一种新型MoS2QDs@MIPs分子印迹聚合物及制备方法与流程

文档序号:17989994发布日期:2019-06-22 00:42阅读:744来源:国知局
一种新型MoS2 QDs@MIPs分子印迹聚合物及制备方法与流程

本发明属于分子印迹技术和生物分析检测技术领域,涉及一种用于抗生素检测的新型分子印迹聚合物及其制备方法,尤其涉及一种新型mos2qds@mips分子印迹聚合物及制备方法。



背景技术:

近年来,随着社会的发展,科技、医疗技术的不断进步,抗生素正在被广泛使用,随之也出现了抗生素滥用的问题,因滥用抗生素而产生的耐药菌以及生物体、人体和环境中残留的部分抗生素已经引发了一系列安全方面的问题,因此如何消除抗生素的污染及残留就成为了国内外学者研究的热点之一。由于生物体、人体和环境样品中成分非常复杂,而残留在其中的抗生素类物质含量又相对偏低,在对其进行检测的过程中存在较多问题,如检测方法的灵敏度、选择性、准确性和稳定性均较差等问题。

自1998年alivisatos等对cdse量子点作为生物标记物进行研究后,半导体量子点在分析检测中的应用得到很大发展。量子点(quantumdots,qds)由于存在显著的尺寸效应、表面效应、量子效应,具有紫外光吸收性、超快速光学非线性响应、光致发光及强抗光氧化性等独特的光电性能,因此得到了广泛的应用。但是单一量子点荧光探针检测易受环境条件的干扰,存在选择性差、稳定性有限的缺点。为解决此问题,将量子点与其他技术相结合的研究逐渐增多。

分子印迹技术(molecularimprintingtechnique,mit)是一种制备对某一特定分子具有独特选择性识别功能的聚合物的技术,制备的聚合物称为分子印迹聚合物(molecularlyimprintedpolymers,mip)。将量子点优异的光学性能和分子印迹技术的高选择性结合起来,利用mip极高的目标靶向定位富集能力恰好弥补了量子点荧光探针选择性差的缺点,可以构建出一种基于分子印迹功能化量子点(qds@mip)的新型光学传感器。分子印迹聚合物材料可以针对目标物“量体裁衣”定制,实现对目标分子的专一识别,可与天然的生物识别系统(酶与底物)相媲美,具有制备简单、稳定性好(耐酸碱、高温、高压、有机溶剂及苛刻环境)、寿命长、易保存、造价低廉等特点,在固相萃取、手性分离、模拟生物抗体、催化及有机合成等方面得到了广泛的应用,是解决环境、生物等复杂体系内特定目标分子高选择性识别的简捷、可靠手段。

阿米卡星是氨基糖苷类抗生素,抗菌谱与庆大霉素相似,临床主要用于对庆大霉素,卡那霉素耐药的革兰阴性杆菌如大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌引起的各种感染,其不良反应主要是引起耳蜗神经损害,对耳、肾毒性与庆大霉素相仿。阿米卡星作为抗生素在被广泛应用的过程中,其对环境、生物体和人体也存在一定的危害性。现有检测阿米卡星的方法虽然有很多种,如液相色谱法、比色法、分子印迹spr纳米传感器法,但液相色谱法的缺点是如果流动相从注射到检测器的流动模式发生变化,任何扩散和保留分离的材料将显著导致色谱峰的扩大和色谱柱效率的降低;胶束电动色谱,存在气泡产生,易于断裂,检测灵敏度低,填料种类有限等问题,且检测成本高、时间长;而比色法,其缺点是干扰严重,被测组分纯度较高,灵敏度较低;而对于采用分子印迹spr纳米传感器的检测方法,虽然适体的出现提供了一种快速检测抗生素的新手段,但这一过程比上述高效液相色谱法和比色法更为复杂。

目前,越来越多的研究人员已经开始使用分子印迹来进行抗生素的检测。但是现有技术中,尚未有将量子点优异的光学性能和分子印迹技术的高选择性结合起来对阿米卡星进行检测的方法报道。

