延长产生变化，导致血清淀粉样蛋白A的检测限升高和检测不稳定，干燥时间大于36h，抗体容易失活，导致检测的灵敏度降低，最佳的干燥时间为24h;⑶免疫层析试纸条的宽度小于3mm时，切割机的精密度对免疫层析试纸条的影响较大，会降低检测结果的重复性，免疫层析试纸条的宽度大于5mm时，会增加检测卡的成本，最优化的免疫层析试纸条为4mm。
[0051]步骤3)样品稀释液制备:样品稀释液为含有牛血清白蛋白、表面活性剂和防腐剂的缓冲液。该缓冲液包括PBS缓冲液、Tri s缓冲液、甘氨酸缓冲液、MES缓冲液、HEPES缓冲液中的一种或几种，表面活性剂为吐温20、吐温80、曲拉通X-100或聚乙二醇，防腐剂为叠氮钠或proclin，所述分散剂为聚乙烯吡咯烷酮10K、聚乙烯吡咯烷酮40K或聚乙烯醇。
[0052]上述proclin防腐剂，其活性成分主要是2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)，是新一代高效生物防腐剂。这两种成分抑制细胞的生长以及促使细胞凋亡的原理相同。活性成分在与细胞膜接触几分钟后，立即可以渗透到膜内并抑制细胞内酶的活性。目标酶处于细胞代谢KREBS循环的中心位置，ProClin防腐剂作用KREBS循环(三羧酸循环)的四个不同位置:丙酮酸脱氢酶，a-酮戊二酸脱氢酶，琥珀酸脱氢酶和NADH脱氢酶。从而抑制细胞生长代谢、大分子的合成、引起细胞内能量水平迅速下降。由于能量体系的崩溃，细胞不能合成日常代谢所需要的化合物。所有的细菌及真菌至少拥有部分KREBS循环，所以ProClin防腐剂的适用的范围非常广泛。其次，ProClin防腐剂具有多标靶作用位点，因此大大降低了因变异产生的微生物的耐药性。随着KREBS循环被阻断，细胞产生能量和合成酶等生物活性物质的能力迅速下降，但其使用剂量却保持比较低的水平对人畜无害，可以有效地控制体外诊断试剂中微生物的生长。因而具有广谱抗菌性、作用速度快、使用剂量少、PH适用范围广(PH2?8.5)、化学稳定性好、毒性较低、与水任意比混合等特点。
[0053]应当说明的是⑴牛血清白蛋白有流动封闭的作用，能与人血清或血浆中的杂蛋白结合，封闭硝酸纤维素膜上的空白位点，降低探针在膜上的残留和非特异性结合，减少假阳信号；⑵表面活性剂能够改善待检测样品和探针的亲水性，使得样品和探针在NC膜上的结合和分布更均匀，避免了基底信号波动和免疫反应不均匀对信号的影响；⑶防腐剂延迟或抑制微生物的生长，避免样品稀释液的腐败;d)缓冲液用于调节免疫反应的反应环境，降低不同人血清的差异和血清血浆的差异对反应体系的影响。
[0054]步骤4)样品检验:取出一定量的血清或血浆加入样品稀释液中，待混合均匀后滴加至免疫层析免疫层析检测卡上进行免疫层析反应，随后在荧光检测器下采用与荧光胶乳微粒相对应的发射光波长进行荧光检测。如图1和图2所示，混合液体渗透到样品垫2上，混合液体经玻璃纤维过滤杂质和处理后到达探针固定垫3，其中的血清淀粉样蛋白A与探针上的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体结合成复合物，复合物顺着硝酸纤维素膜4渗透到检测线上5，与固定在检测线5上的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体形成双抗体夹心的新复合物，检测线5上的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体与探针中的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体，其在血清淀粉样蛋白A上的表位不同。剩余的抗原-荧光标记的抗体复合物、未结合的标记有荧光胶乳微粒的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体沉淀即血清淀粉样蛋白A单克隆抗体荧光胶乳微粒抗体、以及标记有荧光胶乳微粒的羊抗兔IgG继续渗透到控制线6，标记有荧光胶乳微粒的羊抗兔IgG会与控制线6上固定的兔IgG结合形成抗原-抗体复合物。荧光检测器下荧光检测时，仅在控制线6上检测到信号，才能证明检测结果是有效的。
