N-烯基苯并三唑类氮氧衍生物及其制备方法和应用
【专利摘要】本发明公开了一系列N?烯基苯并三唑类氮氧衍生物及其制备方法和应用。本发明所述的N?烯基苯并三唑类氮氧衍生物具有如下式(I)所示结构，其制备方法为：取下述式(II)所示结构的N?羟基苯并三唑衍生物、式(III)所示结构的有机硼试剂、铜盐和碱性物质，置于有机溶剂中，在氧气存在的条件下反应，制得目标物粗品。本发明所述方法简单易控，周期短；制得的部分N?烯基苯并三唑类氮氧衍生物具有显著的抗肿瘤活性，为研制新的抗肿瘤药物提供了先导化合物。所述式(I)、式(II)和式(III)所示结构的化合物分别如下：
【专利说明】
N-烯基苯并三唑类氮氧衍生物及其制备方法和应用
技术领域
[0001] 本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种N-烯基苯并三唑类氮氧衍生物及其制备 方法和应用。
【背景技术】
[0002] 苯并三唑类氮氧衍生物广泛存在于许多药物分子中，是重要的生理活性单元，在 抗菌、抗癌方面具有重要的应用。目前，很多研究工作者致力于这方面的研究，但是现有的 三唑类氮氧衍生物的制备方法步骤长，且底物和试剂存在局限性或者实验操作条件复杂， 限制了该类化合物的进一步的深入研究。
【发明内容】
[0003] 本发明要解决的技术问题是提供一系列结构新颖的N-烯基苯并三唑类氮氧衍生 物，以及它们的制备方法及应用。
[0004] 本发明涉及下式（I)所示化合物或其药学上可接受的盐：
[0006] 其中：
[0007] X表示碳或氮原子；
[0008] Ri表不氣、Ci~4的烷基、Ci~4的烷氧基、Ci~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、单 取代或^取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子；
[0009] R2表不氣、Ci~4的烷基、Ci~4的烷氧基、Ci~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、单 取代或^取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； [00 10] R3表不氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、单 取代或^取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； [00 11] R4表不氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、单 取代或^取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基齒原子；
[0012] 他表示氢、的烷基、Chs的烷氧基或CH4的全氟烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子；
[0013] R6表示氢、的烷基、Chs的烷氧基或CH4的全氟烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子；
[0014] R7表示氢、ChS的烷基、CH6的烷氧基或CH4的全氟烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子。
[0015] 上述化合物中：
[0016] Ri进一步优选为氢、Cl~4：院基、齒原子或Cl~4的烷氧基；
[0017] R2进一步优选为氢、Ci~4烷基、卤原子或Ci~4的烷氧基；
[0018] R3进一步优选为氢、Ci~4烷基、齒原子或Ci~4的烷氧基；
[0019] R4进一步优选为氢、Ci~4:院基、卤原子或Ci~4的烷氧基；
[0020] R5进一步优选为氢或烷基，或者是未取代、单取代或二取代的苯基；
[0021] R6进一步优选为氢或Ch4烷基，或者是未取代、单取代或二取代的苯基；
[0022] R?进一步优选为氢或烷基，或者是未取代、单取代或二取代的苯基。
[0023]上述式（I)所示化合物的制备方法，主要包括以下步骤：取N-羟基苯并三唑衍生 物、有机硼试剂、铜盐和碱性物质，置于有机溶剂中，在氧气存在的条件下反应，制得目标物 粗品；其中：
[0024]所述的N-羟基苯并三唑衍生物具有下述(II)所示结构：
[0026]其中，
[0027] X表示碳或氮原子；
[0028] Ri表不氣、Ci~4的烷基、Ci~4的烷氧基、Ci~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、单 取代或^ 取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； [0029] R2表不氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、单 取代或^ 取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； [0030] R3表不氣、Ci~4的烷基、Ci~4的烷氧基、Ci~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、单 取代或^ 取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或齒原子； [0031] R4表不氣、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或齒原子，或者是未取代、单 取代或^ 取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基齒原子； [0032]所述的有机硼试剂具有下述(III)所示结构：
[0034] 其中，
[0035] 他表示氢、Ch的烷基、Ch的烷氧基或Ch的全氟烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子；
