一类新芳香聚酮化合物的制备方法及其抗菌用图
【专利摘要】本发明公开了一类新芳香聚酮化合物及其制备方法，本发明还披露了该类聚酮化合物的抗菌用途。
【专利说明】
一类新芳香聚酮化合物的制备方法及其抗菌用途
技术领域
[0001] 本发明属于药学领域，本发明披露了一类新的芳香聚酮化合物及其制备方法，本 发明还涉及所述化合物及其组合物的抗菌用途。
【背景技术】
[0002] 细菌感染是致病菌或条件致病菌侵入血循环中生长繁殖，产生毒素和其他代谢产 物所引起的急性全身性感染，能引发高热、伤寒及肺结核等多种病理症状，严重影向人类身 体健康，危害人类生命安全。十九世纪以前，细菌感染引发的疾病曾夺去无数人的生命。青 霉素的发明和使用，使得细菌感染得到了有效控制。而后，随着第二代、第三代等新一代抗 生素的不断问世，各类细菌感染性疾病获得了更为有效的治疗。但由于抗生素、免疫制剂药 物的广泛使用，致病菌种也有所变异，耐药菌株大量涌现，导致抗菌药物的耐药性问题日益 严重。传统的抗生素如青霉素对耐甲氧西林的金葡球菌（MRSA)等耐药菌引起感染的治疗 效果已大大降低，导致临床并发症和死亡数增加。因此，具有全新作用机制和靶点的新颖结 构抗生素的研发工作近年来发展迅速，成为解决耐药性问题的热点和重点领域，有望在一 定程度上解决细菌多药耐药等问题。
[0003] 本专利
【发明人】在研究一株深海来源真菌Spiromastix sp.化学成分的过程中，结 合化学转化方法，制备并鉴定了一类结构新颖的芳香聚酮化合物（式I~式VI)。体外抗菌 活性筛选表明，该类化合物具有显著的抗革兰氏阳性细菌活性。式I化合物活性更是强于 阳性对照药氯霉素，具有进一步新型抗生素开发潜力。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于揭示一类新芳香聚酮化合物在治疗细菌感染疾病中的用途。
[0005] 本发明的另一目的在于提供一类新的芳香聚酮化合物。
[0006] 本发明的另一目的在于提供该类芳香聚酮化合物的制备方法。
[0007] 在本发明第一方面，在于提供式I~式VI所示芳香聚酮化合物，其药学上可接受 的盐或它们的混合物的用途，用于制备药物，所述药物用于治疗细菌感染疾病。
[0008]
[0009] 本发明第二方面提供上述式I~式VI芳香聚酮化合物的制备方法，包括如下步 骤：
[0010] 1)以深海来源真菌Spiromastix sp.为菌种，利用液体或固体发酵培养，获得含 上述式I~式VI化合物的发酵物；
[0011] 2)将发酵物通过硅胶、凝胶、0DS等色谱手段分离与纯化，在同一发酵物中制备上 述式I~式VI化合物；
[0012] 通过体外抗菌实验证明了本发明中的化合物抗革兰氏阳性细菌效果显著，具有进 一步开发成新型广谱抗生素的潜力。
【附图说明】
[0013] 图1 :式I化合物的1H NMR谱；
[0014] 图2 :式I化合物的APT谱；
[0015] 图3 :式I化合物的HMBC谱；
[0016] 图4 :式I化合物的HSQC谱；
[0017] 图5 :式I化合物的COSY谱；
[0018] 图6 :式I化合物的高分辨质谱；
[0019] 图7 :式I化合物的红外光谱；
[0020] 图8 :式II化合物的1H NMR谱；
[0021] 图9 :式II化合物的APT谱；
[0022] 图10 :式III化合物的1H NMR谱；
[0023] 图11 :式III化合物的APT谱；
[0024] 图12 :式IV化合物的1H NMR谱；
[0025] 图13 :式IV化合物的APT谱；
[0026] 图14 :式V化合物的1H NMR谱；
[0027] 图15 :式V化合物的APT谱；
[0028] 图16 :式VI化合物的1H NMR谱；
[0029] 图17 :式VI化合物的APT谱； 具体实施方案：
[0030] 根据本发明所公开的技术内容，本领域技术人员将很清楚本发明的其他实施方 案，下述实施方案仅作示例。
[0031] 实例1 :深海真菌Spiromastix sp.的固体发酵培养
[0032] 1.菌株背景
[0033] Spiromastix sp.分离自南大西洋水下2869米海底沉积物（西经13. 7501°，南 炜15. 1668° )，菌种保藏于中国海洋微生物菌种保藏管理中心（MCCC :3A00308，GeneBank : KJ010057)。
[0034] 2.固体培养基的制备
[0035] 将100mL人工海水与100g大米加入500mL三角瓶中，静置12h，后于121°C高压湿 热灭菌30min，放凉待用。
