9] 表1.对照品色谱峰
[0060]
[0061] 从上表中可以看出，所选用的内标保留时间适宜，既不干扰待测物，又与待测物有 相近的物化性质。
[0062] 图2中样品色谱峰的编号，保留时间如下表所示。
[0063] 表2.样品色谱峰
[0064]
[0065]
[0066] 从上表中可以看出，样品中待测成分的保留时间与对照品一致，并且，样品中各 色谱峰分离度较好，说明本实施例的检测方法能够较好的对待测物质进行分离、检测。
[0067] 将内标峰面积与上述挥发性成分的峰面积进行计算，得到校正因子，通过校正因 子计算得到样品溶液中挥发性成分的含量。
[0068] 并对本实施例的检测方法进行了如下方法学考察：
[0069] A、线性范围考察。
[0070] 精密称取α -蒎烯、β -蒎烯、松油烯-4-醇、松油醇、龙脑、甲基丁香酚、百秋李醇、 β -细辛醚、广藿香酮和 α -细辛醚 15mg，17mg，22mg，10mg，12mg，28mg，10mg，28mg，10mg， 13mg，分别置 25ml，10ml，5ml，25ml，25ml，10ml，5ml，5ml，5ml，IOml 量瓶，用环己烧溶解并 稀释至刻度，摇匀。再分别精密量取上述α -蒎烯、β -蒎烯、松油烯-4-醇、松油醇、甲基丁 香酚、龙脑、百秋李醇、β -细辛醚、广藿香酮、α -细辛醚对照品溶液2ml、0. 5ml、3ml、2ml、 2ml、2ml、lml、3ml、lml、Iml置25ml量瓶，加环己烧稀释至刻度，摇勾，得混合对照品母液。
[0071] 精密量取上述混合对照品母液 0· 1ml、0· 3ml、0· 5ml、I. 0ml、2. 0ml、4. 0ml、6. 0ml、 8. Oml分别置IOml量瓶，精密加入1ml正十九烷浓度为I. 5mg/ml的内标溶液，再加环己烷 定容至刻度，摇匀，得混合对照品系列溶液。
[0072] 将混合对照品系列溶液分别用0. 2 μπι滤膜过滤后，以上述气相色谱条件进行GC 检测。以各对照品与正十九烷浓度比值为横坐标（X)，以对照品与内标峰面积的比值为纵坐 标（y)，绘制标准工作曲线，其线性方程和相关性如下表所示。
[0073] 表3.检测方法的线性考察结果
[0074]
[0075] 从上表中可以看出，本实施例的检测方法的线性良好。
[0076] B、精密度试验
[0077] 取同一对照品溶液在上述色谱条件下连续进样7次，计算α -薇稀、β -薇稀、松 油烯-4-醇、松油醇、甲基丁香酚、龙脑、百秋李醇、β -细辛醚、广藿香酮、α -细辛醚相对峰 面积RSD (相对标准偏差），结果如下表所示。
[0078] 表4.检测方法的精密度考察结果
[0079]
[0080] 从上表中可以看出，本实施例的检测方法的精密度良好。
[0081] C、稳定性试验
[0082] 取同一份样品溶液，室温放置，分别于0、3、6、9、12小时进样，测定其含量，计算 RSD，结果如下表所示。
[0083] 表5.检测方法的稳定性考察结果
[0084]
>
[0085] 从上表中可以看出，本实施例的检测方法的稳定性良好。
[0086] D、重复性实验
[0087] 取同一批号抗病毒口服液5份，按照本实施例的方法制备供试品溶液，进样分析， 计算α-蒎烯、蒎烯、松油烯-4-醇、松油醇、甲基丁香酚、龙脑、百秋李醇、细辛醚、 广藿香酮、α -细辛醚含量平均值和RSD，结果如下表所示。
[0088] 表6.检测方法的稳定性考察结果
[0089]
[0090] 从上表中可以看出，本实施例的检测方法的重复性良好。
[0091] Ε、回收率试验
[0092] 精密量取已知含量同一批号抗病毒口服液6份，每份50ml，分别置500ml圆底烧 瓶中，精密加入1ml混合标准溶液（α -蒎烯、β -蒎烯、松油烯-4-醇、松油醇、龙脑、甲基 丁香酚、百秋李醇、β -细辛醚和α -细辛醚浓度为〇. 02478mg/ml、0. 1640mg/ml、l. 267mg/ ml、0. 5443mg/ml、0. 04338mg/ml、0. 1278mg/ml、0. 2697mg/ml、0. 7900mg/ml、0. 1104mg/ml、 0. 05980mg/ml)，加水150ml与沸石数粒，连接挥发油提取器，自其上端加水使充满刻度部 分，并溢流入烧瓶为止，然后加入环己烷2-3ml，连接回流冷凝管，加热回流2h，冷却。取出 挥发油提取器中环己烷于5ml量瓶，用少量环己烷洗提取器及萃取挥发油提取器中水液的 残留挥发油，合并至5ml量瓶，加入0. 5ml内标溶液，定容至刻度，摇匀。0. 2 μ m滤膜过滤 后，取1 μ 1进样，计算回收率，结果如下表所示。
[0093] 表7.检测方法的回收率考察结果
[0094]
[0095] 从上表中可以看出，本实施例的检测方法的回收率良好。
[0096] 以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实 施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存 在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0097] 以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并 不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来 说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护 范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