[0036] R6表示氢、Ch的烷基、Ch的烷氧基或Ch的全氟烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子；
[0037] R7表示氢、Ch的烷基、Ch的烷氧基或Ch的全氟烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子。
[0038] 上述制备方法中，办、1?2、1?3、1?4、抱、1?6和1?7的优选选择如前所述。
[0039] 上述制备方法中，涉及的原料N-羟基苯并三唑衍生物可参考现有文献(B.X.Yu， Z.Huang，M.Zhang，D.Dillard，and H.T.Ji，Acs Chem.Biol，2013,8,524-529或 N ? J ? Leonard，K ? Co lankiewice，J ? Org ? Chem ? 1969，34，359-365)进行合成，也可自选设计合 成路线进行合成，在此不再详述。涉及的原料有机硼试剂中部分可以直接从市场上购买得 到(如(E)-1-戊烯基硼酸、环己烯基硼酸、环戊烯基硼酸等），对于无法从市场上买到的有机 硼试剂(如3-己烯基硼酸、2-丁烯基硼酸、环庚烯基硼酸等），可以参考现有文献(H.Y.Wang， L.Anderson,Org.Lett.,2013,15,3362-3365nC.Feng,T.P.Loh,Org.Lett.,2014,16,3444-3447?或A.Patil，D.L.Mo，H.Y.Wang，D.Mueller，L.Anderson Angew.Chem.Int.Ed..2012, 51,7799-7803)进行合成，也可自行设计合成路线进行合成，在此不再详述。
[0040] 上述制备方法中，所述的铜盐可以是选自溴化铜、碘化铜、氯化铜、硫酸铜、醋酸 酮、硝酸铜、三氟甲磺酸铜、溴化亚铜、碘化亚铜和氯化亚铜中的一种或两种以上的组合。当 铜盐的选择为上述两种以上物质的组合时，它们的配比可以为任意配比。
[0041] 上述制备方法中，所述的碱性物质可以是含有羟基的碱类物质，具体可以是选自 磷酸三钾、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化铯、碳酸铯，碳酸钾、叔丁醇钾、叔丁醇钠、 氟化钾、吡啶、三乙胺和N，N_二异丙基乙基胺中的一种或两种以上的组合。当碱性物质的选 择为上述两种以上物质的组合时，它们的配比可以为任意配比。
[0042] 上述制备方法中，所述的有机溶剂可以是选自苯、甲苯、环己烷、石油醚、四氯化 碳、四氢呋喃、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、二氯甲烷、丙酮、三氯甲烷、正己烷和二氧六环中一种 或两种以上的组合。当有机溶剂的选择为上述两种以上物质的组合时，它们的配比可以为 任意配比。
[0043]上述制备方法中，反应一般选择在空气条件下进行，同时反应优选是在低于80°C 的条件下进行，进一步优选是在常温至60°C的条件下进行，更优选是在常温至40°C的条件 下进行。反应是否完全可采用TLC跟踪检测。根据
【申请人】的经验，当反应在常温至60°C条件 下进行时，反应时间控制在10~24h较为适宜。
[0044] 为了使反应更有利地进行，进一步提高目标产物的收率，优选在反应进行之前加 入添加剂，所述的添加剂可以是选自硫酸钠、硫酸镁、氯化钙、五氧化二磷、3A分子筛、4A分 子筛和5A分子筛中的一种或两种以上的组合。当添加剂的选择为上述两种以上物质的组合 时，它们的配比可以为任意配比。
[0045] 本发明所述的制备方法中，各原料的用量配比为化学计量比，在实际操作时，N-羟 基苯并三唑衍生物、有机硼试剂、铜盐和碱性物质的摩尔比通常为1.0:1.0~5.0:0.1~ 2.0。所述有机溶剂的用量以能够溶解参加反应的原料为宜，通常情况下，以lmmol的N-羟基 苯并三唑衍生物为基准，所有参加反应的原料通常用0.5~lmL的有机溶剂来溶解。当反应 需要加入添加剂时，添加剂的加入量通常为N-羟基苯并三唑衍生物物质的量的4.0-10.0 倍。
[0046] 由上述方法制得的是式（I)化合物的粗品，可采用现有常规的纯化方法对其进行 纯化以提高式(I)化合物的纯度。通常采用硅胶薄层色谱或硅胶柱层析，或者是重结晶的方 式进行纯化，在层析时用的洗脱剂和重结晶时用的溶剂相同，可以是由石油醚和乙酸乙酯 按10:1~1:1的体积比组成的混合溶剂，也可以是由正己烷和乙酸乙酯按10:1~1:1的体积 比组成的混合溶剂，还可以是由石油醚和甲醇按100:1~10:1的体积比组成的混合溶剂，又 或者是由二氯甲烷和甲醇按100:1~10:1的体积比组成的混合溶剂。
[0047] 本发明还提供上述式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中 的应用。
[0048] 进一步地，本发明还提供以上述式（I)所示化合物或其药学上可接受的盐为有效 成分制备的抗肿瘤药物。
[0049] 与现有技术相比，本发明提供了一系列结构新颖的N-烯基苯并三唑类氮氧衍生 物，以及它们的制备方法和它们在制药领域中的应用，
【申请人】发现部分N-烯基苯并三唑类 氮氧衍生物具有显著的抗肿瘤活性，为研制新的抗肿瘤药物提供了先导化合物。本发明提 供的制备方法简单易控，周期短。
【具体实施方式】
[0050] 下面结合具体实施例对本发明作进一步的详述，以更好地理解本发明的内容，但 本发明并不限于以下实施例。
[0051 ]以下各实施例中涉及的N-羟基苯并三唑衍生物参照下述合成路线进行合成：
[0053] 在100mL圆底烧瓶中加入反应物Sl(11.655mmol)和乙醇(40mL)，搅拌均匀后注入 水合肼S2( 116.6mmol，lOequiv)，该混合物在回流条件下搅拌反应20h后停止反应使其冷却 到室温;减压浓缩除去反应液中的乙醇，向残留液中加入20mL甲醇，用浓盐酸酸化后有沉淀 物析出，过滤，收集滤液，将滤液减压浓缩后得产物S3(即N-羟基苯并三唑衍生物）。
[0054] 以下实施例中涉及的有机硼试剂参照下述方法一或方法二所示合成路线进行合 成：
[0055] 方法一：
[0057] 其中，
[0058] 他表示氢、Ch的烷基、Ch的烷氧基或Ch的全氟烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子；