综上,现有技术存在的主要问题有:(1)单一量子点荧光探针检测易受环境条件的干扰,存在选择性差、稳定性有限的缺点;(2)单一分子印迹聚合物技术具有高选择性,但多不具备优异的光学性能;(3)现有阿米卡星检测方法成本高、时间长、灵敏度差。

因此,研究能将量子点优异的光学性能和分子印迹技术的高选择性结合起来对阿米卡星进行快速准确检测的方法,在保障人类健康、食品安全、环境保护等方面均具有重要意义和前景。



技术实现要素:

为了克服现有技术的不足,解决上述现有技术中存在的问题,本发明的目的在于提供一种新型分子印迹聚合物mos2qds@mips的制备方法,先制备量子点mos2qds,然后再通过将抗生素阿米卡星嵌入到二氧化硅壳中包裹在mos2qds核上从而形成分子印迹聚合物mos2qds@mips,该材料具有良好的光稳定性,对被检测物质阿米卡星具有高选择性,同时具有较短的响应时间,可立即进行响应检测。

本发明采用的技术方案是:一种新型分子印迹聚合物mos2qds@mips的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:首先制备量子点mos2qds,然后再通过将阿米卡星嵌入到二氧化硅壳中包裹在mos2qds核上得到量子点复合物,最后将量子点复合物中阿米卡星洗脱下来得到具有阿米卡星空间印迹位点的分子印迹聚合物mos2qds@mips。

进一步,所述分子印迹聚合物mos2qds@mips的制备方法,其特征在于,具体包括以下步骤:

s1.mos2qds的制备

将l-半胱氨酸溶于去离子水中,超声得到溶液a;

将na2mopo4·2h2o溶于去离子水,超声,用1mol/l的hcl溶液调节ph至5.8-6.5,得到溶液b;

将溶液b滴加于溶液a中,超声,得混合液,再将混合液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中,在200ºc下反应36h。待溶液自然冷却后,先用滤纸过滤,再用0.22μm的滤膜过滤,最后用截流分子量为2000的透析袋透析得到量子点mos2qds。

s2.mos2qds@mips的制备

将量子点mos2qds6ml加入到100ml烧杯中,在机械搅拌下加入环己烷15ml、曲拉通x-1002.8-3.6ml,3-氨丙基三乙氧基硅烷40μl,阿米卡星10-15.0mg,氨水50-300μl和正硅酸乙酯100μl,密封,搅拌过夜。将搅拌后得到的溶液用丙酮破乳,除去杂质后离心,弃去上清液,得到的沉淀物即为量子点复合物,将量子点复合物以乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液作为洗脱液洗涤,高速离心分离,将离心得到的沉淀物再用乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液反复洗涤,直至上清液检测不到阿米卡星为止,高速离心,最后再将所得沉淀物置于烘箱中80℃干燥12h,即可得到mos2qds@mips粉末。

进一步,在步骤s2中,所述离心具体为用高速离心机2000转离心2min。

进一步,在步骤s2中,所述检测具体为用紫外可见分光光度计进行检测。

进一步,步骤s1的操作如下:

s1.mos2qds的制备

将l-半胱氨酸0.5g溶于去离子水50ml,超声10min得到溶液a;

将na2mopo4·2h2o0.25g溶于去离子水25ml,超声10min,用1mol/l的hcl调节ph至5.8-6.5,得到溶液b;

将溶液b滴加于溶液a中超声10min,得混合液,再将混合液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中,在200ºc下反应36h。待溶液自然冷却后,先用滤纸过滤,再用0.22μm的滤膜过滤,最后用截流分子量为2000的透析袋透析得到mos2量子点(mos2qds)。

本发明还提供了一种新型分子印迹聚合物mos2qds@mips,其特征在于:由mos2qds纳米颗粒位于mips球内构成。

进一步,所述mos2qds纳米颗粒的粒径为1-10nm。

进一步,所述mips球的粒径为15-50nm。

进一步,所述分子印迹聚合物mos2qds@mips由上述分子印迹聚合物mos2qds@mips的制备方法制得。

优选地,所述分子印迹聚合物mos2qds@mips由以下制备方法制得:

s1.mos2qds的制备

将l-半胱氨酸0.5g溶于去离子水50ml,超声10min得到溶液a;