[0055]如图1至2所示，本发明基于上述方法还提供一种血清淀粉样蛋白A的荧光免疫层析检测试剂盒，包括试剂盒体以及稀释液瓶，试剂盒体包括PVC衬板I以及固定在PVC衬板上的样品垫2、探针固定垫3、硝酸纤维素膜4和吸水纸7，样品垫搭接在探针固定垫上，探针固定垫3和吸水纸7分别搭接在硝酸纤维素膜的两侧，硝酸纤维素膜上设置有检测线5和控制线6，检测线5和控制线6内分别包被有血清淀粉样蛋白A单克隆抗体和兔IgG;探针固定垫3为由血清淀粉样蛋白A单克隆抗体和羊抗兔IgG的混合荧光胶乳微粒经喷金干燥制得，稀释液瓶中存放有样品稀释液。免疫层析检测卡还包括壳体9，壳体9上设置有加样孔8、检测窗口 10、编码区11和把手12，加样孔8位于样品垫2处，检测窗口 1位于检测线5和控制线6处，编码区11位于检测窗口 10和把手12之间，把手12位于壳体上位于靠近吸水纸7的一侧。
[0056]本发明检测试剂盒使用时，取一定量的血清或血浆样品加入到样品稀释液中，混合均匀后加入到加样孔8中即可。随后在荧光检测器下采用与荧光胶乳微粒对应的发射光波长进行荧光检测。混合液体渗透到样品垫2上，经玻璃纤维过滤杂质和处理后到达探针固定垫3，其中的血清淀粉样蛋白A与探针上的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体结合成复合物，复合物顺着硝酸纤维素膜4渗透到检测线5上，与固定在检测线5上的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体形成双抗体夹心的新复合物，检测线5上的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体与探针中的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体，其在血清淀粉样蛋白A上的表位不同。剩余的抗原-荧光标记的抗体复合物、未结合的标记有荧光胶乳微粒的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体沉淀即血清淀粉样蛋白A单克隆抗体荧光胶乳微粒抗体、以及标记有荧光胶乳微粒的羊抗兔IgG继续渗透到控制线6，标记有荧光胶乳微粒的羊抗兔IgG会与控制线6上固定的兔IgG结合形成抗原-抗体复合物。荧光检测器下荧光检测时，仅在控制线6上检测到信号，才能证明检测结果是有效的。
[0057]上述本发明的检测用荧光检测器，包含激发检测模块、前置放大模块、控制分析模块以及软件系统。其中激发检测模块的光源为发射波长为400?600nm的发光二极管，前置放大模块为一前置放大电路。
[0058]〖实施例3血清淀粉样蛋白A的荧光免疫层析检测
[0059]第一步:探针固定垫的制备
[0060]I)取200μ1发射光波长为570nm的荧光胶乳微粒溶液(含羧基)用pH6.0MES缓冲液洗涤离心分离三次后，沉淀用pH6.0MES缓冲液稀释，加入5mg EDC和15mg Sulf0-NHS混匀后，在室温下反应活化30min，离心分离后，沉淀继续用pH6.5MES缓冲液洗涤三遍，随后沉淀用pH6.5MES缓冲液稀释，加入10yg牛血清白蛋白，室温下反应3h，加入含牛血清白蛋白的乙醇胺溶液封闭，继续反应lh，离心后沉淀用PH7.4PBS缓冲液洗涤四次，得到标记有荧光胶乳微粒的牛血清白蛋白沉淀即牛血清白蛋白荧光胶乳微粒，同理可以得到标记有荧光胶乳微粒的羊抗兔IgG沉淀即羊抗兔IgG荧光胶乳微粒，将沉淀重悬在200μ1 pH7.4PBS缓冲液中，加入0.6μ1 proclin，在4°C下保存;按同样的方法将标记有荧光胶乳微粒的牛血清白蛋白活化偶联血清淀粉样蛋白A单克隆抗体得到标记有荧光胶乳微粒的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体沉淀，将沉淀重悬在200μ1 pH7.4PBS缓冲液中，加入0.6μ1 proclin，在4°C下保存。
[0061]2)将血清淀粉样蛋白A单克隆抗体荧光胶乳微粒与羊抗兔IgG荧光胶乳微粒按体积比6:1混合，将混合得到的混合胶乳微粒与2倍体积的荧光探针微球稀释液漩涡混合，得到探针溶液，以4ul/cm的速度均匀喷在宽度为Icm的玻璃纤维上，在37°C下干燥4h0
[0062]第二步:免疫层析检测卡的制备
[0063]在衬板上依次粘贴硝酸纤维素膜4、探针固定垫3、样品垫2和吸水纸7，样品垫2搭接在探针固定垫3上，探针固定垫3和吸水纸7搭接在硝酸纤维素膜4上，并且紧密相连。分别将与荧光胶乳微粒标记的血清淀粉样蛋白A单克隆抗体位于不同表位另一株血清淀粉样蛋白A单克隆抗体(包被抗体)和羊抗兔I gG用包被液分别配制成lmg/ml和lmg/ml的抗体包被液。将血清淀粉样