[0059] R6表示氢、Ch的烷基、Ch的烷氧基或Ch的全氟烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子；
[0060] 具体的合成方法为：在氮气保护下向100mL三颈烧瓶中加入炔（10.0 mmol)并使其 充分冷却到0°C下，随后加入浓度为1M的二溴硼烷二甲硫醚络合物（12. OmL)，使其在0°C下 搅拌反应2h;将反应液恢复到室温，随后转移注入到30ml混合液(Et20:H20 = 3:l，体积比） 中，0°C下反应15min后停止反应，向反应液中加入40mL乙醚，随后用（3X5mL)水萃取，有机 液加入10mL饱和氯化钠液洗涤，无水硫酸钠干燥后，减压浓缩后得到烯基硼酸产物。
[0061]方法二：
[0063] 其中，
[0064] R5表不氣、Ci~8的烷基、Ci~6的烷氧基或Ci~4的全氣烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子；
[0065] R6表不氣、Ci~8的烷基、Ci~6的烷氧基或Ci~4的全氣烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子；
[0066] R7表不氣、Ci~8的烷基、Ci~6的烷氧基或Ci~4的全氣烷基，或者是未取代、单取代或 ^?取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl-6的烷基或齒原子。
[0067]具体的合成方法为：
[0068] 1)在1 OOmL圆底烧瓶中加入热的甲醇（1 OmL)，随后将反应物S1 (1 Ommo 1)和对甲苯 磺酰肼（lOmmol)加入，搅拌均勾后回流反应2h，冷却到室温下，将析出的固体抽滤，石油醚 洗涤得产物S2;
[0069] 2)向100mL三颈烧瓶中称入反应物S2(leqUiV，即1当量，下同），抽换氮气，于氮气 保护下注入正己烷(3mL/mmo 1)和TMEDA(3mL/mmo 1)，使其冷却到-78°C下，加入浓度为2.5M 的n-BuLi (4equiv)，保持在-78°C下反应lh，然后恢复到室温下搅拌反应2h，再次将反应液 冷却到-78°C下加入异丙醇频哪醇硼酸酯(4eq Uiv)，TLC监测反应完成后，用（3X40mL)乙醚 萃取，有机相用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥后，柱层析分离: PE?E(ii= 1:100~ 1:10)得产物S3;
[0070] 3)在10mL反应瓶中称入反应物S3(0.5mmol)、高碘酸钠（1.5mmol，3equiv)、醋酸铵 (1.5mmol，3equiv)，注入3mL(丙酮:水=1:1)混合液，室温下搅拌反应2d，停止反应，将不溶 物抽滤，滤液用乙醚萃取，饱和氯化钠溶液洗涤、无水硫酸钠干燥，减压浓缩后得产物4。 [0071] 实施例1
[0072]按下述合成路线合成本发明所述的N-烯基苯并三唑类氮氧衍生物。
[0074] 将(：11((^(：)2(0.3111111〇1，5411^)川-羟基苯并三唑底物1(0.3111111〇1)和烯基硼酸4 (0.9mmol)置于反应管中，加入3mL二氧六环，室温下加入吡啶(3mmol，0.24mL);在40°C下搅 拌12~24h，所得反应物加入水（10mL)，用二氯甲烷萃取(2 X lOmL)，合并有机相，用无水硫 酸钠干燥后过滤，减压除去溶剂，硅胶柱层析分离（石油醚/乙酸乙酯= 10:1~1:1，体积 比），得到目标产物5。不同的目标产物及其表征如下：
[0075] 5aa:固体，59mg，96%yield;mp gfgsr.1!! NMR(400MHz，CDCl3):S7.96-7.89(m， 1H),7.63-7.55(m，2H),7.40-7.34(m，lH)，6.90(dd，J=14.0，0.4Hz，lH),6.39-6.29(m, lH),2.21(qd ,J = 7.4Hz,1.5Hz, 2H), 1.56-1.46(m,2H) ,0.95(td ,J = 7.4Hz , 1.9Hz , 3H) ； 13C NMR(100MHz，CDC13): 8132.1,130.7,130.5,124.6,122.7,120.3,115.7,110.5,31.8,22.3， 13.5；IR(neat): 3072,2956,1601,1496,1460,1424,730cm_1；MS(ESI)m/z(M+H) +calcd for [C11H14N3O] +: 204 ? 1137; found: 204 ? 1127 ?其结构式如下：
[0077] 5ab:固体，64mg，82%yield;mp QS-grC.1!! NMR(400MHz，CDCl3):S = 7.95(t，J = 6.6Hz，lH)，7.65-7.55(m，2H)，7.43-7.34(m，lH)，6.93(dd，J=14.0Hz，1.2Hz，lH)，6.37-6?25(m，1H),3.68-3.54(m，3H),2.42-2.25(m，4H)，1.88-1.78(m，2H); 13C 匪R(100MHz， CDCI3):8173.5,132.2,130.8,130.6,124.7,121.1,120.9,115.7,110.5,51.6,33.0,29.1， 24.2；IR(neat): 3085,2952,1730,1672,1423,1188,754cm_1；MS(ESI)m/z(M+H) +calcd for [C13H16N3O3 ] +: 262 ? 1192; found: 262 ? 1181 ?其结构式如下：
[0079] 5ac:固体，43mg，73%yield;mp SS-SYC/H 匪R(500MHz，CDCl3):S7.90(dd，J = 9.5，8.6Hz，lH),7.59-7.50(m，2H),7.36-7.30(m，lH)，5.94-5.87(m，lH),2.24-2.16(m, 3H)，1.86(dt, J = 8.5,4.3Hz，3H);13C NMR(125MHz，CDC13) : 8132.8,131.8,130.4,124.4， 120.2,115.5,111.8,15.5,12.8.IR(neat):3055,2923,1681,1597,1461，1419,738cm-SMS (ESI)m/z(M+H)+calcd for[CiqHi2N30] + : 190 ? 0980;found: 190 ? 0971 ?其结构式如下：