将na2mopo4·2h2o0.25g溶于去离子水25ml,超声10min,用1mol/l的hcl调节ph至5.8-6.5,得到溶液b;

将溶液b滴加于溶液a中超声10min,得混合液,再将混合液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中,在200ºc下反应36h。待溶液自然冷却后,先用滤纸过滤,再用0.22μm的滤膜过滤,最后用截流分子量为2000的透析袋透析得到mos2量子点(mos2qds)。

s2.mos2qds@mips的制备

将量子点mos2qds6ml加入到100ml烧杯中,在机械搅拌下加入环己烷15ml、曲拉通x-1002.8-3.6ml,3-氨丙基三乙氧基硅烷40μl,阿米卡星10-15.0mg,氨水50-300μl和正硅酸乙酯100μl,密封,搅拌过夜。将搅拌后得到的溶液用丙酮破乳,除去杂质后离心,弃去上清液,得到的沉淀物即为量子点复合物,将量子点复合物以乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液作为洗脱液洗涤,高速离心机2000转2min离心分离,将离心得到的沉淀物再用乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液反复洗涤,直至上清液用紫外可见分光光度计检测不到阿米卡星为止,高速离心机2000转2min离心,最后再将所得沉淀物置于烘箱中80℃干燥12h,即可得到mos2qds@mips粉末。

本发明还提供了一种新型分子印迹聚合物mos2qds@mips检测抗生素阿米卡星的用途,可在抗生素阿米卡星含量检测中应用,如检测环境、食品等样品中的残留的阿米卡星。

本发明的原理是:

本发明的mos2qds@mips分子印迹聚合物是将抗生素嵌入到二氧化硅壳中包裹在mos2qds核上从而形成分子印迹聚合物,该材料具有高的选择性。

本发明mos2qds@mips合成过程中,选择曲拉通作为表面活性剂、环己烷作为连续相、氨水作为催化剂、3-氨丙基三乙氧基硅烷作为功能单体、正硅酸乙酯作为交联剂,模板分子为抗生素阿米卡星。在本发明制备方法中,量子点分散在环己烷和曲拉通中形成凝胶,由正硅酸乙酯进行水解,氨水做催化剂在量子点的表面上形成二氧化硅层。在聚合期间的反应中,3-氨丙基三乙氧基硅烷中的氨基(-nh2)和模板分子的官能(-oh和-nh2)基团是通过氢键键合的。因此,抗生素成功地嵌入到二氧化硅包裹的mos2qds中。在洗脱过程中,模板分子和3-氨丙基三乙氧基硅烷中的氢键被中断,留下硅基质中的抗生素印迹位点。该印迹位点的尺寸大小,结构和抗生素的尺寸大小和结构一致,因此可以特异性检测抗生素。

本发明的有益效果。

1、本发明的mos2qds@mips用于抗生素检测时,检测成本低、检测灵敏度高、检测速度快,检测效率高。

2、本发明的mos2qds@mips对被分析物质具有特异选择性,在几种类似的抗生素硫酸链霉素(ss)、硫酸卡那霉素(ks)、硫酸妥布霉素(ts)、硫酸庆大霉素(qs)、硫酸核糖霉素(hs)和硫酸新霉素(ns)中可实现对阿米卡星的高认可度,能够实现选择性检测。

3、本发明的mos2qds@mips能够在18天内保持较为稳定的光学性能,具有良好的稳定性,易于保存。

4、本发明的mos2qds@mips的制备方法简单易行、成本低廉。

附图说明

图1(a)为本发明实施例1制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图;

图1(b)为本发明对比例1制备的mos2qds@nips非分子印迹聚合物的透射电镜图;

图1(c)为本发明实施例2制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图;

图1(d)为本发明实施例3制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图;

图1(e)为本发明实施例4制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图;

图1(f)为本发明实施例5制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图;

图2(a)为本发明实施例1制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物与抗生素相互作用的荧光光谱图;

图2(b)为本发明实施例1制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物与抗生素相互作用的线性拟合图;

