰氯0.82ml(10.5mmol)，保持冰浴条件反应30min后，再移至室温，继续搅拌12h。待反应完毕，在冰浴条件缓慢滴加5ml纯净水淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(4×100ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(etoac:pe＝1:4，v:v)，在tlc展开剂条件为etoac:pe＝1:2(v:v)，收集rf值为0.36的馏分，旋蒸除去溶剂，得白色粉末1.56g，收率为82.5％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.62(s,1h),7.34-7.23(m,10h,h-ph,ph′),5.48(m,1h),4.96(m,1h),4.75(m,4h,-ch2-ph,-ch2-ph′),4.35(m,1h),3.23(s,3h,-so2ch3),3.21(s,3h,-so2ch3),2.82(d,j＝6.0hz,3h),2.12(m,2h),1.91(m,2h)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:173.2,139.1,138.9,138.6,129.5,129.3(2),129.2,128.9,128.7,128.5,128.4,128.2,81.9,79.5,77.9,74.2,72.6,66.7,38.5,38.2(2),35.3,34.8。(2g′)n-甲基-3,5-二叠氮基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2f′)得到的n-甲基-3,5-二甲磺酰氧基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺(812.4mg，1.5mmol)于干燥的50ml圆底烧瓶中，用适量dmf和hmpa的混合溶剂(dmf:hmpa＝3:1，v:v)溶解，并加入叠氮化钠(293mg，4.5mmol)，于70℃的油浴条件下反应12h。待反应完毕，在冰浴条件下缓慢滴加5ml纯净水淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去低沸点溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(etoac:pe＝1:4，v:v)，在tlc展开剂条件为etoac:pe＝1:2(v:v)，收集rf值为0.29的馏分，旋蒸除去溶剂，得黄色油状物617.1mg，收率为84.2％。此为n-甲基-3-叠氮-5-甲磺酰氧基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺。称取n-甲基-3-叠氮-5-甲磺酰氧基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺(586.3mg，1.2mmol)于干燥的50ml圆底烧瓶中，用适量dmf和hmpa的混合溶剂(dmf:hmpa＝3:1，v:v)溶解，并加入叠氮化钠(390mg，6mmol)，于125℃的油浴条件下反应24h。待反应完毕，在冰浴条件缓慢滴加5ml纯净水淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去低沸点溶剂，残留物经硅胶柱层析分离(etoac:pe＝1:4，v:v)，在tlc展开剂条件为etoac:pe＝1:2(v:v)，收集rf值为0.38的馏分，旋蒸除去溶剂，得深黄色油状物427.0mg，收率为81.7％。此为n-甲基-3,5-二叠氮基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.62(s,1h),7.32-7.24(m,10h,h-ph,ph′),5.43(m,1h),5.12(m,1h),4.76(m,4h,-ch2-ph,-ch2-ph′),4.37(m,1h),2.83(d,j＝6.0hz,3h),2.13(m,2h),1.92(m,2h)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:173.2,138.8,138.6,138.5,129.2,129.1(2),129.0,128.7,128.6,128.5,128.4,128.2,81.9,79.5,77.9,74.2,72.6,66.7,38.6,35.4,35.1。(2h′)n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺的制备称取步骤(2g′)得到的n-甲基-3,5-二叠氮基-1,4-二苄氧基奎宁酰胺(370.2mg，0.85mmol)于干燥的50ml圆底烧瓶中，用适量甲醇和水的混合溶剂(meoh:h2o＝5:1，v:v)溶解，并加入三苯基膦(336mg，1.28mmol)，于68℃的油浴条件下进行回流，反应5h。待反应完毕，加入适量的蒸馏水稀释反应液，然后用0.1m的盐酸溶液将反应液调至弱酸性，再用dcm(2×50ml)进行萃取，弃去有机相，保留水相。水相用0.1m的氢氧化钠溶液调至弱碱性，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，得到残留物。由于产物结构中存在两个游离氨基，稳定性较差，且不易于分离，故将残留物直接用于下一步反应。(3)n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-05～cl-08)的制备及分离纯化(3a)称取步骤(1)得到的(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸(384.3mg，2.0mmol)于干燥的50ml圆底烧瓶中，用适量的重蒸dmf溶解，并分别缓慢加入edci(460mg，2.4mmol)和hobt(324mg，2.4mmol)，室温条件下反应30min。接着加入dipea(0.42ml，2.4mmol)，并将步骤(2h)反应所得残留物(约0.8mmol)用干燥的dmf溶解，然后缓慢滴加到反应体系中，在室温条件下继续反应12h。待反应完毕，在冰浴条件下缓慢滴加5ml纯净水淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，残留物直接进入下一步的反应。(3b)将步骤(3a)反应所得残留物(约0.6mmol)置于干燥的100ml圆底烧瓶中，用适量的重蒸二氯甲烷(dcm)溶解，并将烧瓶置于-10℃的条件下，平衡5min。待平衡完毕，向反应液中缓慢滴加三氯化硼(1.5ml，1.5mmol)的浓度为1m的dcm溶液，保持-10℃的条件反应30min后，再移至室温，继续搅拌2h。