[0081 ] 5ad:固体，30mg，37%yield;mp lOT-lOSr.iH NMR(500MHz，CDCl3):S7.95(dt，J = 7.1,3.0Hz,lH),7.44-7.41(m,3H),7.35-7.28(m,4H),6.71-6.62(m,lH),6.28(t,J= 7.9Hz，lH)，2.35(p，J = 7.5Hz，2H)，1.16-1.09(m，3H);13C 匪R(125MHz，CDC13):S133.5， 133.4,132.8,130.9,130.3,130.1,129.5,129.1,128.9,124.3,115.5,112.3,21.5,14.1; IR(neat): 3042,2962,1594,1454,1414,1160,758cm-1 ;MS(ESI)m/z(M+H) + calcd for [C16H15N3O] +: 266 ? 1293; f ound: 266 ? 1282 ?其结构式如下：
[0083] 5ae:固体，40mg，62%yield;mp ee-e?!：.1!! NMR(400MHz，CDCl3):S7.98-7.94(m， 1H) ,7.65(dd,J = 8.6,0.5Hz,lH),7.57(td,J = 7.2,0.7Hz,lH) ,7.40-7.34(m,lH) ,6.20-6.11(m,lH),2.62(dd,J = 2.4,1.6Hz,2H) ,2.31(dd,J = 3.5,2.4Hz,2H),1.86(dd,J = 5.7, 1 ? 9Hz，2H)，1?74(dd，J = 6?8，4?9Hz，2H);13C NMR(100MHz，CDC13): S134?3，132?6，130?5， 130.4,124.5,121.5,115.7,112.1,27.2,24.2,22.2,21.4；IR(neat):3089,2938,1597, 1494,1458,1417,759cm _1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for [Ci2Hi4N30] +: 216.1137 ； found 216.1127.其结构式如下：
[0085] 5af:固体，44mg，67%yield;mp 匪 R(400MHz，CDCl3):S8.01(d，J = 8.5Hz,lH),7.71(d ,J = 8.6Hz,lH),7.65-7.60(m,lH),7.46-7.41(m,lH),6.20(dt ,J = 4.2, 1.4Hz，lH)，4.43(q，J = 2.8Hz，2H)，4.02(t，J = 5.5Hz，2H)，2.85-2.80(m，2H) ;13C 匪R (100MHz，CDC13): 8132.5,131.9,131.0,130.9,124.9,117.6,116.0,112.0,64.3,64.0， 27.3. IR(neat): 3071,2935,1595,1465,1421,1164,740cm_1；MS(ESI)m/z(M+H) +calcd for [CiiHi2N302] +: 218 ? 0930; found: 218 ? 0920 ?其结构式如下：
[0087] 5ag:固体，44mg，73%yield;mp NMR(400MHz，CDCl3):S7.96(dd，J = 8.5，0.7Hz，lH)，7.72(d，J = 8.6Hz，lH) ,7.64-7.58(m，lH)，7.40(dd，J = 8.0,7.4Hz，lH)， 6.06-5.99(m，lH)，3.07-2.98(m，2H)，2.62(ddq，J=10.3,5.1，2.6Hz，2H)，2.14-2.03(m, 2H) ;13C 匪R(100MHz，CDC13) : 8130.7,132.5,130.8,124.7,116.2,115.7,112.4,32.5， 31.0,21.4； IR(neat):3079,2923,1649,1457,1417,1154,761cm_1；MS(ESI)m/z(M+H) +calcd for [ C11H12N3O] + : 202 ? 0980; found: 202 ? 0972 ?其结构式如下：
[0089] 5ah:固体，20mg，29%yield;mp 匪 R(500MHz，CDCl3):S7.96(d，J = 8.5Hz,lH),7.59-7.54(m,2H),7.39-7.34(m,lH),6.26(t,J=6.7Hz,lH),2.80-2.76(m, 2H) ,2.37(dd,J=l 1.3,6.6Hz,2H),1.85(ddd,J = 7.4,4.7,1.8Hz,2H), 1.79-1.74(m,2H), 1.68(ddd，J=14.8,7. l，4.4Hz，2H) ;13C 匪R(125MHz，CDC13) :S = 139.2，132.9，130.4, 130.3.127.9.124.4.115.6.112.0. 32.5.31.2.26.7.26.3.25.8；IR(neat):3052,2918, 1595，1455，1414，1166，749cm- 1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci3Hi5N30] +:230? 1293;found 230.1284.其结构式如下：
[0091] 5ai:固体，56mg，73%yield;mp lSO-lSrC.1!! NMR(400MHz，DMS0-d6):S8.27(t，J = 12.0Hz，2H)，7.95(d，J = 8.4Hz，2H) ,7.84-7.74(m，3H) ,7.55-7.50(m，lH)，7.26(t，J = 8.8Hz，2H)，7.20(d，J=14.3Hz，lH);13CMMR(100MHz，DMS0-d 6):Sl63.5，161.0，133.1， 131.7.130.6.129.1.129.0. 125.8.121.1.117.3.116.3.116.1.115.5.112.8；IR(neat): 3067，2925，1599，1463，1423，1225，739cm- 1 .MS(ESI )m/z (M+H)+calcd for[Ci4HiiFN30] +: 256 ? 0886;found 256 ? 0876 ?其结构式如下：