图3(a)为本发明对比例1制备的mos2qds@nips非分子印迹聚合物与抗生素相互作用的荧光光谱图;

图3(b)为本发明对比例1制备的mos2qds@nips非分子印迹聚合物与抗生素相互作用的线性拟合图;

图4为本发明实施例1制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物在室温下的荧光稳定性图;

图5为本发明实施例1制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物对几种类似抗生素的选择性响应图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的技术方案进行详细说明,但本发明的内容并不局限于此。

实施例1:

mos2qds@mips的制备

s1.mos2qds的制备

将l-半胱氨酸0.5g溶于去离子水50ml,超声10min得到溶液a。

将na2mopo4·2h2o0.25g溶于去离子水25ml,超声10min,用1mol/l的hcl调节ph至5.8-6.5,得到溶液b。

将溶液b滴加于溶液a中超声10min,得混合液,再将混合液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中,在200ºc下反应36h。待溶液自然冷却后,先用滤纸过滤,再用0.22μm的滤膜过滤,最后用截流分子量为2000的透析袋透析得到mos2量子点(mos2qds)。

s2.mos2qds@mips的制备

将量子点mos2qds6ml加入到100ml烧杯中,在机械搅拌下加入环己烷15ml、曲拉通x-1002.8ml、3-氨丙基三乙氧基硅烷40μl、阿米卡星12mg、氨水200μl和正硅酸乙酯100μl,密封,搅拌过夜。将搅拌后得到的溶液用丙酮破乳,除去杂质后用高速离心机2000转2min离心,弃去上清液,得到的沉淀物即为量子点复合物,将量子点复合物以乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液作为洗脱液洗涤,高速离心机2000转2min离心分离,将离心得到的沉淀物再用乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液反复洗涤,直至上清液用紫外可见分光光度计检测不到阿米卡星为止,高速离心机2000转2min离心,最后再将所得沉淀物置于烘箱中80℃干燥12h,即可得到mos2qds@mips分子印迹聚合物粉末。

由实施例1制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图见图1(a)。

对比例1

非分子印迹聚合物(mos2qds@nips)的制备:

使用与实施例1相同的方法制备,但不添加模板分子阿米卡星。

将l-半胱氨酸0.5g溶于去离子水50ml,超声10min得到溶液a。

将na2mopo4·2h2o0.25g溶于去离子水25ml,超声10min,用1mol/l的hcl调节ph至5.8-6.5,得到溶液b。

将溶液b滴加于溶液a中超声10min,得混合液,再将混合液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中,在200ºc下反应36h。待溶液自然冷却后,先用滤纸过滤,再用0.22μm的滤膜过滤,最后用截流分子量为2000的透析袋透析得到mos2量子点(mos2qds)。

s2.mos2qds@nips的制备

将量子点mos2qds6ml加入到100ml烧杯中,在机械搅拌下加入环己烷15ml、曲拉通x-1002.8ml、3-氨丙基三乙氧基硅烷40μl、氨水200μl和正硅酸乙酯100μl,密封,搅拌过夜。将搅拌后得到的溶液用丙酮破乳,除去杂质后用高速离心机2000转2min离心,弃去上清液,得到的沉淀物即为量子点复合物,将量子点复合物以乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液作为洗脱液洗涤,高速离心机2000转2min离心分离,将离心得到的沉淀物再用乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液反复洗涤,直至上清液用紫外可见分光光度计检测不到阿米卡星为止,高速离心机2000转2min离心,最后再将所得沉淀物置于烘箱中80℃干燥12h,即可得到mos2qds@nips非分子印迹聚合物粉末。