待反应完毕，在冰浴条件下缓慢滴加3ml甲醇淬灭反应，然后将反应液移至分液漏斗中，加入适量的饱和食盐水稀释反应液，用dcm(3×50ml)进行萃取，合并有机相后用饱和食盐水(2×100ml)洗涤，有机相用无水na2so4干燥，过滤，真空旋蒸除去溶剂，残留物用rp-hplc分离纯化，rp-hplc纯化的洗脱剂条件为meoh:h2o:hco2h＝33:77:0.5(v:v:v)，rt＝27.6～23.4min，得浅绿色固体364.6mg，总收率为86.4％。(1s,3s,4r,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-05)：收集保留时间rt＝27.6min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体47.4mg，收率11.2％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.51(s,4h),8.31(s,2h),7.57(d,j＝16.0hz,1h),7.51(d,j＝16.0hz,1h),7.46(s,1h),7.12(s,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),6.73(d,j＝2.5hz,2h),6.39(d,j＝2.5hz,1h),6.21(d,j＝2.5hz,1h),6.19(d,j＝16.0hz,1h),6.11(d,j＝16.0hz,1h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.11(m,2h),1.92-1.86(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:175.6,169.5,168.7,148.6(2c),146.7(2c),142.8,142.5,131.1(2c),128.4(2c),122.3(2c),118.7(2c),118.4(2c),116.5(2c),115.2(2c),80.4,73.3,56.6,51.8,40.7,35.6,26.7。(1s,3r,4s,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-06)：收集保留时间rt＝26.24min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体21.9mg，收率5.2％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.52(s,4h),8.32(s,2h),7.58(d,j＝16.0hz,1h),7.52(d,j＝16.0hz,1h),7.47(s,1h),7.13(s,2h),6.77(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),6.74(d,j＝2.5hz,2h),6.38(d,j＝2.5hz,1h),6.22(d,j＝2.5hz,1h),6.19(d,j＝16.0hz,1h),6.11(d,j＝16.0hz,1h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.11(m,2h),1.92-1.86(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:175.0,169.6,169.2,148.7(2c),146.8(2c),142.8,142.6,131.2(2c),128.7(2c),122.5(2c),118.7(2c),118.6(2c),116.7(2c),115.4(2c),80.6,73.6,56.6,51.8,40.6,35.5,26.8。(1r,3s,4r,5s)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-07)：收集保留时间rt＝25.8min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体309.9mg，收率58.8％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.54(s,4h),8.33(s,2h),7.56(d,j＝16.0hz,1h),7.53(d,j＝16.0hz,1h),7.48(s,1h),7.13(s,2h),6.77(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),6.74(d,j＝2.5hz,2h),6.38(d,j＝2.5hz,1h),6.22(d,j＝2.5hz,1h),6.19(d,j＝16.0hz,1h),6.11(d,j＝16.0hz,1h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.20-2.12(m,2h),1.93-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:175.1,169.7,169.2,148.6(2c),147.1(2c),142.6,142.4,131.2(2c),128.4(2c),122.3(2c),118.6(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.5(2c),80.7,73.8,56.7,51.9,40.8,35.7,26.9。(1r,3r,4s,5s)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-08)：收集保留时间rt＝24.9min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体47.4mg，收率11.2％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.53(s,4h),8.35(s,2h),7.54(d,j＝16.0hz,1h),7.47(s,1h),7.36(d,j＝16.0hz,1h),7.14(s,2h),6.92(d,j＝2.5hz,1h),6.90(d,j＝2.5hz,1h),6.64(d,j＝2.5hz,2h),6.82(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),6.18(d,j＝16.0hz,1h),6.14(d,j＝16.0hz,1h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.24(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.19(m,2h),2.87(d,j＝3.2hz,3h),2.21-2.14(m,2h),1.93-1.89(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:175.3,169.5,169.4,148.6(2c),147.2(2c),142.5,142.3,131.4(2c),128.5(2c),122.5(2c),118.7(2c),118.5(2c),116.7(2c),115.6(2c),80.6,73.6,56.6,51.8,40.6,35.7,26.9。