[0093] 5aj:固体，52mg，65%yield;mp lei-ie〗！：.1!!匪R(400MHz，CDCl3):S8.03(d，J = 8.5Hz，lH)，7.74-7.66(111，2H) ,7.48-7.41 (m，4H)，7.29(d，J=1.5Hz，lH)，6.95(t，J = 5.8Hz，2H)，3.86(s，3H).13C 匪R(100MHz，CDC13):S159.9，132.4，130.9，130.8，127.8， 126.4,124.9,120.5,117.2,115.9,114.4,110.6,55.3；IR(neat):3064,2925,1603,1460, 1420,1242,738cm _1； MS (ESI )m/z(M+H)+calcd for [Ci5Hi4N302] +: 268.1086 ； found 268.1074.其结构式如下：
[0095] 5al:固体，19mg，34%yield;mp eS-erC.1!! NMR(400MHz，CDCl3):S8.00-7.95(m， 1H) ,7.61-7.55(m,lH) ,7.38(dd,J = 8.1,4.4Hz,2H),6.58(d,J=1.2Hz,lH) ,1.98(s,3H), 1.82(d，J=1.2Hz，3H) ;13C 匪R(100MHz，CDC13) :S138.5，134.0,130.4，129.9，124.4, 115.6,115.6,111.0,22.8,18.7;IR(neat):3050，2914，1656，1564，1497，1420，744cm- 1 ;MS (ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci0Hi2N30] +: 190 ? 0980;found 190 ? 0972 ?其结构式如下：
[0097] 5am:固体，60mg，80%yield;mp lOO-lOrC.1!!匪R(500MHz，CDCl3):S7.95(d，J = 8.5Hz，lH)，7.65-7.57(m，2H)，7.40(dd，J = 8.1，6.9Hz，lH)，6.94(d，J=14.0Hz，lH)，6.39-6.30(m,lH),3.56(t,J = 6.4Hz,2H) ,2.30(q,J = 7.4Hz,2H) ,1.88-1.80(m,2H) ,1.71-1.62 (m，2H).13C 匪R(125MHz，CDC13) :S = 132.2，130.8，130.6，124.7，121.7，120.6，115.8, 110?5，44?6，31?8，29?1，26?3;IR(neat):3079，2940，1496，1461，1422，1309，743cm- 1 ;MS (ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci2Hi5ClN30] +: 252 ? 0904;found 252 ? 0893 ?其结构式如下：
[0099] 5ba:固体，48mg，68%yield;mp ln-llST.1!! NMR(400MHz，CDC13):S = 7.48-7.43 (m，lH)，7.24(d，J = 2.3Hz，lH)，6.86(d，J= 14.0Hz，1H)，6.33(dtd，J = 9.7，7.4,2.2Hz， lH),3.87(d ,J = 2.5Hz,3H), 2.25-2.17(m,2H), 1.57-1.46(m,2H),0.96(td ,J = 7.3,2.5Hz, 3H);13C 匪R(100MHz，CDC13): 8157.8,135.8,131.9,130.0,128.5,128.3,124.1,122.1， 112.3,94.4,56.0,53.4.IR(neat):3074,2930,1670,1510,1446,1272,812cm _1；MS(ESI)m/z (M+H)+calcd for[Ci2Hi6N302] +: 234? 1243;found: 234? 1232 ?其结构式如下：
[0101] 5ca:固体，52mg，76%yield;mp NMR(400MHz，CDC13):S8.34(s，1H)， 7.81(dd，J = 8.8，l.lHz，lH)，7.70(d，J = 8.8Hz，lH)，6.90(d，J= 13.9Hz，1H)，6.49-6.39 (m，lH)，2.26(tt，J= 11.4,5.7Hz，2H)，1.6 卜1.49(m，2H)，1.03-0.94(111，3H) ;13C 匪 R (100MHz,CDC13) : 8132.9,132.8,130.3,125.2,122.0,119.7,117.2,112.1,108.2,31.9, 22 ? 2，13 ? 5; IR(neat): 3085，2959，1509，1438，1384，1283，935cm-1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for [Ci2Hi3N40] +: 229 ? 1090; found: 229 ? 1079 ?其结构式如下：
[0103] 5da:固体，50mg，77%yield;mp lSS-lSfC.1!! NMR(400MHz，CDC13):S7.70(s，1H)， 7.43(q,J = 8.7Hz,2H),6.87(d,J=14.0Hz,lH),6.37-6.27(m,lH) ,2.48(s,3H),2.21(q,J = 7.4Hz，2H)，1.57-1.46(111，2H)，0.96(dd，J = 7.9,6.8Hz，3H);13C NMR(100MHz，CDC13):S 135.4,132.9,130.9,130.8,122.4,120.6,114.6,110.2，32.0,22.4,21.4,13.6;IR(neat): 3074,2926,1668,1507,1435,1283,700cm _1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci2Hi6N30] +: 218.1293; found: 218.1283 ?其结构式如下：
