本实用新型涉及一种免疫沉淀实验装置技术领域，特别涉及一种高通量自动化串联免疫沉淀实验装置。
背景技术：
免疫沉淀法(Immunopreciptation,IP)是利用抗体-靶蛋白特异性结合的特点，从含有几千种不同蛋白的动/植物组织或细胞裂解溶液中提纯和富集靶蛋白的一种方法。抗体包括多克隆抗体和单克隆抗体，通常会预先固定在固相基质上，目前很多公司有相应的商业化免疫沉淀实验试剂盒。现有的免疫沉淀实验装置基本都是一个抗体对应一份蛋白样品的人工加样模式，操作时主要分三个步骤：一、利用共价偶联将抗体偶联到琼脂糖或磁珠上；二、裂解样品提取蛋白，预处理后与抗体一起孵育，此处均采用人工一对一加样模式(一份样本对应一个IP)；三、离心或磁力架收集珠子-抗体-靶蛋白-靶蛋白互作蛋白复合物，多次清洗去除非特异结合蛋白后，用低pH洗脱液洗脱并收集靶蛋白以及靶蛋白互作蛋白。纯化富集的蛋白样品用于后续的生化分析，如蛋白质免疫印迹，银/考染，或质谱鉴定。
然而，现有免疫沉淀实验装置在使用过程中存在以下问题：一、抗体孵育耗时长：现有装置是一份蛋白样品对应孵育一个抗体，若需要完成多个IP操作，则需多次加样，费时费力；二、清洗过程不能自动化：现有装置换液时完全依赖人工，除非特异性结合蛋白的清洗过程需要离心和液体吸取等操作，步骤繁琐且不能实现自动化；三、蛋白样品利用率低：现有装置一个抗体需要消耗1mg蛋白样品，如果靶蛋白含量低则需要2-3mg蛋白样品。
技术实现要素：
本实用新型提供一种高通量自动化串联免疫沉淀实验装置，以解决现有技术中的上述缺陷。
本实用新型的技术方案如下：
一种高通量自动化串联免疫沉淀实验装置，包括由两个以上层析柱串联连接的孵育平台、恒流泵、试管和固定装置，所述的孵育平台通过固定装置垂直固定在离实验台一段距离上，所述的孵育平台的液体流出端的下面设置有所述的试管，所述的恒流泵的两橡胶管分别插入至所述的孵育平台的进样口和所述的试管，液体从所述的试管流向所述的孵育平台，形成循环流动。
优选为，所述的固定装置为铁架台和试管夹，所述的孵育平台通过所述的试管夹固定在所述的铁架台上。
优选为，所述的层析柱之间通过螺纹实现串联连接。
优选为，所述的试管置于试管架上。
优选为，所述的层析柱的个数为5个。
与现有技术相比，本实用新型的有益效果如下：
第一.本实用新型的高通量自动化串联免疫沉淀实验装置，通过设置由两个以上层析柱串联连接的孵育平台，将不同的琼脂糖-抗体偶联物分别填充在层析柱内，串联循环孵育实现一份蛋白样品被多个抗体共享，一次孵育时间内完成多个免疫沉淀实验；
第二.本实用新型的高通量自动化串联免疫沉淀实验装置，由恒流泵提供循环动力，防止抗体-蛋白样品在孵育过程中出现的串联管堵塞现象，同时实现清洗过程的自动化，提高了工作效率；
第三.本实用新型的高通量自动化串联免疫沉淀实验装置，利用抗体对蛋白的特异性结合特征，一份蛋白样品对应多个IP，实现样本的高效合理利用，特别适合用于蛋白含量极低、物种珍稀或者某些极难富集的疾病样本的项目。
当然，实施本实用新型的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有优点。
附图说明
图1为本实用新型的高通量自动化串联免疫沉淀实验装置的结构示意图。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本实用新型。应该理解，这些实施例仅用于说明本实用新型，而不用于限定本实用新型的保护范围。在实际应用中本领域技术人员根据本实用新型做出的改进和调整，仍属于本实用新型的保护范围。