【主权项】
1. 一种抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 样品前处理：采用水蒸气蒸馏法，萃取法或有机溶剂回流提取法提取待测样品中 的挥发性成分，制得样品溶液； (2) 挥发性成分对照品溶液的制备：精密称取a -蒎烯、13 -蒎烯、松油烯-4-醇、松油 醇、龙脑、甲基丁香酚、百秋李醇、P -细辛醚、广藿香酮和a -细辛醚，以有机溶剂配制对照 品溶液； (3) 检测：以内标法或外标法按照下述条件进行气相色谱检测： 色谱柱：弹性石英毛细管柱； 载气：氮气，流速为 〇. 8ml/min_l. 2ml/min ; 进样 口温度：230°C _270°C ; 升温程序：由75°C -85°C程序升温至210°C _240°C，保持3-8min ; 检测器：氢火焰离子化检测器，检测器温度为250°C -300°C ; 分别精密吸取样品溶液和对照品溶液，注入气相色谱仪中进行检测，通过峰面积计算 得到样品溶液中挥发性成分的含量。2. 根据权利要求1所述的抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，其特征在于，所述升 温程序为：由75°C -85°C按照1_4°C /min的速度升温至210°C _240°C，保持3-8min。3. 根据权利要求2所述的抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，其特征在于，所述气 相色谱检测条件为： 色谱柱：弹性石英毛细管柱，以键合/交联聚乙醇为固定相； 载气：氮气，流速为lml/min ; 进样口温度：250 °C ; 进样量：lyl ; 升温程序：由80°C按照1°C /min的速度升温至100°C，再按照4°C /min的速度升温至 165°C，保持20min，随后按照4°C /min的速度升温至230°C，保持5min ; 检测器：氢火焰离子化检测器，检测器温度为270°C。4. 根据权利要求1-3任一项所述的抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，其特征在 于，步骤（1)样品前处理中，加入正十九烷作为内标，制得样品溶液； 步骤（2)挥发性成分对照品溶液的制备中，加入正十九烷作为内标，制得对照品溶液； 步骤（3)检测中，以内标法进行气相色谱检测，将内标峰面积与对照品峰面积进行计 算，得到校正因子，通过校正因子计算得到样品溶液中挥发性成分的含量。5. 根据权利要求4所述的抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，其特征在于，步骤（1) 样品前处理中，精密量取100mL待测样品，提取后精密加入正十九烷，并以环己烷定容至 5ml，其中正十九烧的浓度为0. 15mg/ml ; 步骤⑵挥发性成分对照品溶液的制备中，精密称取a_蒎烯、(6-蒎烯、松油 烯-4-醇、松油醇、龙脑、甲基丁香酚、百秋李醇、(6-细辛醚、广藿香酮和a-细辛醚，配制 浓度分别为 〇? 012mg/ml，0. 068mg/ml，0. 352mg/ml，0. 016mg/ml，0. 019mg/ml，0. 112mg/ml， 0. 240mg/ml，0. 672mg/ml，0. 080mg/ml，0. 052mg/ml，的混合对照品母液，并以该混合对照品 母液配制挥发性成分对照品溶液，其中正十九烷的浓度为0. 15mg/ml。6. 根据权利要求1所述的抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，其特征在于，步骤（1) 样品前处理中，采用水蒸气蒸馏法提取待测样品中的挥发性成分，具体步骤如下： 精密量取待测样品，置于圆底烧瓶中，加水与沸石，连接挥发油测定器，自测定器上端 加水至充满刻度部分并溢流入烧瓶为止，然后加入适量环己烷，连接回流冷凝管，加热回流 1-3小时，冷却，取环己烷溶液层，以环己烷定容，制得样品溶液。7. 根据权利要求6所述的抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，其特征在于，步骤（1) 样品前处理中，采用水蒸气蒸馏法提取待测样品中的挥发性成分，得到含有挥发性成分的 环己烷溶液以后，精密加入正十九烷作为内标，以环己烷定容，制得样品溶液。8. 根据权利要求1所述的抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，其特征在于，所述待 测样品为抗病毒口服液成药和/或抗病毒口服液生产中间品。
【专利摘要】本发明涉及一种抗病毒口服液挥发性成分的检测方法，属于药物分析技术领域。该检测方法采用水蒸气蒸馏法，萃取法或有机溶剂回流提取法提取待测样品中的挥发性成分，制得样品溶液；并精密称取α-蒎烯、β-蒎烯、松油烯-4-醇、松油醇、龙脑、甲基丁香酚、百秋李醇、β-细辛醚、广藿香酮和α-细辛醚，以有机溶剂配制挥发性成分对照品溶液；再通过气相色谱同时测定上述10种挥发性成分，能够更为全面的反映药材信息，评价产品质量，提高了质量标准，同时也为产品的生产工艺优化提供了条件。
【IPC分类】G01N30/88
【公开号】CN105092761
【申请号】CN201510516225
【发明人】孟鹤, 谢小燕, 申小花, 范真, 伍军, 连林生, 张健
【申请人】广州市香雪制药股份有限公司
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2015年8月20日