[0105] 5ea:固体，35mg，57%yield;mp 匪R(400MHz，CDCl3):S = 8.65(d，J = 3.8Hz，lH)，8.11 (d，J = 8.6Hz，1H)，7.62(dd，J = 8.6,4.3Hz，1H)，6.94(d，J= 14.0Hz， lH),6.41-6.31(m,lH),2.23(qd ,J = 7.4,1.3Hz,2H), 1.57-1.47(m,3H),0.95(t,J = 7.4Hz, 3H);13C 匪R(100MHz，CDC13):S147.9,141.1，125.5，125.1,123.6,120.4,120.3,31.8, 22 ? 2,13 ? 5 ? IR(neat): 3050,2956,1673,1450,1411,1330,938cm-1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for [CiqHi3N40] + : 205 ? 1089; found: 205 ? 1080 ?其结构式如下：
[0107] 5fa:固体，65mg，80%yield;mp NMR(500MHz，CDC13):S8.29(s，1H)， 7.82(d ,J = 8.9Hz,lH),7.73(dd ,J = 8.8,2.8Hz,1H) ,6.93(dd ,J= 13.9,1. 1Hz , 1H) ,6.46-6.37(m，lH),2.29-2.22(m，2H),1.59-1.49(m，2H),1.01-0.94(m，3H); 13C 匪R(100MHz, CDC13):8133.1，130.1,127.4,124.4,124.3,122.2,120.0,114.4,111.7,31.87,22.2， 13.5；IR(neat): 3081,2968,1606,1447,1324,1132,942cm_1；MS(ESI)m/z(M+H) +calcd for [Ci2Hi3F3N30] + : 272 ? 1011; found: 272 ? 0998 ?其结构式如下：
[0109] 实施例2:
[0110] 按下述合成路线合成本发明所述的N-烯基苯并三唑类氮氧衍生物。
[0112] 将CuS04(0.3mmol，）、N-羟基苯并三唑底物1 (0.3mmol)和烯基硼酸4(0.9_〇1)置 于反应管中，加入3mL 1，2-二氯乙烷，室温下加入碳酸钾（3mmol);在25°C下搅拌12~24h， 所得反应物加入水（10mL)，用二氯甲烷萃取(2X10mL)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥后 过滤，减压除去溶剂，硅胶柱层析分离（正己烷/乙酸乙酯= 10:1~1:1，体积比），得到目标 产物5。不同的目标产物及其表征如下：
[0113] 5gn:固体，28mg，35%yield;mp 12卜以〗！：.1!!匪R(500MHz，CDCl3):S7.68(d，J = 15.0Hz，1H)，7.27-7.22(m，5H)，7.15(d，J=15.0Hz，1H)，5.26(s，lH)，4.98(s，lH)，2.38(s， 3H)，2?26(s，3H); 13C NMR(125MHz，CDC13): S = 140?1，138?5，137?2，131?9，130?1，129?5， 127.1,122.3,120.8,114.0,20.5,17.4；IR(neat):3086,2965,1601,1450,1415,1278, 746cm-1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci6Hi6N30] + :266? 1293;found:266? 1281 ?其结构式如 下：
[0115] 5go:固体，31mg，45%yield;mp 匪 R(500MHz，CDCl3):S7.69(d，J = 7.5Hz,lH),7.21(d J = 7.5Hz,1H),2.41(s,3H),2.30(s,3H),2.14(s,3H),1.66(s,6H)；13C NMR(125MHz，CDC13): 8138.4,132.6,132.3,128.8,127.0,121.2,114.6,20.0,18.2,16.5， 11.3；IR(neat): 3060,2941,1623,1546,1463,1412,764cm_1；MS(ESI)m/z(M+H) +calcd for [Ci3Hi8N30] + : 232 ? 1449; found: 232 ? 1437 ?其结构式如下：
[0117] 5gp:固体，44mg，48%yield;mp gfgsr.1!!匪 R(500MHz，CDCl3):S7.68(d，J = 14.8Hz，lH)，7.27-7.09(m，4H)，6.85(dd，J=3.3，1.5Hz，lH)，6.83-6.80(m，lH)，2.61(q，J = 13.4Hz，2H)，2.38(s，3H)，2.30(s，3H)，2.12(s，3H)，0.96(t，J=13.4Hz，3H) ;13C 匪R (125MHz，CDC13): 8146.0,144.6,140.6,134.5,132.5,130.1,128.4,126.8,125.8,123.8， 115?0，22?5，20?1，16?1，14?6，13?2;IR(neat):3040，2936，1593，1512，1447，1323，739cm- 1; MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci9H22N30] + : 308 ? 1763;found: 308 ? 1753 ?其结构式如下：
