抗病毒口服液挥发性成分的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物分析技术领域，特别是涉及一种抗病毒口服液挥发性成分的检测 方法。
【背景技术】
[0002] 抗病毒口服液目前载入2015年版《中国药典》，是一种由板蓝根、连翘、知母、芦 根、广藿香、地黄、石菖蒲、郁金、石膏等9味中药制成的口服溶液剂，具有清热祛湿、凉血解 毒之功效，用于风热感冒，温病发热及上呼吸道感染，流感、腮腺炎等病毒感染疾患。
[0003] 实验研究表明，抗病毒口服液中的挥发性成分具有抗炎，抗病毒，退热等功效，但 现有标准的质量控制项中，对于该品种挥发性成分的控制项仅有百秋李醇（来源于广藿 香）的定性鉴别，对产品质量评价不够全面，存在质量标准过低的问题。
【发明内容】
[0004] 基于此，有必要针对上述问题，提供一种抗病毒口服液挥发性成分的检测方法。该 检测方法能够更为全面的检测抗病毒口服液中的挥发性成分，对抗病毒口服液进行更为全 面的评价，提高质量标准。
[0005] -种抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，包括以下步骤：
[0006] (1)样品前处理：采用水蒸气蒸馏法，萃取法或有机溶剂回流提取法提取待测样 品中的挥发性成分，制得样品溶液；
[0007] (2)挥发性成分对照品溶液的制备：精密称取α -蒎烯、β -蒎烯、松油烯-4-醇、 松油醇、龙脑、甲基丁香酚、百秋李醇、β -细辛醚、广藿香酮和α -细辛醚，以有机溶剂配制 对照品溶液；
[0008] (3)检测：以内标法或外标法按照下述条件进行气相色谱检测：
[0009] 色谱柱：弹性石英毛细管柱；
[0010] 载气：氮气，流速为 0· 8ml/min-l. 2ml/min ;
[0011] 进样 口温度：230°C _270°C ;
[0012] 升温程序：由75°C -85°C程序升温至210°C _240°C，保持3-8min ;
[0013] 检测器：氢火焰离子化检测器，检测器温度为250°C -300°C ;
[0014] 分别精密吸取样品溶液和对照品溶液，注入气相色谱仪中进行检测，通过峰面积 计算得到样品溶液中挥发性成分的含量。
[0015] 本发明人通过对处方进行分析后发现，抗病毒口服液中，对挥发性成分有主要贡 献的药材为4种，但是常规检测中仅仅对来源于广藿香的百秋李醇进行了检测。因此，本发 明通过大量的实验摸索和对比后，选定了 α -蒎烯、β -蒎烯、松油烯-4-醇、松油醇、龙脑、 甲基丁香酚、百秋李醇、β -细辛醚、广藿香酮和α -细辛醚等10种来源于不同药材的挥发 性成分，作为新的质量控制项进行检测，能够更为全面的反映药材信息，评价产品质量，提 高了质量标准，同时也为产品的生产工艺优化提供了条件。
[0016] 在其中一个实施例中，所述升温程序为：由75°C -85°C按照1_4°C /min的速度升 温至210°C _240°C，保持3-8min。在气相色谱检测中，采用上述升温程序，能够使多种挥发 性成分具有较好的分离度，具有较好的检测效果。
[0017] 在其中一个实施例中，所述气相色谱检测条件为：
[0018] 色谱柱：弹性石英毛细管柱，以键合/交联聚乙醇为固定相；
[0019] 载气：氮气，流速为lml/min ;
[0020] 进样 口温度：250 °C;
[0021] 进样量：1μ1;
[0022] 升温程序：由80°C按照1°C /min的速度升温至100°C，再按照4°C /min的速度升 温至165°C，保持20min，随后按照4°C /min的速度升温至230°C，保持5min ;
[0023] 检测器：氢火焰离子化检测器，检测器温度为270°C。
[0024] 采用上述气相色谱检测条件，具有最佳的检测效果。
[0025] 在其中一个实施例中，步骤（1)样品前处理中，加入正十九烷作为内标，制得样品 溶液；
[0026] 步骤（2)挥发性成分对照品溶液的制备中，加入正十九烷作为内标，制得对照品 溶液；
[0027] 步骤（3)检测中，以内标法进行气相色谱检测，将内标峰面积与对照品峰面积进 行计算，得到校正因子，通过校正因子计算得到样品溶液中挥发性成分的含量。
[0028] 本发明通过大量实验摸索后，选取了正十九烷作为内标，该正十九烷的理化性质 与待测挥发性成分接近，能够在气相色谱中于待测挥发性成分附近出峰，并且在抗病毒口 服液中不含该内标成分，该内标也不对待测挥发性成分产生影响，为性能优良的内标。
[0029] 在其中一个实施例中，步骤（1)样品前处理中，精密量取100mL待测样品，提取后 精密加入正十九烧，并以环己烧定容至5ml，其中正十九烧的浓度为0. 15mg/ml ;
[0030] 步骤（2)挥发性成分对照品溶液的制备中，精密称取α-蒎烯、β-蒎烯、松油 烯-4-醇、松油醇、龙脑、甲基丁香酚、百秋李醇、β-细辛醚、广藿香酮和α-细辛醚，配制 浓度分别为 〇· 012mg/ml，0. 068mg/ml，0. 352mg/ml，0. 016mg/ml，0. 019mg/ml，0. 112mg/ml， 0. 240mg/ml，0. 672mg/ml，0. 080mg/ml，0. 052mg/ml，的混合对照品母液，并以该混合对照品 母液配制挥发性成分对照品溶液，其中正十九烷的浓度为0. 15mg/ml。