实施例3n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-09～cl-12)的制备及分离纯化(1a-b)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸的制备，按照实施例1步骤(1)中的(1a)和(1b)获得胡椒醛。(1c′)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸的制备于250ml圆底烧瓶中，将步骤(1a-b)得到的胡椒醛(12g，79.9mmol)和甲烷磺酸酐(20.9g，120mmol)用150ml干燥thf溶解，分批加入nah(2.9g，120mmol)，后将反应液移至油浴115℃加热回流约2小时。反应过程用tlc监测至胡椒醛完全消失，表明反应完全。反应液冷却至室温后，于冰浴下将反应液缓慢倾入200ml盐酸溶液(2mol/l)中，有大量淡黄白色固体析出。经抽滤得到淡黄色固体滤饼，后将淡黄色固体滤饼用400ml水分散洗涤，再经抽滤得到淡黄白色固体滤饼，并重复以上操作至滤饼ph值为中性。用热水重结晶，收集淡黄白色固体滤饼至红外灯下干燥至恒重，得到淡黄白色固体13.2g，收率72.2％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.81(d,j＝16.0hz,1h),7.31(d,j＝6.0hz,1h),7.24(s,1h),7.08(d,j＝16.0hz,1h),6.95(d,j＝6.0hz,1h),6.07(s,2h)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:149.1,148.2,134.6,128.3,124.6,113.5,108.3,101.6。(2)n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基环己烷-1-甲酰胺的制备，按照实施例1步骤(2)获得。(3)n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-09～cl-12)的制备和分离纯化按实施例1步骤(3)进行，其中原料(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸更换为(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸。残留物用rp-hplc分离纯化，rp-hplc纯化的洗脱剂条件为meoh:h2o:hco2h＝33:80:0.5(v:v:v)，rt＝25.3～21.5min，得浅绿色固体365.5mg，总收率76.2％。(1s,3s,4s,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-09)：收集保留时间rt＝25.3min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体219.3mg，收率45.7％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.54(s,4h),7.56(d,j＝16.0hz,2h),7.48(s,1h),7.31(d,j＝16.0hz,2h),7.06(s,2h),7.05(s,2h),6.89(d,j＝2.5hz,1h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.11(m,2h),1.92-1.86(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.7,148.9(2),146.8(2),142.8,142.8,134.5(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,51.9,40.5,35.5,26.8。(1s,3s,4r,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-10)：收集保留时间rt＝24.6min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体54.7mg，收率11.4％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.54(s,4h),7.56(d,j＝16.0hz,2h),7.48(s,1h),7.31(d,j＝16.0hz,2h),7.06(s,2h),7.05(s,2h),6.89(d,j＝2.5hz,1h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.11(m,2h),1.92-1.86(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.7,148.9(2),146.8(2),142.8,142.8,134.5(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.6,56.6,51.8,40.4,35.6,26.7。(1s,3r,4s,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-11)：收集保留时间rt＝23.4min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体73.1mg，收率15.2％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.55(s,4h),7.55(d,j＝16.0hz,2h),7.49(s,1h),7.32(d,j＝16.0hz,2h),7.07(s,2h),7.04(s,2h),6.88(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.64(d,j＝2.5hz,2h),6.76(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.38(br,1h),4.63(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.84(d,j＝3.2hz,3h),2.20-2.12(m,2h),1.93-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.8,148.8(2),146.9(2),142.9,142.7,134.6(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.6,56.7,51.9,40.5,35.8,26.9。