[0119] 5gq:固体，38mg，50%yield;mp 匪R(500MHz，CDCl3):S7.72(d，J = 7.5Hz,lH),7.18(d,J=7.5Hz,lH),2.41(s,3H),2.32-2.28(m,5H),1.95-1.92(m,2H),1.68 (s，3H)，1.65-1.63(m，4H) ;13C NMR( 125MHz，CDC13):8 = 138.5,132.6,130.7,129.8,120.9， 116.9,113.8,31.5,27.0,24.3,23.9,20.0,17.5,16.0；IR(neat):3080,2947,1602,1457, 1420，1205，762cm-1 ;MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci5H20N30] +:258? 1606;found:258? 1613? 其结构式如下：
[0121] 5ho:固体，35mg，46%yield;mp 12卜匪R(500MHz，CDCl3):S7.67(d，J = 15.0Hz，1H)，7.16(d，J=15.0Hz，1H)，2.26(s，3H)，2.09(s，3H)，1.66(s，6H); 13C 匪R (125MHz，CDC13) :S142.1,132.9,129.2,127.0,126.2,116.8,116.0,22.5,16.8,10.8; IR (neat) : 3046,2917,1650,1545,1453,1380,733cm-1 ;MS(ESI)m/z(M+H) + calcd for [C12H15CIN3O] + : 252 ? 0904; found: 252 ? 0909 ?其结构式如下：
L0123J 5io:固体，24mg，30%yield;mp 100-101°C/H NMR(500MHz，CDC13):S7.14(s，1H)， 2.34(s，3H)，2.29(s，3H)，2.09(s，3H)，1.68(s，6H) ;13C 匪R(125MHz，CDC13):S140.8， 138.9,132.9,128.2,126.4,120.8,116.2,20.8,19.6,17.2,10.8.IR(neat):3068,2980, 1605,1545,1460,1325,743cm _1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci3Hi7ClN30]+: 266.1060 ； found: 266.1051.其结构式如下：
[0125] 5」〇:固体，2611^，35%7161(1;11^123-124。(：. 111匪1?(5001泡，〇0(：13):8 = 8.46(8， 1H)，3.95(s，lH)，2.60(s，3H)，2.41(s，3H)，1.56(s，6H);13C NMR(125MHz，CDC13) :S161.8， 146.0. 132.9.128.6.128.0.108.2.60.8.18.2.13.2.10.8；IR(neat):3060,2946,1610, 1485,1324,1250,721cm _1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for [Ci2Hi7N402] +: 249.1352 ； found: 249.1342.其结构式如下：
[0127] 5ko:固体，18mg，19%yield;mp NMR(500MHz，CDC13):S7.54-7.39 (m，5H)，2.45(s，3H)，2.12(s，3H)，1.67(s，6H) ;13C 匪R(125MHz，CDC13):S150.0，146.8， 140.5.132.9.131.0. 128.6.127.9.127.0.124.5.17.2.17.3.10.8；IR(neat):3086,2980, 1564,1425,1235,1127,696cm _1；MS(ESI)m/z(M+H)+calcd for[Ci7Hi8ClN40]+: 329.1169 ； found: 329.1156.其结构式如下：
[0129] 实验例1:本发明所述苯并三唑类氮氧衍生物对多种人肿瘤株进行体外抑制活性 实验：
[0130] (1)细胞培养：将124、]\?；(：-803、1^?62、％1-11460、51(0￥3、7702细胞培养于含10% (体积比）胎牛血清和1 % (体积比）双抗(含青霉素和链霉素）的DMEM培养基，在温度37 °C、 5 % C02及95 %空气的培养箱中培养，隔天换液。待细胞长满后进行传代，冻存。
[0131] (2)种板:取处于对数生长期的细胞，去掉旧培养基，用PBS洗涤两次，胰蛋白酶消 化细胞，待细胞变圆后加入新的培养基终止细胞消化并吹打悬浮细胞，制成单个细胞悬液。 取适量的细胞悬液，加入一定量的培养基稀释，接种到96孔板中，每孔ISOiiL，每孔细胞数为 20000-40000〇
[0132] (3)加药:于种有肿瘤细胞的96孔板中加入待测样品，每孔20此，使样品的最终浓 度为10yM，进行初筛。根据初筛的结果，对化合物设置不同的浓度梯度进行筛选，每组设置5 个复孔。加化合物后放C〇2培养箱培养48h，每孔加入10yL配好的MTT溶液，放C0 2培养箱继续 培养4~6h。
[0133] (4)测试:吸弃96孔板内的培养基，加入100yL的DMS0,放摇床上震荡5~lOmin，使 结晶的甲瓒完全溶解。用酶标仪以570nm的吸收波长，630nm的参比波长双波长测定吸光度 (0D)值，计算抑制率。抑制率=(1_样品组0D值/空白组0D值）X 100%，用SPSS软件分别计算 各化合物对不同肿瘤细胞株的IC5Q值。其测试结果如下表1所示：
[0134] 表1:
【主权项】
