一株可降解多种芳香族化合物的细菌及其用图

文档序号:8313194阅读:687来源:国知局
一株可降解多种芳香族化合物的细菌及其用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于微生物技术领域和水处理技术领域,具体设及一株可降解多种芳香族 化合物的细菌及其用途。
【背景技术】
[0002] 煤炭化工和炼焦等工业过程产生大量的含芳香族污染物的废水,该些废水所含的 芳香族污染物如苯酪类及其衍生物、嗟咐类化合物、苯类及其衍生物,该些废水的排放导致 水源污染,毒死鱼邮,危害农作物,并严重威胁人类的健康,在我国水污染控制中已被列为 重点解决的有害废水之一。
[0003] 研究已发现在很多的废水处理系统中化auera都具有比较高的含量,并可能起着 重要的作用。本实验室Liu等人对一个嗟咐为碳源的反硝化反应器驯化过程的研究结果, 同样表明化auera应该是反应器中最优势的嗟咐降解菌。本实验室Yan等人焦化废水实验 室处理装置的研究中发现,Thauera可能不仅在苯酪的降解起作用,在废水COD的去除方面 可能也起到主要作用。近年来,在很多的废水处理装置中,尤其是含芳香族污染物的废水处 理中,含有较高丰度的化auera属细菌。然而,废水处理装置中化auera细菌的分离具有一 定的难度,本实验室的毛跃建依据分子生物学的指导从焦化废水处理A2池中分离获得了 S株化auera细菌。因此,对化auera属细菌分离物的降解功能的研究还不多,尤其是具有 多种芳香族化合物降解能力的细菌菌株的应用没有得到充分重视。本发明正是在该种背景 下,从含有多种芳香族污染物的焦化废水处理装置中分离了一株化auera属细菌,并发现 该细菌不仅可W耐受高浓度废水,而且对多种芳香族化合物都具有有效的降解能力。
[0004] 关于陶厄氏细菌的用途,中国发明专利申请"一株腐殖质还原陶厄氏菌及应用和 微生物制剂"(公开(公告)号:CN102634466B)公开了一株陶厄氏菌的应用,但主要是用 于腐殖质还原的用途。