由对比例1制备的mos2qds@nips非分子印迹聚合物的透射电镜图见图1(b)。

实施例2:

mos2qds@mips的制备

s1.mos2qds的制备

将l-半胱氨酸0.5g溶于去离子水50ml,超声10min得到溶液a。

将na2mopo4·2h2o0.25g溶于去离子水25ml,超声10min,用1mol/l的hcl调节ph至5.8-6.5,得到溶液b。

将溶液b滴加于溶液a中超声10min,得混合液,再将混合液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中,在200ºc下反应36h。待溶液自然冷却后,先用滤纸过滤,再用0.22μm的滤膜过滤,最后用截流分子量为2000的透析袋透析得到mos2量子点(mos2qds)。

s2.mos2qds@mips的制备

将量子点mos2qds6ml加入到100ml烧杯中,在机械搅拌下加入环己烷15ml、曲拉通x-1003.6ml、3-氨丙基三乙氧基硅烷40μl、阿米卡星10mg、氨水200μl和正硅酸乙酯100μl,密封,搅拌过夜。将搅拌后得到的溶液用丙酮破乳,除去杂质后用高速离心机2000转2min离心,弃去上清液,得到的沉淀物即为量子点复合物,将量子点复合物以乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液作为洗脱液洗涤,高速离心机2000转2min离心分离,将离心得到的沉淀物再用乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液反复洗涤,直至上清液用紫外可见分光光度计检测不到阿米卡星为止,高速离心机2000转2min离心,最后再将所得沉淀物置于烘箱中80℃干燥12h,即可得到mos2qds@mips分子印迹聚合物粉末。

由实施例2制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图见图1(c)。

实施例3:

mos2qds@mips的制备

s1.mos2qds的制备

将l-半胱氨酸0.5g溶于去离子水50ml,超声10min得到溶液a。

将na2mopo4·2h2o0.25g溶于去离子水25ml,超声10min,用1mol/l的hcl调节ph至5.8-6.5,得到溶液b。

将溶液b滴加于溶液a中超声10min,得混合液,再将混合液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中,在200ºc下反应36h。待溶液自然冷却后,先用滤纸过滤,再用0.22μm的滤膜过滤,最后用截流分子量为2000的透析袋透析得到mos2量子点(mos2qds)。

s2.mos2qds@mips的制备

将量子点mos2qds6ml加入到100ml烧杯中,在机械搅拌下加入环己烷15ml、曲拉通x-1003.0ml、3-氨丙基三乙氧基硅烷40μl、阿米卡星15.0mg、氨水200μl和正硅酸乙酯100μl,密封,搅拌过夜。将搅拌后得到的溶液用丙酮破乳,除去杂质后用高速离心机2000转2min离心,弃去上清液,得到的沉淀物即为量子点复合物,将量子点复合物以乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液作为洗脱液洗涤,高速离心机2000转2min离心分离,将离心得到的沉淀物再用乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液反复洗涤,直至上清液用紫外可见分光光度计检测不到阿米卡星为止,高速离心机2000转2min离心,最后再将所得沉淀物置于烘箱中80℃干燥12h,即可得到mos2qds@mips分子印迹聚合物粉末。

由实施例3制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图见图1(d)。

实施例4:

mos2qds@mips的制备

s1.mos2qds的制备

将l-半胱氨酸0.5g溶于去离子水50ml,超声10min得到溶液a。

将na2mopo4·2h2o0.25g溶于去离子水25ml,超声10min,用1mol/l的hcl调节ph至5.8-6.5,得到溶液b。

将溶液b滴加于溶液a中超声10min,得混合液,再将混合液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中,在200ºc下反应36h。待溶液自然冷却后,先用滤纸过滤,再用0.22μm的滤膜过滤,最后用截流分子量为2000的透析袋透析得到mos2量子点(mos2qds)。

s2.mos2qds@mips的制备

将量子点mos2qds6ml加入到100ml烧杯中,在机械搅拌下加入环己烷15ml、曲拉通x-1002.8ml、3-氨丙基三乙氧基硅烷40μl、阿米卡星12.0mg、氨水50μl和正硅酸乙酯100μl,密封,搅拌过夜。将搅拌后得到的溶液用丙酮破乳,除去杂质后用高速离心机2000转2min离心,弃去上清液,得到的沉淀物即为量子点复合物,将量子点复合物以乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液作为洗脱液洗涤,高速离心机2000转2min离心分离,将离心得到的沉淀物再用乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液反复洗涤,直至上清液用紫外可见分光光度计检测不到阿米卡星为止,高速离心机2000转2min离心,最后再将所得沉淀物置于烘箱中80℃干燥12h,即可得到mos2qds@mips分子印迹聚合物粉末。