(1s,3r,4r,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-12)：收集保留时间rt＝21.5min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体18.3mg，收率3.8％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.53(s,4h),7.52(d,j＝16.0hz,2h),7.47(s,1h),7.33(d,j＝16.0hz,2h),7.08(s,2h),7.05(s,2h),6.88(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.64(d,j＝2.5hz,2h),6.76(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.38(br,1h),4.63(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.84(d,j＝3.2hz,3h),2.20-2.12(m,2h),1.93-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.8,148.8(2),146.9(2),142.9,142.7,134.6(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.7,56.6,51.8,40.6,35.7,26.8。实施例4n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-13～cl-16)的制备及分离纯化(1)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸的制备，按照实施例3步骤(1)的方法获得。(2)n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基环己烷-1-甲酰胺的制备，按照实施例2步骤(2)的方法获得。(3)n-甲基-n′,n′-二咖啡磺酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-13～cl-16)的制备及分离纯化按实施例2步骤(3)的方法进行，其中原料(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸更换为步骤(1)得到的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-磺酸。残留物用rp-hplc分离纯化，rp-hplc纯化的洗脱剂条件为meoh:h2o:hco2h＝33:80:0.5(v:v:v)，rt＝26.9～22.3min，得浅绿色固体390.0mg，总收率81.3％。(1s,3s,4r,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-13)：收集保留时间rt＝26.9min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体50.7mg，收率10.7％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.55(s,4h),7.55(d,j＝16.0hz,2h),7.49(s,1h),7.32(d,j＝16.0hz,2h),7.07(s,2h),7.04(s,2h),6.88(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.64(d,j＝2.5hz,2h),6.76(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.38(br,1h),4.63(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.84(d,j＝3.2hz,3h),2.20-2.12(m,2h),1.93-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.8,148.8(2),146.9(2),142.9,142.7,134.6(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.6,56.7,51.9,40.5,35.8,26.9。(1s,3r,4s,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-14)：收集保留时间rt＝25.3min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体23.4mg，收率4.9％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.54(s,4h),7.56(d,j＝16.0hz,2h),7.48(s,1h),7.31(d,j＝16.0hz,2h),7.06(s,2h),7.05(s,2h),6.89(d,j＝2.5hz,1h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.11(m,2h),1.92-1.86(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.7,148.9(2),146.8(2),142.8,142.8,134.5(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.6,56.6,51.8,40.4,35.6,26.7。(1r,3s,4r,5s)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-15)：收集保留时间rt＝24.1min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体265.2mg，收率55.3％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.53(s,4h),7.52(d,j＝16.0hz,2h),7.47(s,1h),7.33(d,j＝16.0hz,2h),7.08(s,2h),7.05(s,2h),6.88(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.64(d,j＝2.5hz,2h),6.76(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.38(br,1h),4.63(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.84(d,j＝3.2hz,3h),2.20-2.12(m,2h),1.93-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.8,148.8(2),146.9(2),142.9,142.7,134.6(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.7,56.6,51.8,40.6,35.7,26.8。