1. 下式(I)所示化合物或其药学上可接受的盐：其中： X表示碳或氮原子； R读不氨、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或面原子，或者是未取代、单取代 或二取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或面原子； R2表不氨、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或面原子，或者是未取代、单取代 或二取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或面原子； R3表不氨、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或面原子，或者是未取代、单取代 或二取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或面原子； R4表不氨、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或面原子，或者是未取代、单取代 或二取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基面原子； 化表示氨、Cl~8的烷基、Cl~6的烷氧基或Cl~4的全氣烷基，或者是未取代、单取代或二取代 的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、CW5的烷基或面原子； Rs表示氨、Cl~8的烷基、Cl~6的烷氧基或Cl~4的全氣烷基，或者是未取代、单取代或二取代 的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、CW5的烷基或面原子； 化表示氨、Cl~8的烷基、Cl~6的烷氧基或Cl~4的全氣烷基，或者是未取代、单取代或二取代 的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、CW5的烷基或面原子。2. 权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于:取N-径基苯并Ξ挫衍生物、有机棚 试剂、铜盐和碱性物质，置于有机溶剂中，在氧气存在的条件下反应，制得目标物粗品；其 中： 所述的N-径基苯并Ξ挫衍生物具有下述(II)所示结构：其中， X表示碳或氮原子； R读示氨、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或面原子，或者是未取代、单取代 或二取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或面原子； R2表不氨、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或面原子，或者是未取代、单取代 或二取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或面原子； R3表示氨、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或面原子，或者是未取代、单取代 或二取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基或面原子； R4表不氨、Cl~4的烷基、Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基或面原子，或者是未取代、单取代 或二取代的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、Cl~4的烷基面原子； 所述的有机棚试剂具有下述(III)所示结构：其中， 化表不氨、Cl~8的烷基、Cl-6的烷氧基或打~4的全氣烷基，或者是未取代、单取代或二取代 的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、CW5的烷基或面原子； Rs表不氨、Cl~8的烷基、Cl-6的烷氧基或打~4的全氣烷基，或者是未取代、单取代或二取代 的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、CW5的烷基或面原子； 化表不氨、Cl~8的烷基、Cl-6的烷氧基或打~4的全氣烷基，或者是未取代、单取代或二取代 的苯基，其中，取代基为Cl~4的烷氧基、Cl~4的全氣烷基、CW5的烷基或面原子。3. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于:所述的铜盐为选自漠化铜、舰化铜、氯 化铜、硫酸铜、醋酸酬、硝酸铜、Ξ氣甲横酸铜、漠化亚铜、舰化亚铜和氯化亚铜中的一种或 两种W上的组合。4. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于:所述的碱性物质为选自憐酸Ξ钟、氨 氧化钢、氨氧化钟、氨氧化巧、氨氧化飽、碳酸飽，碳酸钟、叔下醇钟、叔下醇钢、氣化钟、化 晚、Ξ乙胺和N，N-二异丙基乙基胺中的一种或两种W上的组合。5. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于:所述的有机溶剂为选自苯、甲苯、环己 烧、石油酸、四氯化碳、四氨巧喃、乙酸乙醋、乙腊、乙酸、二氯甲烧、丙酬、Ξ氯甲烧、正己烧 和二氧六环中一种或两种W上的组合。6. 根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于:反应在低于80°C的条件下进行。7. 根据权利要求2~7中任一项所述的制备方法，其特征在于:在反应进行之前加入添 加剂，所述的添加剂为选自硫酸钢、硫酸儀、氯化巧、五氧化二憐、3A分子筛、4A分子筛和5A 分子筛中的一种或两种W上的组合。8. 根据权利要求2~7中任一项所述的制备方法，其特征在于:还包括纯化步骤:具体是 将制得的目标物粗品进行硅胶薄层色谱或硅胶柱层析，或者是重结晶，得到纯化后的目标 物。9. 权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物中的应用。 10. W权利要求1所述化合物或其药学上可接受的盐为有效成分制备的抗肿瘤药物。
【文档编号】C07D249/18GK105968059SQ201610317256
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年5月12日
【发明人】莫冬亮, 石维敏, 马小盼, 闭红艳, 苏桂发, 陈春华, 邹宁
【申请人】广西师范大学