由实施例4制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图见图1(e)。

实施例5:

mos2qds@mips的制备

s1.mos2qds的制备

将l-半胱氨酸0.5g溶于去离子水50ml,超声10min得到溶液a。

将na2mopo4·2h2o0.25g溶于去离子水25ml,超声10min,用1mol/l的hcl调节ph至5.8-6.5,得到溶液b。

将溶液b滴加于溶液a中超声10min,得混合液,再将混合液转移至聚四氟乙烯高压反应釜中,在200ºc下反应36h。待溶液自然冷却后,先用滤纸过滤,再用0.22μm的滤膜过滤,最后用截流分子量为2000的透析袋透析得到mos2量子点(mos2qds)。

s2.mos2qds@mips的制备

将量子点mos2qds6ml加入到100ml烧杯中,在机械搅拌下加入环己烷15ml、曲拉通x-1002.8ml、3-氨丙基三乙氧基硅烷40μl、阿米卡星12.0mg、氨水100μl和正硅酸乙酯100μl,密封,搅拌过夜。将搅拌后得到的溶液用丙酮破乳,除去杂质后用高速离心机2000转2min离心,弃去上清液,得到的沉淀物即为量子点复合物,将量子点复合物以乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液作为洗脱液洗涤,高速离心机2000转2min离心分离,将离心得到的沉淀物再用乙醇︰乙腈的体积比为4︰1的乙醇/乙腈溶液反复洗涤,直至上清液用紫外可见分光光度计检测不到阿米卡星为止,高速离心机2000转2min离心,最后再将所得沉淀物置于烘箱中80℃干燥12h,即可得到mos2qds@mips分子印迹聚合物粉末。

由实施例5制备的mos2qds@mips分子印迹聚合物的透射电镜图见图1(f)。

实施例6:

(1)mos2qds@mips的性能测试

向10ml的磷酸缓冲液(ph=7.0)中加入由实施例1所得的mos2qds@mips分子印迹聚合物2.0mg,超声振动20分钟。向16个10ml的比色管中分别加入1ml上述溶液,并分别加入一系列不同浓度的阿米卡星标准溶液1ml,阿米卡星标准溶液的浓度依次为0.5nmol/l、1nmol/l、2nmol/l、5nmol/l、10nmol/l、15nmol/l、20nmol/l、30nmol/l、40nmol/l、50nmol/l、60nmol/l、80nmol/l、100nmol/l、200nmol/l、500nmol/l和1000nmol/l。混合均匀。采用荧光分光光度计将激发波长调整为350nm,光谱范围选在390和560nm,测定上述一系列溶液的荧光发射光谱。观察不同浓度阿米卡星对应体系的荧光光谱,观察其荧光强度是否产生猝灭,以此来确定mos2qds@mips是否具有选择性能。mos2qds@mips与抗生素的相互作用的荧光光谱图,见图2(a);同时绘制荧光强度比值随阿米卡星浓度变化的线性拟合图,见图2(b)。

由图2(a)和图2(b)可知,在相同的检测条件下,mos2qds@mips分子印迹聚合物对模板分子阿米卡星有明显的荧光响应,体系荧光产生猝灭,即mos2qds@mips对模板分子阿米卡星有特异性识别作用。在阿米卡星浓度为0.5-1000nmol/l时,荧光强度比值与阿米卡星的浓度呈线性关系,线性方程为:y=1.208+0.0150x,r2=0.9948,由此可知,荧光强度比值与阿米卡星线性关系良好。经测试,mos2qds@mips分子印迹聚合物对阿米卡星的检测限为0.23nmol/l。