(1r,3r,4s,5s)-n-甲基-n′,n′-二咖啡酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-16)：收集保留时间rt＝22.3min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体50.7mg，收率10.6％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.54(s,4h),7.56(d,j＝16.0hz,2h),7.48(s,1h),7.31(d,j＝16.0hz,2h),7.06(s,2h),7.05(s,2h),6.89(d,j＝2.5hz,1h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.37(br,1h),4.62(br,1h),4.21(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.11(m,2h),1.92-1.86(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.7,148.9(2),146.8(2),142.8,142.8,134.5(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,51.9,40.5,35.5,26.8。实施例5n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-17～cl-20)的制备及分离纯化(1a-b)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸单甲酯的制备，按照实施例1步骤(1)中的(1a)和(1b)方法获得胡椒醛。(1c″)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸二甲酯的制备于250ml圆底烧瓶中，将步骤(1a-b)得到的胡椒醛(12g，79.9mmol)和甲基膦酸二甲酯(14.9g，120mmol)用150ml干燥thf溶解，分批加入nah(2.9g，120mmol)，后将反应液移至油浴115℃加热回流约2小时。反应过程用tlc监测至胡椒醛完全消失，表明反应完全。反应液冷却至室温后，于冰浴下将反应液缓慢倾入200ml盐酸溶液(2mol/l)中，乙酸乙酯萃取3次，有机层用无水硫酸钠干燥，减压旋蒸除去乙酸乙酯，硅胶柱层析分离纯化(石油醚:乙酸乙酯＝10:1，v:v)，得淡黄色粘稠液体14.1g，收率68.5％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.32(d,j＝6.0hz,1h),7.23(s,1h),6.95(d,j＝6.0hz,1h),6.91(d,j＝17.0hz,1h),5.63(d,j＝17.0hz,1h),6.06(s,2h),4.23(s,6h)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:150.1,147.9,147.8,128.5,123.5,111.5,111.2,109.2,101.2,61.9(2)；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:20.0。(1d″)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸单甲酯的制备于100ml圆底烧瓶中，将步骤(1c″)得到的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸二甲酯(1.28g，5mmol)用30ml干燥thf溶解，氮气保护下，于室温滴加1.0m的libh(s-bu)3溶液(6.0ml，6.0mmol)，tlc跟踪直至水解反应完全。随后，于冰浴下将反应液缓慢倾入50ml盐酸溶液(2mol/l)中，有大量淡黄白色固体析出。经抽滤得到淡黄色固体滤饼，后将淡黄色固体滤饼用100ml水分散洗涤，再经抽滤得到淡黄白色固体滤饼，并重复以上操作至滤饼ph值为中性。用热水重结晶，收集淡黄白色固体滤饼至红外灯下干燥至恒重，得到淡黄白色固体1.13g，收率93.2％。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.34(d,j＝6.0hz,1h),7.235(s,1h),6.96(d,j＝6.0hz,1h),6.92(d,j＝17.0hz,1h),5.64(d,j＝17.0hz,1h),6.07(s,2h),4.25(s,3h)；13cnmr(75mhz,cdcl3)δ:150.2,147.8,147.7,128.6,123.4,111.6,111.3,109.3,101.2,61.8；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:34.8。(2)n-甲基-3,4-二氨基-1,5-二苄氧基环己烷-1-甲酰胺的制备，按照实施例1步骤(2)方法获得。(3)n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-17～cl-20)的制备及分离纯化按实施例1步骤(3)进行，其中原料(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸更换为步骤(1d″)得到的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸单甲酯。残留物用rp-hplc分离纯化，rp-hplc纯化的洗脱剂条件为meoh:h2o:hco2h＝40:80:0.5(v:v:v)，rt＝28.5～24.2min，得浅绿色固体259.4mg，总收率68.9％。