为了更好的说明本实用新型，下方结合附图对本实用新型进行详细的描述。
如图1所示，本实用新型的一种高通量自动化串联免疫沉淀实验装置，包括由5个层析柱1串联连接的孵育平台2、恒流泵3、试管4和固定装置，所述的孵育平台2通过固定装置垂直固定在离实验台一段距离上，具体距离以保住液体滴进试管4内且不溅出液体为准，所述的孵育平台2的液体流出端5的下面设置有所述的试管4，所述的恒流泵3的两橡胶管7分别插入至所述的孵育平台2的进样口6和所述的试管4，液体从所述的试管4流向所述的孵育平台2，形成循环流动。
进一步，所述的固定装置为铁架台8和试管夹9，所述的孵育平台2通过所述的试管夹9固定在所述的铁架台8上。
进一步，所述的层析柱1之间通过螺纹实现串联连接，组成孵育平台2。
进一步，所述的试管4置于试管架上，用于收集从孵育平台2流出的液体。
下方结合具体实施例对本实用新型做进一步的描述。
实施例
利用本实用新型的一种高通量自动化串联免疫沉淀实验装置进行免疫沉淀实验的方法，具体包括以下步骤：
1.抗体偶联
将0.5mg抗体偶联到15mg CNBr-活化的珠子上；
2.抗体-样品串联孵育
2.1搭建自动化串联免疫沉淀实验装置。如图1所示，5个C型层析空柱之间通过螺纹串联固定，C型层析空柱和恒流泵之间通过橡胶管连接。连接好后串联管用铁架台和试管夹固定，最下面一根C型层析空柱对应一个15ml试管，用来收集蛋白样品。打开恒流泵，用PBS检测是否漏液并润洗。液体流动方向：恒流泵打开后产生动力，液体从离心管进入橡胶管，流过恒流泵，再从上到下流过C型层析柱，最后滴回到离心管，如此循环往复；
2.2装柱。蛋白样品预清除处理30min去除非特异结合蛋白，然后用PBS稀释至终体积10ml。串联装置中各预填1ml稀释后样品与偶联好的珠子，管壁上编号；
2.3孵育。打开泵，使样品填充满恒流泵管道。将5个一组的串联装置组装完毕，30rpm/min，样品循环孵育3h；
3.清洗。进液端的橡胶管插入含清洗缓冲液瓶中，出液端对准废液桶，恒流泵调到60rpm/min，清洗10min。关闭恒流泵，用移液器取出样品与珠子置于1.5mlEP管中。离心(3000rpm/min)，小心回收上清，以不损失珠子为原则。
4.洗脱。1ml ddH2O(如样品为膜蛋白须含0.5％triton)洗1次，离心去上清。加90ul 100mM甘氨酸pH2.5，用力拍管底混匀，放置2min，离心，小心转移上清至“收集管”。收集管事先加1M pH9Tris 9ul，作中和用。
5.制样和检测。收集管12000rpm离心2min，去除意外吸出的珠子，上清转移至另一新的1.5ml Axygen离心管，确保无珠子混入。洗脱样品加12ul 5xSDS loading buffer,95℃5min处理为SDS样本，-20℃保存。制备好的蛋白样品用于后续的蛋白质免疫印迹、银/考染或质谱鉴定。
以上公开的本实用新型优选实施例只是用于帮助阐述本实用新型。优选实施例并没有详尽叙述所有的细节，也不限制该实用新型仅为所述的具体实施方式。显然，根据本说明书的内容，可作很多的修改和变化。本说明书选取并具体描述这些实施例，是为了更好地解释本实用新型的原理和实际应用，从而使所属技术领域技术人员能很好地理解和利用本实用新型。本实用新型仅受权利要求书及其全部范围和等效物的限制。