[0036] 3.菌株发酵
[0037] 在PDA(马铃薯、葡萄糖、琼脂）培养皿上挑取长有新鲜Spiromastix sp.的琼脂 片（1~2cm2)，接种于大米培养基上，25°C下避光恒温培养30d，得到发酵产物。
[0038] 实例2 :式I~式VI化合物的制备
[0039] 发酵产物捣碎后用乙酸乙酯超声萃取3次，每次1.5h，减压浓缩得粗浸膏 (52. 4g)。浸膏用等比例硅胶（160~200目）扮样，利用减压硅胶柱色谱以石油醚/丙酮 为流动相梯度洗脱。石油醚/丙酮（10 : l，v/V)洗脱组分（4.8g)用0DS柱色谱以甲醇/ 水为流动相（20%~100%，v/v)梯度洗脱，60%洗脱组分用半制备高效液相色谱以68%甲 醇/水为流动相等度洗脱，纯化得到式I化合物（12. 3mg)，式II化合物（17. 8mg)和式IV 化合物（22. 6mg) ;0DS柱色谱80%洗脱组分用半制备高效液相色谱以78%甲醇/水为流 动相等度洗脱，纯化得到式III化合物（32. 8mg)。硅胶柱色谱石油醚/丙酮（5 : l，v/v) 洗脱组分（7. lg)用0DS柱色谱以甲醇/水为流动相（20%~100%，v/v)梯度洗脱，50% 洗脱组分用半制备高效液相色谱以52%甲醇/水为流动相等度洗脱，纯化得到式V化合物 (8. 4mg)和式 VI 化合物（6. 2mg)。
[0040] 实例3 :式I~式VI化合物的抗菌活性实验：
[0041 ] 采用微量肉汤稀释法测试了式I~式VI对七种指示菌，Staphylococcus aureus (金黄色葡萄球菌，ATCC 25923)，Bacillus thuringensis (苏云金芽抱杆菌，ATCC 10792)，Bacillus subtilis (枯草芽抱杆菌，ATCC 63501)，Ralstonia solanacearum(前 科雷尔氏菌，ATCC 11696)，Xanthomonas vesicatoria(辣椒疮痴病菌，ATCC 11633)， Agrobacterium tumefaciens(根癌土壤杆菌，ATCC 11158)，以及 Pseudomonas lachrymans (甜瓜细菌性叶斑病菌，ATCC 11921)的最低抑菌浓度（MIC)，结果见表1。
[0042] 具体实验方法如下：
[0043] 1.培养基
[0044] 使用 Mueller-Hinton(MH)肉汤培养基，pH 7. 2 ~7. 4。
[0045] 2. MIC 板制备
[0046] 无菌情况下，将倍比稀释后不同浓度的抗菌药物溶液分别加到灭菌的96孔聚苯 乙烯板中，第1至11孔加药液，每孔10 yL，第12孔不加药作为生长对照，冰冻干燥后密 封，-20°C以下保存备用。
[0047] 3.接种物制备
[0048] 将用生长法制备的浓度相当于0.5麦氏比浊标准的菌悬液，经MH肉汤1 : 1000 稀释后，向每孔中加入100 μ L，密封后置35°C普通空气孵箱中孵育24h。此时，第1孔至第 11 孔药物浓度分别为 128、64、32、16、8、4、2、1、0· 5、0· 25、0· 125yg/mL。
[0049] 4.结果判断
[0050] 以在小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度为MIC。当阳性对照孔（即不含抗 生素）内细菌明显生长时认定实验可行。当在微量肉汤稀释法出现单一的跳空时，记录抑 制细菌生长的最高药物浓度。如出现多出跳孔，结果不可信，重复实验。
[0051] 本实验中抗菌活性结果表明，式I~式VI化合物能够显著抗菌活性。
[0052] 表1.式I~式VI的抗菌MIC值
[0053]
【主权项】
1. 一种式I~式VI化合物2. 权利要求1所述的化合物的制备方法，包括下述步骤： 1. W深海来源真菌Spiromastix SP.为菌种，利用液体或固体发酵培养，获得含上述 聚酬化合物的发酵物； 2) 将发酵物通过硅胶、凝胶、0DS等色谱手段分离与纯化，在同一发酵物中制备上述式 I~式VI化合物。3. 式I~式VI所示聚酬化合物，其药学上可接受的盐或它们的混合物的用途，用于制 备药物，所述药物用于治疗细菌疾病和感染。
【文档编号】C07D311/76GK105837413SQ201510057950
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2015年2月3日
【发明人】林文翰, 邵宗泽, 牛四文, 刘 东
【申请人】北京大学, 中国大洋矿产资源研究开发协会