【发明内容】

[0005] 针对现有技术中的缺陷,本发明的目的是提供一株可降解多种芳香族化合物的细 菌及其用途。
[0006] 本发明所设菌株已提交中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、进行保 藏,保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号;保藏日期;2014年9月24日;保藏 编号;CGMCC 9732 ;分类命名;陶厄氏菌,Thauera sp.。
[0007] 本发明是通过W下技术方案实现的:
[000引第一方面,本发明提供一株可降解多种芳香族化合物的细菌,所述细菌菌株为陶 厄氏菌订hauera sp. )CGMCC 9732。
[0009] 优选地,所述细菌具有反硝化相关的基因nirS。
[0010] 优选地,所述细菌具有反硝化相关的基因nirS的序列如SED ID No. 6所示。
[0011] 优选地,所述细菌的16S rRNA基因序列如SED ID No. 3所示;所述细菌的16S rRNA基因序列的GenBank登录号为KM596507。
[001引 优选地,所述细菌的16S rRNA基因序列与Iliauera 3口.口1¥-1佑6址3证:4巧05850.1)和化3116脚8口.920-(:佑6址3证:抓850614.1)具有100% 的相似性;
[001 引 其中 Hiauera sp. PIV-1 已公开于如下文献;Probian, C. , Wulf ing, A. and Harder, J. Anaerobic mineralization of quaternary carbon atoms:isolation of denitrifying bacteria on pivalic acid(2, 2-dimethylpropionic acid).Appl. 化viron. Microbiol. 2003, 69(3),1866-1870 ;
[0014] Hiauera sp. Q20-C 已公开于如下文献;Mao Y,化ang X, Xia X,化ong H,化ao L. Versatile aromatic compound-degrading capacity and microdiversity of Thauera strains isolated from a coking wastewater treatment bioreactor. J Ind Microbiol Biotechnol.2010, 37(9):927-34. doi:10. 1007/sl0295-010-0740-7。
[0015] 优选地,所述细菌的形态特征为短杆状,长为1. 8~3 ym,宽为0. 3~0. 8 ym,革 兰氏阴性。
[0016] 优选地,所述细菌的培养特征为在LB琼脂培养基平板上过夜培养后,目视观察到 菌落形态为乳白色,表面光滑,边缘整齐,中央有突起的圆形菌落。
[0017] 第二方面,本发明设及一株可降解多种芳香族化合物的细菌的用途。
[0018] 优选地,所述用途包括;所述细菌可用于降解多种有机污染物。
[0019] 优选地,所述用途具体包括;对焦化废水中的多种有机污染物进行去除、对含多种 有机污染物的工业废水的生物处理、对受多种有机污染物污染的环境的生物修复等。
[0020] 优选地,所述有机污染物包括芳香族化合物等。
[0021] 优选地,所述芳香族化合物包括苯酪、甲基酪、二甲基酪、己基甲基酪、嘲噪、了基 哲基甲苯、献酸二了醋等。
[0022] 优选地,所述细菌还可在反硝化条件下去除环境中的硝酸盐。
[0023] 与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
[0024] 本发明通过对一株细菌的分离W及其对焦化废水中多种成分的降解研究,发现了 TM1菌株的用途,该菌株在高浓度废水中可W有效地降解多种芳香族化合物,有效去除废水 中污染物,在COD为llOOmg/L的焦化废水中,对苯酪、甲基酪、二甲基酪、己基甲基酪、嘲噪、 了基哲基甲苯、献酸二了醋的去除率在90% W上。本发明将推动芳香族污染物降解细菌在 废水处理及其相关领域的应用。
【附图说明】
[0025] 通过阅读参照W下附图对非限制性实施例所作的详细描述,本发明的其它特征、 目的和优点将会变得更明显:
[0026] 图1为分离株TM1菌株的邸1C指纹图谱;
[0027] 其中,M泳道为分子量标准;
[002引图2为化auera菌株TM1在好氧条件下的焦化废水有机污染物的降解图谱;
[0029] 其中,曲线1为原废水的气相色谱图谱;曲线2为不接菌的对照样品的气相色谱图 谱;曲线3为TM1菌株的气相色谱图谱;曲线4为基本培养基的空白对照。
【具体实施方式】
[0030] 下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。W下实施例将有助于本领域的技术 人员进一步理解本发明,但不W任何形式限制本发明。应当指出的是,对本领域的普通技术 人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可W做出若干变形和改进。该些都属于本发明 的保护范围。
[0031] 对于本领域的技术人员而言,通过本发明记载的实施例,很显然可知本发明的方 法能够适用于本领域的诸多微生物或各类由微生物组成的群落,而不限于本发明实施记载 的微生物。当然,本发明的方法很显然地适用于与实施例记载的该细菌菌株的相类似的用 途,如对各类含芳香族污染物的废水的处理、芳香族化合物污染的±壤的生物修复等。
[00扣]连施例1
[0033] 本实施例设及一种细菌菌株的分离、鉴定,具体包括如下所述:
[0034] (1)细菌菌株TM1的分离方法;
[0035] 原废水培养基:用0. 22微米的滤菌膜对焦化废水进行过滤除菌后加热至60°C左 右,然后与融化状态下已灭菌的7. 5%的琼脂按照4 ;1的比例混合。
[0036] 用于细菌分离的样品采自某焦化厂废水处理装置的反硝化池。将新鲜采集的样品 用无菌水适当稀释后,取100 UL菌悬液涂布于原废水培养基上,置于28°C的培养箱中培养 至有明显菌落形成。挑取单菌落进行划线纯化,将获
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