(1s,3s,4s,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-17)：收集保留时间rt＝28.5min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体155.6mg，收率41.3％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.53(s,4h),7.55(d,j＝16.0hz,2h),7.47(s,1h),7.32(d,j＝16.0hz,2h),7.05(s,2h),7.03(s,2h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.85(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.36(br,1h),4.63(br,1h),4.22(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),3.92(s,6h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.13(m,2h),1.92-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.6,148.8(2),146.7(2),142.6,142.5,134.4(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,54.6(2),51.9,40.5,35.5,26.8；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:25.8。(1s,3s,4r,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-18)：收集保留时间rt＝27.2min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体38.9mg，收率10.3％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.52(s,4h),7.54(d,j＝16.0hz,2h),7.48(s,1h),7.34(d,j＝16.0hz,2h),7.06(s,2h),7.04(s,2h),6.89(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.36(br,1h),4.63(br,1h),4.22(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),3.92(s,6h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.13(m,2h),1.92-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.7,148.7(2),146.6(2),142.6,142.5,134.4(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,54.6(2),51.9,40.5,35.5,26.8；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:25.9。(1s,3r,4s,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-19)：收集保留时间rt＝26.3min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体51.9mg，收率13.8％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.54(s,4h),7.53(d,j＝16.0hz,2h),7.49(s,1h),7.35(d,j＝16.0hz,2h),7.06(s,2h),7.04(s,2h),6.89(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.36(br,1h),4.63(br,1h),4.22(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),3.92(s,6h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.13(m,2h),1.93-1.89(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.8,148.8(2),146.7(2),142.6,142.4,134.4(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,54.6(2),51.9,40.5,35.5,26.8；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:25.7。(1s,3r,4r,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-20)：收集保留时间rt＝24.2min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体13.0mg，收率3.4％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.52(s,4h),7.51(d,j＝16.0hz,2h),7.47(s,1h),7.34(d,j＝16.0hz,2h),7.05(s,2h),7.03(s,2h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.36(br,1h),4.63(br,1h),4.22(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),3.92(s,6h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.13(m,2h),1.93-1.89(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.9,148.7(2),146.7(2),142.6,142.4,134.4(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,54.6(2),51.9,40.5,35.4,26.7；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:25.8。实施例6n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-21～cl-24)的制备及分离纯化(1)(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸单甲酯的制备，按照实施例5步骤(1)方法获得。(2)n-甲基-3,5-二氨基-1,4-二苄氧基环己烷-1-甲酰胺的制备，按照实施例2步骤(2)方法获得。(3)n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-21～cl-24)的制备及分离纯化按实施例2步骤(3)方法进行，其中原料(e)-3-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)丙烯酸更换为步骤(1)得到的(e)-2-(苯骈[d][1,3]二氧戊烯-5-基)乙烯-1-膦酸单甲酯。