(2)mos2qds@nips的性能检测

向10ml的磷酸缓冲液(ph=7.0)中加入由对比例1所得的mos2qds@nips非分子印迹聚合物2.0mg,超声振动20分钟。向9个10ml的比色管中分别加入1ml上述溶液,并分别加入一系列不同浓度的阿米卡星标准溶液1ml,阿米卡星标准溶液的浓度依次为0.5nmol/l、1nmol/l、2nmol/l、4nmol/l、6nmol/l、8nmol/l、10nmol/l、12nmol/l、15nmol/l。混合均匀。采用荧光分光光度计将激发波长调整为350nm,光谱范围选在390和560nm,测定上述一系列溶液的荧光发射光谱。观察不同浓度阿米卡星对应体系的荧光光谱,观察其荧光强度是否产生猝灭,以此来确定mos2qds@nips是否具有选择性能。mos2qds@nips与抗生素的相互作用的荧光光谱图,见图3(a);同时绘制荧光强度比值随阿米卡星浓度变化的线性拟合图,见图3(b)。

由图3(a)可以看出,体系荧光强度几乎不变,由图3(a)和图3(b)可知,在相同的检测条件下,mos2qds@nips非分子印迹聚合物对模板分子阿米卡星没有明显的荧光响应,即对体系荧光不产生猝灭。

实施例7:

mos2qds@mips的光学稳定性

为了测试mos2qds@mips的光学稳定性,利用实施例1所得的mos2qds@mips分子印迹聚合物,在室温下,连续30天,测定其荧光光谱,激发波长为350nm,并绘制荧光稳定性图。室温下mos2qds@mips的荧光稳定性图,见图4。由图4可以看出,室温下mos2qds@mips的荧光强度18天后才逐渐降低,其中光谱宽度和发射波长保持不变。由此可知,所得mos2qds@mips分子印迹聚合物在18天内能够保持较为稳定的光学性能,这一现象也说明mos2qds@mips具有良好的稳定性。

实施例8:

mos2qds@mips的选择性检测

为了测试mos2qds@mips的选择性,同时用mos2qds@nips进行对比,使用几种抗生素类似物硫酸链霉素(ss),硫酸卡那霉素(ks),硫酸妥布霉素(ts),硫酸庆大霉素(qs),硫酸核糖霉素(hs)和硫酸新霉素(ns)进行了mos2qds@mips和mos2qds@nips对阿米卡星的选择性测试。所得mos2qds@mips和mos2qds@nips对上述几种抗生素的选择性响应图,见图5。

由图5可知,mos2qds@mips对阿米卡星(as)的认可度高于对硫酸链霉素(ss)、硫酸卡那霉素(ks)、硫酸妥布霉素(ts)、硫酸庆大霉素(qs)、硫酸核糖霉素(hs)和硫酸新霉素(ns)的认可度,即mos2qds@mips只对模板分子阿米卡星有特异性识别作用。而mos2qds@nips对抗生素阿米卡星(as)、硫酸链霉素(ss)、硫酸卡那霉素(ks)、硫酸妥布霉素(ts)、硫酸庆大霉素(qs)、硫酸核糖霉素(hs)和硫酸新霉素(ns)的荧光反应几乎相同。这些结果表明,mos2qds@mips的识别机制是基于模板的形状,大小和功能的相互作用。在mos2qds@nips中,因为没有添加模板,所以没有形成特异性识别位点,因此mos2qds@nips对模板分子的吸附能力远低于mos2qds@mips,并且与其它类似抗生素的猝灭能力没有显着差异。

实施例9:

样品分析

采用由实施例1得到的mos2qds@mips来检测样品中的阿米卡星。

取河水样品3份,加热煮沸,用0.22μm滤膜过滤3次。用实施例1所得mos2qds@mips,按照实施例6中mos2qds@mips的性能测试中的线性方程计算体系中阿米卡星的浓度,根据加标量和测定值,计算回收率,分别测定3份样品中阿米卡星的回收率,结果见表1。

表1样品中阿米卡星的回收率测定结果

由表1可知,mos2qds@mips对阿米卡星的回收率在98.8%-103.5%,且rsd值均低于5.78%,说明该方法的准确度较高、精密度较好。

以上所述,仅是本发明的较佳实施例,并非用以限制本发明的权利范围。任何以本申请专利范围所涵盖的权利范围实施的技术方案,或者任何熟悉本领域的技术人员,利用上述揭示的方法内容做出许多可能的变动和修饰的方案,均属于本发明的保护范围。

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