[0031] 按照上述方法制备样品溶液和对照品溶液，充分考虑了样品中各挥发性成分的含 量及各成分在气相色谱中的信号响应度，使最终得到各成分的色谱峰具有适宜的峰面积， 提高了检测的稳定性和重现性。
[0032] 在其中一个实施例中，步骤（1)样品前处理中，采用水蒸气蒸馏法提取待测样品 中的挥发性成分，具体步骤如下：
[0033] 精密量取待测样品，置于圆底烧瓶中，加水与沸石，连接挥发油测定器，自测定器 上端加水至充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，然后加入适量环己烷，连接回流冷凝管，加热 回流1-3小时，冷却，取环己烷溶液层，以环己烷定容，制得样品溶液。
[0034] 可以理解的，对于抗病毒口服液中的挥发性成分，还可以采用常规的萃取法和有 机溶剂回流提取法等，但是，采用上述水蒸气蒸馏法提取，具有提取充分的优点，特别是对 于通过包合技术制备得到的抗病毒口服液，以水蒸气蒸馏法提取，可以将所有挥发性成分 彻底释放出来，达到较好的提取效果。
[0035] 在其中一个实施例中，步骤（1)样品前处理中，采用水蒸气蒸馏法提取待测样品 中的挥发性成分，得到含有挥发性成分的环己烷溶液以后，精密加入正十九烷作为内标，以 环己烷定容，制得样品溶液。在提取后再加入内标，避免长时间的加热提取过程对内标造成 不良影响。
[0036] 在其中一个实施例中，所述待测样品为抗病毒口服液成药和/或抗病毒口服液生 产中间品。该检测方法可用于对生产全过程进行监测，更好的控制产品质量。
[0037] 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0038] 本发明的一种抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，在原有抗病毒口服液挥发性 成分质量标准的基础上（单一指标定性鉴别），建立了新的气相色谱法，同时测定10种挥发 性成分的含量，这10种挥发性成分分别来自于广藿香，石菖蒲，连翘等药材，能够更为全面 的反映药材信息，评价产品质量，提高了质量标准，同时也为产品的生产工艺优化提供了条 件。
[0039] 并且，该检测方法还对各步骤进行了优化筛选，使该检测方法具有准确性高、精密 度好、稳定性高、重复性好的优点。
【附图说明】
[0040] 图1为实施例1中对照品溶液的气相色谱图；
[0041] 图2为实施例1中样品溶液的气相色谱图。
【具体实施方式】
[0042] 实施例1
[0043] 一种抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，包括以下步骤：
[0044] (1)样品前处理。
[0045] 采用水蒸气蒸馏法提取待测样品中的挥发性成分，具体步骤如下：
[0046] 精密量取待测样品（抗病毒口服液成品）100ml，置于500ml圆底烧瓶中，加水 100mL与沸石数粒，连接挥发油测定器，自测定器上端加水使充满刻度部分，并溢流入烧瓶 为止，然后加入环己烷2-3ml，连接回流冷凝管，加热回流2小时，冷却，取环己烷溶液层，置 5ml量瓶中，精密加入0. 5ml浓度为I. 5mg/ml的正十九烷内标溶液，加环己烷稀释至刻度， 摇匀，即得样品溶液。
[0047] (2)挥发性成分对照品溶液的制备。
[0048] 精密称取正十九烷适量，用环己烷定容制成浓度为I. 5mg/ml的溶液，作为内标溶 液，备用。
[0049] 另精密称取α-蒎烯、β-蒎烯、松油烯-4-醇、松油醇、龙脑、甲基丁香酚、百秋 李醇、β -细辛醚、广藿香酮和 α -细辛醚 15mg，17mg，22mg，10mg，12mg，28mg，10mg，28mg， 10mg，13mg，分别置 25ml，10ml，5ml，25ml，25ml，10ml，5ml，5ml，5ml，IOml 量瓶，用环己烧溶 解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取上述α -蒎烯、β -蒎烯、松油烯-4-醇、松油醇、龙脑、 甲基丁香酚、百秋李醇、β -细辛醚、广藿香酮和α -细辛醚对照溶液0. 5ml，lml，2ml，lml， Iml，Iml，3ml，3ml，Iml，Iml，置25ml量瓶，精密加入2. 5ml内标溶液用环己烷溶解并稀释至 刻度，摇匀，即得对照品溶液；
[0050] (3)检测：以内标法按照下述条件进行气相色谱检测：
[0051] 色谱柱：弹性石英毛细管柱，以键合/交联聚乙醇为固定相；
[0052] 载气：氮气，流速为lml/min ;
[0053] 进样 口温度：250 °C;
[0054] 进样量：1 μ 1 ;
[0055] 升温程序：由80°C按照I °C /min的速度升温至100°C，再按照4°C /min的速度升 温至165°C，保持20min，随后按照4°C /min的速度升温至230°C，保持5min ;
[0056] 检测器：氢火焰离子化检测器，检测器温度为270°C。
[0057] 分别精密吸取样品溶液和对照品溶液，注入气相色谱仪中进行检测，理论塔板数 按百秋李醇计算不低于4000 ;其中，对照品溶液的气相色谱图如图1所示，样品溶液的气相 色谱图如图2所示。
[0058] 图1中各对照品色谱峰的编号，保留时间和分离度如下表所示。
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