残留物用rp-hplc分离纯化，rp-hplc纯化的洗脱剂条件为meoh:h2o:hco2h＝40:80:0.5(v:v:v)，rt＝27.6～23.4min，得浅绿色固体273.3mg，总收率72.6％。(1s,3s,4r,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-21)：收集保留时间rt＝27.6min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体35.5mg，收率9.4％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.54(s,4h),7.53(d,j＝16.0hz,2h),7.49(s,1h),7.35(d,j＝16.0hz,2h),7.06(s,2h),7.04(s,2h),6.89(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.36(br,1h),4.63(br,1h),4.22(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),3.92(s,6h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.13(m,2h),1.93-1.89(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.8,148.8(2),146.7(2),142.6,142.4,134.4(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,54.6(2),51.9,40.5,35.5,26.8；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:25.7。(1s,3r,4s,5r)-n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-22)：收集保留时间rt＝26.4min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体16.4mg，收率4.4％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.52(s,4h),7.51(d,j＝16.0hz,2h),7.47(s,1h),7.34(d,j＝16.0hz,2h),7.05(s,2h),7.03(s,2h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.36(br,1h),4.63(br,1h),4.22(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),3.92(s,6h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.13(m,2h),1.93-1.89(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.9,148.7(2),146.7(2),142.6,142.4,134.4(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,54.6(2),51.9,40.5,35.4,26.7；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:25.8。(1r,3s,4r,5s)-n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,4-二氨基-1,5-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-23)：收集保留时间rt＝25.3min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体185.8mg，收率49.4％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.53(s,4h),7.55(d,j＝16.0hz,2h),7.47(s,1h),7.32(d,j＝16.0hz,2h),7.05(s,2h),7.03(s,2h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.85(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.36(br,1h),4.63(br,1h),4.22(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),3.92(s,6h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.13(m,2h),1.92-1.87(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.6,148.8(2),146.7(2),142.6,142.5,134.4(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,54.6(2),51.9,40.5,35.6,26.9；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:25.8。(1r,3r,4s,5s)-n-甲基-n′,n′-二咖啡膦(单甲酯)酰基-3,5-二氨基-1,4-二羟基环己烷-1-甲酰胺(cl-24)：收集保留时间rt＝23.4min馏分，真空旋蒸除去溶剂，残留物冷冻干燥，得浅绿色固体35.5mg，收率9.4％。1hnmr(300mhz,cd3od)δ:9.52(s,4h),7.51(d,j＝16.0hz,2h),7.47(s,1h),7.34(d,j＝16.0hz,2h),7.05(s,2h),7.03(s,2h),6.87(d,j＝2.5hz,1h),6.86(d,j＝2.5hz,1h),6.63(d,j＝2.5hz,2h),6.78(dd,j＝8.0,2.5hz,2h),5.36(br,1h),4.63(br,1h),4.22(dd,j＝7.5,3.0hz,1h),4.16(m,2h),3.92(s,6h),2.83(d,j＝3.2hz,3h),2.19-2.13(m,2h),1.93-1.89(m,2h)；13cnmr(75mhz,cd3od)δ:173.9,148.7(2),146.7(2),142.6,142.4,134.4(2c),128.5(2c),124.4(2c),118.8(2c),118.5(2c),116.6(2c),115.3(2c),80.5,73.5,56.7,54.6(2),51.9,40.5,35.4,26.7；31pnmr(162mhz,cdcl3)δp:25.8。实施例7奎宁酸衍生物的抗呼吸道病毒活性检测病毒、宿主细胞材料：选用呼吸道合胞病毒(rsv)，宿主细胞为喉癌细胞(hep-2)；选用副流感病毒iii(piv3)，宿主细胞hep-2；甲型流感病毒(flua,h1n1)，宿主细胞为狗肾传代细胞(mdck)。病毒rsv、piv3、h1n1和细胞hep-2、mdck均购自武汉大学药用病毒研究所。细胞生长液为含有浓度为体积百分比10％的小牛血清(fbs)的mem培养基，细胞维持液为含有体积百分比1％fbs的mem培养基。阳性对照药为利巴韦林、来自地胆草的天然产物3,4-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯和3,5-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯。四唑盐(mmt)溶液配制：用缓冲液pbs(0.1m、ph7.4)配制成5mg/ml溶液。样品溶液配制：将实施例1～6所制备的奎宁酸衍生物和利巴韦林采用细胞维持液分别配成200μg/ml和100μg/ml的样品溶液。(1)采用mmt法检测化合物的细胞毒性：将hep-2细胞和mdck细胞分别接种于96孔板中，接种密度为1×104个/孔，等单层细胞长好后，加入用细胞维持液稀释配制的样品溶液至系列浓度(3.1～200μg/ml)，在37℃、5％的co2培养箱中培养3天，加入10μl配制的mtt溶液，继续培养4h。吸出样品溶液，加入100μl二甲亚砜(dmso)，室温下，将96孔板置于微空孔板振荡器中震荡10min，然后用酶标仪检测570nm处的od值，分别计算hep-2细胞和mdck细胞存活率；每组设4个平衡孔，重复3次。计算结果，画出曲线，求出半数毒性浓度(cc50)，检测结果见表1～3。(2)通过观察样品对细胞病变效应的抑制程度测定抗病毒活性：将hep-2细胞和mdck细胞分别培养在96板孔中，等单层细胞长好后，加入用细胞维持液稀释好的100倍半数感染量(100tcid50)的rsv、piv3和fluah1n1病毒液，再加入用细胞维持液稀释配制的样品溶液至系列浓度(0.4～100.0μg/ml)，在37℃、5％的co2培养箱中培养3～4天。每天于倒置显微镜下观察细胞病变效应(cpe)的程度，并记录。-表示无cpe；+表示0～25％的细胞有cpe；2+表示25～50％的细胞有cpe；3+表示50～70％的细胞有cpe；4+表示75～100％的细胞有cpe。最后估算出半数抑制浓度(ic50)。选择性指数(si)＝cc50/ic50。实验结果见表1～3。表1奎宁酸衍生物和阳性对照的抗呼吸道合胞病毒活性*注：呼吸道胞合病毒(rsv)的宿主细胞为hep-2，cc50为半数毒性浓度，ic50为半数抑制浓度，si为选择性指数，si＝cc50/ic50。表1数据表明，与阳性对照药利巴韦林以及来自地胆草的天然化合物3,4-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯和3,5-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯相比，奎宁酸衍生物(cl-01～cl-24)的细胞毒性、抗呼吸道胞合病毒活性以及选择性指数比利巴韦林更佳，其中尤以cl-07、cl-15和cl-23的综合评价最好；奎宁酸衍生物比相应的天然来源二咖啡酰奎宁酸甲酯的综合评价要高。表2奎宁酸衍生物和阳性对照的抗副流感病毒iii活性*注：副流感病毒iii(piv3)的宿主细胞为hep-2，cc50为半数毒性浓度，ic50为半数抑制浓度，si为选择性指数，si＝cc50/ic50。表2数据表明，与阳性对照药利巴韦林以及来自地胆草的天然化合物3,4-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯和3,5-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯相比，3,5-二氨基奎宁酸衍生物的细胞毒性、抗副流感病毒iii活性以及选择性指数比利巴韦林更佳，其中尤以cl-07、cl-14、cl-15、cl-22、cl-23和cl-24的综合评价最好；奎宁酸衍生物比相应的天然来源二咖啡酰奎宁酸甲酯的综合评价要高。表3奎宁酸衍生物和阳性对照的抗流感病毒活性*注：甲型流感病毒h1n1(fluah1n1)的宿主细胞为mdck，cc50为半数毒性浓度，ic50为半数抑制浓度，si为选择性指数，si＝cc50/ic50。表3数据表明，与阳性对照药利巴韦林以及来自地胆草的天然化合物3,4-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯和3,5-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯相比，3,5-二氨基奎宁酸衍生物的细胞毒性、抗甲型流感病毒h1n1活性以及选择性指数比利巴韦林更佳，其中尤以cl-07、cl-15和cl-23的综合评价最好；奎宁酸衍生物比相应的天然来源二咖啡酰奎宁酸甲酯的综合评价要高。实施例8部分奎宁酸衍生物在胎牛血清中的稳定性实验材料：小牛血清(fbs)和培养基dmem均购自gibco公司。实验过程：1)利用高效液相法建立检测样品的标准工作曲线；2)配置终浓度为20mm的样品(实施例2、4和6制备的cl-07、cl-15、cl-23以及地胆草的天然产物3,4-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯和3,5-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯)溶液，加200μl样品溶液和1.8ml的胎牛血清于6孔板中，37℃孵育，在0.25h、0.5h、1h、2h、4h、8h、12h、24h分别取10μl混合样品，加入90μl20％(v/v)高氯酸甲醇溶液，振荡混匀后静置30min，10000rpm离心5min。取上清液hplc分析。以时间-浓度作图，获得待测样品在胎牛血清中的半衰期，结果见表4。表4奎宁酸衍生物在胎牛血清中的稳定性样品t1/2(h)3,4-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯0.23,5-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯0.3cl-074.8cl-155.3cl-235.2从表4可见，天然来源的3,4-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯和3,5-o,o-二咖啡酰奎宁酸甲酯的半衰期很短，分别为0.2h和0.3h；而奎宁酸衍生物cl-07、cl-15、cl-23的半衰期分别为4.8h、5.3h和5.2h，有较大幅度的提高。上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12